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文檔簡介
1、1、生物技術:生物技術有時也稱生物工程,是指人們以現代生命科學為根底,結合其他根底學科的科學原理,承受先 進的工程技術手段,依據預先的設計改造生命體或加工生物原料,為人類生產出所需的產品或到達某種目的。2DNA體外重組技術應用人工的方法把生物的遺傳物質通常是DNDNA 細胞或個體中大量表達已獲得基因產物。3、細胞工程:是指以細胞為根本單位,在體外進展培育、生殖,或人為地使細胞的某些生物學特性按人們的意愿發生 轉變,從而到達改進生物品種或制造品種;或加速繁育動植物個體;或獲得某些有用的物質的過程包括動植物細 胞的體外培育技術、細胞融合技術、細胞器移植技術、克隆技術和干細技術等4、發酵工程:利用微
2、生物生長速度快、生長條件簡潔以及代謝過程特別等特點,在適合的條件下,通過現代化工程技 術手段,由微生物的某種特定功能生產出人類所需的產品。5包括酶的固定化技術、酶反響器的設計及應用、酶制劑的制備催化功能,對酶進展修飾改造,并借助生物反響器來生產人類所需產品的一項技術。6、蛋白質工程:是指在基因工程的根底上,結合蛋白質結晶學、計算機關心設計和蛋白質化學等的學科根底學問,通 過對基因的人工定向改造等手段,對蛋白質進展修飾、改造和拼接以生產能滿足人類需要的型蛋白質的技術。7、連接酶:能夠催化雙鏈DNA 3、5末端形成磷酸二酯鍵的酶。8、目的基因:在基因工程設計和操作中,被用于基因重組、轉變受體細胞性
3、狀和獲得預期表達產物的基因成為目的基 因。9、細菌質粒載體:是存在于細菌細胞質中的一類獨立位于染色體外的能夠進展自主復制的遺傳成分。10、噬菌體載體:把特地感染了細菌的病毒稱為噬菌體載體,由DNA頭部和蛋白質尾部組成。11、溶源:假設噬菌體侵入宿主細胞后并不裂解宿主細胞,而是把自身的DNA 整合到宿主細胞DNA 中,并隨著宿主細胞分裂而增殖。12、裂解:假設噬菌體侵入宿主細胞后,可以利用宿主細胞的酶以及底物合成的噬菌體,然后裂開細胞釋放出子代噬 菌體并再次感染其他宿主。13、基因重組:利用限制性內切酶和其他一些酶類,切割和修飾載體DNA 和目的基因,將兩者連接起來,使目的基因插入于可以自我復制
4、的載體內,再轉入受體細胞,以期這種外源性的目的基因在受體細胞內得到正確表達。14宿主細胞是指能夠攝取外源DN,并使其穩定擴增以及表達的細胞。15、薩瑟恩DNA 印跡雜交:依據毛細作用的原理,使在電泳凝膠中分別得DNA 片段,轉移并結合在適當的濾膜上,然后通過標記好的DNA 或RNA 探針的雜交作用,來檢測這些轉移的DNA 片段。16、細胞融合技術:是指承受自然或人工方法使兩個或兩個以上的不同細胞或原生質體融合為一個細胞,不經過有性 過程而到達雜種細胞的方法。17、細胞拆合技術細胞重組技術:是指從活細胞中分別出細胞器或其組分,然后將不同來源的細胞器在體外條件 下進展重組,使其重裝配成具有生物活性
5、的細胞或細胞器的一種試驗技術。18、細胞培育技術:是指動物、植物或微生物的細胞在體外無菌條件下的保存和生長。19、生能細胞:是指能夠表達生物體基因組的任何一種基因,并能分化該物體內任何一種細胞,并進而發育成為一個 完全生物體的細胞。20、外殖體:指植物組織培育中用來進展無菌培育的離體材料。21、原生質體:除去了全部細胞壁的細胞。22、胚狀體:指組織培育中起源于非核子細胞,經過胚胎發生與胚胎發育而形成的胚狀構造具有根芽兩節23、繼代培育:指愈傷組織在培育基上生長一段時間后,由于養分缺乏、水分散失、代謝產物積存等緣由,需將這些 組織轉移到的培育基上,這種轉移稱為繼代培育后傳代培育。24、植物細胞培
