生物化學與分子生物學：血清過氧化氫酶Km值測定_第1頁
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文檔簡介

實驗三血清過氧化氫酶Km值測定一 實驗原理1 Km酶促速度達到其最大速度Vm一半時的底物濃度特征性常數可以表示E與S之間的親和能力。雙倒數作圖法（Lineweaver-Burk法） VmaxS Km+SV = （林貝氏方程）+ 1/V=KmVmax 1/Vmax 1/S 兩邊同取倒數-1/Km 1/Vmax 1/S1/VHanes作圖法S/V=Km/Vmax + S/Vmax S S/V -Km Km/Vm 1/Vmax + 1/V=KmVmax 1/Vmax 1/S 2 過氧化氫酶 2H2O22H2O+O2 2KMnO45H2O23H2SO4 2MnSO4K2SO45O28H2OV反應速度=開始H2O2物質的量剩余H2O2物質的量H2O2物質的量濃度加入的體積KMnO4物質的量濃度消耗的KMnO4體積5/2 二 實驗操作 （見書P132）1 H2O2濃度的標定： 同樣操作，做二份，取二份數據平均值。2反應速度的測定： 表1 各反應管添加血清，硫酸時間 1 2 3 4 5加稀釋血清0.5ml時間 0 1 2 3 4加H2SO4 2.0ml時間 5 6 7 8 9 3 KMnO4滴定各瓶至微紅色。記錄KMnO4消耗量(m1)，計算H2O2剩余量。三 實驗結果與討論1 實驗結果 （1）書P132 表3-3 （2）作圖：標題，制作時間，標注Km值 （3）實驗結果（文字描述）2 結論

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