1、診斷病理學藥理藥效研究動物模型課件DIAGNOSTC PATHOLOGY IN CLINICAL PRACTICE Guorong Chen M.D. and Professor Department of PathologyWenzhou Medical CollegeDIAGNOSTC PATHOLOGY IN CLINICA一、引言：病理學定義 Patho-suffering/ logy-study =Scientific study of disease/ 疾病過程中機體代謝、功能及形態結構的改變，研究疾病發生的機制、病因基礎學科 vs 臨床學科 （疾病的診斷）一、引言：病理學定義一、

2、引言：病理學范圍(The Scope of Pathology)臨床病理學及實驗病理學(Clinical Pathology & Experimental Pathology)組織病理學（histopathogy）、細胞病理學(cytopathology）、血液病學（haematology）, 微生物學（microbiology）, 免疫學(immunology),化學病理學(chemical pathology), 遺傳學（genetics）, 毒理學（toxicology）, 法醫病理學（forensic pathology）一、引言：病理學范圍(The Scope of Patho二、診

3、斷病理學的發展 19世紀70年代活檢做為外科手術檢查的一種必要診斷方法Surgical Pathology:外科，婦產科醫師專門培訓的病理醫師醫院病理科現代外科病理學所有外科專業，內科專業(內鏡，活檢)，皮膚病學，神經病學，腫瘤學，診斷放射學，放射治療學等。 DIAGNOSTC PATHOLOGY 二、診斷病理學的發展 19世紀70年代活檢做為外科手術檢查三、診斷病理學的任務及重要性病理診斷的作用？病理檢查 VS 化驗、檢驗？檢驗報告是檢驗數據，多由檢測儀器做出。臨床醫生根據這些檢驗數據，再結合病人臨床的癥狀、體征，經過綜合分析得出初步的診斷病理診斷報告是病理醫生應用病理學知識和個人經驗，通過

4、對病變組織結構及細胞形態的識別、分析，并結合臨床各種信息（包括各種檢查結果）對各種疾病做出的診斷三、診斷病理學的任務及重要性病理診斷的作用？病理診斷的作用？近年來臨床檢驗（PCR、腫瘤相關抗原檢測、疾病基因檢測）與影像學檢查（CT、MRI、PET-CT）有了很大的發展。病理診斷的作用？近年來臨床檢驗（PCR、腫瘤相關抗原檢測、疾Joensuu et al. N Engl J Med. 2001;344:1052-1056.治療4周后Joensuu et al. N Engl J Med. 診斷病理學藥理藥效研究動物模型課件病理診斷的作用？臨床檢驗（PCR、腫瘤相關抗原檢測、疾病基因檢測）與影像

5、學檢查對于確定疾病性質仍有許多問題。對明確器質性病變的疾病，病理診斷仍然是目前國際上公認的最可靠診斷技術，最高一級的診斷。許多病人的臨床診斷仍須通過病理檢查才能得到最后的確認。病理診斷的作用？臨床檢驗（PCR、腫瘤相關抗原檢測、疾病基因病理診斷的法律意義重要的醫學文書臨床治療手段選擇的重要依據發生醫療糾紛時重要的證據病理診斷的法律意義重要的醫學文書三、診斷病理學的任務及重要性主要任務：提出診斷；提出可能的病因學證據或線索；提供有關的預后因素，轉歸；評價療效；器官的確認；無條件送病理檢查正確、全面的病理診斷是最可靠的診斷，Final Diagnosis, Speak last words三、診斷

6、病理學的任務及重要性主要任務：三、診斷病理學的任務及重要性What is a pathologist JCE UnderwoodFirst, a doctor!Second, a scientific diagnostician (uses rational and verifiable methods)Custodian of patients tissuesGuardian of clinical standardsInnovator of research, teaching, training, etc.三、診斷病理學的任務及重要性What is a pathol四、病理醫生 VS 臨

7、床醫生病理醫生：病理形態+臨床信息(體征，癥狀，年齡，部位，影像學，治療后反應，手術所見) + 知識和經驗臨床醫生：病理診斷全過程，長處，短處 病理診斷 = 臨床醫師+病理醫師四、病理醫生 VS 臨床醫生病理醫生：病理形態+臨床信息(體病理診斷的局限性病理診斷僅對送檢的標本負責因取材不夠，非典型區域，擠壓，電釣傷，標本處理不當（固定不及時，不充分），放化療影響導致無法診斷或漏診、誤診臨床信息不夠或錯誤疾病表現復雜或尚未達到某一特征性階段病理醫師水平限制，或對病病認識的限制，病理觀察不全面不同時期診斷標準不同，知識更新快醫院規模小，不能開展特殊病理檢查病理診斷的局限性病理診斷僅對送檢的標本負責診

