1、非細胞型微生物包括（真）病毒和亞病毒，非細胞型微生物包括（真）病毒和亞病毒， 后后者又包括類病毒、擬病毒和朊病毒。者又包括類病毒、擬病毒和朊病毒。 （真）病毒（真）病毒(virus)：至少含有核酸和蛋白質兩種至少含有核酸和蛋白質兩種 組分組分.亞病毒亞病毒:類病毒類病毒(viroid)：只含單獨具侵染性的：只含單獨具侵染性的RNA組分組分.擬病毒擬病毒(virusoid)：只含不具單獨侵染性的：只含不具單獨侵染性的RNA 組分組分.朊病毒朊病毒(prion)：只含蛋白質一種組分：只含蛋白質一種組分.病毒和亞病毒病毒和亞病毒非細胞生物的種類非細胞生物的種類第三章第三章 病毒與亞病毒病毒與亞病毒第

2、一節第一節 病毒病毒第二節第二節 亞病毒亞病毒第三節第三節 病毒與實踐病毒與實踐第一節第一節 病毒病毒一、概述一、概述二、病毒（二、病毒（virus）的形態構造和化學成分）的形態構造和化學成分三、四類病毒及其繁殖方式三、四類病毒及其繁殖方式一、概述一、概述 病毒是一類由核酸和蛋白質等少數幾種成分組成的超病毒是一類由核酸和蛋白質等少數幾種成分組成的超 顯微顯微“非細胞型生物非細胞型生物”，其本質是一種只含，其本質是一種只含DNA或或RNA 的遺傳因子，能以感染態和非感染態兩種狀態存在。的遺傳因子，能以感染態和非感染態兩種狀態存在。 病毒病毒(virus)，拉丁語的原意是，拉丁語的原意是“毒素毒素

3、”。 病毒和病毒顆粒、病毒粒、病毒體病毒和病毒顆粒、病毒粒、病毒體(virijon)是其同義詞。是其同義詞。 1、形態極其微小、形態極其微小,必須在電鏡下觀察必須在電鏡下觀察,一般具過濾性一般具過濾性; 2、沒有細胞構造、沒有細胞構造,其主要成分僅是核酸和蛋白質兩種，其主要成分僅是核酸和蛋白質兩種，故稱分子生物故稱分子生物; 3、每一種病毒只含一種核酸、每一種病毒只含一種核酸,不是不是DNA就是就是RNA; 4、既無產能酶系、既無產能酶系,也無蛋白質和核酸酶合成系統，只能也無蛋白質和核酸酶合成系統，只能活細胞內專性寄生，活細胞內專性寄生，5、靠其宿主代謝系統的協助來復制核酸、合成蛋白質等、靠其

4、宿主代謝系統的協助來復制核酸、合成蛋白質等組分，然后再進行裝配而得以增殖，形成子代；組分，然后再進行裝配而得以增殖，形成子代； 6、在離體條件下、在離體條件下,能以無生命的化學大分子狀態存在能以無生命的化學大分子狀態存在,并并可可長期保持其侵染活力長期保持其侵染活力; 7、對一般抗生素不敏感、對一般抗生素不敏感,但對干擾素敏感。但對干擾素敏感。8、有些病毒的核酸還能整合到宿主的基因組中，并誘發、有些病毒的核酸還能整合到宿主的基因組中，并誘發潛伏性感染。潛伏性感染。 （二）病毒特征（二）病毒特征（三）宿主范圍（分布）及重要性（三）宿主范圍（分布）及重要性病毒在自然界分布廣、數量多。幾乎可以感染病

