1、仿制藥一般流程仿制藥一般流程第1頁一個完整制劑研發流程應該包含基礎內容一、文件調研和專利查詢二、處方前研究三、原輔料相容性研究四、處方工藝篩選和優化五、影響原因試驗六、小試穩定性樣品制備和穩定性研究七、中試放大和中試穩定性研究八、藥品申報工作（資料撰寫、統計臺賬樣品整理）仿制藥一般流程第2頁文件藥品注冊情況調研和專利查詢（一）藥品注冊情況查詢：SFDA、FDA、EMEA（二）文件檢索：我國數據庫：CNKI、維普、萬方 國外數據庫：Reaxys、Pubmed、CA、SciFinder等（三）專利查詢：中國專利局、歐洲專利網、美國專利網、注意：1、在進行3.1類申報時，FDA資料普通比較詳細，會得

2、到很多有用信息。尤其要注意查詢。仿制藥一般流程第3頁處方前研究1、原料藥理化性質2、原料藥生物學性質3、劑型選擇仿制藥一般流程第4頁1、原料藥理化性質包含原料藥色澤、嗅味、pH值、pKa、粒度、晶型、比旋度、光學異構體、熔點、水分、溶解度、脂水分配系數、溶劑化/或水合狀態，以及原料藥在固態和/或溶液狀態下對光、熱、濕、氧等條件下穩定性情況。有些性質能夠經過文件查詢仿制藥一般流程第5頁對制劑影響較大一些理化性質pH值 注射劑時要重點考慮pKa 能夠了解藥品在一定pH下解離狀態，粗略地預計口服藥品體內吸收粒度 影響藥品溶出速率和溶解度，難溶性藥品要尤其關注晶型影響藥品溶出速率和溶解度，可能會影響體

3、內吸收溶解度 影響制劑體內吸收脂水分配系數（logP）影響制劑體內吸收仿制藥一般流程第6頁需要給出研究匯報一些理化性質粒度研究：主要針對難溶性藥品，能夠先考查不一樣粒度原料藥溶出速率影響，進而考慮是否在處方設計時，控制原料藥粒度。晶型研究：以前重視程度不夠，現在應該引發足夠重視。因為化合物晶型對藥品穩定性、溶解度和溶出速率有很大影響，另外當前存在很多化合物晶型專利，有時需要繞開保護晶型選擇另一個有效晶型。溶解度和溶出速率研究：溶解度分為特征溶解度和表觀溶解度（平衡溶解度），咱們當前測定藥品在不一樣pH值下溶解度都屬于表觀溶解度。仿制藥一般流程第7頁3、劑型選擇仿制藥要盡可能選擇與原研藥相同劑型

4、，假如確實要改變劑型，一定要給出充分理由，說明新劑型突出優點。仿制藥一般流程第8頁 原輔料相容性 試驗方法：HPLC、DSC等 原輔料相容性選擇那些輔料？仿制藥一般流程第9頁 SFDA指導標準 與影響原因條件相同。 輔料用量較大（如稀釋劑等），可按主藥：輔料=1：5百分比混合，若用量較小（如潤滑劑等），可按主藥：輔料=20：1百分比混合，取一定量，放置在高濕、高溫、光照條件下10天，重點考查性狀、相關物質等等，必要時，可用原料藥和輔料分別做平行對照試驗，以判別是原料藥本身改變還是輔料影響。仿制藥一般流程第10頁 FDA相關指導標準 主藥：填充劑1：10 主藥：崩解劑/粘合劑1：1 主藥：潤滑劑

5、10：1 條件為（1）40、RH75%開口；（2）40、RH75%閉口；（3）60閉口。于兩周、四面取樣檢驗外觀性狀及相關物質仿制藥一般流程第11頁處方工藝研究處方設計無專利專利保護了關鍵技術和輔料，只能采取相近技術和可替換輔料實現咱們目標處方篩選過程重點要找出評價指標？仿制藥一般流程第12頁基礎要求篩選之前要有方案試驗過程要有統計-真實、及時、完整處方優化要有比較和設定關鍵指標試驗結果要有分析和總結仿制藥一般流程第13頁處方篩選和優化單原因考查，原因較多時能夠采取正交設計和均勻設明確處方篩選和優化評價指標，如溶出度、釋放度、相關物質等假如研究過程中發覺影響制劑質量、穩定性、藥效主要原因，如原

