1、關(guān)于核酸化學(xué)forgraduatescandidates第一張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月一、核酸的種類和組成單位二、核酸的分子結(jié)構(gòu)DNA的結(jié)構(gòu)(一級、二級、三級結(jié)構(gòu))RNA的結(jié)構(gòu)（tRNA、mRNA、rRNA）三、核酸的理化性質(zhì)核酸的一般性質(zhì)紫外吸收特征變性及復(fù)性四、核酸的分離純化第二張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月 1982年，Cech發(fā)現(xiàn)四膜蟲的rRNA具有自我剪接的功能。1983-1984，Altman也發(fā)現(xiàn)RNA具有催化功能（核酶）。第三張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月1.核酸的種類脫氧核糖核酸（DNA，Deoxyribonucleic A

2、cid） 多為雙鏈線狀，也有單鏈、環(huán)狀核糖核酸（RNA，Ribonucleic Acid） 多為單鏈，分子量比DNA小，包括 tRNA（10-15%）、mRNA（5%）、rRNA（80%） 參與蛋白質(zhì)的生物合成 一、核酸的種類和組成單位第四張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月mRNArRNAtRNA第五張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月2.核酸的組成DNA和RNA是線性多聚核苷酸基本結(jié)構(gòu)單元是核苷酸戊糖：DNA為脫氧核糖，RNA為核糖堿基：DNA（A、T、C、G） RNA（A、U、C、G）第六張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月核酸的組成核酸核苷酸磷酸核苷戊糖堿

3、基水解第七張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月（1）核苷酸堿基嘌呤堿：腺嘌呤A、鳥嘌呤G嘧啶堿：胸腺嘧啶T、胞嘧啶C、尿嘧啶U稀有堿基第八張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月 嘌呤環(huán) 嘧啶環(huán)第九張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月第十張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月堿基具有芳香環(huán)的結(jié)構(gòu)特征嘌呤環(huán)和嘧啶環(huán)呈(接近)平面的結(jié)構(gòu)堿基的芳香環(huán)與環(huán)外基團可以發(fā)生： 酮式烯醇式 胺式亞胺式互變異構(gòu)第十一張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月胺式亞胺式互變異構(gòu)第十二張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月酮式烯醇式互變異構(gòu)第十三張，PPT共一百一十一

4、頁，創(chuàng)作于2022年6月鳥嘌呤次黃嘌呤1-甲基次黃嘌呤稀有堿基是基本堿基的化學(xué)修飾型第十四張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月第十五張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月核苷：核糖+堿基第十六張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月核苷 nucleoside糖與堿基之間的C-N鍵：C-N糖苷鍵。第十七張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月稀有核苷 稀有核苷：2-0-甲基-核糖-核苷稀有堿基 DHU連接方式 （假尿嘧啶核苷）第十八張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月第十九張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月H2OH2O堿基磷酸戊糖核苷鍵酯鍵HO

5、CH2核苷酸第二十張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月核苷酸堿基連接（核苷鍵）酯 鍵（對DNA為H）12345第二十一張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月4. DNA和RNA共有的成分是（ ）。D 核糖 B. D 2-脫氧核糖 C. 鳥嘌呤 D. 尿嘧啶 E. 胸腺嘧啶組成核酸的基本單位是嘌呤堿與嘧啶堿 B. 核糖與脫氧核糖 C. 核苷 D. 核苷 酸 E. 寡核苷 酸 下列哪種堿基只存在于RNA而不存在于DNA（ ）。A. 尿嘧啶 B. 腺嘌呤 C. 胞嘧啶 D. 胸腺嘧啶第二十二張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月（2）核苷酸的衍生物 ATP (腺嘌呤核糖核苷

