1、第十四章 其他細菌病原生物學學習目標掌握：幽門螺桿菌主要生物學特性和致病性。熟悉：空腸彎曲菌、銅綠假單胞菌的主要生物學特性和致病性。了解：流感桿菌、百日咳桿菌和腸球菌所致疾病。 第一節 流感嗜血桿菌嗜血桿菌屬（Haemophilus）是一類革蘭陰性小桿菌，常呈球桿狀或多形態性，無鞭毛、無芽胞。許多菌株有莢膜。因人工培養時必須提供新鮮血液或血液成分，故名嗜血桿菌。本屬菌共有21個種，多數為正常菌群成員，對人致病的主要是流感嗜血桿菌。 第一節 流感嗜血桿菌流感嗜血桿菌（H. influenzae）簡稱流感桿菌，1892年被首先從流感患者鼻咽部分離出，當時被誤認為是流感的病原菌，直至1933年流感病

2、毒分離成功，才明確流感嗜血桿菌只是在流感流行時，引起呼吸道繼發感染的病原菌。流感嗜血桿菌是小兒急性腦膜炎的主要病原菌，也可引起鼻咽炎、中耳炎等化膿性炎癥。 第一節 流感嗜血桿菌一、生物學性狀（一）形態染色 革蘭陰性短小球桿菌，大小為0.30.4m1.01.5m，在急性感染標本中多為短小桿菌，在恢復期病灶或長期人工傳代培養后可呈球桿狀、長桿狀、絲狀等多形態。多數菌株有菌毛，但無鞭毛、無芽胞。有毒株初培養時有明顯莢膜，陳舊培養物中莢膜常消失。 第一節 流感嗜血桿菌 （二）培養 需氧或兼性厭氧，最適生長溫度3537，生長要求特殊，需要X和V因子。因血液中的V因子需經加熱才能從紅細胞中釋放，故流感嗜血

3、桿菌在巧克力色血平板上生長良好，培養1824小時出現無色露滴狀小菌落，48h后形成灰白色、光滑、邊緣整齊的較大菌落。有莢膜時菌落可輕度粘稠。 第一節 流感嗜血桿菌 （二）培養 若將流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌在同一血瓊脂平板上共同培養，由于金黃色葡萄球菌能合成V因子，可促進流感嗜血桿菌的生長，故在金黃色葡萄球菌菌落周圍的流感嗜血桿菌菌落較大，反之越小，此種現象被稱為衛星現象(satellite phenomenon)，周圍的嗜血桿菌菌落稱為衛星菌落(satellite colony)，有助于流感嗜血桿菌的鑒別。 第一節 流感嗜血桿菌（三）抗原構造與分型 流感嗜血桿菌有兩種主要抗原。 1.莢膜多

4、糖抗原 具有型特異性。根據莢膜多糖抗原的不同，可將有莢膜的流感嗜血桿菌分為a、b、c、d、e和f 6個型，其中b型致病力最強。該抗原與肺炎鏈球菌的莢膜多糖有部分共同抗原，可有交叉的血清學反應。 第一節 流感嗜血桿菌（三）抗原構造與分型 流感嗜血桿菌有兩種主要抗原。2.菌體抗原 包括脂多糖抗原和外膜蛋白抗原。其中多種外膜蛋白抗原可用于流感嗜血桿菌亞型的區分和進行流行病學調查。 第一節 流感嗜血桿菌二、致病性與免疫力（一）致病物質 主要有莢膜、菌毛、IgA蛋白酶和內毒素等。莢膜是本菌的主要毒力因子，具有抗吞噬作用；菌毛具有黏附和定植于細胞的作用；IgA蛋白酶能水解sIgA，可降低黏膜局部免疫力；內

5、毒素在本菌的致病作用尚不清楚。 第一節 流感嗜血桿菌二、致病性與免疫力（二）所致疾病 有莢膜的b型菌株可引起原發性急性化膿性感染，以小兒多見，常見的有腦膜炎、鼻咽炎、咽喉會厭炎、化膿性關節炎、心包炎等。無莢膜菌株常在流感、麻疹、百日咳、肺結核等感染后引起繼發性感染，臨床類型有慢性支氣管炎、中耳炎、鼻竇炎等，多見于成人。 第一節 流感嗜血桿菌二、致病性與免疫力（三）免疫性 感染后，患者能產生特異性抗體。抗莢膜多糖抗體能增強吞噬細胞的吞噬作用和激活補體的溶菌作用。抗外膜蛋白抗原的抗體也有促進補體介導的調理作用。 第一節 流感嗜血桿菌三、微生物學檢查（一）直接檢測 根據感染部位，可取痰液、腦脊液、鼻