5、毒在自然界分布廣、數量多。幾乎可以感染所有的生物，包括各類微生物、植物、昆蟲、所有的生物，包括各類微生物、植物、昆蟲、魚類、禽類、哺乳動物和人類。魚類、禽類、哺乳動物和人類。根據宿主可以分為：根據宿主可以分為： 動物病毒動物病毒 植物病毒植物病毒 細菌病毒（或稱噬菌體）等細菌病毒（或稱噬菌體）等二、病毒（二、病毒（virus）的形態構造）的形態構造 和化學成分和化學成分（一）病毒大小（一）病毒大小（二）病毒的形態構造（二）病毒的形態構造（三）化學組成（三）化學組成 病毒粒子病毒粒子(virus particle) ：指成熟的、結構完：指成熟的、結構完整的、有感染性的病毒個體。整的、有感染性的病

6、毒個體。 在電子顯微鏡下呈特定的形態。在電子顯微鏡下呈特定的形態。（一）病毒大小（一）病毒大小測定病毒大小的單位是納米（測定病毒大小的單位是納米（109)，多數病毒，多數病毒的直徑在的直徑在100nm以下以下: 150nm 大型病毒（最大大型病毒（最大300 nm）絕大多數病毒是能通過細菌濾器絕大多數病毒是能通過細菌濾器,須用電鏡才能須用電鏡才能觀察到其具體形態和大小。觀察到其具體形態和大小。 病病 毒毒 大大 小小牛痘苗病毒牛痘苗病毒傳染性濃泡皮炎病毒傳染性濃泡皮炎病毒腮腺炎病毒腮腺炎病毒T T偶數病毒偶數病毒皰疹病毒皰疹病毒大蚊病毒大蚊病毒流感病毒流感病毒煙草花葉病毒煙草花葉病毒腺病毒腺病

7、毒多瘤病毒多瘤病毒脊髓灰質炎病毒脊髓灰質炎病毒1微米微米（二）病毒的形態（二）病毒的形態多數病毒呈球形或近似球形，桿狀，絲狀，少數可為多數病毒呈球形或近似球形，桿狀，絲狀，少數可為子彈狀、磚塊狀，噬菌體可呈蝌蚪狀。子彈狀、磚塊狀，噬菌體可呈蝌蚪狀。1、病毒粒子的基本結構、病毒粒子的基本結構 衣殼衣殼 核心核心包膜包膜刺突刺突核衣殼核衣殼衣殼粒衣殼粒病毒粒子結構模式圖病毒粒子結構模式圖A 結構簡單的病毒粒子；結構簡單的病毒粒子；B 結構復雜的病毒粒子結構復雜的病毒粒子2、病毒的對稱體制、病毒的對稱體制三類典型形態的病毒：三類典型形態的病毒：廿面體對稱的結構廿面體對稱的結構( (球狀球狀) ) 螺

8、旋對稱的結構螺旋對稱的結構( (桿狀桿狀) ) 復合對稱的結構復合對稱的結構( (蝌蚪狀蝌蚪狀) )大腸桿菌的大腸桿菌的T T偶數噬菌體是由偶數噬菌體是由橢圓形的二十面體頭部和螺旋橢圓形的二十面體頭部和螺旋對稱的尾部組合而成，是病毒對稱的尾部組合而成，是病毒中復合對稱的代表。中復合對稱的代表。病毒粒子的對稱體制病毒粒子的對稱體制螺旋對稱螺旋對稱二十面體對稱二十面體對稱復合對稱復合對稱(A) Filamentous(B) Complex(C) Eicosahedral(D) EnvelopedRNA or DNAProtein Coat(Capsomers)Lipid envelope3、三類典

9、型形態的病毒及其代表、三類典型形態的病毒及其代表二十面體對稱的代表二十面體對稱的代表- -腺病毒腺病毒復合對稱的代表復合對稱的代表-T-T偶數噬菌體偶數噬菌體螺旋對稱的代表螺旋對稱的代表- -煙草花葉病毒煙草花葉病毒(TMV)(TMV)（1）螺旋對稱的代表）螺旋對稱的代表-煙草花葉病毒煙草花葉病毒 (tobaco mosaicvirus,TMV)有三種類型：纖維狀、直桿狀和彎曲桿狀。衣殼形似一中空柱，有三種類型：纖維狀、直桿狀和彎曲桿狀。衣殼形似一中空柱，內包核酸，衣殼粒和核酸呈螺旋對稱形排列。由內包核酸，衣殼粒和核酸呈螺旋對稱形排列。由95衣殼衣殼Pr和和5SSRNA組成。蛋白質衣殼由衣殼粒