6、三磷酸)第二十三張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月ATP的性質(zhì)能量轉(zhuǎn)換中間體ATP含兩個高能磷酸鍵 水解時 釋放大量自由能ATP是磷酰化劑GTP (鳥嘌呤核糖核苷三磷酸)主要作為蛋白質(zhì)合成磷酰基供體第二十四張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月 cAMP 和 cGMPcAMP 3,5環(huán)腺嘌呤核苷一磷酸（細胞間信使） 環(huán)狀磷酯鍵是高能鍵第二十五張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月簡述ATP在生物體內(nèi)的主要作用生物系統(tǒng)的能量交換中心（能量貨幣）參與代謝調(diào)節(jié)水解放能推動熱力學(xué)上的不利反應(yīng)調(diào)節(jié)代謝路徑方向（促進糖酵解、抑制糖異生）細胞內(nèi)磷酸集團轉(zhuǎn)移的中間載體（NTP、dN

7、TP）合成RNA的原料第二十六張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月二、核酸的分子結(jié)構(gòu)（一）DNA（二）RNA第二十七張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月1、DNA的一級結(jié)構(gòu) 核苷酸的排列順序核苷酸間以3-5磷酸二酯鍵相連5-磷酸端（5-P）和3-羥基端（3-OH）多聚核苷酸鏈具有方向性： 表示時需注明方向：53或35特點第二十八張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月脫H2O酯鍵相連3，5-磷酸二酯鍵首尾35第二十九張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月DNA單鏈中連接脫氧核苷酸的化學(xué)鍵是( )。 A.氫鍵 B. 3-5磷酸二酯鍵 C. 離子鍵 D. 2-5磷

8、酸二酯鍵自然界游離核苷酸中，磷酸最常見是位于( )。A戊糖的C-5上 B戊糖的C-2上C戊糖的C-3上 D戊糖的C-2和C-5上第三十張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月DNA一級結(jié)構(gòu)的簡寫形式53首端末端PPPPPP A G C T G C OHpApGpCpTpG -pA-G -C-T-G核苷酸順序又稱堿基順序第三十一張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月2、DNA的高級結(jié)構(gòu)（1）DNA的二級結(jié)構(gòu)（雙螺旋結(jié)構(gòu)）堿基互補配對方式：A-T、G-C一 股核苷酸序列與另一股序列互補第三十二張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月腺嘌呤胸腺嘧啶鳥嘌呤胞嘧啶第三十三張，PPT共

9、一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月小溝大溝5353第三十四張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月反向平行、右手螺旋堿基位于內(nèi)側(cè)（堿基平面互相平行、垂直于螺旋軸）兩條鏈依靠堿基間氫鍵而結(jié)合（堿基互補配對）螺旋每周含10個堿基對螺距3.4nmB型雙螺旋特點第三十五張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月根據(jù)Watson-Crick模型，求每一微米DNA雙螺旋含核苷酸對的平均數(shù)為( )。A25400B2540C29411 D2941 E3505關(guān)于Watson and Crick DNA雙螺旋模型（）是錯的。A. 組成雙螺旋的兩條DNA 鏈反向平行B. 堿基對位于雙螺旋的內(nèi)側(cè)C. 維系

10、雙螺旋結(jié)構(gòu)的作用力主要是堿基堆積力 D. DNA 雙鏈是左手螺旋第三十六張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月 雙螺旋的補充第三十七張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月B-form helix（DNA）：獲得的條件在較高濕度下（92%）制得基本特性反向平行、右手螺旋、存在情況細胞中DNA主要的二級結(jié)構(gòu)第三十八張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月A-form helix（DNA）： 獲得的條件 相對濕度75%以下獲得的DNA纖維 基本特性 右手螺旋 較B型的DNA寬而短 存在情況 RNA分子的雙螺旋區(qū) RNA-DNA雜交雙鏈具有類似結(jié)構(gòu) 第三十九張，PPT共一百一十一

11、頁，創(chuàng)作于2022年6月Z-DNA獲得的條件人工合成的寡核苷酸基本特性反向平行、左手螺旋磷酸和糖的骨架呈現(xiàn)Z字形（zigzag）走向存在情況 嘌呤與嘧啶相間排列的核酸鏈易出現(xiàn)第四十張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月下列DNA模型中，屬于左手的螺旋的是 （ ）。A. Z-DNA B. C-DNA C. B-DNA D. A-DNA生物體內(nèi)天然狀態(tài)的DNA主要是以存在 A. A型 B. B型 C. C型 D. Z型 穩(wěn)定DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的主要因素是 ( )。 A.氫鍵和離子鍵 B. 疏水鍵和范德華力 C.堿基堆積力和氫鍵 D.離子鍵和范德華力 第四十一張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2