6、育:指在離體條件下,將愈傷組織或其他易分散的組織接種到培育基,通過培育使細胞增殖,從而獲 得大量的細胞群體的技術。25、組織培育:是在無菌和人為把握外因的條件下,培育和爭辯植物組織,器官,甚至進而從中分化,發育出整體植 物的技術。26、人工種子:外面包裹有一層有機薄膜的胚狀體。27、自然選育:不經過人工處理,直接利用微生物的自然突變進展選育短波輻射、低劑量使用、四種堿基磷間互變 異構、宇宙射線28、固定化酶:通過物理或化學的方法將酶束縛在肯定的空間里,將酶制成仍具有催化活性的衍生物。29、蛋白質組學:是指一個細胞或組織所包含的全部的蛋白質,現將其定義為基因組表達的全部蛋白質。30、生物芯片:通
7、過微電子、微加工技術在平方厘米大小的固相基質外表構建的一個微型分析系統,以實現對組織細 胞中的DNA、蛋白質以及其他生物組分進展快速、高效、敏感的高級分析。31、基因芯片:將大量的探針分子固定于支持物上后,與標記的樣品分子進展雜交,通過對雜交信號檢測分析,獵取 樣品的分子的數量和序列信息。32、蛋白質芯片:將大量的蛋白質有規章的固定到某種介質載體上,利用蛋白質與蛋白質酶與底物、蛋白質與其他小 分子之間的相互作用,檢測分析蛋白質的技術。33、人類基因組打算:目的是測定22 1 3109 34 萬個基因組成的全DNA序列。34“路標”,以遺傳學的距離為“圖距”的基因組圖,它是基于遺傳功能而建立的圖
8、譜。35、物理圖譜:是指以一段的核苷酸序列的DNA 片段為標志,所做出的基因組的DNA 的分析。36、轉錄圖譜:又叫轉錄圖,指具有表達力量的DNA 轉錄圖37、序列圖譜:是分子水平上的一個物理圖譜.38、載體DNA 與外源基因連接的方法有:粘性末端連接法、平末端連接法。39PCRDNA體內復制過程的體外DNADNAd-NTP引物和DNA 聚合酶,通過變性、退火、延長三個溫度的不斷循環,使目標DNA 得到快速大量的復制,需要兩條合成的寡核苷酸片斷和耐熱的DNA聚合酶。40、什么是生物技術,它包括那些根本內容?其內容之間如何聯系? 概念略。它包括基因工程,細胞工程,酶工程,發酵工程,蛋白質工程。關
9、系:這五項技術并不是各自獨立的,他們之間是彼此聯系,相互滲透的。其中基因工程技術是核心技術,他能帶動 其他技術的進展。41、簡要說明生物技術的進展史以及現代生物技術與傳統生物技術的關系。進展史:傳統的生物技術從史前時代起就始終為人們所開發利用,首先是發酵技術的應用,證明白發酵是由微生物引 起的,并建立了微生物的純種培育技術。在發酵工程的帶動下,發酵業和酶制劑業大量涌現。由于遺傳學的建立及其 應用,細胞學的理論被運用于細胞工程。但這些發面的進展不具備高技術的要素,被稱為傳統生物技術。現代生物 20 60 DNA 重組技術的建立為標志的。它說明白DNA 是遺傳信息的攜帶者。提醒了DNA 編碼的DN
10、A 愿獲得所需產品。形成了具有劃時代意義和戰略價值的現代生物技術。關系:現代生物技術是從傳統生物技術中進展而來的。在傳統細胞工程的根底上,運用高技術實現了基因的改造現代生物技術。42、簡述一下內切酶和連接酶的作用機理內切酶:類型、:都有甲基化,依靠于 ATP,限制性內切酶活性。型酶在識別部位進展切割很簡潔從底物上解離。型酶是隨機切割,識別部位不等于切割部位,能長生不同的末端。類型的特點:識別部位不等于切割部位1在 DNA 雙鏈特異性識別部位進展切割產生特定的DNA 2兩個單鏈部位在DNA 分子上不是彼此相對的3DNA 片段往往具有互補的單鏈延長末端。連接酶:能夠催化雙鏈DNA 3-OH 5-P