8、斷病理學藥理藥效研究動物模型課件診斷病理學藥理藥效研究動物模型課件診斷病理學藥理藥效研究動物模型課件 CD30 CD30診斷病理學藥理藥效研究動物模型課件診斷病理學藥理藥效研究動物模型課件診斷病理學藥理藥效研究動物模型課件彌漫性大B細胞淋巴瘤 (DLBCL) 將被分成多種類型彌漫大B細胞淋巴瘤 非特殊性 新命名原發性縱隔大B細胞淋巴瘤血管內大B細胞淋巴瘤原發性滲出性淋巴瘤富于T細胞/組織細胞的大B細胞淋巴瘤 新漿母細胞性淋巴瘤 新ALK-陽性 DLBCL 新與慢性炎癥相關的DLBCL 新原發性中樞神經系統DLBCL新原發性皮膚 DLBCL, 腿型 新發生于HHV8+多中心性Castleman病

9、的淋巴瘤 新彌漫性大B細胞淋巴瘤 (DLBCL) 將被分成多種類型彌漫大診斷病理學藥理藥效研究動物模型課件四、病理醫生 VS 臨床醫生1.提供盡可能詳盡的病史，部位；不能遺漏重要的病史！2.熟悉各種病理技術的適應性，要求，免疫組化，電鏡，組化，固定液，溫度3.取材：體積，人為因素，典型的病變4.病理醫生的難處，局限性5.雙方的交流：Doctors Doctor (Rosai-Dorfman病， 脂肪母細胞瘤，韌帶樣纖維瘤,淋巴瘤，交界病變及陰性報告的處理，等等)四、病理醫生 VS 臨床醫生1.提供盡可能詳盡的病史，部位；DiagnosisClinical featuresMorphologyI

10、mmunologic and biologic markers臨床特點 形態學 免疫和生物信息 病理診斷=金標準？病理診斷臨床病理!DiagnosisClinical featuresMorp病理診斷 是一種特殊的會診 而不是一種檢驗！病理診斷 是一種特殊的會診五、病理診斷的種類1.細胞學診斷：各種體液離心涂片，痰，宮頸涂片，刷片，印片，細針穿刺(FNA)等。損傷小，操作簡單，術前診斷，范圍廣有較高可靠性，假陽性少，假陰性，良惡性疾病VS分類(？)，部分疾病有限制，最后診斷(？)惡性高度可疑可疑不排除良性 TBS診斷系統(婦科）五、病理診斷的種類1.細胞學診斷：各種體液離心涂片，痰，宮2.組織

11、學診斷：Surgical & Biopsy, 最重要，多數為最后診斷。HE染色切片，免疫組化，特殊染色，電鏡，原位雜交，PCR等診斷報告：大體描述，鏡下描述，診斷(明確的陽性診斷，考慮為，傾向于，懷疑，不排除，陰性診斷，描述診斷等) 注釋(預后，下一步診斷或治療建議，少見病的參考書，文獻等) 2.組織學診斷：Surgical & Biopsy, 最重要良、惡性腫瘤并沒有恒定、統一、完全客觀的標準，在許多情況下靠主觀、經驗判斷，鑒別困難良性惡性病變連續譜系，存在中間狀態新認識的腫瘤，確切生物學行為有待積累病例長期隨訪病理醫師承擔巨大風險，診斷中不得不留有余地交界性病變（腫瘤）/潛在惡性borde

12、rline/malignant potential良、惡性腫瘤并沒有恒定、統一、完全客觀的標準，在許多情況下靠診斷病理學藥理藥效研究動物模型課件診斷病理學藥理藥效研究動物模型課件軟組織腫瘤：中間性（intermediate）局部侵襲性：常局部復發，無轉移；擴大切除。韌帶樣纖維瘤病，非典型脂肪瘤性脂肪腫瘤等偶而轉移性：常局部侵襲生長，偶而轉移(組織)，容器溫度(室溫，4)，時間：1mm/小時，幾個小時過夜檢查申請單聯號! 2.特殊染色(細胞及組織化學 酶組織化學) PAS，van Gieson，網狀纖維，鐵，脂肪，酶六、病理診斷技術1.標本前處理：新鮮標本/及時固定，完整!3.免疫組化：免疫螢光

13、免疫酶標(PAP， ABC(Avidin+Biotin Complex/酶) ，SP，應用廣泛。免疫組化技術已廣泛應用于病理診斷：在解決疑難病例診斷方面起著重要作用；隨著人們醫療風險意識的增強，許多普通的病例也常常需要免疫組化進一步證實；成為病理醫生常規工作不可缺少的重要工作，是目前病理醫生實踐循證醫學的一個重要方面。 3.免疫組化：免疫螢光免疫酶標(PAP， ABC(Avid3.免疫組化：免疫組化染色意味著試劑及人力等方面的支出；但如果正確掌握適用范圍，選擇合適的抗體，可以及時地明確或避免誤診，或對臨床分期進行更為準確的評估，有助于選擇更有效的治療方法，因此總體上節省醫療費用。3.免疫組化：

