高中生物選修1基礎填空清單(含答案)專題二高中生物選修1基礎填空清單(含答案)專題二高中生物選修1基礎填空清單(含答案)專題二V:1.0精細整理，僅供參考高中生物選修1基礎填空清單(含答案)專題二日期：20xx年X月選修１《生物技術實踐》知識清單2.1微生物的實驗室培養1、培養基（1）培養基按照物理性質主要分為（主要用于工業生產）和（主要用于菌種的分離、計數、鑒別）。只有培養基表面可以形成“菌落”。菌落的概念是，不同菌落的不同，因此，菌落是的重要依據。（2）按照培養基的功能，可將培養基分為培養基和培養基。（3）培養基的化學成分一般包括等，除此之外，還需要滿足微生物對、和的需求。例如，培養乳酸桿菌時需要添加的特殊營養物質是。牛肉膏能為微生物提供的主要營養是，蛋白胨能為微生物提供的主要營養是。2、無菌技術（1）獲得純凈培養物的關鍵是，要注意以下幾個方面：①對實驗操作的空間、操作者的衣著和手，進行清潔和（消毒/滅菌）。②將用于微生物培養的器皿、接種用具和培養基等進行（消毒/滅菌）。③為避免周圍環境中微生物的污染，實驗操作應在進行。④實驗操作時應避免已經滅菌處理的材料用具與周圍的物品。（2）消毒與滅菌的區別①消毒指使用方法殺死（全部/部分）微生物。消毒方法常用、、、。對于牛奶的消毒，應使用法，該方法的優點是；對于接種室或工作臺，可以用消毒，在此之前，可適量噴灑來加強消毒效果。②滅菌指使用因素殺死（全部/部分）微生物，包括和。滅菌方法有、、。（3）常用器具的滅菌消毒方法：①接種環、接種針和其他金屬用具使用滅菌法；②玻璃器皿、金屬用具等可使用滅菌法，所用器械是；③培養基使用法，所用器械是。④殺死物體表面和空氣中的微生物可使用消毒法。3．制作牛肉膏蛋白胨固體培養基（1）方法步驟：。（2）思考討論：=1\*GB3①“溶化”步驟中，加熱熔化瓊脂時需要不斷用玻璃棒攪拌，攪拌目的是什么？

答：。=2\*GB3②平板冷凝后，為什么要將平板倒置？

答：。③拓展：培養細菌時，需要將平板倒置于恒溫培養箱中培養，為什么？

答：。4、純化大腸桿菌（純化的目的：獲得單菌落）（1）能獲得單菌落的接種方法是。（2）“稀釋涂布平板法”包括操作和板操作兩步。（3）平板劃線法和稀釋涂布平板法接種的共性：。（4）平板劃線操作灼燒的目的:=1\*GB3①首次劃線前灼燒接種環的目的是：。=2\*GB3②第二次及以后劃線前灼燒接種環的目的是：。=3\*GB3③劃線結束后灼燒接種環的目的是：。=4\*GB3④第二次及以后劃線時，總是從上一次的末端開始劃線的原因是：。（5）平板劃線法獲得的菌落分布，（能/不能）計數；稀釋涂布平板法獲得的菌落分布，（能/不能）計數。5、菌種的保存（1）臨時保存：將菌種接種到上，待后放在℃冰箱中保藏。這種保存方法的缺點是。該方法用于的菌種的保存。（2）長期保存：可采用法，在℃冷凍箱中保存。2.2土壤中分解尿素的細菌的分離與計數一、菌種的分離1、尋找目的菌株=1\*GB3①方法：尋找目的菌株時，要根據目的菌株對的要求，到去尋找。=2\*GB3②實例：若要尋找“尿素分解菌”，應在的土壤中去尋找；若要尋找“纖維素分解菌”，應在的環境中去尋找；若要尋找“石油分解菌”，應在的環境中去尋找。2、篩選出“尿素分解菌”=1\*GB3①選擇性培養基：是指培養基。=2\*GB3②篩選“尿素分解菌”的選擇培養基的特點是。二、細菌的計數（一）統計菌落的數目（間接計數法）1、方法：。2、原理：當樣品的稀釋度時，培養基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的1個活菌，通過統計平板上的數，就能推測出樣品中大約有多少活菌。（為保證結果準確，一般選擇菌落數在的平板進行計數。）3、【問題探討】請根據所學知識回答以下問題

有2位同學用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數．在對應稀釋倍數為106的培養基中，得到以下2種統計結果：甲同學在該濃度下涂布了一個平板，統計的菌落數為230；乙同學在該濃度下涂布了3個平板統計的菌落數分別為21、212、256，并且取平均值163作為統計結果；請評價這兩位同學的實驗結果的有效性

①甲同學操作（合理/不合理），原因是；

②乙同學的結果（合理/不合理），原因是；

③正確做法是：在設計實驗時，一定要涂布個平板作為重復組，才能減小實驗誤差并增強實驗的說服力與準確性．在分析實驗結果時，一定要考慮所設置的重復組的結果是否相當，結果差距太大，意味著，需要。

