1、畜業技術疫病防治奶牛布魯氏桿菌病的血清學檢查張金峰邵云龍王曉磴(黑龍江省龍江縣畜牧水產局161100)琥紅抗原、標準陽性血淸、陰性血淸（黑龍江省生物-廠購買）、干凈玻腐板1塊、移液器、移液頭、受檢血清.牙簽。2.2操作在玻鴉板上滴加0.03ml琥紅抗原、抗原旁邊滴滴等於待檢血淸，并設陰陽性血淸對照，充分混合血淸和抗原，在室溫20七條件下觀察結果。如果環境溫度低.可用酒帶燈加熱。2.3結果別定在陰陽性血淸對照成立條件下，在4分鐘內受檢血淸與抗原出現肉眼可見的凝集現線判為陽性，否則判為陰性）3試管凝集試驗3材料準備抗原由黑龍江省生物制-廠購買，使用前應搖勻，使用前按1：20倍晞釋即hnl抗原加19

2、ml稀釋液,過期或出現結塊的抗原不能使用。陽性血淸.陰性血淸由黑龍江省生物-廠購買。稀釋液為0.5%石碳酸生理鹽水，配制方法即0.5g石碳酸加生理鹽水至100ml,調pH值7274.121七高壓滅菌20分鐘受檢血淸可快速離心制取，2000轉/分，離心10分鐘即可收集血淸，也可將裝全血試管傾斜45。角放置環境溫度在20七左右23小時即可出血淸：此外需玻璃試管.移液槍.移液頭、試管架等。3.2操作方法毎份受檢血淸準備4個玻璃試管.分別按1：50、1：100、1：200、1：400四個稀釋度桶釋。即第1管加1.2ml稀釋液，第24管各加入0.5ml桶釋液,然后用移液器吸取0.05ml血淸加入到第1個

3、試管中，反復吹打3次吸dl0.25ml棄之.再吸0.5ml混合液加入到第2個試管中，反復吹打3次.吸取第2試管混合液0.5ml放人第3試管中，直至借比稀釋第4試管，反復吹打3次后從第4試管棄去混合液05ml這樣14試管血清的稀釋度分別為1：25、1：50、1：100、1：200,14試管毎管分別加人1：20倍稀釋的抗原0.5ml,嫌動揺勻，這樣受檢血清最終幡釋度為1：50、1：100.1:200、1：400o將混合液連同陰陽性對照濁管對照和抗原對照吉37七溫箱中培養48h.見表1。毎次試驗都應設陰性血淸對照.陽性血淸對照和抗原對照：陰性血淸對照方法步驟與受檢血淸試驗方法相同。陽性血淸對照應稀釋

4、到原冇的滴度，加抗原方法與受檢血淸相同。抗原對照，1：20倍稀釋的抗原加0.5ml碳酸生理鹽水，看是否冇自凝現象：3.3比濁管配制每次試驗都應配制比濁管作為判定凝集反應程度的依據.按表2配制3.4結果判定參照比濁管液的淸亮程度來判斷受檢血清各管的清亮程度并以+、試管號12340.瓏饌戰牛艸鹽水1.200.50.50.5被檢血淸0.050.50.50.5第次血淸飾鏗度1：251：501：1001X2001：20倍怖禪抗腹0.50.50.50.5被檢血淸址終怖祥度1：501：1001：2001:400條2配制比濁管作為判定凝集反應的程度nV1：20的抗原碩釀牛理盎水(nl)淋:瞰（*）標記10.0

5、1.010020.250.7575+30.500.5050i0750.25255LO0.00-表1試管凝集反應操作表每醫師，黑龍江龍江甚人，冬科丈化，1997年參加工作，從亭畜枚每醫生產技術推廣工作奶牛布魯氏桿茵病是由布魯氏桿菌引起的種人畜共患的傳染病.人類感染該病后，病程長，反復發作.氏期不愈.家畜感染則出現流產和不育嚴蛋危害畜牧業生產和人類健康：因此.做好檢驗檢疫.對防治奶牛布魯氏桿菌病致關蟲要，而血淸學檢査則是檢驗檢疫奶牛布魯氏桿菌病的垂要方法。1血清學檢查的主要方法血淸學檢查通常使用平板凝集試臉和試管凝集試驗兩種方法.平板凝集試驗用于牛群粗篩,端出的陽性牛血清樣品再用試管凝集試臉做最后

6、確診。2平板擬集試驗2.1材料準備作考簡介：張金第，男，1976年1（）月出生,98E1國固禽固業|20W.9畜業技術疫病防治仔豬繁殖與呼吸綜合癥的診斷與防治喬俊平(陜西省旬邑縣湫坡頭鎮畜牧業服務站711300)仔獵繁殖一呼吸綜合癥也叫藍耳病，或稱神秘痛，是由繁殖一呼吸綜合癥病毒所引起仔豬的種急性、鬲度接觸性傳染病發病的特征為：仔豬呼吸困難.耳尖、耳根發纟甘呈藍紫色，體溫升高，腹瀉.消瘦。妊娠母豬流產、死胎、木乃伊。1診斷根據臨床經驗總結得出的簡易診斯方法：20%以上的胎兒死產.80%以上母豬流產斷奶前冇26%以上的仔豬死亡，三項中冇兩項符合即可得出初步診斯或另一指標作初步診斷：發病14天內死