12、022年6月三股螺旋DNA （H-DNA，鉸鏈hinged DNA ）第三股堿基與Watson-Crick堿基對中的嘌呤堿形成Hoogsteen配對（中間是嘌呤）第四十二張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月 DNA堿基組成的Chargaff規(guī)則具有生物種的特異性 與組織/器官來源無關(guān) 不受生長發(fā)育、營養(yǎng)狀況及環(huán)境條件影響 Chargaff規(guī)則堿基摩爾數(shù)：A=T、G=CA+C=G+T（含氨基堿基總數(shù)=含酮基堿基總數(shù)）A+G=C+T （嘌呤總數(shù)=嘧啶總數(shù)） 第四十三張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月有二個DNA樣品，分別來自兩種未確認的細菌。兩種DNA樣品中的腺嘌呤堿基含量分

13、別占它們DNA總堿基的32和17。這兩個DNA樣品的腺嘌呤，鳥嘌呤，胞嘧啶和胸腺嘧啶的相對比例是多少？其中哪一種DNA是取自溫泉（64）環(huán)境下的細菌，哪一種DNA是取自嗜熱菌？答案的依據(jù)是什么？A:32%T:32%A:17%T:17%36%66%C:18%C:33%第四十四張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月一段雙鏈DNA包含1000個對，其組成中G+C58%，那么該雙鏈DNA中T的含量是: A.58% B. 42% C. 29% D. 21%假尿嘧啶核苷分子中，核糖與嘧啶的連接方式是: A.C1-N1 B.C1-N9 C.C1-C2 D.C1-C5 下列關(guān)于雙鏈DNA堿基含量關(guān)系中

14、（ ）是錯誤的。 A. A+GC+T B. AT C. A+TG+C D. CG第四十五張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月 DNA分子的堿基組成特點是（ ）。A. A/T1 B. G+C/A+T1 C. G/C1 D. A+G/C+T1第四十六張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月3. DNA的三級結(jié)構(gòu)（超螺旋）在二級結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上經(jīng)扭曲和折疊形成的 構(gòu)象（雙螺旋的螺旋）第四十七張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月4. DNA與蛋白質(zhì)的復(fù)合體 真核細胞的染色體原核細胞的擬核病毒核糖體第四十八張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月（H2A、H2B、H3、H4）2

15、 第四十九張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月壓縮分子第五十張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月RNA和蛋白質(zhì)核心細菌擬核的突環(huán)結(jié)構(gòu)第五十一張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月第五十二張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月真核生物DNA的高級結(jié)構(gòu)包括有（ ）。A核小體 B環(huán)狀DNA C染色質(zhì)纖維 D-螺旋第五十三張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月1. RNA的一級結(jié)構(gòu)核糖核苷酸通過磷酸二酯鍵形成的無分支線形長鏈。（1）RNA一級結(jié)構(gòu)特點 t RNA m RNA r RNA第五十四張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月 tRNA分子特點分

16、子較小（7090個核苷酸）含有較多修飾成分3端都具有CpCpA-OH結(jié)構(gòu)5端磷酸化，pG（pC）第五十五張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月5末端有甲基化的鳥苷酸：帽結(jié)構(gòu)真核細胞mRNA一級結(jié)構(gòu)特點3末端有 聚腺苷酸(polyA)：尾結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)錄后經(jīng)polyA聚合酶作用添加識別穩(wěn)定性第五十六張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月5 ，5 三磷酸橋核糖甲基化核糖甲基化第五十七張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月5-末端有帽子結(jié)構(gòu)的RNA分子是（ ） A.原核生物mRNA B.原核生物rRNA C.真核生物mRNA D.真核生物rRNA真核生物mRNA中5 末端的mG與第二