6、料藥水分或輔料一些指標，應進行重點控制，確保藥品質量仿制藥一般流程第14頁制劑工藝研究處方篩選后進行工藝研究。普通同時進行，但在資料中須分條理整理。普通須研究粘合劑用量范圍，制粒設備參數，原料粒徑控制，干燥方式及時間，整粒方式及參數，混合強度及時間，壓片速度，硬度等。普通依據經驗值作微調即可，或是對關鍵步驟進行考查，無須全部詳細考查。對于常規工藝，經過多批樣品驗證即可。仿制藥一般流程第15頁工藝設計依據劑型特點，結合已掌握藥品理化性質和生物學性質，設計幾個基礎合理制劑工藝假如藥品存在多晶型現象，要注意制劑工藝過程中粉碎、制粒、包衣過程對藥品晶型影響。原料藥單獨晶型研究比較輕易，與輔料一起進行晶

7、型研究難度較大。假如藥品對濕不穩定，應注意對生產環境濕度進行控制，制備工藝盡可能防止水分影響，可采取干法制粒。粉末直接壓片工藝等。易氧化藥品可將溶劑加熱放冷后再溶解藥品，能夠加惰性氣體保護，溶劑除氧易揮發性藥品，最終加入，防止制備過程損失仿制藥一般流程第16頁影響原因研究樣品批次和規模 影響原因樣品需要采取最終確定處方工藝，制備批量滿足測定要求，普通制備一批，固體制劑批量為1000個制劑單位左右，注射劑則依據詳細放樣和測定要求，普通在幾十個制劑單位。影響原因批可與小試三批中一批共用樣品進行試驗。仿制藥一般流程第17頁放置條件 普通將制劑除去外包裝，分散放置于適宜容器中（常見培養皿），分別進行高

8、溫、高濕和光照試驗。高溫條件為40和60；高濕條件為RH90%5%和RH75%5%；光照條件為4500Lx500Lx。分為在以上試驗條件下放置10天，在第5天和第10天取樣檢測。若供試品性質穩定，高溫試驗可只進行60條件，高濕試驗可只進行RH90%5%。仿制藥一般流程第18頁小試穩定性樣品制備和穩定性研究樣品批次和規模 制備批量普通為三批，固體制劑批量為1000個制劑單位，注射劑則依據放樣和測定要求放樣，普通每個批次在幾十個制劑單位。仿制藥一般流程第19頁放置條件 分為長久和加速條件放樣，分別采取擬上市包裝三批進行試驗。 加速試驗普通選擇402、75%5%條件進行6個月試驗，在第0、1、2、3

9、、6個月末取樣測定。若6個月內樣品經檢測有不符合質量標準現象，應在302、65%5%條件下同法進行6個月試驗。 長久試驗普通選擇252、60%5%條件進行36個月試驗，在第0、3、6、9、12、18、24、36個月末取樣測定。仿制藥一般流程第20頁藥品申報工作內容申報資料撰寫研發原始統計整理樣品制備批統計、中控統計、檢驗統計整理研發儀器和設備臺帳整理穩定性樣品留取樣臺賬整理樣品、對照品使用情況統計及剩下樣品整理樣品出入庫臺賬仿制藥一般流程第21頁制劑質量研究項目性狀判別檢驗含量均勻度溶出度釋放度雜質殘留溶劑其它含量2022/9/4仿制藥一般流程第22頁性狀制劑性狀是考查樣品外形和顏色。片劑應描

