1、臨床常用免疫學檢查2022/7/141臨床常用免疫學檢查免疫功能檢查 * 血清免疫球蛋白檢測 *血清補體檢測 * 細胞免疫檢測病毒肝炎血清標志物檢查感染免疫檢查 細菌感染免疫檢測 病毒感染免疫檢測 其它（寄生蟲 感染、性病等）腫瘤標志物檢查 蛋白質類腫瘤標志物 糖脂類腫瘤標志物 酶類腫瘤 標志物2022/7/142臨床常用免疫學檢查自身抗體檢查 *抗核抗體檢測 * 類風濕因子測定 * 抗心磷脂抗體測定 * 抗中性粒細胞胞漿抗體測定 抗某種組織/細胞的抗體檢測 移植免疫檢查 細胞因子檢查 * I L-2、6、8、10 * TNF IFN 2022/7/143免疫功能檢查 *血清免疫球蛋白檢測 *

2、血清補體檢測 *細胞免疫檢測2022/7/144體液免疫檢查 （一）免疫球蛋白 （Immunoglobulin,Ig） 免疫球蛋白指具有活性的抗體活性和抗體樣結構的球蛋白，由漿細胞產生，存在于體液，血液，外分泌液和一些細胞膜上。2022/7/1452022/7/1462022/7/14臨床常用免疫學檢查7免疫球蛋白 用超速離心、免疫電泳方法可將免疫球蛋白分為五類： IgG、IgA、IgM、 IgE 、 IgD2022/7/1472022/7/14臨床常用免疫學檢查8免疫球蛋白特點IgG 機體含量最多、占70%-80%的抗體活性，是唯一能夠通過胎盤的Ig，是使新生兒獲得被動免疫的抗體 IgA 分

3、血清型和分泌型兩種，分泌型主要與呼吸道、消化道、泌尿生殖道的感染、腫瘤等病變密切相關 IgM 五聚體，是分子量最大的Ig，是有效凝聚和溶解細胞的因子。在個體發育和抗原刺激后出現最早的抗體，在機體的早期免疫防御中起主要作用。 2022/7/1482022/7/14臨床常用免疫學檢查9IgE 血清含量最少的Ig ，與變態反應、寄生蟲感染、皮膚過敏等有關IgD 功能尚不完全清楚2022/7/1492022/7/14臨床常用免疫學檢查10 IgG最多、主力軍 IgA血清型和分泌型 IgM最早出現 IgD功能尚不完全清楚 IgE與變態反應有關2022/7/1410正常值： 單向免疫擴散法 IgG 7.0

4、16.6 g/L IgA 0.73.5g/L IgM 0.52.6 g/L ELISA法 IgE 0.10.9mg/L2022/7/1411 多克隆增高: IgG IgA IgM均增高 單克隆增高: 僅某一種Ig增高而其他種不增高 2022/7/14122022/7/14臨床常用免疫學檢查13 免疫球蛋白增高的臨床意義： 多克隆性增高慢性感染（包括細菌、病毒、結核感染等）、慢性肝病、自身免疫性疾病、腫瘤（淋巴瘤）等 單克隆性增高免疫增殖性疾病，如分泌型多發性骨髓瘤；IgE的增高主要與各種過敏性疾病相關 2022/7/14132022/7/14臨床常用免疫學檢查14關于M蛋白M蛋白（Monoco

5、lonal protein）: 又稱單克隆免疫球蛋白，是由單克隆B細胞增殖產生的具有相同結構和電泳遷移率的免疫球蛋白及其分子片段。血清中若能檢測到M蛋白，提示單克隆免疫球蛋白增殖病，最常見的是： 多發性骨髓瘤 (multiple myeloma,MM)，可有IgG型、IgA型、IgM型等 巨球蛋白血癥（Waldenstrom癥） 重鏈病、 輕鏈病 半分子病2022/7/1414例:多發性骨髓瘤（multiple myeloma,MM） 是漿細胞異常增殖的惡性腫瘤，也稱漿細胞瘤（plasmocytoma）。1873年由Butzky首先并命名。2022/7/1415MM的主要臨床特征：進行性的骨質