17、核苷酸間的 連接方式是 （ ）。A. 52 B. 53 C. 35 D. 55 大部分真核細胞mRNA的3-末端都具有：A多聚A B多聚U C多聚T D多聚C E多聚G第五十八張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月寡聚dT-纖維素柱層析用于（ ）。A. 從總DNA中分離純化質(zhì)粒DNAB. 從總核蛋白中分離出DNPC.從總RNA中純化mRNA D. 除去雜蛋白tRNA分子二級結(jié)構(gòu)的特征是( )。A. 3端有多聚A B5端有C-C-A C.有反密碼子環(huán) D.有氨基酸殘基 E. 尿嘧啶環(huán)第五十九張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月關(guān)于RNA分子中“尾”的正確敘述是 ( )。A.是t

18、RNA的加工過程 B.存在于tRNA的3末端C.是由多聚腺苷酸(polyA)組成 D. 存在于真核細胞的mRNA上mRNA的特點有：A分子大小不均一 B有3-多聚腺苷酸尾C有編碼區(qū) D有5C-C-A結(jié)構(gòu)第六十張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月 rRNA一級結(jié)構(gòu)特點70S80S第六十一張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月真核細胞核糖體的沉降系數(shù)是 A50S B60S C70S D80S 各類核糖核酸中,稀有核苷酸含量百分比最高的是A. tRNA B. 5srRNA C. mRNA D、rRNA有關(guān)RNA的描寫哪項是錯誤的（ ）。AmRNA分子中含有遺傳密碼BtRNA是分子量

19、最小的一種RNAC胞漿中只有mRNAD組成核糖體的主要是rRNA第六十二張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月借助次級鍵進而折疊（三級結(jié)構(gòu)） 2. RNA的高級結(jié)構(gòu)RNA通常是單鏈線形分子 自身回折形成局部雙螺旋（二級結(jié)構(gòu)） 除tRNA多數(shù)成核蛋白復(fù)合物（四級結(jié)構(gòu)） 如核糖體、拼接體、編輯體（RNP） A-U G-CtRNA的二級和三級結(jié)構(gòu)第六十三張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月 tRNA的三葉草結(jié)構(gòu)（二級結(jié)構(gòu)）氨基酸臂DHU環(huán)反密碼環(huán)額外環(huán)T C環(huán)末端CCA-OH接受活化AA識別密碼子分類的重要指標第六十四張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月 tRNA的倒L型

20、結(jié)構(gòu)（三級結(jié)構(gòu)）DHU環(huán)第六十五張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月決定tRNA攜帶氨基酸特異性的關(guān)鍵部位是： A.3末端 B.TC環(huán) C.DHU環(huán) D.額外環(huán) E.反密碼子環(huán) tRNA的二級結(jié)構(gòu)為（ ）。雙螺旋 B. 超螺旋 C. 線形 D. 三葉草形 E. 倒“L”形有關(guān)RNA結(jié)構(gòu)的敘述哪項是正確的？A.通常以雙鏈分子存在 B.通常以環(huán)狀單鏈分子存在C.通常以單股鏈存在，可有局部雙鏈結(jié)構(gòu)D.RNA的空間構(gòu)象為超螺旋結(jié)構(gòu)第六十六張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月核酸的組成和在細胞內(nèi)的分布如何?核酸由DNA和RNA組成在真核細胞中，DNA主要分布于細胞核內(nèi)另外葉綠體、線粒

21、體和質(zhì)粒中也有DNARNA主要分布在細胞核和細胞質(zhì)中另外葉綠體和線粒體中也有RNA第六十七張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月三、核酸的理化性質(zhì)（一）核酸的一般性質(zhì)1.核酸的水解2.核酸的酸堿性質(zhì)酸、堿、酶 DNA/RNA對酸堿耐受程度不同第六十八張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月第六十九張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月酸水解（完全水解）糖苷鍵比磷酸酯鍵更敏感嘌呤堿比嘧啶堿的糖苷鍵更不穩(wěn)定對酸最不穩(wěn)定的 嘌呤與脫氧核糖間糖苷鍵1.核酸的水解第七十張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月DNA在pH2.8、100加熱1h，可除去嘌呤形成無嘌呤酸（apur