10、述是什么顏色壓制片或包衣片（包薄膜衣或糖衣），除去包衣后片芯顏色，以及片子形狀，如異形片（長條形，橢圓形，三角形等）；片面有沒有印字或刻痕或有商標識號等也應描述。硬膠囊劑應描述內容物顏色、形狀等。注射液普通為澄明液體（水溶液），但也有混懸液或粘稠性溶液，需注意對顏色描述，還應考查貯藏過程中性狀是否有改變。23仿制藥一般流程第23頁判別通常采取靈敏度較高、專屬性較強、操作較簡便、不受輔料干擾方法對制劑進行判別。普通采取HPLC法：在含量測定項下統計色譜圖中，供試品溶液中主峰保留時間與對照品溶液中主峰保留時間一致2022/9/424仿制藥一般流程第24頁檢驗口服片劑、膠囊劑除按制劑通則檢驗外，普通

11、還應進行溶出度、雜質（或已知雜質）等檢驗；緩控釋制劑、腸溶制劑、透皮吸收制劑等應進行釋放度檢驗；小劑量制劑（主藥含量低）應進行含量均勻度檢驗；注射劑應進行pH 值、顏色（或溶液顏色）、雜質（或已知雜質）檢驗；注射用粉末或凍干品還應檢驗干燥失重或水分；大致積注射液檢驗重金屬與不溶性微粒等。2022/9/4仿制藥一般流程第25頁含量均勻度化學藥品質量標準建立規范化過程技術指導標準含量均勻度系指小劑量口服固體制劑、粉霧劑或注射用無菌粉末等制劑中每片（個）含量偏離標示量程度；片劑、膠囊劑或注射用無菌粉末，規格小于 10mg（含 10mg）品種或主藥含量小于每片（個）重量5%品種；其它制劑，標示量小于

12、2mg 或主藥含量小于每個重量 2%品種；復方制劑應對符合上述條件組分進行含量均勻度檢驗。對于藥品有效濃度與毒副反應濃度比較靠近品種或混勻工藝較困難品種，每片（個）標示量小于 25mg者，應進行含量均勻度研究。 版中國藥典附錄XE含量均勻度系指小劑量或單劑量固體制劑、半固體制劑和非均相液體制劑每片（個）含量偏離標示量程度。片劑、硬膠囊劑或注射用無菌粉末，每片（個）標示量小于25mg或主藥含量小于每片（個）重量25%者；內容物非均一溶液軟膠囊、單劑量包裝口服混懸液、透皮貼劑、吸入劑和栓劑；復方制劑僅檢驗符合上述條件組分；凡檢驗含量均勻度制劑，普通不再檢驗重（裝）量差異2022/9/4仿制藥一般流

13、程第26頁含量均勻度程度取10片（個）計算：A+1.80S15.0，供試品符合要求；A+S15.0，不符合要求；如A+1.80S15.0，A+S 15.0，另取20片（個）復試。依據30片（個）數據計算：A+1.45S 15.0，符合要求；A+1.45S 15.0，不符合要求。單劑量包裝口服混懸劑、內充混懸物軟膠囊劑、膠囊型或泡囊型粉霧劑、單劑量包裝眼用、耳用、鼻用混懸劑、固體或半固體制劑，其程度應為20%；透皮貼劑、栓劑程度應為25%.2022/9/4仿制藥一般流程第27頁溶出度凡檢驗溶出度制劑，不再進行崩解時限檢驗。溶出度研究應測定最少三批樣品，考查其溶出曲線和溶出均一性。 對易溶于水藥品

14、，在質量研究中亦應考查其溶出度，但溶出度檢驗不一定訂入質量標準。 2022/9/4仿制藥一般流程第28頁釋放度 緩釋制劑、控釋制劑、腸溶制劑、透皮貼劑均應進行釋放度研究。通常應測定最少三批樣品，考查其釋放曲線和釋放均一性，并對釋藥模式（零級、一級、Higuchi方程等）進行分析。 凡檢驗釋放度制劑，不再進行崩解時限檢驗。2022/9/4仿制藥一般流程第29頁溶出度/釋放度對測定方法進行方法學驗證，主要從以下幾方面進行考慮：1、溶出及釋放方法，主要考查溶出介質選擇、溶出條件選擇（槳法或轉籃法）、轉速選擇，主要經過溶出曲線進行評價。2、對溶出檢測方法進行驗證，從專屬性和準確性進行評價（1）需要進行

