1、白細胞分化抗原的檢測回顧白細胞分化抗原：白細胞分化成熟為不同的譜系后，以及處于不同分化階段和活化過程中，出現或者消失的細胞表面標記。白細胞、不同分化階段的紅系和巨核細胞/血小板譜系，以及非造血細胞如血管內皮細胞、成纖維細胞、上皮細胞、神經內分泌細胞等。整合性膜蛋白：一種內在蛋白，可部分或者完全穿過細胞膜脂質雙層，通常只有經過去污劑處理才能使其脫離細胞膜。大部分整合性膜蛋白為跨膜蛋白，包括膜外區，跨膜區，和胞質區。整合性膜蛋白分為六型：型：一次跨膜，N端在外，C端在內，Ig超家族型：一次跨膜，N端在內，C端在外，腫瘤壞死因子超家族型：一條多肽鏈多次跨膜，其中四次和七次跨膜受體超家族常見，如G蛋白

2、偶聯受體型：由多個跨膜亞單位組成型：多肽鏈以糖基磷脂酰肌醇連接于細胞膜的脂質雙層中，如CD16CD55CD58.型：一條多肽鏈的一端以GPI形式連接于胞質，另一端是一次或多次跨膜，如膜橋蛋白。第一節 白細胞分化抗原及其功能與T細胞識別、黏附、活化有關的CD分子CD3分子Diagram showing T-cell receptor (TCR) surface expression and the interaction with a peptide-presenting major histocompatibility complex (MHC) class I molecule. TCR a

3、lpha/beta heterodimers associate with the chains of the CD3 complex. This association is essential for expression of the TCR on the cell surface. The CD3 chains are also essential for signal transduction. The red dots represent immunoreceptor tyrosine-based activation motifs that can be phosphorylat

4、ed when the TCR recognizes a peptide presented by an MHC molecule. CD4分子IL-16RCD8分子CD2分子又稱淋巴細胞功能相關抗原2（LFA-2）.配體：CD58CD2增強了T細胞與APC或靶細胞之間的黏附，并促進T細胞對抗原的識別和激活。CD58又稱淋巴細胞功能相關抗原3.CD58分子有跨膜和GPI連接兩種形式分布于T細胞、B細胞、單核細胞、DC、中性粒細胞、血小板和紅細胞，上皮細胞、內皮細胞、成纖維細胞等表達CD58的APC細胞或者靶細胞通過與CD2分子結合，有利于TCR識別抗原并參與T細胞信號轉導。CD40L(CD15

5、4)屬于TNFSF表達于活化的CD4+T或者部分CD8+T，以及活化的嗜堿性粒細胞、肥大細胞、NK細胞、活化B細胞等傳遞B細胞活化的第二信號與Ig類別轉換有關。CD28幾乎所有的CD4+T細胞和50%CD8+T細胞傳遞T細胞活化的第二信號CTLA-4(CD152)為細胞毒型T細胞相關分子靜止的T細胞不表達CTLA-4，T細胞活化后誘導表達，可以與B7分子結合，提供抑制性信號，阻止T細胞活化。用于免疫耐受研究與B細胞識別、黏附、活化有關的CD分子Ig/Ig(CD79a/cd79b)介導信號的轉導B細胞的特征（漿細胞不表達）CD19B細胞重要標志（除漿細胞）CD19組成CD19/CD21/CD81

6、信號復合物，參與B細胞的激活CD21（CR2）參與B細胞活化與CD23結合，若與 膜型CD23結合，則對IgE產生具有調節作用；若與sCD23結合，則刺激B細胞增殖。EB病毒受體。CD81又稱增殖抗體靶抗原分布于B細胞、T細胞、巨噬細胞、DC、NK和嗜酸性粒細胞組成B細胞信號復合體丙型肝炎病毒受體CD40表達于APC，以及某些上皮細胞、內皮細胞、成纖維細胞、淋巴樣并指細胞、FDC以及活化的單核細胞。誘導B細胞活化的第二信號系統CD22屬于唾液酸黏附素家族，可結合唾液酸表達于靜止B細胞，B細胞活化后可以上調CD22表達胞漿區含有ITIM基序CD80/CD86即B7-1/B7-2，靜止單核細胞和樹

7、突狀細胞CD80、CD86，活化T、B和單核細胞表達均高。CD80/86與CD28結合為T細胞的活化提供重要的協同刺激信號第二節 CD分子檢測技術免疫熒光細胞組織化學技術免疫酶細胞組織化學技術細胞黏附法分子生物學檢測方法一、免疫熒光細胞組織化學技術免疫熒光細胞化學技術 原理：將免疫細胞CD分子作為抗原，與抗CD分子的熒光標記抗體反應，分別通過流式細胞儀或者熒光顯微鏡對免疫細胞CD分子進行定量或定性檢測免疫熒光組織化學技術 將組織進行切片，把組織中的CD分子作為抗原物質，再與熒光標記的抗體反應，通過熒光顯微鏡對CD分子進行定性分析。二、免疫酶組織化學技術辣根過氧化物酶法 將抗CD分子的單克隆抗體用辣根過氧化物酶進行標記，然后進行抗原抗體特異性結合反應，加入酶作用底物，進而形成顯微鏡下可見的終反應產物。ABC法（生物素親和素放大系統） 生物素與酶結合，形成生物素化的HRP，以生物素化HRP與親和素按一定比例混合，形成復合物。三、分子生物學檢測方法RT-PCR技術原位雜交技術 使用含有特異性序列、經過標記的核酸單鏈即探針，在適宜條件下與組織細胞中的互補核酸單鏈即靶核酸雜交，再以放射自顯影或