10、（組成。蛋白質衣殼由衣殼粒（2130個）一個緊挨一個）一個緊挨一個地呈螺旋排列而成，個地呈螺旋排列而成，ssRNA位于衣殼內側螺旋狀溝中。位于衣殼內側螺旋狀溝中。 （2）二十面體對稱的代表腺病毒）二十面體對稱的代表腺病毒(Adenovirus)具有具有20個面，個面，30條邊和條邊和12個頂角。核衣殼由不個頂角。核衣殼由不同數量的衣殼粒按一定方式排列成對稱體。同數量的衣殼粒按一定方式排列成對稱體。腺病毒粒子共由腺病毒粒子共由252個球形的衣殼粒排列成一個球形的衣殼粒排列成一個具有廿面的對稱體，線狀個具有廿面的對稱體，線狀dsDNA。噬菌體噬菌體 X174只有只有12個衣殼粒，最大的廿面體個衣殼

11、粒，最大的廿面體是由是由1，472個衣殼粒組成的昆蟲病毒粒子。個衣殼粒組成的昆蟲病毒粒子。 絕大多數噬菌體為蝌蚪形，現以絕大多數噬菌體為蝌蚪形，現以E.coli T4為例，介紹蝌為例，介紹蝌蚪形噬菌體的結構：蚪形噬菌體的結構：大腸桿菌大腸桿菌T4T4噬菌體構造噬菌體構造（3）復合對稱的代表）復合對稱的代表T偶數噬菌體偶數噬菌體95nm95nm65nm24環環頸環頸環3、病毒的群體形態、病毒的群體形態包涵體包涵體(inclusion body)噬菌斑噬菌斑(plaque)空斑空斑(plaque)枯斑枯斑(lesion)病毒的群體形態有：病毒的群體形態有：（1）包涵體）包涵體（inclusion

12、body）概念：感染病毒的宿主細胞內，出現在光學顯微鏡下概念：感染病毒的宿主細胞內，出現在光學顯微鏡下可見的大小、形態、數量不等的小體，稱為包涵體。可見的大小、形態、數量不等的小體，稱為包涵體。在宿主細胞內形成包涵體是病毒的特征，不同的病毒在宿主細胞內形成包涵體是病毒的特征，不同的病毒其形成的包涵體具有不同的形態、結構、和特性。其形成的包涵體具有不同的形態、結構、和特性。包涵體在細胞中的形成部位：包涵體在細胞中的形成部位： 位于細胞核內位于細胞核內如包疹病毒如包疹病毒 位于細胞質內位于細胞質內如狂犬病毒等如狂犬病毒等 胞核內胞質都有胞核內胞質都有麻疹病毒麻疹病毒 包涵體（包涵體（inclusi

13、on body）是病毒的聚集體是病毒的聚集體; ;是病毒的合成部位是病毒的合成部位; ;是病毒蛋白和與病毒感染有關的蛋白質是病毒蛋白和與病毒感染有關的蛋白質非病毒性包涵體非病毒性包涵體, ,由化學因子或細菌感染形成由化學因子或細菌感染形成包涵體的實踐意義包涵體的實踐意義-病毒鑒定、臨床診斷依據。病毒鑒定、臨床診斷依據。(2)噬菌斑噬菌斑(plaque)噬菌斑是指在宿主細菌的噬菌斑是指在宿主細菌的菌苔上，噬菌體使菌體裂菌苔上，噬菌體使菌體裂解而形成的空斑。解而形成的空斑。應用：應用：1 1、噬菌體定量計數、噬菌體定量計數2 2、噬菌體的鑒定、噬菌體的鑒定空斑和病斑空斑和病斑 在動物細胞培養物上的