22、inic acid，APA）第七十一張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月2/3環(huán)磷酸酯2核苷酸3 核苷酸堿水解 RNA磷酸酯鍵比DNA的更敏感（0.3M -1M）第七十二張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月酶水解（主要作用于磷酸二酯鍵）根據(jù)底物： DNase、RNase根據(jù)作用方式：核酸外切酶、核酸內(nèi)切酶底物二級結(jié)構(gòu)：雙鏈酶、單鏈酶作用的化學(xué)鍵：磷酸二酯酶、磷酸單酯酶非特異性/堿基特異的N糖苷酶水解糖苷鍵第七十三張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月5 -T-A-G-C-T-A-T-A-G-C-T-A-33 -A-T-C-G-A-T- A-T-C-G-A-T- 5

23、5 -T-A-G-C-T-A- -T-A-G-C-T-A-33 -A-T-C-G-A-T- - A-T-C-G-A-T- 5 5 -T-A-G-C- T-A-T-A-G-C-T-A-33-A-T-C-G-A-T-A-T -C-G-A-T- 5 限制性內(nèi)切酶(細菌)具嚴格的堿基序列專一性平末端第七十四張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月核苷酸是兩性電解質(zhì)2. 核酸的酸堿性質(zhì)DNA等電點為44.5RNA等電點為22.5第七十五張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月 堿基含有共軛雙鍵紫外吸收光譜：260nm核酸及其組份定量的依據(jù)（二）核酸的紫外吸收特征通常A260為1相當(dāng)于： 50

24、g/mL雙螺旋DNA40g/mL單鏈DNA（或RNA）20g/mL寡核苷酸 第七十六張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月 核酸具有紫外吸收能力的原因是（ ）。A. 嘌呤和嘧啶環(huán)中有共軛雙鍵B. 嘌呤和嘧啶中有酮基C. 嘌呤和嘧啶中有氨基 D. 嘌呤和嘧啶連接了核糖 E. 嘌呤和嘧啶連接了磷酸基團第七十七張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月1、核酸的變性 實質(zhì)： 某些理化因素使堿基對的氫鍵斷裂， 核酸分子高級結(jié)構(gòu)改變、理化性質(zhì)及 生物活性發(fā)生改變。 不涉及磷酸二酯鍵斷裂，一級結(jié)構(gòu)不變（三）核酸的變性與復(fù)性降解：核苷酸骨架上3，5 -磷酸二酯鍵的斷裂第七十八張，PPT共一百一十

25、一頁，創(chuàng)作于2022年6月變性因素 高溫（一般75） 熱變性 強酸、堿 酸堿變性 甲醛（Agarose中RNA ） 尿素（PAGE中DNA ）機理：雙鏈間氫鍵斷開，消除二級結(jié)構(gòu)第七十九張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月增色效應(yīng) 核酸降解或完全變性后紫外吸收值增加：天然DNA 25-40%、RNA 約1.1%實質(zhì)：堿基暴露RNA變性引起的性質(zhì)變化沒有DNA明顯第八十張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月 DNA熱變性的特征變性過程是“躍變”而非漸變加熱變性使DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)失去一半所需的溫度稱為融點/熔解溫度（Tm）指增色效應(yīng)達50%時的溫度一般DNA Tm 值在85 - 9

26、0 C之間第八十一張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月 Tm值大小與下列因素有關(guān)：DNA的均一性：越均一Tm的范圍愈小GC含量：越高Tm越高 介質(zhì)的離子強度：愈高Tm愈高 不易用稀電解質(zhì)保存DNA第八十二張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月 DNA在純水室溫下放置時，為什么線狀雙鏈DNA 會分離成它的組成鏈？失去陽離子的穩(wěn)定作用、DNA的解鏈溫度Tm降低下列哪些物質(zhì)能降低雙鏈DNA的Tm值？SSB、核組蛋白、氯化鈉、甲酰胺、堿SSB：單鏈結(jié)合蛋白甲酰胺：強烈的氫鍵競爭者堿：增加堿基電荷第八十三張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月影響Tm值的因素有（ ）。A. 一定