11、 末端形成磷酸二脂鍵,使倆末端相連。用DNA連接酶連接具有互補的粘性末端片段用T4DNA連接酶將末平端片段連接段片段加上連接頭或人工合成的連桿使之成為粘性末端后用DNA 連接酶連接。43、比較基因工程中常用的DNA 聚合酶的催化酶活性有什么不同?DNA DNA 聚合酶特點:a、5-3b、5-3外切酶活性 c、5-3為且酶活性大腸桿菌DNAa聚合酶活性b5外切酶活性T4噬菌體DNAT7DNA聚合酶DNA 鏈比其他的長耐熱DNA 聚合酶7080PCR 中DNA 聚合酶依靠于RNA 的DNA 聚合酶末端轉移DNA 聚合酶將平末端修飾為粘性末端T4 噬菌體多核苷酸聚合酶S1 核酸酶降解雙鏈DNA,單鏈
12、RNABa13 核酸酶具有高度的、特異的、脫氧核苷酸內切酶活性堿性磷酸酶細菌堿性BE(DAP)去除 5端磷酸提高重組率44、基因工程常用的載體有哪些性質?1能在宿主細胞中進展獨立的穩定的DNA 自我復制。2已于從寄主細胞中分別并進展純化。3)在其 DNA 序列中具有適當的限制性內切酶位點。4具有能夠觀看的表形特征。45、簡述質粒、噬菌體、柯斯質粒載體的特性?質粒:1具有復制起點。2帶有可供選擇的標記。3含假設干限制酶的帶一位點。4)分子量小。5拷貝數高。噬菌體:1具有雙鏈的復制型 DNA,可如質粒一樣進展遺傳操作。2對大腸桿菌有很強的感染力。3DNA 的整合是可逆的,原噬菌體可從宿主DNA中切
13、出,進入溶菌性方式的生殖。柯斯質粒載體:1)具有質粒的復制起點和藥物抗性基因。2 噬菌體載體的COS 位點。3分子量小,但有高容量的克隆力量。4具有與質粒同源徐磊的質粒進展重組的力量。46、簡述外源基因導入受體細胞的途徑。1導入原核細胞受體的方法:轉化、轉導、三親本雜交。DNA 分子的生理狀態的細胞。轉導:以噬菌體或真核病毒為載體構建的重組分子導入受體細胞的方法。轉導時重組分子先進展體外包裝,然后導入 受體細胞。三親本雜交:當重組DNA 分子不能直接轉導或轉化時,將含有DNA 分子的供體菌,含有被轉化的受體菌,含有關心質粒的關心菌,三者共同培育。在關心菌的作用下,將供體菌導入到受體菌中。 2導
14、入真核細胞受體的方法; 用鋰鹽進展處理,細胞能夠允很多元基因的進入2導入植物細胞中主要承受致癌膿桿菌制導下的以T2 質粒為載體構成重組分子導入受體細胞的方法3導入動物細胞:有物理、化學方法,,和生物方法。47、植物組織培育的或許步驟。5 個階段:預備階段 (1)選擇適宜的外植體,一般以幼嫩的組織器官為宜2除去病原菌及雜菌, 外植體自來水屢次漂洗消毒劑處理無菌水反復沖洗無菌濾紙吸干3配置適宜的培育基。由于物種的不同培育基也多種多樣。 誘導去分化階段:就是讓外植體去分化,使各細胞處于旺盛有絲分裂的分生狀態。繼代增值階段:愈傷組織長出后經過幾周的快速分裂,原有的培育基中的水分及養分物質多以耗失,細胞
15、的有害代謝 物已在培育基中積存,因此必需進展移植切割成數塊后繼代增值。生根發芽階段:通常愈傷組織要移植于含有適量細胞分裂素,沒有或僅有少量生長素的分化培育基中,才能誘導胚狀 體的產生。移栽成活階段:生長于人工照明玻璃瓶中小苗,要移栽到室外以利成長。此時的幼苗還格外幼嫩,移栽應在能保證適度的光、溫、濕條件下進展。48、植物細胞大量培育承受什么方法?在培育過程中有哪些影響因素? 承受懸浮細胞培育系統。1遺傳特性,細胞本身,內因,影響植物細胞蛋白質培育。2培育條件,外因光照:愈傷組織和細胞生長不需要光照,但光照會影響次生代謝產物的合成和積聚。溫度: 細胞生長速率與培育溫度親熱相關。攪拌與混合,通氣養
