1、Q/LB.XXXXX-XXXXICS FORMTEXT 67.120.30CCS FORMTEXT B 50 FORMTEXT 46 FORMTEXT 海南省地方標準DB FORMTEXT 46/T FORMTEXT XXXX FORMTEXT 2022 FORMTEXT FORMTEXT 尖鰭鯉種質 FORMTEXT The germplasm of Cyprinus acutidorsalis FORMDROPDOWN FORMTEXT （本草案完成時間：2022年7月） FORMDROPDOWN FORMTEXT 2022 - FORMTEXT XX - FORMTEXT XX發布 FO

2、RMTEXT 2022 - FORMTEXT XX - FORMTEXT XX實施 FORMTEXT 海南省市場監督管理局發布 STYLEREF 標準文件_文件編號 * MERGEFORMAT DB XX/T XXXXXXXX STYLEREF 標準文件_文件編號 * MERGEFORMAT DB 46/T XXXX2022前言本文件按照GB/T 1.12020標準化工作導則 第1部分：標準化文件的結構和起草規則的規定起草。請注意本文件的某些內容可能涉及專利。本文件的發布機構不承擔識別專利的責任。本文件由海南省農業農村廳提出并歸口。本文件起草單位：海南省海洋與漁業科學院。本文件主要起草人：申志

3、新、董楊、李芳遠、蔡杏偉、張清鳳、王吉、王世鋒、李高俊。尖鰭鯉種質范圍本文件規定了本標準規定了尖鰭鯉Cyprinus acutidorsalis (Wang, 1979)的學名與分類、分布與生態習性、形態特征、生長與繁殖特性、遺傳學特性和檢測方法。本文件適用于尖鰭鯉的種質鑒定。規范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T 18654.1 養殖魚類種質檢驗 第1部分 檢驗規則GB/T 18654.2 養殖魚類種質檢驗 第2部分 抽樣方法

4、GB/T 18654.3 養殖魚類種質檢驗 第3部分 性狀測定GB/T 18654.4 養殖魚類種質檢驗 第4部分 年齡與生長的測定GB/T 18654.6 養殖魚類種質檢驗 第6部分 繁殖性能的測定GB/T 18654.12 養殖魚類種質檢驗 第12部分 染色體組型分析GB/T 18654.14 養殖魚類種質檢驗 第14部分 DNA含量的測定術語和定義本文件沒有需要界定的術語和定義。學名與分類學名尖鰭鯉Cyprinus acutidorsalis(Wang, 1979)。俗名海鯉、三角鯉。分類 隸屬于硬骨魚綱（Osteichthyes）、鯉形目（Cypriniformes）、鯉科(Cypri

5、nidae)、鯉屬(Cyprinus)。 分布與生態習性尖鰭鯉分布于海南島萬泉河水系和廣西欽州茅尾海，主要棲息于鹽度較低半咸水區域的中下層，棲息地底質為泥沙質底。其適宜生長溫度的范圍為1528，耐受鹽度的范圍為020，屬河口性咸淡水中型魚類。雜食性，以底棲生物為食。形態特征外部形態體側扁，背部隆起，腹部呈淺弧形。口前位，上頜比下頜稍長；斜裂，口裂未伸達到眼前緣。須2對，吻須和頜須各1對，均較短。背鰭1個，具鋸齒狀硬棘，起點位于腹鰭起點之后，背鰭展開后可見從頂端至尾部有一個明顯折線下墜，外形呈旗狀。腹部呈淺弧形，胸鰭和臀鰭各具鋸齒狀硬棘，胸鰭末端未伸達腹鰭，腹鰭末端距肛門較遠。尾鰭叉形，上下葉幾

6、乎齊平。體色為青灰色，腹部白色，各鰭均呈青灰色，背鰭和尾鰭具黑色邊緣（尖鰭鯉外部形態如圖1所示）。尖鰭鯉外形圖可數性狀背鰭鰭式IV-1518。臀鰭鰭式-5。胸鰭鰭式-1415。腹鰭鰭式-8。尾鰭鰭式2021。側線鱗式32645V33。鰓耙數1922（左側第一鰓弓外側的鰓耙數）。脊椎骨3233。可量性狀尖鰭鯉可量性狀的實測比例值見表1。尖鰭鯉可量性狀比例值項目比值體長體高2.960.20體長頭長3.951.00體長尾柄長5.560.43體長尾柄高7.540.53頭長吻長4.040.45頭長眼徑4.680.46頭長眼間距2.430.34尾柄長尾柄高1.360.14內部構造特征鰾鰾2室，前室較大，末

