1、鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵實驗目的學習確定實驗條件的方法，掌握鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵的方法原理。掌握TU-1901紫外-可見分光光度計的使用方法，并了解此儀器的主要構造。 根據朗伯比耳定律：A=bc，當入射光波長及光程b一定時，在一定濃度范圍內，有色物質的吸光度A與該物質的濃度c成正比。只要繪出以吸光度A為縱坐標，濃度c為橫坐標的標準曲線，測出試液的吸光度，就可以由標準曲線查得對應的濃度值，即未知樣的含量。 用分光光度法測定試樣中的微量鐵，目前一般采用鄰二氮菲法，該法具有高靈敏度、高選擇性，且穩定性好，干擾易消除等優點。實驗原理 在pH=29的溶液中，Fe2+與鄰二氮菲(phen)生成

2、穩定的桔紅色配合物Fe(phen)32+：此配合物的lgK穩=21.3，摩爾吸光系數510 = 1.1104 Lmol-1cm-1，而Fe3+能與鄰二氮菲生成31配合物，呈淡藍色，lgK穩=14.1。所以在加入顯色劑之前，應用鹽酸羥胺(NH2OHHCl)將Fe3+還原為Fe2+，其反應式如下：2Fe3+2NH2OHHCl2Fe2+N2+H2O+4H+2Cl-測定時控制溶液的酸度為pH5較為適宜。用鄰二氮菲可測定試樣中鐵的總量。實驗預習預習鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵的方法原理。了解TU-1901紫外-可見分光光度計的主要構造和使用方法。TU-1901紫外-可見分光光度計，1 cm吸收池，10

3、mL 吸量管，50 mL 比色管（或容量瓶）儀器和試劑儀器 1.010-3 molL-1 鐵標準溶液：準確稱量0.4822 g NH4Fe(SO)412H2O于燒杯中，加入80 mL 6 molL-1 HCl和少量水，溶解后轉移至1 L容量瓶中，以水稀釋至標線，搖勻。 100gmL-1鐵標準溶液: 準確稱量0.8634 g NH4Fe(SO)412H2O于燒杯中，加入80 mL 6 molL-1 HCl和少量水，溶解后轉移至1 L容量瓶中，以水稀釋至標線，搖勻。 0.15%鄰二氮菲水溶液，10%鹽酸羥胺溶液（新配），1 molL-1乙酸鈉溶液，1 molL-1 NaOH溶液，6 molL-1

4、HCl（工業鹽酸試樣）試劑1. 啟動計算機，打開主機電源開關，啟動工作站并初始化儀器。2. 在工作界面上選擇測量項目（光譜掃描，光度測量），本實驗選擇光譜掃描，設置測量條件（掃描范圍，測量波長等）。3. 將空白放入測量池中，點擊START掃描空白，點擊ZERO校零。4. 標準曲線的制作。基本操作吸收曲線的繪制和測量波長的選擇： 用吸量管吸取2.00 mL1.010-3mol.L-1標準溶液，注入50mL比色管中，加入1.00mL 10%鹽酸羥胺溶液，搖勻，加入2.00 mL0.15%鄰二氮菲溶液，5.0 mL NaAc溶液，以水稀釋至刻度。在光度計上用1 cm比色皿，采用試劑溶液為參比溶液，在

5、440-560 nm間，每隔10 nm測量一次吸光度，以波長為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制吸收曲線，選擇測量的適宜波長。實驗步驟2. 工業鹽酸中鐵含量的測定：(1)標準曲線的制作: 在5支50 mL比色管中，分別加入0.20、0.40、0.60、0.80、1.00 mL 100 g/mL鐵標準溶液，再加入1.00 mL10%鹽酸羥胺溶液，2.00 mL0.15%鄰二氮菲溶液和5.0 mL NaAc溶液，以水稀釋至刻度，搖勻。(2)試樣測定: 準確吸取2.0 mL工業鹽酸三份，按標準曲線的操作步驟，測定其吸光度。1. 以波長為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制吸收曲線，選擇測量的最適宜波長條件。2. 以鐵濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制標準曲線。根據試樣的吸光度，從標準曲線求出工業鹽酸中鐵的含量（以g/mL表示），計算測量結果的平均值和相對偏差。 數據處理1. 鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵時為何要加入鹽酸羥胺溶液？2. 吸收曲線與標準曲線有何區