16、分鹽PH 值前體和調整因子。49、原生質的融合過程和結果。12化學融合,在無菌條件下按比例混合雙親原生質體滴加 PEG 溶液,搖勻,靜止滴加高鈣高PH 溶液,搖勻,靜止滴加原生質體培育液洗滌數次離心獲得原生質體細胞團篩選鑒定再生雜合細胞3接通肯定的交變電場。原生質體極化后順著電場排列成嚴密的珍寶串裝。此時,瞬間施以適當強度的電脈沖,使原生 質體質膜被擊穿而發生融合。原核細胞和真菌原生質體的融合分別培育帶遺傳標志的雙親本菌株至指數生長中期,此時細胞壁最簡潔被降解。2(3)混合雙親本,參加適量溶菌 酶,作用 2030 分鐘。(4)高速離心后去上清液得原生質體,用少量高滲培育基制成菌懸浮液。(5)參
17、加 10 貝體積的聚乙二醇促使原生質體分散、融合。結果:在融合后的一個細胞內有二核同時存在的異核體,但隨之進展同期的核分裂,進展核的融合,得到雜種細胞系。50、單倍體植株形單體弱,為何還要誘發單倍體植株?單倍體生物是指僅含一組染色體的個體。此類植物與正常二倍體植物相比,他們:1可以縮短雜交育種時間,抑制雜種分別的困難2顯著提高選育效率3抑制遠緣雜交不親和性,制造型 品種。51、人工種子包括哪幾局部?如何制備?人工種子的構造:人工種皮、人工胚乳、胚狀體人工種皮:包裹在人工種皮最外層的膠質化合物薄膜。人工胚乳:指人工配置的能夠保證胚狀體正常發育的養分物質。胚狀體:是指由組織培育產生的具有胚芽,胚根
18、和類似自然種子胚的構造。人工種子的制備:1胚狀體的誘導 2包裹制種 3發芽試驗52、發酵工程的進展經受了那幾個時期?自然發酵階段發酵技術的第一個轉折時期純培育技術其次個轉折時期通氣攪拌技術的建立,抗生素發酵開頭。工業化,現代發酵工業的開端。第三轉折時期代謝把握發酵技術,谷氨酸發酵菌的產生。第四個轉折時期基因工程技術53、列舉發酵工程的應用范疇。微生物菌體的發酵,以微生物菌體細胞為產品酵母、菌體蛋白、疫苗微生物發酵微生物種類多,產酶多,本錢低微生物代謝產物發酵產量最多利用微生物細胞的酶或酶系把一種化合物轉化成構造相關的更具有價值的化合物的生化反響 。如抗生素的生物轉換現代生物技術中生物細胞的發酵
19、微生物處理廢水以及其他發面的發酵。54、發酵工程包括那幾個階段?菌種的選育上游技術、微生物發酵生產中游、產品下游加工55、發酵液預處理的方法和技術有哪些?Ca+/Fe+等,參加草酸或草酸鈉。去除雜蛋白質,參加三氯乙酸鹽。去除有色雜質,參加活性炭。技術:承受分散絮凝技術分散:在中性鹽作用下,由于雙電層排斥作用降低使膠體體系穩定。絮凝:再某些高分子絮凝劑存在下,形成絮凝團。物理作用收集液相,產品在液相中。提取胞內產物先要對細胞進展 裂開。56、發酵工程下游加工的四個階段:發酵液預處理和固液分別提取精制成品加工發酵工程下游中提取和精巧的方法是什么?提取:沉淀法、萃取法、離子交換法、吸附法、超濾法。精巧:層析法,吸附層析,凝膠層析,離子交換層析、聚焦層析、疏水層析、親和層析57、在生產酶的過程中承受什么樣的方法提高酶產量?1添加誘導物2添加促進劑3把握阻遏物的濃度:代謝終產物、分解代謝產物58、
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