6、咽分泌物、血液及膿液等標本。直接涂片鏡檢，對腦膜炎、關節炎、下呼吸道感染有快速診斷價值。 （二）分離培養 將標本接種于巧克力色平板或血平板，根據菌落特征、衛星現象、生化反應等進行鑒定。 第一節 流感嗜血桿菌三、微生物學檢查（三）抗原檢測 可通過乳膠凝集反應鑒定b型抗原，免疫熒光或莢膜腫脹試驗亦可獲得較高的陽性結果。（四）分子生物學技術 PCR技術已用于鑒定臨床標本中流感嗜血桿菌。 第一節 流感嗜血桿菌五、防治原則可用b型流感嗜血桿菌的莢膜多糖菌苗進行預防，一年內保護率在90%以上，但對1歲以下兒童預防效果欠佳。治療可用氨芐西林、磺胺、氯霉素等。第二節 百日咳鮑特菌百日咳鮑特桿菌（Bordete

7、lla pertussis）簡稱百日咳桿菌，是一類革蘭陰性小桿菌，是人類百日咳的病原菌。 一、生物學性狀（一）形態與染色 革蘭陰性卵圓形短小桿菌，大小為0.20.5m0.51.5m，無鞭毛和芽胞。毒力株有莢膜和菌毛。第二節 百日咳鮑特菌（二）培養特性 專性需氧，最適生長溫度3537，最適pH 6.87.0。初次分離時營養要求高，需用含有甘油、馬鈴薯和血液的鮑-金(Bordet-Gengou medium)培養基，培養2 3天后，形成細小、光滑、不透明、銀灰色的珍珠樣菌落，周圍有不明顯的狹窄溶血環。生化反應較弱，不發酵糖類，不產生吲哚，不生成硫化氫，觸酶陽性，氧化酶陽性。第二節 百日咳鮑特菌（三

8、）變異性 常發生菌落變異。新分離菌株為S型，稱為相菌，有莢膜，毒力強。人工培養后，細菌失去莢膜，毒力消失，形成R型菌落，為相菌。第二節 百日咳鮑特菌（四）抵抗力 抵抗力較弱，日光照射1小時，56加熱30分鐘即死亡。對一般消毒劑和多種抗生素敏感。第二節 百日咳鮑特菌二、致病性和免疫性（一）致病物質 包括莢膜、菌毛、內毒素和毒性因子。1.百日咳外毒素：不耐熱，性質不穩定，加熱56 10 分鐘即被破壞，經福爾馬林處理可成為類毒素。該毒素是百日咳的主要毒力因子，能使呼吸系統血管淤血，并對腦神經細胞有損傷。第二節 百日咳鮑特菌2.腺苷酸環化酶毒素：迅速提高吞噬細胞內cAMP水平，抑制吞噬殺傷作用。3.氣

9、管細胞毒素：結合于氣管纖毛上皮細胞，并抑制細胞DNA合成，阻遏纖毛擺動甚至使細胞壞死脫落。4.皮膚壞死毒素：引起外周血管收縮，局部缺血，與局部組織壞死有關。5.絲狀血凝素：與黏附纖毛上皮有關。第二節 百日咳鮑特菌6.溶血素：溶解破壞血細胞等。7.內毒素：百日咳鮑特菌產生的內毒素能使機體對組胺過敏，與感染時呼吸道分泌物增加有關。第二節 百日咳鮑特菌（二）所致疾病 百日咳是兒童常見的急性呼吸道傳染病。由于病程較長，并以咳嗽為主要癥狀，故名百日咳。傳染源是患者，尤其是癥狀輕微的非典型患者，通過飛沫傳播。細菌進入易感兒童機體后，以菌毛黏附在呼吸道上皮細胞并在此生長繁殖，產生毒素，引起局部炎癥和細胞壞死