7、亡數在20%仔豬出生后第1周發病死亡率大于25%,母豬流產或早產率大于8%0另根據急性病豬在臨床顯現期和瀕死期出現五大病理變化作為初診依據：(1)急性敗血癥；(2)全身性的巨噬細胞和血管內皮細胞腫大、活化或增生;(3)間質性肺炎；(4)廣泛性的澈循環障礙；(5)非化膿性腦炎。確診需進行實驗室診斷：(1)病命分離與鑒定，病毒分離是診斷豬繁殖與呼吸綜合癥最確切的種方法.般采用易感細胞分離法。目前用于分離豬繁殖與呼吸綜合癥病應的細胞主要冇豬原代肺泡巨噬細胞(PAM)、CL-2621細胞、M.A104細胞系的克隆株Marc-145采集病豬的血淸和肺組織分離成功率皿高。將豬的肺、死胎兒的腸和腹水、胎兒的

8、血淸、母豬血液.昴軾子和糞便等進行病毒分離。病料經處理后，再經045nm淀膜過海，取濾液接種豬肺泡巨噬細胞熔養，培養5天后，用免疫過氣化物關法染色，檢査肺泡巨噬細胞中豬繁殖與呼吸綜合癥病能抗原。(2)間接騎聯免疫吸附試驗(ELISA),用ELISA可檢測豬繁殖與呼吸綜合癥病戀抗體，方法是用豬繁殖與呼吸綜合癥病帶接種PAM培養作已知陽性抗原，并用相同方法制備模擬抗原，當陽性抗原孔的OD值與模擬抗原孔的01)值之比大于15時，即可判樣品為陽性。(3)間接熒光抗體試驗(IFA)，檢測豬繁殖與呼吸綜合癥病毒抗原，血淸抗休滴度工1：20時判為陽性，血清抗體滴度Ml：64作為豬繁殖與呼吸綜合癥病廊活動性感

9、染標志。2防治(1)控制本病的主要描施是切斷傳播途徑。對發病豬場要嚴密封鎖，禁止豬只調運：對于核心豬群，應實施全而的、嚴格的執行粹醫衛生描施.如搞好舍內外淸潔衛生，對地面用具.車輛.工作服等全面定期消孫。(2)嚴禁從發病國家和地區引進豬只。對于新購入的豬只應隔離檢疫8周以上確證無病才能入群。(3)對于母豬群和種公豬進行血清學檢測，淘汰陽性豬，培育淸凈的健康豬樣認A執行防疫制度.定期注射疫苗控制賭群的飼養密度.要消滅豬場內的鼠類和防止野鳥入內。(4)免疫預防。豬繁殖呼吸綜合癥滅活疫苗。用法及用fit：仔豬出生后20(|,毎只皮下或肌肉注射2mLc母豬在配種前57(1,首免毎只皮下或肌肉注射4mL

10、，間隔20(|以同樣劑於加強免疫1次，以肩6個月注射1次。應注意的是注射此苗時個別豬會出現局部腫脹.可在短時間內消失。對于育肥豬在屠宰前3周不得注射此苗。(5)治療本病目前尚無有效的治療方法，只冇采取對癥治療描施。為防止細菌繼發感染.可用抗茵索和碳胺類藥物進行治療：也可用安乃近或安痛定解熱鎧痛。同時注射荷樹糰生理鹽水及維生素等可滅輕病豬的病情。3小結由于豬繁殖與呼吸綜合癥是免疫抑制性疾病，不僅造成豬發病與死亡.還造成免疫抑制，導致豬瘟等其他疾病的免疫失敗，所以做好豬緊殖與呼吸綜合癥的防治，能夠冇效地防止其他疫病的發生。目前國內已冇正規的批準文號的滅活疫苗，但術無冇效的治療藥物.給該病的防治帶來定的在此悄況下，使用抗生素、廣譜抗病強藥及中草藥.各種營養補充劑、免疫増強劑對癥及早治療冇定的療效卄+、+、+、來記錄各管反應結果。、+“：100%菌體完全凝集.液體完全透明，與比濁管對比呈100%淸亮.管底出現大片的傘狀沉淀；“+75%IS體凝集，液體幾乎透明,與比濁管對比呈75%淸亮.管底冇明顯的傘狀沉淀；50%的茵休凝集，液體中等混濁，與比濁管對比呈50%清亮,管底呈中等fit的傘狀沉淀;*25%的菌體凝集,液體透明度不明顯，與比濁管對比