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介紹蟲草素提取途徑與方法、前言:蟲草素(cordycepin)又稱冬蟲夏草素、蟲草菌素、蛹蟲草菌素,是冬蟲夏草和蛹蟲草中(尤其是核苷類)主要活性成分,也是第一個從真菌中分離出來的核苷類抗生素。蟲草素一種天然來源的藥物,具有中醫醫理中冬蟲夏草一樣的陰陽同補和雙向調節人體平衡的功能;它在護肝、保腎、潤肺方面由于成分更純效果更好,而且大補氣血,能消除現在不能治愈的痛經、偏頭痛、頸椎增生等疾病。從西醫醫理角度看蟲草素具有抗腫瘤、抗衰老、抗菌、抗病毒、免疫調節、改善新陳代謝、清除自由基等多種藥理作用,有良好的臨床應用前景。目前蟲草素的研究現正成為藥物化學、抗衰老、美容、保健品領域中一個極其活躍的領域。二、蟲草素藥用價值:1、 免疫調節作用近年來,研究人員發現蟲草素具有免疫調節作用。它能夠極大地提高了人外周血液單核細胞IL-10的分泌和IL-10mRNA的表達,同時,蟲草素對誘導產生IL-2的植物血球凝集素和外周血液單核細胞擴增都有抑制作用,抗IL-10中性抗體也不能完全阻止蟲草素對IL-2產生的抑制作用。在蟲草素作用下,成熟樹突狀細胞能誘導調節性T細胞增殖,而且還能抑制細胞分裂,促進細胞的分化,改變胞膜上物質結構分布,對T淋巴細胞轉化有促進作用,它還可以提高機體單核巨噬細胞系統的吞噬功能,激活巨噬細胞產生細胞毒素直接殺傷癌細胞。2、 蟲草素的抗腫瘤作用蟲草素對腫瘤的抑制作用一直是廣大科學家們關注的熱點。研究發現,用蟲草素皮下注射接種了艾氏腹水癌的小鼠,可使小鼠中位生存期延長到60d,而對照組僅為19d,這說明蟲草素對小鼠艾氏腹水癌有明顯的抑制作用,能明顯延長接種艾氏腹水癌小鼠的存活時間。還有研究表明,蟲草素對人鼻咽癌KB細胞和人宮頸癌HeLa細胞等皆具有明顯的抑制作用??茖W家推測蟲草素可能有3種抑制腫瘤的機制:一是蟲草素的游離羥基可以滲入瘤細胞DNA中而發生作用;二是抑制核苷或核苷酸的磷酸化而生成二磷酸鹽和三磷酸鹽的衍生物,從而抑制瘤細胞的核酸的合成;三是阻斷黃苷酸胺化形成鳥苷酸的過程。3、 蟲草素的抗炎作用經研究發現,蟲草素可以拮抗NO產物的生成,這一機制是通過對NO合酶和COX-2基因表達負調控以及對NF-kB活性、AKT和p38磷酸化的抑制來實現的。由此,蟲草素很可能成為一種治療由炎癥引起的相關紊亂的藥物。4、蟲草素的抗白血病作用通過體內實驗研究發現,蟲草素作為一種腺苷脫氨酶抑制劑,對末端脫氧核苷酸陽性白血病細胞(TdT+)的抑制大于對末端脫氧核苷酸陰性白血病細胞(TdT-)的抑制。經過分析其抗TdT+白血病的機理。結果表明,3'-dATP不是3'-dA抗白血病的主要原因,而TdT的活性才是主要原因,并且發現PBM對3'-dA的細胞毒性作用不敏感。其他研究發現蟲草素對TdT+的白血病細胞的凋亡誘導與提高蛋白激酶A(PK-A)活性密切相關,并且經蟲草素處理L1210白血病細胞,可顯著抑制RNA的甲基化。三、提取途徑與方法途徑:獲取蟲草素的辦法不外乎三條途徑:從天然蟲草中提取、人工合成和通過生物工程的方法從北蟲草組織液中提取?;瘜W合成目前處于探索階段,國外有報道蟲草素能夠人工合成,但過程復雜且產量極低,因此如何提高蛹蟲草中蟲草素的含量并實現蟲草素的工業化生產,是目前國內外研究的主要方向。天然蟲草資源稀缺,價格昂貴,含量甚微,很難成為主要原料。人工合成蟲草素雖然在上個世紀六十年代我國曾有報道,但由于合成的起始原料較貴或設備投入巨大或產業化工藝缺失或總收率太低或合成工藝技術無法重復,迄今難以實現產業化。因此,通過生物工程的方法,從人工培育的蟲草子實體中提取蟲草素,是實現蟲草素作為治療藥物產業化生產的最可行的途徑。目前國內雖然有幾家企業能生產蟲草子實體,由于工廠化大規模培育和提取純化的關鍵技術尚未突破,其產品的蟲草素含量很低,難以為蟲草素開發新藥,并實現產業化提供原料藥的保障。藏諾提取的蟲草素,由藏諾創始人、蟲草素提取專利發明人王智森教授帶領科研團隊探索攻關,深入開展冬蟲夏草蟲草素分離與提取技術工藝的研究,歷經8年科研攻關,終于掌握了穩定的蟲草素分離與純化方法一一“雙動態提取分離與純化技術”并榮獲國家發明專利(專利號:ZL201210458821.0),解決這一世界級科研難題。利用這種技術提取蟲草素,提純度可達99.84%,處于國際領先水平。方法:1、雙動態提取分離與純化技術。經過對蛹蟲草子實體及培養基的粉碎、石油醚脫脂、80°C?85°C水浴12h、調節等電點沉淀、732-NH4離子交換樹脂的分離、濃縮、4C下低溫結晶,得到一定純度的蟲草素晶體。采用微波/光波組合提取,可使蟲草中所含的不同藥效成分分別溶出,提取迅速,轉化完全。提純度達到99.84%。2、以蛹蟲草為材料的提取方法。米用超聲波水提法、超聲波醇提法、水熱回流法和醇熱回流法4種提取方法選擇蟲草素最優提取方法,用正交試驗方法考察水熱回流法中提取溫度、提取次數、提取時

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