1、HPV18 E7抗原HLA-DRB1*0301限定性Th表位的猜測與斷定以往有關HPV治療性多肽疫苗的研究重要是針對HLA-A2限定性TL表位開展的。Andress等7在體外試驗中，賜與抗原肽HPV16E711-20刺激PBHLA-A2陽性康健人泉源創造，HPV16E711-20能誘導產生特異性的TL，并能識別和殺傷HPV16E711-20加載的T2細胞，同時創造，HPV16E711-20特異性的TL還可以或許識別和殺傷表達HPV16E7、E6卵白的腫瘤細胞，以上效果表白，HPV16E711-20具有高的免疫原性，是HPV免疫的上風表位。張乾等4，8接納超基序、多項式和量化基序方案相團結的要領

2、，猜測HPV18E77-15為靶抗原HPV18E7的HLA-A2限定性TL表位，并在厥后的體外試驗中，經特異性的五聚體檢測創造，HPV18E77-15可以或許誘導HLA-A2陽性康健人PB產生特異性的TL增殖，具有精良的免疫原性。Van等9通過重疊肽法經體外淋巴細胞增殖試驗斷定了HPV16E7的3個Th表位DR15/E750-62、DR3/E743-77、DQ2/E735-50)。uderspah等10用HPV16E711-20和HPV16E786-932個TL表位接種18例HPV16陽性的重度宮頸上皮內瘤變IN和重度外陰上皮內瘤變VIN患者，創造18例中有9例患者IN/VIN病變部門或完全消

3、退，陰道鏡下創造3例病變完全消退，6例病變縮小50%，15例HPVDNA轉陰。效果表白，這些抗原表位能有用誘生特異性TLs殺傷熏染細胞，掃除熏染的病毒和顯著改進機體對HPV的免疫成效。邇來分子盛行病學研究表白，宮頸癌與H-分子較H-I分子有著更高的相干性。H-類基因型HLA-DR15、DQB1*0602、DQB1*0303在瑞典宮頸癌患者中出現率較高，而法國女性中具備HLA-DRB1*1301或DRB1*1302的患者不易生長成宮頸癌，說明H-類基因與宮頸癌形成相干，因此研究病毒卵白的H-限定性表位對患者的免疫治療具有緊張的意義。比年的研究計謀已開始存眷D4+T細胞對HPV熏染的影響。Zave

4、ling等11的研究表白，pGDNA同HPV16E743-77含有H-2Kb限定性TL表位HPV16E749-57及Th表位E748-5435肽適用，可使10只宮頸癌移植瘤小鼠中的8只腫瘤完全消退，另2只小鼠的腫瘤生長也較比較組遲鈍，而pGDNA同HPV16E749-57肽適用僅能使9只宮頸癌移植瘤的小鼠中的3只腫瘤完全消退。Dell等12別離經皮膚賜與單個HPV16E749-57、HPV16E749-57團結Th表位E748-57和B細胞表位E744-48免疫57BL/6小鼠，效果創造，只有團結表位TL+Th+Bell)才氣誘導出猛烈的TL反響，表白Th細胞在TL反響中起著緊張的作用。以上研

5、究證明了Th細胞在抗HPV的免疫庇護中的緊張作用，同時也表白，HPV抗原的TL表位與Th表位公正組合方案后的團結多肽疫苗大概更有用，但這需先斷定出Th表位。本研究斷定了HPV18E7抗原的一個Th表位，為進一步研究該表位的成效特點及作為多肽疫苗的底子研究提供實行基矗本研究接納軟件猜測、淋巴細胞成效試驗驗證的要領斷定出HPV18E7抗原Th表位。以往斷定T細胞表位的要擁有：酶解法。用噬菌體表現肽庫技能挑選模擬表位。酸洗脫法：將表位從H-分子或單抗上洗脫下來，繼而舉行肽段測序。合成重疊肽法：按照抗原卵白的氨基酸序列合成一系列重疊肽段，然后通過淋巴細胞成效試驗確定可被T細胞識別的肽段。這些要領事情量

6、大、費時、費力，但是斷定的T細胞表位較全面，漏篩的大概性小，同時也為表位猜測提供了大量的信息。如今多接納對表位舉行猜測、分子模擬、人工合成和抗原性斷定的要領。比年來，隨著對H-類分子與抗原肽團結紀律的熟悉，隨著盤算機技能和生物信息學的生長，我們可以在幾分鐘內用盤算機軟件闡發整個基因組，再將猜測得到的候選表位用實行要領驗證，如許就可以或許快速正確地斷定出抗原表位。在斷定表位之前用軟件闡發猜測一些大概的表位，不但可淘汰事情量、節流經費，并且還能進步實行的樂成率。SYFPEiTHI是由德國傳授Raensee方案的，重要猜測與H-類分子特異性團結的多肽，按照差異的實行動物，選擇差異的基因型。固然任何猜

7、測軟件均不克不及到達100%正確性，大概存在猜測分值較高但并不克不及真正刺激淋巴細胞增殖的多肽，但此要領能大大低落探求抗原表位的盲目性，低落實行本錢。在猜測得到的3條多肽中，經淋巴細胞增殖試驗證明P1能刺激淋巴細胞增殖，通過流式細胞計數對效應細胞舉行表型闡發，效果表白，經P1刺激后D4+T淋巴細胞的比例較造就前以及未加多肽刺激的比較組均有顯著增長，未加多肽刺激的比較組相對造就前無顯著增長。由于抗原特異性D4+T淋巴細胞識別特定的H-類分子與肽的復合物，T細胞受體(TR)與H-多肽之間的作用可以被相應抗H抗體阻斷，因此在參加多肽刺激前參加鼠抗人HLA-DR抗體不但不克不及促進增殖，反而較未加多肽

8、刺激的比較組大大低落，說明多肽刺激淋巴細胞增殖是有H限定性的。綜上所述，本研究可開端證明P1HPV18E780-94大概為HPV18E7抗原HLA-DRB1*0301限定性的Th表位。【參考文獻】1FerenzyA,FranE.Persistenthuanpapillavirvusin-fetinandervialneplasiaJ.Lanetnl,2002,3(1):11-16.2Hebner,LaiinsLA.Huanpapillaviruses:basiehanissfpathgenesisandngeniityJ.RevedVirl,2022,16(2):83-97.3TeruyaK,

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