10、，并抑制上皮細胞纖毛的正常運動，使粘稠分泌物不易被排出，刺激支氣管黏膜感覺神經末梢，反射性地引起劇烈的連續性咳嗽。第二節 百日咳鮑特菌（二）所致疾病 百日咳潛伏期約714天，病程分為三期：卡他期：從發病到出現痙攣性咳嗽，約持續12周，此期癥狀類似感冒，傳染性最大；痙咳期：一般持續16周，出現陣發性、痙攣性咳嗽，呈現特殊的高音調雞鳴樣吼聲，呼吸道中大量粘稠分泌物不易排出；恢復期：約23周，此期陣發性、痙攣性咳嗽減輕，雞鳴樣吼聲消失。在整個病程中，百日咳鮑特菌始終存在于呼吸道上皮細胞表面，不進入血流。但可繼發其他細菌引起的支氣管炎。第二節 百日咳鮑特菌（三）免疫性 百日咳病后可獲得持久免疫力，很少

11、再次感染，即使再感染，癥狀也較輕。第二節 百日咳鮑特菌三、微生物學檢查檢查百日咳鮑特菌以分離培養為主，選可疑菌落做鏡檢、生化反應、特異性抗血清鑒定試驗等。也可直接將鼻咽拭檢材涂片作熒光抗體染色，鏡檢，可對百日咳做快速診斷，但特異性較差。第二節 百日咳鮑特菌四、防治原則對患者應早發現、早隔離，隔離期為自發病起7周。對易感人群采用帶有莢膜的死菌苗或用白百破(白喉類毒素、百日咳菌苗、破傷風類毒素，DPT)三聯疫苗等進行人工主動免疫。治療首選紅霉素、氨芐西林等。第三節 銅綠假單胞菌銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）俗稱綠膿桿菌，是假單胞菌屬的代表菌種。分布廣，除存在于水、土壤

12、、污水、植物表面以及空氣中外，正常人皮膚、腸道和呼吸道都有存在。當機體免疫力低下時可引起多種感染。第三節 銅綠假單胞菌 一、生物學性狀（一）形態與染色 革蘭陰性桿菌，大小為0.5 1.0m1.53.0m，菌體稍有彎曲，單個、成對或短鏈排列。菌體一端有13根鞭毛，運動活潑，無芽胞。臨床分離的菌株常有菌毛。第三節 銅綠假單胞菌 一、生物學性狀（二）培養 專性需氧。最適生長溫度為35。營養要求不高，在普通肉湯中均勻混濁生長，并有菌膜。在普通瓊脂平板上菌落大小不一，邊緣不齊、扁平濕潤。有些菌株能產生多種水溶性色素，主要為綠膿素( pyocyanin)和青膿素(pyoverdin)或稱熒光素( fluo

13、rescin)，這些色素擴散入培養基而使培養基呈藍綠色或黃綠色。第三節 銅綠假單胞菌 一、生物學性狀（三）生化反應 發酵糖類能力低，但能分解葡萄糖，產酸不產氣。多數不液化明膠，不形成吲哚，分解尿素，氧化酶陽性，能利用枸櫞酸鹽。第三節 銅綠假單胞菌 一、生物學性狀（四）抵抗力 有較強的抵抗力，在潮濕的地方能長期生存。但對濕熱敏感，561小時可被殺滅。1%石炭酸、5%甲酚皂液5分鐘可被殺滅。對多種抗生素有耐藥性。第三節 銅綠假單胞菌 二、致病性與免疫性 （一）致病物質第三節 銅綠假單胞菌（二）所致疾病 銅綠假單胞菌是正常菌群成員，一般不致病，其感染主要是接觸傳播，多見于局部或全身免疫防御功能低下者

14、，如感染多發生在皮膚黏膜受損的部位（燒傷、刨傷等），也常見于長期化療或使用免疫抑制劑的患者。也是醫院內感染的重要病原菌，占醫源性感染的10%。臨床表現可為局部化膿性炎癥或全身感染。該菌幾乎可侵犯人體的任何組織和器官，常見的有皮膚炎、中耳炎、尿道炎、角膜炎等，也可引起心內膜炎、胃腸炎、膿胸，甚至進入血流導致敗血癥。第三節 銅綠假單胞菌（三）免疫性 正常人體對銅綠假單胞菌有天然抵抗力。中性粒細胞的吞噬作用在抗該菌感染中起著重要作用，感染后產生的特異性抗體，也有一定的抗感染作用。第三節 銅綠假單胞菌三、微生物學檢查（一）標本 可取膿液、創面滲出液、痰、尿、血液等。（二）培養 將標本接種于血瓊脂平板，