6、破壞，如骨質疏松和溶骨性病變，常有骨痛、易骨折，為MM最典型特征；大量的M蛋白導致血液粘度增高,呈高粘血癥或沉積于腎小管中，腎小管上皮細胞淀粉樣變性，發生腎病綜合征。損害中樞神經系統，可出現神經功能障礙；骨髓損傷可引起貧血、粒細胞和血小板減少；漿細胞浸潤其他組織，如脊髓和神經根受壓時引起運動功能障礙等；男性多發，平均發病年齡46歲左右；惡性程度高，預后不良；易感染。2022/7/1416MM的主要免疫學特征：血清中出現大量的M蛋白或尿中有本周蛋白（1.0g/24h尿）骨髓中有無限擴增的異常漿細胞（15%）為主要病理特征，組織證實有漿細胞瘤；有溶骨性損害。2022/7/1417本周蛋白（benc

7、e-jones protein）: 1847年由Bence-Jones在病人的尿液中檢出而命名。已知M蛋白不具有免疫活性，無正常免疫球蛋白的功能，其輕鏈分子小可通過腎小球濾過從尿排除。（本周蛋白是從尿中檢出的M蛋白輕鏈）2022/7/1418免疫功能檢查 *血清免疫球蛋白檢測 *血清補體檢測 *細胞免疫檢測2022/7/14192022/7/14臨床常用免疫學檢查20第二節 血清補體（complement , C） *是一組具有酶原活性的糖蛋白，由C1-C9及B、D等因子及補體調節蛋白組成*參與滅活病原體的免疫反應 ，也可破壞自身組織或自身細胞造成免疫損傷*通過傳統途徑和旁路途徑激活，傳統途徑

8、需免疫復合物（CIC）激活，旁路途徑不需要CIC激活而首先發揮作用*血清中含量穩定，屬天然免疫，不耐熱2022/7/1420一、參與宿主早期抗感染免疫補體系統活化后可通過溶解細胞、細菌和病毒，發揮抗感染作用補體活化過程中可產生多種具有炎癥介質效應的活性片段，如C3a、C4a、C5a等，參與炎癥反應補體的生物學作用2022/7/14212022/7/1422二、維持機體內環境穩定 促進免疫復合物清除清除凋亡細胞2022/7/1423 3、清除免疫復合物2022/7/1424清除凋亡細胞的機制C1q、MBL、C3b等可與凋亡細胞的分子結合2022/7/14252022/7/14臨床常用免疫學檢查2

9、6 總補體溶血活性檢測 （total hemolytic complement activity , CH50) 正常值：50-100 ku/L 臨床意義 ：反映傳統途徑的活化程度 減低補體消耗相關疾病:腎小球腎炎、自身免疫性疾病（如系統性紅斑狼瘡 Systemic lupus erythematosis,SLE）、感染性心內膜炎（subacute infecitive endocarditis,SBE） 補體合成降低:肝病等 先天性缺陷 增高急性炎癥、組織損傷、腫瘤等2022/7/1426補體C3檢測： C3在補體系統各成分中含量最多，是傳統途徑和旁路途徑被激活的關鍵物質 正常值：0.81.

10、5 g/L 補體C4檢測： C4代表補體傳統活化途徑，在補體活化、促進吞噬、防止免疫復合物沉著和中和病毒等方面發揮作用 正常值：0.20.6 g/L2022/7/14272022/7/14臨床常用免疫學檢查28臨床意義： 參見CH50減低和增高的臨床意義 C3增高在急性炎性反應更敏感(炎癥性疾病) C4對判斷免疫復合物形成時補體消耗性減低 更有意義（自身免疫性疾病）2022/7/1428免疫功能檢查 *血清免疫球蛋白檢測 *血清補體檢測 *細胞免疫檢測2022/7/14292022/7/14臨床常用免疫學檢查30 第三節 免疫細胞檢測針對細胞的數量(amount)、活性（功能 function

11、）、表面標志物(membrane molecules )表達(express)程度 T細胞免疫檢測 B細胞免疫檢測 自然殺傷細胞檢測 細胞因子檢測 中性粒細胞吞噬殺菌功能檢測2022/7/1430 T細胞分化抗原測定 (免疫熒光法） CD3總T細胞 正常值： 61%85% CD4T輔助細胞（TH） 正常值： 28% 58% CD8T抑制細胞（TS） 正常值： 19% 48% CD4 /CD8 1 .660.33 （1）2022/7/1431流式細胞術(flowcytometry,FCM) 2022/7/1432臨床意義：CD3 降低系統性紅斑狼瘡、免疫缺陷病、放化療后 CD4/ CD8增高自身