15、輔料干擾試驗（2）進行檢測方法系統適用性試驗（3）進行回收率試驗3、對試驗方法進行驗證（1）需要進行進樣精密度試驗（2）進行溶出液穩定性試驗4、對批內及批間差異進行驗證（1）進行溶出重復性試驗（2）進行溶出均一性試驗2022/9/4仿制藥一般流程第30頁溶出度/釋放度溶出度/釋放度方法確實立方法學驗證2022/9/4仿制藥一般流程第31頁方法確實立 參考上市產品溶出度測定條件溶出方法選擇：籃法、漿法、小杯法溶出介質篩選：自制與參比制劑在pH1.0鹽酸、pH4.5醋酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液、純化水中溶出曲線要相同，用相同因子（f2）判斷。 不一樣溶出介質中溶出曲線，并非溶出越快越好，而

16、應該是對產品有較強區分能力，而亦能在一定程度上反應體內實際吸收情況 2022/9/4仿制藥一般流程第32頁方法確實立溶出介質體積選擇：使藥品符合漏槽條件 漏槽條件：即所用介質體積應到達被測物質在37時在此介質中到達飽和溶液濃度體積310倍。指溶出到介質中藥品很快被介質稀釋帶走，藥品溶出不受溶出介質中藥品濃度影響，亦即濃度差不是藥品溶出限速步驟。轉速選擇：普通從50轉開始，若速度提升須有充分理由。 2022/9/4仿制藥一般流程第33頁方法確實立溶出度指標制訂： 在選擇方法及溶出介質和預選轉速下測定不一樣時間溶出量，建立溶出曲線，從圖譜上來確定取樣液時間，普通溶出曲線拐點處后推10-15分鐘。溶

17、出度均勻性試驗（批內） ：確定工藝穩定性 在確定條件下測定6片（粒）樣品溶出曲線，6條溶出曲線進行比較，應基礎均勻一致。 2022/9/4仿制藥一般流程第34頁方法確實立溶出曲線試驗（重現性，批間） ： 考查方法設定取樣時間以及程度是否合理。經過溶出曲線也能夠看出藥品在何時能到達最大釋放，以及是否能到達最大釋放。 2022/9/4溶出曲線RSD要求時間點溶出結果RSD第一時間點20%自第二時間點至最終時間點10%仿制藥一般流程第35頁方法學驗證-只考查一個介質HPLC法或UV法 若用UV須進行紫外方法學考查：最大吸收波長掃描、輔料干擾試驗、濾膜吸附、線性、回收率試驗、進樣精密度、溶液穩定性試驗

18、 若用HPLC測定須進行HPLC方法學考查：色譜條件、濾膜吸附、線性、進樣精密度、回收率試驗、溶液穩定性試驗 2022/9/4仿制藥一般流程第36頁輔料干擾試驗測定方法：取對照品溶液掃描，一份同等濃度樣品或樣品濃度略低于對照品溶液。假如沒有干擾，二條紫外掃描圖基礎重合，假如有干擾，供試品掃描圖會高于對照品溶液。 2022/9/4仿制藥一般流程第37頁濾膜吸附試驗注意事項：(1)過濾時濾膜與主成份間存在著一個吸附飽和過程，濾膜吸附一定量后到達飽和，不再吸附。(2) 吸附量2%以下時可忽略不計；超出2%應注意。(3) 0.45m濾膜吸附率高于0.80m。(4)煮沸1.5h處理提升微孔濾膜通透性,減

19、小吸附作用效果好于浸泡24 h。方法：（1）取溶出液，分別過濾不一樣體積初濾液后測定，觀察響應值改變情況，以知曉被測藥品與濾膜吸附情況。(2) 取樣后一份不過濾，直接采取高速離心，取上清液，與過濾掉一定體積后另一份續濾液比較，觀察二者間測定數據是否存在顯著性差異。判定自動取樣溶出儀固有濾膜是否存在吸附時，普通采取該法。(3) 對照品溶液，經濾膜過濾一定體積后，與原溶液進行比較，觀察測定前后數據改變情況。2022/9/4仿制藥一般流程第38頁線性要求：溶出度測定以釋放量10%120%間選取5個點即可,每個濃度進3針。可接收標準(常量):R0.998(0.990),Y軸截距在100響應值2%(25