15、培養后根據菌落特征、色素及生化反應等予以鑒定。第三節 銅綠假單胞菌四、防治原則應注意診療器械和醫院環境的消毒管理，規范醫護人員的無菌操作，防止醫源性感染。已經研制出多種銅綠假單胞菌疫苗，其中以原內毒素蛋白(OEP)具有不受菌型限制，保護范圍廣、毒性低等優點。銅綠假單胞菌對多種常用抗生素有天然抗藥性。最好根據藥敏試驗結果選擇用藥。治療時可選用多粘菌素B、慶大霉素等。對燒傷患者也可采用多價綠膿桿菌抗血清治療。第四節 幽門螺桿菌 幽門螺桿菌（Helicobacter，pylori,HP）是Warren等于1982年從慢性胃炎、消化性潰瘍患者的胃活檢組織中分離出來的呈彎曲狀的細菌。大量研究表明它與慢性

16、胃炎、十二指腸潰瘍有密切關系。第四節 幽門螺桿菌一、生物學性狀（一）形態與染色革蘭陰性，末端鈍圓，呈螺旋形彎曲的桿菌，有時呈U形、S形或海鷗狀，常聚集成堆，大小為0.51.0m2.54.0m。菌體一端或兩端有26根帶鞘的鞭毛，運動活潑。 第四節 幽門螺桿菌一、生物學性狀（二）培養特性微需氧，營養要求較高，需在含血或血清等培養基上生長。最適生長溫度為37，25不生長，42少數生長。pH6.08.0時繁殖最為活躍，培養34天后可見圓形、光滑、無色透明、針尖大小的菌落，在血平板上有輕度溶血。第四節 幽門螺桿菌一、生物學性狀（三）生化反應不活潑，不分解糖類，但具有大量高活力的胞外尿素酶。故測定尿毒酶活

17、性可作為本菌感染的快速診斷方法之一。該菌還產生堿性磷酸酶、DNA酶、亮氨酰肽酶，借此與其他彎曲菌相區別。 第四節 幽門螺桿菌二、致病性與免疫性（一）致病物質該菌的致病機制尚不清楚，可能與下列因素有關：細菌的黏附作用，取決于細菌鞭毛，其運動活潑，穿透黏液層，黏附于完整的微絨毛上；除此而外，還產生尿素酶、蛋白酶、磷脂酶A和C，內毒素和外毒素樣物質如細胞毒素相關蛋白A( CagA)和空胞毒素A( VacA)參與致病。此外，機體因素如胃酸分泌功能低下等也使該菌易感。第四節 幽門螺桿菌（二）所致疾病幽門螺桿菌與慢性胃炎、胃和十二指腸潰瘍密切相關，也與胃癌的發生關系密切。幽門螺桿菌陽性的宿主常出現胃上皮增

18、生；感染該菌時，胃內亞硝胺、亞硝基化合物增多，有可能導致DNA突變致癌。第四節 幽門螺桿菌（三）免疫性人體感染該菌后可產生IgG、IgM和IgA型抗體，并能維持數年。但抗體的含量與胃炎的嚴重程度無明顯關系。第四節 幽門螺桿菌三、微生物學檢查通過纖維胃鏡采取胃、十二指腸黏膜組織，直接涂片，革蘭染色鏡檢，找到典型的彎曲呈螺旋形的細菌即可診斷。將活組織接種于選擇培養基，經27天可獲得陽性結果。尿素酶試驗應為該菌感染的快速診斷。還可用組織切片Ciemsa或鍍銀染色鏡檢，免疫組化，間接免疫熒光法等診斷方法。PCR可用于快速診斷。第四節 幽門螺桿菌四、防治原則目前正在試用重組脲酶幽門螺桿菌疫苗，初步結果提