14、與噬菌斑類似的空斑在動物細胞培養物上的與噬菌斑類似的空斑, ,稱稱為病斑為病斑. .因為受腫瘤病毒感染。因為受腫瘤病毒感染。 空斑和病斑用于動物病毒粒子的計數也可以采用空斑和病斑用于動物病毒粒子的計數也可以采用噬菌斑法類似的技術。噬菌斑法類似的技術。枯斑：枯斑：植物病毒在植物葉片上形成的群體植物病毒在植物葉片上形成的群體 稱為枯斑。稱為枯斑。（三）化學組成（三）化學組成 病毒的主要成分為核酸（病毒的主要成分為核酸（DNA或或RNA）和蛋白）和蛋白質。有的病毒還含有脂質、糖類等其他組分。質。有的病毒還含有脂質、糖類等其他組分。1 1、病毒的核酸、病毒的核酸 v病毒核酸是病毒粒中最重要的成分，是病

15、毒繁殖、病毒核酸是病毒粒中最重要的成分，是病毒繁殖、遺傳變異與感染性的物質基礎。核酸構成了病毒遺傳變異與感染性的物質基礎。核酸構成了病毒的基因組。的基因組。v病毒核酸的種類很多，是病毒分類鑒定中的重要病毒核酸的種類很多，是病毒分類鑒定中的重要指標：指標： 是是DNA還是還是RNA；是單鏈還是雙鏈；是單鏈還是雙鏈； 呈線狀還是環狀；呈線狀還是環狀； 是閉環還是開口環；是閉環還是開口環； 基因組是單分子、雙分子、三分子或多分子；基因組是單分子、雙分子、三分子或多分子； 核酸的堿基或堿基對數；核酸的堿基或堿基對數；核苷酸序列，等。核苷酸序列，等。一種病毒只含有一種核酸（一種病毒只含有一種核酸（DNA

16、或或RNA）。）。 植物病毒絕大多數含植物病毒絕大多數含DNA;少數含少數含RNA； 動物病毒一部分含動物病毒一部分含DNA，一部分含，一部分含RNA； 細菌病毒普遍含細菌病毒普遍含DNA，含，含RNA的極少。的極少。病毒的核酸類型極為多樣化：病毒的核酸類型極為多樣化： 病毒的病毒的DNA與與RNA均有單鏈和雙鏈：均有單鏈和雙鏈： dsDNA ssDNA dsRNA ssRNA 病毒核酸的種類病毒核酸的種類病毒病毒DNA分子有線裝和環狀之分。分子有線裝和環狀之分。 2.2.病毒的蛋白質病毒的蛋白質有的病毒只有一種蛋白質，多數含有為數不多的有的病毒只有一種蛋白質，多數含有為數不多的幾種蛋白質。幾

17、種蛋白質。病毒蛋白質的氨基酸組成與其他生物一樣，但不病毒蛋白質的氨基酸組成與其他生物一樣，但不同病毒蛋白質的氨基酸組成和含量各不相同。同病毒蛋白質的氨基酸組成和含量各不相同。病毒蛋白質主要在構成病毒結構、病毒的侵染與病毒蛋白質主要在構成病毒結構、病毒的侵染與增殖過程中發揮作用。增殖過程中發揮作用。 3.其他成分其他成分一些較復雜的病毒（如包膜病毒）除含有核酸和一些較復雜的病毒（如包膜病毒）除含有核酸和蛋白質兩種成分外，還含有脂類、多糖等其他成蛋白質兩種成分外，還含有脂類、多糖等其他成分。分。三、各類病毒及其繁殖方式三、各類病毒及其繁殖方式原核生物病毒原核生物病毒噬菌體噬菌體植物病毒植物病毒人類