20、%)以內,響應因子RSD2.0%(10%)。YKX+b假如和含量測定方法一樣，可不做；假如和含量測定濃度不一樣，增加線性范圍；假如和含量定方法不一樣，要求要做此項。 2022/9/4仿制藥一般流程第39頁分別配制濃度為80、100和120供試品溶液各三份，分別測定其含量，將實測值與理論值比較，計算回收率可接收標準：98.0102.0% RSD2.0 (n=9)每個樣品進3針，共9針 2022/9/4回收率試驗仿制藥一般流程第40頁當和含量溶劑不一樣時，須重新考查。主成份溶解于溶出介質后，因進行穩定性考查。(1)如不穩定，則應在標準中注明取樣后馬上測定；(2)溶液不穩定時普通采取對照品平行操作法

21、。每個樣1針 2022/9/4溶液穩定性試驗仿制藥一般流程第41頁精密度同含量測定連續進6針 2022/9/4精密度仿制藥一般流程第42頁含量測定方法學驗證HPLC法 考查：系統適用性、專屬性、線性、進樣精密度、溶液穩定性、耐用性、重復性、回收率。 2022/9/4仿制藥一般流程第43頁系統適用性是一份樣品連續進樣6針，在沒有特殊要求條件下，普通是取相關物質項下供試品溶液連續進樣6針 ，主峰峰面積RSD2.0%，主峰保留時間RSD1.0%。另外，主峰拖尾因子不得大于2.0，主峰與雜質峰必須到達基線分離，主峰理論塔板數應符合質量標準要求。共6針 2022/9/4仿制藥一般流程第44頁專屬性（陰性

22、對照試驗）配制空白輔料，與樣品相同溶劑溶解，考查輔料是否干擾主藥測定。可接收標準為：空白對照應無干擾，主成份與各相關物質應能完全分離，分離度不得小于2.0。以二極管陣列檢測器進行純度分析時，主峰純度因子應大于980。 2022/9/4仿制藥一般流程第45頁系統適用性與專屬性區分和聯絡聯絡：建立方法時候，必須要經過系統實用性及專屬性試驗。系統適用性中也有對分離度進行要求，不過是主要峰；專屬性試驗中也對分離度等進行了要求，比置系統實用性中要求更全方面和嚴格。區分：系統實用性在每次檢測時，必須要做，而且要必須合格。專屬性則在方法建立及方法學中研究，做一次即可 。 2022/9/4仿制藥一般流程第46

23、頁線性對照品配制，線性范圍最少5個點以上，濃度范圍可為供試濃度50%-150%（或者80-120），最少包含回收率最低和最高濃度，分別測定其主峰面積，計算對應含量。以含量為橫坐標（X），峰面積為縱坐標（Y），進行線性回歸分析。可接收標準為：回歸線相關系數（R）不得小于0.998，Y軸截距應在100響應值2以內，響應因子相對標準差應小于2.0%。每個樣進3針2022/9/4仿制藥一般流程第47頁進樣精密度詳細操作：普通可取線性關系試驗項下中間濃度溶液，連續進樣。可接收標準為：RSD2.0% 。進6針2022/9/4仿制藥一般流程第48頁溶液穩定性取供試品溶液，要求條件下放置8h，分別于0、2、4

24、、6、8h進樣，統計色譜圖，觀察主峰面積（及主要雜質及總雜質峰面積）改變，并計算RSD 。可接收標準為：RSD2.0% 。每個樣進1針2022/9/4仿制藥一般流程第49頁耐用性分別考查流動相百分比改變5、流動相pH值改變0.2、柱溫改變5、流速相對值改變20時，儀器色譜行為改變。可接收標準為：主峰拖尾因子不得大于2.0，主峰與雜質峰必須到達基線分離；各條件下含量數據（n=6）RSD2.0% 。每個條件進1針2022/9/4仿制藥一般流程第50頁重復性（用中試樣品）是配制6份含量測定項下供試品溶液，分別進樣，并計算每針含量，并計算其RSD 。可接收標準為： RSD2.0。進8針2022/9/4