19、示其兼有預防和治療的雙重作用。此外及時診斷及治療胃、十二指腸炎癥，可減少胃癌發生率。治療多采用枸櫞酸鉍鉀或抑酸劑為基礎，另加兩種敏感抗生素如氟哌酸、甲硝唑的三聯療法。 第五節 空腸彎曲菌彎曲菌屬（Campylobacter）細菌是一類呈逗點狀或S形的革蘭陰性桿菌，對人致病的有空腸彎曲菌、胎兒彎曲菌和和結腸彎曲菌等，其中空腸彎曲菌感染較常見，呈世界性分布，主要導致胃腸炎，也可引起腸道外感染。 第五節 空腸彎曲菌一、生物學性狀（一）形態與染色形態細長，呈弧形、螺旋形或海鷗狀，革蘭陰性，菌體一端或兩端有單鞭毛，運動活潑，無芽胞，無莢膜。 （二）培養特性微需氧，營養要求較高，生長在42中比37好。（三

20、）生化反應不活潑，不發酵糖類，氧化酶陽性 第五節 空腸彎曲菌二、致病性與免疫性致病物質檢測到的有黏附素、細胞毒性酶類和腸毒素，但其特異性作用尚不清楚。 第五節 空腸彎曲菌二、致病性與免疫性空腸彎曲菌是散發性細菌性結腸炎最常見的菌種之一。該菌通過污染飲食、牛奶、水源等被食入。臨床表現為痙攣性腹痛、腹瀉、血便或果醬樣便，量多，頭痛，不適，發熱。該病通常可自限，病程58天。感染空腸彎曲菌后24周可產生特異性IgM和IgG抗體，通過免疫調理和活化補體等作用增強吞噬細胞的吞噬殺菌及補體的溶菌作用。 第五節 空腸彎曲菌三、微生物學檢查糞便標本涂片，鏡檢，查找革蘭陰性弧形或海鷗狀彎曲菌，或用懸滴法觀察魚群樣

21、運動或螺旋式運動。分離培養可直接用選擇性培養基，于42和37微需氧環境下培養4872小時。PCR法可直接檢出糞便中的彎曲菌。 第五節 空腸彎曲菌四、防治原則目前尚無特異性疫苗，預防主要是注意飲水和食品衛生，加強人、畜、禽類的糞便管理。治療可用紅霉素、氨基糖苷類抗生素、氯霉素等。第六節 腸球菌腸球菌（E.enterococcus）為人類和動物腸道正常菌群的一部分。是醫院感染的重要病原菌。一、生物學性狀為典型的革蘭陽性球菌，呈雙或短鏈狀排列，故與肺炎鏈球菌很難區別。無芽胞，無鞭毛，為需氧或兼性厭氧菌。本菌對營養要求較高，在含有血清的培養基上生長良好。在血平板上經37培養18小時后，可形成灰白色、不

22、透明、表面光滑、直徑0.51mm大小的圓形菌落，不同的菌株表現為不同的溶血現象。第六節 腸球菌一、生物學性狀與鏈球菌的不同在于本菌在生化反應上能耐受高鹽和膽汁培養基，并對許多抗菌藥物表現為固有耐藥。 腸球菌屬由糞腸球菌(E.faecalis) 、屎腸球菌(E.faecium) 、堅韌腸球菌(E.durans)等29個種組成。其中對人類致病者主要為糞腸球菌和尿腸球菌。在臨床分離菌中糞腸球菌占85%95%、屎腸球菌占5%10%，其余少數為堅韌腸球菌和其他腸球菌。第六節 腸球菌二、致病性腸球菌有多種致病物質。其中脂磷壁酸與黏附素可使細菌黏附定植于腸道、泌尿道上皮細胞及心內膜細胞。集聚因子、細胞溶素、

23、信息素和明膠酶等都具有各自的功能。腸球菌由于其細胞壁堅厚，對許多抗生素表現為固有耐藥，屎腸球菌比糞腸球菌更易耐藥。腸球菌是醫院感染的重要病原菌，容易在年老體弱，表皮黏膜破損以及抗生素使用不當等條件下產生感染。常見的感染有：尿路感染、腹腔盆腔感染、敗血癥和心內膜炎等。第六節 腸球菌三、微生物學檢查根據感染部位不同采集膿液、尿液、血液等標本。將標本接種于血平板或選擇性培養基，通過生化反應和血清學方法做出鑒定。第六節 腸球菌四、防治原則由于腸球菌對抗生素耐藥性的增加，給臨床治療造成很大困難，已引起廣泛重視。腸球菌感染的治療應重視藥物敏感試驗。大部分腸球菌對呋喃妥因敏感，已成功用于尿路感染。腸球菌性心內膜炎、腦膜炎等