14、免疫組化染色意味著試劑及人力等方面的支出；3.免疫組化：腫瘤的病理診斷：良惡性腫瘤的鑒別未分化惡性腫瘤（癌或肉瘤）性質的判斷；各種圓細胞、梭形細胞、多形性腫瘤的鑒別診斷；幫助確定轉移性腫瘤的原發部位等。3.免疫組化：腫瘤的病理診斷：診斷病理學藥理藥效研究動物模型課件診斷病理學藥理藥效研究動物模型課件診斷病理學藥理藥效研究動物模型課件CK20 CK7肺結腸癌轉移CK20 CK7肺結腸癌轉移細胞角蛋白在癌中的表達 CK7+ CK7 -CK20+ 女性生殖道黏液癌， 消化道癌 （結腸） 部分胃癌，部分胰膽道癌 Merkel細胞癌CK20- 消化道以外的腺癌：肺、 肝癌、腎細胞癌、前列 乳腺、漿液性及

15、宮內膜癌 ， 腺癌、鱗狀細胞癌 間皮瘤、膀胱、宮頸 唾腺來源的癌(90%)細胞角蛋白在癌中的表達 CK診斷病理學藥理藥效研究動物模型課件診斷病理學藥理藥效研究動物模型課件3.免疫組化：淋巴造血系統疾病的診斷：鑒別反應性增生性疾病與淋巴瘤；各類淋巴瘤分型的重要依據。在淋巴造血疾病的病理診斷中免疫組化目前已成為常規開展的工作項目。3.免疫組化：淋巴造血系統疾病的診斷：診斷病理學藥理藥效研究動物模型課件小B細胞淋巴瘤免疫組化鑒別 CD5 CD23 IgD CyclinD1 CD10/bcl-6B-CLL/SLL + + + - -MALT - - - - -MCL + - + + -(CD10可陽性

16、)FCC，diffuse - +/- - - +/-小B細胞淋巴瘤免疫組化鑒別3.免疫組化：內分泌腫瘤的診斷：不僅可以幫助確定診斷，還可以通過檢測腫瘤分泌激素達到功能分類的目的。在軟組織腫瘤、神經系統腫瘤等其他各系統腫瘤的病理診斷中免疫組化也具有重要的作用。3.免疫組化：內分泌腫瘤的診斷：不僅可以幫助確定診斷，還可以3.免疫組化：小活檢病理檢查：能明確地顯示癌細胞的存在（如胃粘膜活檢中的印戒細胞癌）；微小癌、微小轉移灶（淋巴結及骨髓）、甚至不易察覺的病變得以確診。3.免疫組化：小活檢病理檢查：能明確地顯示癌細胞的存在（如胃診斷病理學藥理藥效研究動物模型課件診斷病理學藥理藥效研究動物模型課件3.

17、免疫組化：細針穿刺、細胞學診斷主要是定性診斷？免疫組化的應用有可能對部分腫瘤進一步地進行分類或明確來源。3.免疫組化：細針穿刺、細胞學診斷主要是定性診斷？3.免疫組化：乳腺癌激素受體（ER、PR）的檢測在指導臨床治療方面已起到了重要的作用。針對腫瘤基因產物（C-erbB2, P53, ALK，CD117等）的抗體為基因治療提供重要的參考依據。細胞增殖核抗原（Ki-67）等免疫組化染色可為腫瘤的預后提供依據。3.免疫組化：乳腺癌激素受體（ER、PR）的檢測在指導臨床治已用于臨床的新型靶向治療藥物美羅華：CD20單克隆抗體，用于治療CD20+的B細胞淋巴瘤Herceptin：c-erbB-2（ne

18、u）單克隆抗體，用于治療c-erbB-2過度表達的乳腺癌STI-571（Gleevec，imatinib）：小分子選擇性蛋白酪氨酸激酶抑制劑，用于CML和GIST治療已用于臨床的新型靶向治療藥物美羅華：CD20單克隆抗體，用于診斷病理學藥理藥效研究動物模型課件4.電子顯微鏡：組織小，及時固定(戊二醛)適用于：腎臟病(腎小球疾病)診斷；腫瘤病理診斷(小細胞，神經內分泌，間皮)；部分感染性疾病；代謝性疾病；纖氣運動不能綜合征；局限性：觀察組織，細胞少；無法區分良惡性；費時4.電子顯微鏡：組織小，及時固定(戊二醛)診斷病理學藥理藥效研究動物模型課件診斷病理學藥理藥效研究動物模型課件5.分子病理學：分子生物學+病理學 免疫組化蛋白質(抗原，基因產物) 分子生物學基因改變：PCR，濾膜雜交(斑點，Protein 印跡)，原位雜交 功能性+ 結構改變優點：反應特異，檢測靶信號本質上不同，溫度，固定影響小。用途：感染性疾病(Virus)，腫瘤基因(癌基因，抑癌基因/原癌基因)，點突變，基因重排，基因擴增，缺失失控惡性腫瘤，遺傳性疾病(基因突變，重排)5.分子病理學：分子生物學+病理學 5.分子病理學作用：定性5.分子病理學作用：定性診斷病理學藥理藥效研究動物模型課件 PCR for TCR-Jr多克隆 單 克 隆 PCR for TCR-Jr多克隆 5.分子病理學作用：分類5.分子病