12、免疫性疾病（如SLE、類風濕關節炎、多發性硬化癥等）及器官移植后排異反應 CD4/ CD8減低見于艾滋病、惡性腫瘤、傳染性單核細胞增多癥、巨細胞病毒感染等。 CD3 CD4 CD8均增高T細胞型淋巴細胞惡性疾病2022/7/14332022/7/14臨床常用免疫學檢查34 B細胞分化抗原測定： 應用CD19、CD20、CD22等單克隆抗體標記單個核細胞B細胞，通過免疫熒光或流式細胞術進行檢測，CD19是所有B細胞共有的表面標志，活化后不消失 參考值：CD19 11.743.73% 臨床意義： 升高B細胞型急性淋巴細胞性白血病、慢性淋巴細胞白血病、Burkitt淋巴瘤等 減低無丙種球蛋白血癥、免

13、疫抑制劑應用2022/7/1434 自然殺傷細胞免疫檢測它不依賴抗體和補體即能殺傷靶細胞 自然殺傷細胞（NK）介導天然免疫應答， 自然殺傷細胞（NK）活性可作為判斷機體抗腫瘤和抗病毒感染的指標之一 2022/7/1435 參考值： NK細胞活性（自然殺傷）47.6%76.8% 臨床意義： 升高：常見于病毒感染早期，器官移植后，使用免疫增強劑（如干擾素）治療后。 減低：常見于惡性腫瘤，重癥聯合免疫缺陷病，AIDS和免疫抑制劑使用者等。2022/7/1436感染免疫檢測（一）血清抗鏈球菌溶血素“O” （anti-streptolysin“O”，ASO） A組溶血性鏈球菌的莢膜抗原代謝產物鏈球菌溶血

14、素“O”具有溶血活性，能溶解人類和一些動物的紅細胞。 將受檢病人血清倍比稀釋后，加入一定量的鏈球菌溶血素“O”，如病人血清中含有抗體（ASO），即能使鏈球菌溶血素“O”失去溶血能力，不溶血的管數越多表示ASO的效價越高 參考值：膠乳凝集法為陰性 1：56）2022/7/14402022/7/14臨床常用免疫學檢查41第四節 腫瘤標志物（tumor marker）檢測1、是由腫瘤細胞本身合成、釋放或機體對腫瘤細胞反應而產生的一類物質2、可反映細胞惡變各階段的表型及基因特征性3、包括蛋白類（甲胎蛋白、癌胚抗原等）、糖類、酶類腫瘤標志物2022/7/1441惡性腫瘤增長的檢測腫瘤標記物 (無形的腫瘤

15、)Tumor mass1g10 1mg1061g109 10-100g1010-11 1kg1012臨床可檢測的腫瘤腫瘤增長Tumor cellsLead time2022/7/1442腫瘤標志物免疫分析理想的腫瘤標志物特異反映特定腫瘤；量的變化反映腫瘤：發生、發展、及對治療的反映性。容易檢測準確可靠現實的腫瘤標志物靈敏度有限；特異性有限；存在正常異常交錯；存在不穩定性與臨床表現存在差異2022/7/14432022/7/14臨床常用免疫學檢查442022/7/14442022/7/14臨床常用免疫學檢查452022/7/1445血清腫瘤標志物的生物學分類注意:按臨床腫瘤分類可能導致臨床結論草

16、率和醫療矛盾糖類抗原 胚胎性抗原 細胞角蛋白 腫瘤相關酶激素類標志物 其他蛋白質類 2022/7/1446糖類抗原的共同特點結構復雜，抗原決定位點多；抗體類型較多，不同的檢測試劑之間存在差異；與多種惡性腫瘤有關;與同類腫瘤不同的生物特性有關;檢查的影響因素多！生理性和病理性的意義不清楚。2022/7/1447糖類抗原的一般臨床應用指征CA19-9 胰腺癌；胃腸道和肝膽道腫瘤CA15-3 乳腺癌；肺腺癌、卵巢、肝等CA125 卵巢癌,子宮內膜癌、胰腺癌、肝癌、肺癌CA50 胰腺癌、乳腺癌、肺癌、胃腸道和肝膽腫瘤CA242 結直腸癌、胰腺癌、卵巢癌等 CA72-4 胃癌；卵巢、胰腺、乳腺 2022

17、/7/1448糖類抗原臨床應用的注意事項對腺癌有較高的臨床診斷價值：高值與腫瘤大小有關治療后的測量值與療效和預后密切相關多種腫瘤表達高值與腫瘤惡性程度和多元化改變有關治療后的測量值與療效和預后密切相關3. 多種良性疾病會少量升高！2022/7/1449血清腫瘤標志物 糖類抗原 胚胎性抗原 細胞角蛋白 腫瘤相關酶激素類標志物 其他蛋白質類 2022/7/1450胚胎抗原 癌胚抗原 CarcinoEmbryonic AntigenCEA 結直腸癌：60； 腺癌中敏感性高于上皮癌胃癌、肺癌等。吸煙引起升高（20）甲胎蛋白Alpha-FetoProtein，AFP 原發性肝癌：敏感性70%-80%，特