25、仿制藥一般流程第51頁回收率驗證時普通要求分別配制濃度為80、100和120供試品溶液各三份，分別測定其含量，將實測值與理論值比較，計算回收率。可接收標準為：各濃度下平均回收率均應在98.0%-102.0%之間，9個回收率數據相對標準差（RSD）應小于2.0% 。每個樣進3針2022/9/4仿制藥一般流程第52頁定量限：主峰與噪音峰信號強度比應不得小于10 。檢測限：主峰與噪音峰信號強度比應不得小于3。都能夠不做 2022/9/4仿制藥一般流程第53頁雜質 藥品中雜質按其理化性質普通分為三類：有機雜質、無機雜質及殘留溶劑。有機雜質包含工藝中引入雜質和降解產物等，可能是已知或未知。因為這類雜質化

26、學結構普通與活性成份類似或具淵源關系，故通常又可稱之為相關物質。無機雜質是指在原料藥及制劑生產或傳遞過程中產生雜質，這些雜質通常是已知，主要包含：反應試劑、配位體、催化劑、重金屬、其它殘留金屬、無機鹽、助濾劑、活性炭等。 殘留溶劑是指在原料藥及制劑生產過程中使用有機溶劑。 制劑中雜質考查重點是降解產物。 2022/9/4仿制藥一般流程第54頁相關物質方法學驗證-已知雜質（定量）參考標準用HPLC法測定 系統適用性、專屬性、線性、檢測限與定量限、精密度、溶液穩定性、回收率、耐用性2022/9/4仿制藥一般流程第55頁已知雜質（定量）采取HPLC法，須采取峰面積法，詳細定量方法有：外標法（雜質對照

27、品法）加校正因子主成份本身對照法不加校正因子主成份本身對照法峰面積歸一化法。法定量比較準確，采取時應對對照品進行評定和確認，并制訂質量要求。法應對校正因子進行嚴格測定，僅適合用于已知雜質控制。法前提是假定雜質與主成份響應因子基礎相同。普通情況下，如雜質與主成份分子結構相同，其響應因子差異不會太大。法簡便快捷，但因各雜質與主成份響應因子不一定相同、雜質量與主成份量不一定在同一線性范圍內、儀器對微量雜質和常量主成份積分精度及準確度不相同等原因，所以在質量標準中采取有一定不足。2022/9/4仿制藥一般流程第56頁系統適用性配置6份相同濃度雜質對照品溶液進行分析，該雜質峰面積RSD2.0%，主峰保留

28、時間RSD1.0%。另外，分離度應大于2.0或符合要求、拖尾因子應0.8-1.2或符合要求。共6針2022/9/4仿制藥一般流程第57頁專屬性空白溶劑干擾試驗 取溶解樣品用溶劑，進樣。空白輔料干擾試驗（有輔料時做）降解試驗：酸、堿、熱、光照、氧化 降解對照品溶液：取樣品，按相關物質供試品濃度配制溶液已知雜質定位試驗 取已知雜質配成一定濃度，進樣。取降解對照品溶液，加入少許已知雜質對照品進樣。可接收標準：空白對照應無干擾，主峰與雜質峰應完全分離，已知雜質峰與其它峰應能完全分離，分離度不得小于2.0。 2022/9/4仿制藥一般流程第58頁強制降解試驗酸降解試驗：普通選擇0.1N鹽酸，在室溫或加熱

29、條件下進行考查。普通破壞24h。再用堿中和。堿降解試驗：普通選擇0.1N氫氧化鈉溶液，在室溫或加熱條件下進行考查。普通破壞24h 。再用酸中和。高溫降解試驗：可分別在固體和溶液狀態下進行考查，詳細考查溫度與時間均可依據詳細品種。比如，在110考查24小時。光降解試驗： 4000Lx+（-）500Lx照度下放置10天。氧化降解試驗：主要在溶液狀態下進行考查，用10或15雙氧水溶液雙氧水破壞24小時。制劑和空白輔料同時做2022/9/4仿制藥一般流程第59頁進行破壞性試驗時關注點和存在問題在選定破壞條件下，藥品應有一定量降解。以主成份計算，普通降解10左右。分離度與峰純度分析：破壞性試驗產生降解產