4、稀釋涂布平板法的計數公式：每克樣品中的菌株數=（C÷V）×M其中，C代表某一稀釋度下平板上生長的，V代表，M代表。【例題】（14全國卷節選）某研究小組為測定某河流水樣中的細菌含量，將1ml水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布法分別接種0.1ml稀釋液，培養后在3個平板上的菌落數分別是39、38和37，據此可得出每升水樣中的活菌數為個。5、方法評價：稀釋涂布平板法統計的菌落數往往比活菌的實際數目，這是因為：。（二）統計細菌的數目（直接計數法）1、方法：。2、計數工具：。3、計算公式：1ml培養液中酵母菌數=大方格總菌數÷大方格總體積×稀釋倍數4、方法評價：顯微鏡計數法統計的細菌數往往比活菌的實際數目，這是因為：。三、設置對照1、設置對照的目的：主要是排除對實驗結果的影響，提高實驗結果的可信度。2、微生物培養的常用對照設置方法：=1\*GB3①判斷培養基是否被污染的對照設置方法：將接種后的培養基與1個放在相同且適宜條件下培養，觀察對照組的培養基上是否有菌落生長。=2\*GB3②判斷選擇培養基是否具有選擇作用的對照設置方法：將同一土壤樣品分別接種在培養基和選擇培養基上，然后在相同且適宜條件下培養，觀察比較二者的菌落數目。四、實驗流程1、土壤取樣→富含有機質的土壤↓樣品的稀釋→常選用一定稀釋范圍的樣品液進行培養，以保證獲得菌落數在之間、↓計數的平板3、接種→采用法接種↓=1\*GB3①細菌：℃培養天；4、培養→=2\*GB3②放線菌：℃培養天；↓=3\*GB3③霉菌：℃培養天；5、觀察→根據菌落特征區分微生物，這些特征包括菌落的。↓統計→每隔小時統計一次菌落數，選取的記錄作為結果，↓這樣可以防止而導致。7、計算→稀釋涂布平板法的計數公式：每克樣品中的菌株數=。五、菌種鑒定1、尿素分解菌的鑒定：為鑒定分離的細菌是否具有分解尿素的能力，可以在培養基中加入，若該細菌具有分解尿素的能力，則將導致培養基PH值，菌落周圍出現，這是因為細菌合成的將尿素分解成，使培養液性增強；菌落周圍的環帶越大，說明。2、大腸桿菌的鑒定：鑒定大腸桿菌可在培養基中加入，如果培養基上菌落呈現色，則說明該菌落為大腸桿菌的菌落。2.3分解纖維素的微生物的分離一、纖維素與纖維素酶1、纖維素：一種由首尾相連而成的高分子化合物，是地球上含量最豐富的多糖類物質。棉花是自然界中纖維素含量最高的天然產物。2、纖維素酶：=1\*GB3①是一種復合酶，包括。=2\*GB3②作用：“C1酶和CX酶”能將分解成，“葡萄糖苷酶”將分解成。二、纖維素分解菌的篩選1、篩選方法：。能夠通過反應直接對微生物進行篩選。2、篩選原理：染料可以與纖維素、淀粉等多糖形成，但該染料并不和發生這種反應。當纖維素被纖維素酶分解后，培養基中會出現的現象。三、分離“分解纖維素的微生物”的實驗流程1、步驟：土壤取樣→選擇培養→→將樣品涂布到的培養基上→挑選的菌落。2、土壤取樣：選擇的環境采取土樣。3、選擇培養的目的是，此步是否需要，應根據來確定。4、剛果紅染色法種類：●方法一：先，再加入剛果紅進行顏色反應。缺點是操作，加入剛果紅溶液會；其優點是這樣顯示出的顏色反應基本上是的作用。NaCl溶液的作用：培養基不含CR，用NaCl溶液可以，這樣就會留下大大小小的透明圈。●方法二：在。優點是操作，不存在現象。缺點：=1\*GB3①淀粉類物質，可以使能夠產生酶的微生物出現反應；=2\*GB3②有些微生物具有能力，長時間培養會而形成透明圈，與纖維素分解菌不容易區分。四、課題延伸為確定初步篩選得到的是“纖維素分解菌”，還需要進行的實驗。纖維素酶發酵的方法有發酵和發酵兩種；纖維素酶的測定方法一般是采用對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產生的進行定量測定。2.1微生物的實驗室培養（1）液體培養基固體培養基固體培養基形狀、大小、顏色和隆起程度菌種鑒定（2）選擇鑒別（3）水、無機鹽、碳源、氮源PH特殊營養物質O2維生素碳源、氮源、磷酸鹽和維生素碳源、氮源、維生素（1）防止外來雜菌入侵消毒滅菌酒精燈火沿附近相接觸（2）較為溫和的物理或化學部分煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒、紫外線消毒巴氏消毒法既可以殺死牛奶中的微生物，并且使牛奶中的營養成分不被破壞紫外線石碳酸或煤酚皂溶液強烈的物理因素全部芽孢孢子灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌（3）灼燒干熱干熱滅菌箱高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌鍋紫外線（1）計算、稱量、溶化、調PH、分裝、滅菌、倒平板（2）防止瓊脂糊底而導致燒杯破裂防止皿蓋上水珠落入培養基造成污染、也可避免培養基中水分過快揮發防止水分過快揮發、防止皿蓋上水珠落入培養基影響微生物生長而難以形成單菌落、防止雜菌污染（1）平板劃線法和稀釋涂布平板法（2）系列稀釋涂布平板（3）使聚集在一起的細菌分布成單個細胞，以便于純化菌種（4）殺死菌種環上可能存在的雜菌殺死上次劃線結束后，接種環上存在的菌種，使下一次劃線時接種環上的菌種直接來源于上次劃線的末端，通過劃線次數的增加，使每次劃線時菌種數目逐漸減少，以便獲得單個細胞避免細菌污染環境和感染操作者=4\*GB3④線條末端細菌的數目比線條起始處要少，每次從末端開始劃線，能逐步稀釋細菌，最終能得到由單個細胞形成的單菌落不均勻不能均勻能（1）試管的固體斜面培養基菌落形成4保存時間不長，菌種容易污染或產生變異頻繁使用（2）甘油管藏-202.2土壤中分解尿素的細菌的分離和計數一、菌種的分離1、生存環境