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掃描電子顯微鏡樣品制備1常規樣品制備技術2冷凍割斷技術3離子蝕刻技術4鑄型技術5聚焦離子束技術掃描電子顯微鏡樣品制備1常規樣品制備技術1掃描電鏡是研究樣品的表面結構,要求樣品的表面不變形、無污染、導電好、干燥好,結構清晰、無損壞。對于金屬樣品或較硬的組織來說樣品處理比較簡單。對于生物的軟組織來說,就需要進行較為復雜的樣品處理過程。下面主要介紹生物組織的樣品制備技術。掃描電鏡是研究樣品的表面結構,2生物樣品的常規處理方法1取材2表面結構的清洗、暴露3組織固定4組織脫水5組織干燥6組織表面導電處理7組織干燥保存生物樣品的常規處理方法1取材3取材取材速度要快,刀片要鋒利,避免組織擠壓,將要觀察的區域用刀片切開暴露,組織塊可大至40×40×10mm3,一般5×5×3mm3為宜。取材4清洗對要觀察的組織表面用緩沖液或生理鹽水進行快速沖洗,除掉表面的粘液、組織液、血液等附著物,盡量將組織表面清洗干凈,以利于電鏡觀察。對于載玻片上的培養細胞要注意沖洗力量,防止細胞脫落。對于難以沖掉的附著物,也可在固定后仔細沖洗。清洗5固定將清洗好的組織迅速放入2%戊二醛固定液中2小時,0.1M磷酸緩沖液清洗5分鐘,然后放入1%的鋨酸中后固定液1小時,0.1M磷酸緩沖液清洗5分鐘。固定64組織脫水固定好的組織清洗后用酒精或丙酮進行梯度脫水,30%,50%,70%,90%,100%各15分鐘。4組織脫水固定好的組織清洗后用75組織干燥臨界點干燥法:中間液,液態二氧化碳,加壓,升溫,真空干燥。冰凍干燥法:乙醚,液氮冷凍,真空干燥。
乙腈真空干燥法:脫水后的組織進行50%,70%,90%,100%乙腈置換,各15分鐘,然后放入真空鍍膜臺的鐘罩中真空干燥5組織干燥臨界點干燥法:中間液,液態二氧化碳,加壓,86導電處理真空蒸鍍金屬膜:離子鍍膜(濺射鍍膜):6導電處理真空蒸鍍金屬膜:9其他樣品制備方法1冷凍割斷法:離子蝕刻法:鑄型技術:離子聚焦束IFB其他樣品制備方法1冷凍割斷法:10掃描電鏡樣品制備技術教學課件11掃描電鏡樣品制備技術教學課件12掃描電鏡樣品制備技術教學課件13冠狀動脈內皮冠狀動脈內皮14掃描電鏡樣品制備技術教學課件15掃描電鏡樣品制備技術教學課件16掃描電鏡樣品制備技術教學課件17掃描電鏡樣品制備技術教學課件18耳蝸毛細胞耳蝸毛細胞19掃描電鏡樣品制備技術教學課件20掃描電鏡樣品制備技術教學課件21掃描電子顯微鏡樣品制備1常規樣品制備技術2冷凍割斷技術3離子蝕刻技術4鑄型技術5聚焦離子束技術掃描電子顯微鏡樣品制備1常規樣品制備技術22掃描電鏡是研究樣品的表面結構,要求樣品的表面不變形、無污染、導電好、干燥好,結構清晰、無損壞。對于金屬樣品或較硬的組織來說樣品處理比較簡單。對于生物的軟組織來說,就需要進行較為復雜的樣品處理過程。下面主要介紹生物組織的樣品制備技術。掃描電鏡是研究樣品的表面結構,23生物樣品的常規處理方法1取材2表面結構的清洗、暴露3組織固定4組織脫水5組織干燥6組織表面導電處理7組織干燥保存生物樣品的常規處理方法1取材24取材取材速度要快,刀片要鋒利,避免組織擠壓,將要觀察的區域用刀片切開暴露,組織塊可大至40×40×10mm3,一般5×5×3mm3為宜。取材25清洗對要觀察的組織表面用緩沖液或生理鹽水進行快速沖洗,除掉表面的粘液、組織液、血液等附著物,盡量將組織表面清洗干凈,以利于電鏡觀察。對于載玻片上的培養細胞要注意沖洗力量,防止細胞脫落。對于難以沖掉的附著物,也可在固定后仔細沖洗。清洗26固定將清洗好的組織迅速放入2%戊二醛固定液中2小時,0.1M磷酸緩沖液清洗5分鐘,然后放入1%的鋨酸中后固定液1小時,0.1M磷酸緩沖液清洗5分鐘。固定274組織脫水固定好的組織清洗后用酒精或丙酮進行梯度脫水,30%,50%,70%,90%,100%各15分鐘。4組織脫水固定好的組織清洗后用285組織干燥臨界點干燥法:中間液,液態二氧化碳,加壓,升溫,真空干燥。冰凍干燥法:乙醚,液氮冷凍,真空干燥。
乙腈真空干燥法:脫水后的組織進行50%,70%,90%,100%乙腈置換,各15分鐘,然后放入真空鍍膜臺的鐘罩中真空干燥5組織干燥臨界點干燥法:中間液,液態二氧化碳,加壓,296導電處理真空蒸鍍金屬膜:離子鍍膜(濺射鍍膜):6導電處理真空蒸鍍金屬膜:30其他樣品制備方法1冷凍割斷法:離子蝕刻法:鑄型技術:離子聚焦束IFB其他樣品制備方法1冷凍割斷法:31掃描電鏡樣品制備技術教學課件32掃描電鏡樣品制備技術教學課件33掃描電鏡樣品制備技術教學課件34冠狀動
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