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文檔簡介

1、保健食品中茶氨酸的高效液相色譜測定Determination of theanine in health food by high-performance liquid chromatography 適用范圍本方法規定了紅茶、綠茶及以茶氨酸為主要原料生產的保健食品中茶氨酸的高效液相色譜測定方法。本方法適用于紅茶、綠茶及以茶氨酸為主要原料生產的保健食品中茶氨酸的高效液相色譜測定方法。本方法的最低檢出量 1ng。本方法的最佳線性范圍：0.1mg/mL4.2mg/mL。2方法原理. 將試樣中的茶氨酸用水提取，使用等度洗脫反相高效液相色譜進行分離，紫外檢測器（UV）檢測，根據色譜峰的保留時間定性，外標

2、法定量，適用于紅茶、綠茶及以茶為原料生產的保健食品中茶氨酸的高效液相色譜測定方法。3. 試劑實驗用水為去離子水。3.1 三氟乙酸：分析純。3.2 高效液相色譜流動相：等度淋洗。3.3茶氨酸標準品：含量大于98（HPLC）。3.4茶氨酸標準溶液的配制：準確稱取3.5 mg茶氨酸對照品，溶于水中，用10 mL容量瓶定容，搖勻, 此標準溶液濃度為0.35 mg/mL。儀器設備4.1 高效液相色譜儀：雙高壓輸液泵，附紫外檢測器。4.2 水浴鍋。5. 分析步驟5.1固體試樣的處理：準確稱取1.0克粉碎試樣，加入30 mL H2O，在80的水浴鍋上加熱40 min，冷卻，離心，過濾后，濾液加水定容至50

3、ml，試樣溶液過0.45 m水膜，濾液進行色譜分析。5.2液體試樣的處理： 取一定量的試樣在水浴鍋上蒸干，殘渣以10ml 水溶解，溶液過0.45 m水膜，濾液進行色譜分析。5.3 液相色譜參考條件5.3.1 色譜柱：反相C18柱，5m, 100, 4.6 250 mm5.3.2 紫外檢測器：檢測波長 203nm5.3.3 等度淋洗條件：pH=3.0的三氟乙酸水溶液；流速：1 mL/min5.3.4 柱溫：35C5.4 色譜分析5.4.1 標準曲線的制備分別取標準溶液2，4，6，10，12 L進行HPLC分析，用峰面積對進樣體積繪制茶氨酸的標準回歸曲線。5.4.2 試樣測定 取10L試樣凈化液進行高效液相色譜分析，以絕對保留時間定性，用峰面積通過茶氨酸的標準曲線定量計算試樣中茶氨酸的含量。 6. 分析結果的表述6.1 計算 C 5 0 試樣中茶氨酸的含量（g/g） m 1000 式中：C 試

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