30、物個數比較多，采取HPLC法測定時，需考慮主成份與降解產物之間、降解產物相互之間分離度，確保降解產物峰與主峰、降解產物峰之間有良好分離度。推薦色譜分析時采取梯度洗脫，以有效分離降解產物。相關物質濃度考慮：如濃度太大，峰面積平頭，將樣品用流動相稀釋至峰高為100mA或峰面積為12萬之間。0.1N濃度酸堿對于一些較為穩定藥品來說，是破壞不出什么東西，做法有兩種：1.梯度性增加酸堿濃度，如：0.5N、1.0N、1.5N等2.用水浴加熱輔助。但這種加熱法存在一個問題，破壞出來雜質是算熱破壞還是純粹是酸堿破壞呢？個人以為是都有，所以雜質又變得不專屬了。2022/9/4仿制藥一般流程第60頁線性從定量限濃

31、度起，至雜質對照品溶液濃度120%或更高，配制6份濃度不一樣供試液。可接收標準為：回歸線相關系數（R）不得小于0.990。2022/9/4仿制藥一般流程第61頁檢測線與定量限定量限：雜質峰與噪音峰信號強度比應不得小于10。檢測限：雜質峰與噪音峰信號強度比應不得小于3。另外：配制6份最低定量限濃度溶液，所測6份溶液雜質峰保留時間相對標準差應小于2.0%，峰面積相對標準差應小于5.0%。（線性最低點，也可作為進樣精密度）2022/9/4仿制藥一般流程第62頁精密度重復性：分別配置雜質對照品貯備液與供試品貯備液，然后取供試品貯備液適量稀釋定容，平行制備6份雜質濃度（普通為0.1%） ，進樣，再進雜質

32、對照品，計算含量及RSD ，RSD10就能夠了）、100%、120%（能夠高點），普通提議和線性對應，這么范圍更明確。普通做50%，100%，150%也能夠接收要。比如某雜質程度為0.2%，取已知雜質含量樣品適量9份（普通為樣品取樣量二分之一），分別加入該雜質濃度為0.1、0.2和0.3雜質溶液，稀釋到相關物質供試品溶液濃度。另取雜質對照品，按照標準配制成雜質對照品溶液，分別測定其含量，計算回收率。該項目標可接收標準為：各濃度下平均回收率均應在80%-120%之間，相對標準差應小于10%。回收率最低點為定量限時，可放寬至70%-130%。回收率=（測得對照品量+樣品中已知含量）-樣品中已知含量

33、）/加入對照品量 x 100%=測得對照品量/加入對照品量 x 100%2022/9/4仿制藥一般流程第65頁耐用性分別考查流動相百分比改變5、流動相pH值改變0.2、柱溫改變5、檢測波長改變5nm、流速相對值改變20以及采取三根不一樣批號色譜柱進行測定時，儀器色譜行為改變，每個條件下各測試兩次。可接收標準為：各雜質峰拖尾因子不得大于2.0，雜質峰與其它成份峰必須到達基線分離；各條件下雜質含量數據（n=6）相對標準差應小于2.0%，雜質含量絕對值在0.1以內。2022/9/4仿制藥一般流程第66頁相關物質方法學驗證未知雜質（程度檢驗）用HPLC法測定 系統適用性、專屬性、檢測限、精密度、溶液穩定性、耐用性2022/9/4仿制藥一般流程第67頁系統適用性取樣品，按照相關物質供試品濃度配制溶液，進樣。可接收標準為：理論踏板數應符合要求，分離度應大于2.0或符合要求，拖尾因子應0.8-1.2或符合要求。2022/9/4仿制藥一般流程第68頁專屬性空白溶劑干擾試驗 取溶解樣品用溶劑，進樣。空白輔料干擾試驗（有輔料時做）降解試驗：酸、堿、熱、光照、氧化 降解對照品溶液：取樣品，按相關物質供試品濃度配制溶液可接收標準：空白對照應無干擾，主峰與雜質峰應完全分離。2022/9/4仿制藥一般流程第69頁檢測線檢測限：雜質