7、端尖。腹膜白色或灰白色。性腺性腺為1對，位于魚體腹面兩側；性成熟個體的性腺呈塊狀，繁殖期成熟的雌魚可見卵巢中已成型呈暗黃色的卵粒，雄魚精巢呈乳白色，輕擠腹部可擠出游離的卵子和精液。生長與繁殖特性生長尖鰭鯉體長與體重的關系符合指數函數，關系式見式（1）。W= 0.0349L2.8672， R = 0.9261（1）式中：W體重，單位為克（g）；L體長，單位為厘米（cm）。繁殖特性性成熟年齡自然條件下，初次性成熟雌魚為2齡，雄魚為1齡，體重規格為：雌魚0.7kg，雄魚0.6kg。繁殖季節繁殖期為每年的3月7月。產卵類型性腺每年成熟1次，分批產卵，卵具粘性。懷卵量2齡以上個體相對繁殖力為130粒/g

8、體重245粒/g體重，個體的絕對繁殖力為0.53萬粒21萬粒，卵徑為0.8 mm1.0 mm。遺傳學特性細胞遺傳學特性染色體數2n=100。染色體臂數NF=152。核型公式2n=22m+30sm+16st+32t。 公式中：n：倍數，m：中部著絲粒染色體，sm：亞中部著絲粒染色體，st：亞端部著絲粒染色體，t：端部著絲粒染色體。尖鰭鯉染色體中期分裂相及組型參見附錄A。分子遺傳學特性DNA條形碼以線粒體細胞色素C氧化酶亞基(CO)基因的特定區段作為尖鰭鯉DNA條形碼CO基因DNA條形碼尖鰭鯉線粒體COI基因全序列共740個堿基，堿基組成比例為A占26.5%、C占28.1%、G占17.4%、T占2

9、8.0%。經檢測尖鰭鯉種內的序列歧異度D0.05%，種內遺傳距離在0.000-0.002之間，尖鰭鯉DNA條形碼序列如下： 1 AGCCTCCTCATTCGGGCCGAACTTAGCCAACCCGGGTCGCTTCTAGGTGATGACCAAATT 6061 TATAACGTTATCGTCACTGCCCACGCCTTTGTAATAATTTTCTTTATAGTAATGCCTATC 120121 CTTATTGGAGGATTTGGAAACTGACTTGTACCACTAATAATCGGAGCCCCAGACATAGCA 180181 TTCCCACGAATAAATAACATAAGCTTCTGACTAC

10、TGCCCCCATCATTCCTTCTACTCCTA 240241 GCTTCTTCTGGTGTTGAAGCTGGGGCTGGAACAGGATGAACCGTATACCCACCTCTTGCA 300301 GGGAACTTAGCCCACGCAGGAGCATCAGTAGACCTAACAATTTTCTCACTTCACCTGGCA 360361 GGTGTTTCATCAATTCTAGGGGCAATCAACTTTATTACTACAACCATCAACATGAAACCC 420421 CCAGCCATCTCCCAATACCAAACACCCCTGTTCGTCTGATCCGTGCTTGTAACCGCCGTA 4

11、80481 TTGCTCCTTCTATCATTACCTGTTTTAGCCGCAGGAATTACAATGCTCCTAACAGACCGA 540541 AACCTTAATACCACATTCTTTGACCCGGCAGGAGGAGGAGACCCAATCCTTTATCAACAC 600601 TTATTCTGATTCTTCGGCCACCCAGAAGTTTATATTCTCATCCTCCCAGGATTCGGTATC 660661 ATCTCCCATGTTGTAGCCTATTATTCAGGCAAAAAAGAACCGTTCGGTTACATAGGAATG 720721 GTCTGAGCCATAATGGCCAT 7

12、40檢測方法性狀檢測按GB/T 18654.3的規定執行。年齡與生長檢測采用鱗片鑒定年齡，按GB/T 18654.4的規定執行。繁殖力檢測按GB/T 18654.6的規定執行。染色體檢測按GB/T 18654.12的規定執行。DNA含量檢測按GB/T 18654.14 的規定執行。DNA條形碼檢測DNA提取取尖鰭鯉背部肌肉或魚鰭等組織，用手術剪剪碎，再用試劑盒提取其基因組DNA，溶解后放冰箱，-20保存備用。PCR擴增DNA條形碼基因引物序列上游引物：5-CACAAAGACATTGGCACCCT-3；下游引物：5-AGTCAGCTGAAKACTTTTAC-3。擴增反應體系反應體系為50 L，其中Takara公司Premix Taq酶25 L，10 mol/L的引物2 L，DNA模板50 ng，無菌ddH2O補足50 L。擴增反應條件94 變性3 min，1個循環；94 變性30 s，60 退火30 s，72 延伸45 s，35個循環；72 延伸10 min，4 保存。序列測定PCR產物經回收純化后，送基因檢測公司進行測序，使用一代ABI3730 xl，Sanger測序儀進行測序，為保證測序的可靠性和準確性，采用雙向測序，并進行人工核對、校正。結果計算序列歧異度(D)按式（2）計算D= 序列內變異