18、異性80%。另見于睪丸癌、畸胎瘤、肝硬化及肝炎等。 2022/7/1451血清腫瘤標志物 糖類抗原 胚胎性抗原 細胞角蛋白 腫瘤相關酶激素類標志物 其他蛋白質類 2022/7/1452細胞角蛋白Cytokeratin 細胞角蛋白19片段 Cyfra21-1組織多肽特異性抗原TPS組織多肽抗原 Tissue Polypeptide Antigen, TPA較為廣譜的腫瘤標志物與腫瘤病程進展、轉移密切相關。2022/7/1453細胞角蛋白片段19 - CYFRA21-1良好的組織特異性，是非小細胞肺癌（NSCLC）首選腫瘤標志物臨床意義：非小細胞肺癌的診斷和鑒別診斷，與腫瘤的病理組織分型和TNM分

19、期相關對手術、化療和放療的治療的效果進行監測對非小細胞肺癌預后進行評估，初始血清高水平顯示 預后不良監測橫紋肌浸潤性膀胱癌的病程2022/7/1454血清腫瘤標志物糖類抗原 胚胎性抗原 細胞角蛋白 腫瘤相關酶激素類標志物 其他蛋白質類2022/7/1455腫瘤相關酶前列腺特異性抗原Prostate Specific Antigen PSA NSE 2022/7/1456神經元特異性烯醇化酶-NSE分子量為80KD的蛋白酶，主要來源于神經細胞核神經內分泌細胞，以及這些細胞引發的腫瘤細胞中NSE是檢測小細胞肺癌的首選的腫瘤標志物NSE是神經內分泌腫瘤和精原細胞瘤的腫瘤標志物2022/7/1457血

20、清腫瘤標志物糖類抗原 胚胎性抗原 細胞角蛋白 腫瘤相關酶激素類標志物 其他蛋白質類2022/7/1458激素類標志物 降鈣素 CalciTonin, CT：甲狀腺髓樣癌、SCLC (聯合NSE、CEA)；另見于乳腺癌、胃腸道癌、嗜鉻細胞瘤等 。人絨毛膜促性腺激素 Human Chorionic Gonadotropin, hCG：惡性葡萄胎、絨癌睪丸癌,另見于乳腺癌、卵巢癌等。 2022/7/1459篩查診斷和鑒別診斷 監測和預后評估腫瘤標記物的臨床應用2022/7/1460腫瘤標記物的臨床應用常見惡性腫瘤篩查積極和謹慎使用高危險人群:老年人;比較長期住院病人;相關的慢性病人;有惡性腫瘤家族病

21、史;高度懷疑自己患有惡性腫瘤需要檢測和其他檢查排除;項目選擇:AFP, CEA, PSA, CA125CA19-9, 其他2022/7/1461腫瘤標記物的臨床應用_篩查陰性:告訴受檢者樂觀,患相關惡性腫瘤的概率很低;指導有腫瘤家族史的患者定期復查,并結合其他檢查;陽性:首先告訴受檢者:檢測可能有假陽性或患良性疾病;優先考慮馬上或短期內復檢,復檢仍然陽性者進行基本檢查;12個月內進行復檢,如果升高要提醒病人患惡性腫瘤的概率比較高!注意病史記錄!2022/7/1462篩查診斷和鑒別診斷 監測和預后評估腫瘤標記物的臨床應用2022/7/1463臨床意義初步診斷中的應用 惡性腫瘤的初步診斷：多數由臨

22、床檢查、影像檢查、內鏡檢查以及手術探查作出的；部分通過腫瘤標志物檢測到。有幾種腫瘤的瘤體大小與術前腫瘤標志物的水平顯著相關，如：CEA和結腸直腸癌。CA125和卵巢癌。CYFRA 21-1和肺癌各種腫瘤的腫瘤標志物表達和分泌特性明顯不同，而且受多種變量影響。2022/7/1464腫瘤標記物的臨床應用診斷和鑒別診斷積極使用有惡性腫瘤史患者均應該定期檢測相關指標;時間13個月一次項目選擇:首選針對性要強注意適當聯合使用 (尤其中晚期病人）2022/7/1465腫瘤 首選標志物 補充標志物 肺癌 肝癌 乳腺癌 胃癌 前列腺癌直結腸癌 胰腺癌 卵巢癌睪丸腫瘤CYFRA21-1、CEA、NSE AFPC