27、條件下核酸分子越長，Tm值越大B. DNA中G，C對含量高，則Tm值高C. 溶液離子強度高，則Tm值高D. DNA中A，T含量高，則Tm值高第八十四張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月2. 核酸的復(fù)性變性DNA在適當(dāng)條件下，兩條彼此分開的單鏈重新締合成雙鏈熱變性DNA驟然冷卻（淬火）不能復(fù)性將變性DNA緩慢冷卻（退火）可以復(fù)性減色效應(yīng)（低色效應(yīng)）復(fù)性時紫外吸收減少第八十五張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月分子量：越大，復(fù)性越難濃度：越大，復(fù)性越容易本身組成和結(jié)構(gòu)：具多重復(fù)序列DNA復(fù)性快 影響復(fù)性程度與速率的因素第八十六張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月DNA

28、變性時( )斷裂，變性后紫外吸收會( )。 A.離子鍵，降低 B.離子鍵，增強 C.分子鍵，降低 D.氫鍵，增強 DNA變性是指（ ）。A分子中磷酸二酯鍵斷裂B多核苷酸鏈解聚CDNA分子由超螺旋雙鏈雙螺旋D互補堿基之間氫鍵斷裂EDNA分子中堿基丟失第八十七張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月DNA Tm值較高是由于哪組核苷酸含量較高所致？AG+A BC+G CA+T DC+T EA+CDNA變性后，下列那一項變化是正確的? A.對260nm紫外吸收減少 B.溶液粘度下降 C.磷酸二酯鍵斷裂 D.核苷鍵斷裂 E.嘌吟環(huán)破裂DNA復(fù)性的重要標志是( )。 A.溶解度降低 B.溶液粘度降低

29、 C.紫外吸收增大 D.紫外吸收降低第八十八張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月下列各DNA分子中，堿基組成比例各不相同，其中那種DNA的Tm最低（ ）。A. A-T占15% B. G-C占25% C. G-C占40% D. A-T占80% E. G-C占35% 由結(jié)核分枝桿菌提純出含有15.1（按摩爾計算）的腺嘌呤的DNA樣品，計算其它堿基的百分含量。A=T=15.1% ； G=C=34.9% 第八十九張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月下列三種DNA中，哪個的Tm值最高？哪個的Tm值最低？為什么？A. AAGTTCTCTGAATTA TTCAAGAGACTTAATB.

30、AGTCGTCAATGCATT TCAGCAGTTACGTAAC. GGATCTCCAAGTCAT CCTAGAGGTTCAGTA將下列DNA分子加熱變性，再在各自的最適溫度下復(fù)性，哪種DNA復(fù)性形成原來結(jié)構(gòu)的可能性更大？為什么？A.ATATATATAT B. TAGACGATGC TATATATATA ATCTGCTACG第九十張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月不同來源的DNA經(jīng)熱變性后緩慢冷卻異源DNA間如存在互補序列復(fù)性時會交錯配對形成雜交DNA分子3. 核酸的雜交 Southern雜交（DNA） Northern雜交（RNA） Western雜交 ( Pr )第九十一張，P

31、PT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月四、核酸的分離純化1.核酸的超速離心利用核酸MW、密度和構(gòu)象的差異進行分離蔗糖/甘油/浮力密度梯度離心2.核酸的凝膠電泳瓊脂糖、PAGE （聚丙烯酰胺凝膠電泳）不同構(gòu)象的DNA分子遷移率不同 超螺旋線狀分子開環(huán)狀分子溴化乙錠、硝酸銀第九十二張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月3.核酸的柱層析羥基磷灰石柱層析層析用于分子雜交種單鏈和雙鏈的分離Oligo (dT )寡聚脫氧胸苷酸親和層析分離mRNA第九十三張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月4. DNA的提取與純化苯酚：蛋白質(zhì)的變性劑乙醇：沉淀DNA蛋白酶K：降解細胞蛋白SDS：裂解細胞