23、A15-3、CEA CA72-4 PSA、f-PSA CEA CA19-9 CA125AFP 、 hCGCA125、CA19-9、CT等CA125、CA19-9，鐵蛋白等hCG、CT、鐵蛋白等CEA、CA19-9、CA125等CA19-9、CA125、CA724等CEA、 CA125、CA724等CA72-4、CEA、hCG等CA125 、 CEA等2022/7/1466篩查診斷和鑒別診斷 監測和預后評估腫瘤標記物的臨床應用2022/7/1467繼續治療期間的腫瘤標志物的行為月初始濃度高.治療響應，減少緩解，低濃度復發，濃度逐漸增加.化學治療濃度.經治療緩解的病人2022/7/1468臨床意義

24、預后應用治療后的水平與治療前的基礎水平存在關系： 基礎水平高可能處于癌癥晚期，通常預后較差 基礎水平正常或僅輕微升高不表達或者表達受到抑制存活期延長。2022/7/1469腫瘤標志物臨床應用的其他幾個問題“正常參考值”問題檢測技術上存在多種影響因素靈敏度和特異性是一對矛盾2022/7/1470自身免疫檢測*類風濕因子測定、*抗核抗體檢測、 抗磷脂抗體 抗中性粒細胞胞漿抗體*組織和細胞抗體檢測 2022/7/1471自身抗體檢查類風濕因子（rheumatoid factor, RF） RF是變性IgG刺激機體產生的一種自身抗體，主要存在于類風濕關節炎患者的血清和關節液內。 RF可分為IgM型、I

25、gG型、IgA型等，用膠乳凝集法測出的主要是IgM型，用ELISA法可進一步檢出其它型2022/7/1472RF-IgG RF-IgA RF-IgM2022/7/1473參考值： 陰性 1：40為陽性 2022/7/14942022/7/14臨床常用免疫學檢查95臨床意義： ANA陽性最多見于未治療的SLE 陽性率達80%100%（活動期幾乎100%陽性） 2022/7/1495SLE 系統性紅斑狼瘡是多因素參與的特異性的自身免疫病，表現有多種自身抗體，通過免疫復合物等途徑，造成幾乎全身每一系統、每一器官都可能受累。2022/7/14962022/7/14臨床常用免疫學檢查972022/7/1

26、4972022/7/14臨床常用免疫學檢查982022/7/14982022/7/14992022/7/14臨床常用免疫學檢查1002022/7/141002022/7/14臨床常用免疫學檢查1012022/7/141012022/7/14臨床常用免疫學檢查1022022/7/141022022/7/14臨床常用免疫學檢查1032022/7/141032022/7/14臨床常用免疫學檢查1042022/7/141042022/7/14臨床常用免疫學檢查1052022/7/14105狼瘡脫發2022/7/141061072022/7/141082022/7/14109肺動脈高壓2022/7/14

27、1102022/7/141112022/7/14臨床常用免疫學檢查112ANA陽性是結締組織病的標志 混合性結締組織病（mixed connective tissue disease,MCTD）100%陽性 系統性硬化病（systemic sclerosis,SSc）85%95%陽性多發性肌炎（polymyositis,PM）30%50%陽性類風濕性關節炎(rheumatoid arthritis,RA) 干燥綜合癥（Sjogren Syndrom,SS）等 2022/7/141122022/7/14臨床常用免疫學檢查113ANA陽性也可出現于其它疾病 原發性膽汁性肝硬化 慢性肝病 慢性感染

28、惡性腫瘤等2022/7/141132.抗脫氧核糖核酸抗體 （anti-DNA antibody，抗DNA） 其中抗雙鏈DNA（double stranded-DNA,ds-DNA）抗體的靶抗原是細胞核中的DNA雙螺旋結構，它的檢測有臨床的重要性 正常結果：陰性 臨床意義：抗ds-DNA抗體陽性見于活動期SLE，陽性率70%90%，為SLE特異性抗體，特別在并發狼瘡性腎炎時起重要作用，其它風濕病中抗ds-DNA抗體也可陽性2022/7/14114 3.可提取性核抗原多肽抗體譜 ENA（extractable antinuclear antigen）由多種相對分子質量不同的多肽構成，利用免疫印跡試驗可對這些抗原的自身抗體進行檢測 2022/7/141152022/7/14臨床常用免疫學檢查1162022/7/141162022/