32、水：溶解DNA（不溶于0.14M NaCl）DNA與堿性蛋白質(zhì)形成核蛋白DNPDNP溶于水和濃鹽溶液（1M NaCl）破碎第九十四張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月5. RNA的提取與純化DEPC(焦碳酸二乙酯)：破壞RNase酸性胍鹽+苯酚+氯仿抽提 異硫氰酸胍使蛋白質(zhì)變性胍鹽/氯化銫將細胞抽提物密度梯度離心上層蛋白、中間DNA、底部RNA第九十五張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月 防止降解和變性 條件溫和、防止過酸/堿、 避免劇烈攪拌 防止核酸酶作用第九十六張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月一單鏈DNA與一單鏈RNA分子量相同，如何區(qū)分？專一性的DNA酶

33、與RNA酶堿水解：RNA易被水解顏色反應(yīng)：蘭色 綠色利用單核苷酸分析：U、T第九十七張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月6. 核酸及其組分含量的測定（1）紫外吸收法（260nm）（2）定糖法RNA：核糖 糠醛 綠色物質(zhì)（670-680nm）DNA：脫氧核糖+二苯胺蘭色物質(zhì)（595-620nm） 苔黑酚地衣酚濃HCl濃硫酸第九十八張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月（4）瓊脂糖凝膠電泳溴乙錠能插入DNA分子堿基間形成復(fù)合物紫外線照射下熒光強度與DNA含量成正比（3）定磷法 核酸含磷量為9.5% （1g磷相當(dāng)于10.5g核酸）橘紅色第九十九張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于202

34、2年6月核酸純度的測定通常用A260/A280 =1.8-2.0作為純度標準純DNA比值1.8， 1.8 Pr污染純RNA比值2.0， 2.0 RNA污染第一百張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月OD260的應(yīng)用 DNA或RNA的定量OD260=1.0相當(dāng)于：50g/ml雙鏈DNA40g/ml單鏈DNA（或RNA）20g/ml寡核苷酸判斷核酸樣品的純度（ OD260/OD280 ）DNA純品: 1.8；RNA純品: 2.0判斷DNA是否變性 變性（增色效應(yīng)）；復(fù)性（減色效應(yīng)）第一百零一張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月從動植物細胞勻漿中提取基因組DNA時，常用EDTA、氯

35、仿-異戊醇混合液和95%乙醇試劑。請根據(jù)蛋白質(zhì)和核酸理化性質(zhì)回答：（1）該實驗中這些試劑各起什么作用？（2）舉出一種可以鑒定所提取基因組的DNA中是否殘 留有RNA的方法。EDTA：絡(luò)合金屬離子（核酸酶的作用）氯仿-異戊醇：去蛋白、去苯酚95%乙醇：沉淀DNA鑒定核糖、用專一性的核酸酶第一百零二張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月在分離和鑒定動物肝DNA 和RNA 的實驗中，下列 化合物的作用是什么？A . 0.1M NaCl B. 5M NaClC. 0.1M Na2-EDTA 溶液D .15SDS 溶液 E .氯仿-異戊醇（24:1 溶液）不同濃度的 NaCl溶液中DNA 和RNA 溶解度不同在0.1MNaCl 溶液中RNA 溶解而DNA 溶解度低，在5MNaCl中DNA 的溶解度大于RNASDS（十二烷基硫酸鈉）、EDTA為核酸酶抑制劑EDTA：將核酸酶的激活劑Mg2+絡(luò)合SDS: 可使核蛋白體解離，使蛋白質(zhì)變性氯仿-異戊醇使蛋白質(zhì)變性第一百零三張，PPT共一百一十一頁，創(chuàng)作于2022年6月可用于測量生物樣品中核酸含量的元素是( )。 A碳 B氫 C氧 D磷 E氮核酸對紫外線的最大吸收峰在哪一波長附近？A280nm B260nm C200nm D340nm在核酸結(jié)構(gòu)中含量較穩(wěn)定的元素是A. C B.