18、和脊椎動物病毒人類和脊椎動物病毒昆蟲病毒昆蟲病毒(一一)原核生物的病毒原核生物的病毒噬菌體噬菌體噬菌體：噬菌體：是病毒中的一種，一般把侵染細菌、放是病毒中的一種，一般把侵染細菌、放線菌、線菌、藍細菌藍細菌的病毒叫噬菌體，包括噬細菌體、噬的病毒叫噬菌體，包括噬細菌體、噬放線菌體、噬藍細菌體等。放線菌體、噬藍細菌體等。 把侵染真菌的病毒叫把侵染真菌的病毒叫噬真菌體。噬真菌體。噬菌體共有六類形態。噬菌體共有六類形態。噬菌體的六類形態：噬菌體的六類形態：T-系噬菌體系噬菌體T-系噬菌體是研究的最廣泛而又深入的系噬菌體是研究的最廣泛而又深入的細菌噬菌體，按發現的先后順序進行從細菌噬菌體，按發現的先后順序

19、進行從T1-T7編號，后來編號，后來發現其中偶數者的形態都相同（蝌蚪形收縮性長尾），故發現其中偶數者的形態都相同（蝌蚪形收縮性長尾），故統稱統稱T偶數噬菌體偶數噬菌體。噬菌體的類型噬菌體的類型溫和噬菌體（溫和噬菌體（temperate phrage）噬菌體感噬菌體感染細胞后，將其核酸整合（插入）到宿主的核染細胞后，將其核酸整合（插入）到宿主的核DNA上，并且可以隨宿主上，并且可以隨宿主DNA的復制而進行同的復制而進行同步復制，在一般情況下，不引起寄主細胞裂解的步復制，在一般情況下，不引起寄主細胞裂解的噬菌體。噬菌體。烈性噬菌體（烈性噬菌體（virulent phage）感染細胞后感染細胞后,

20、,能在寄主細胞內增殖，產生大量子代噬菌體并能在寄主細胞內增殖，產生大量子代噬菌體并引起細菌裂解的噬菌體。引起細菌裂解的噬菌體。噬菌體的繁殖分為：吸附、侵入、增殖（復制與生噬菌體的繁殖分為：吸附、侵入、增殖（復制與生物合成）、成熟（裝配）和裂解（釋放）物合成）、成熟（裝配）和裂解（釋放）5個階段。個階段。（1 1）噬菌體的繁殖）噬菌體的繁殖裂解性周期（增殖性周期）：烈性噬菌體的繁殖過程。裂解性周期（增殖性周期）：烈性噬菌體的繁殖過程。 吸附吸附(adsorption)噬菌體對宿主細胞的吸附具高度的特異性。噬菌體對宿主細胞的吸附具高度的特異性。吸附的機理：尾絲尖端與受體發生共價結合吸附的機理：尾絲

21、尖端與受體發生共價結合。影響吸附的因素影響吸附的因素：噬菌體數量噬菌體數量；陽離子濃度陽離子濃度；溫度溫度；輔輔助因子（色助因子（色AA、生物素）等。、生物素）等。自外裂解：大量噬菌體吸附在同一細胞表面并釋放眾自外裂解：大量噬菌體吸附在同一細胞表面并釋放眾多的溶菌酶，最終因外在的原因導致細胞裂解。多的溶菌酶，最終因外在的原因導致細胞裂解。 侵入侵入(penetration)頭部的核酸通過頭部的核酸通過中空的尾髓壓入中空的尾髓壓入細胞內，而蛋白質細胞內，而蛋白質外殼則留在細胞外。外殼則留在細胞外。尾鞘的收縮性可尾鞘的收縮性可明顯提高噬菌體明顯提高噬菌體核酸注入的速率。核酸注入的速率。 增殖增殖

22、(replication)包括核酸的復制和蛋包括核酸的復制和蛋白質的生物合成。白質的生物合成。增殖是通過噬菌體基增殖是通過噬菌體基因表達實現的。因表達實現的。核酸的復制與病毒蛋核酸的復制與病毒蛋白質的合成是分開進白質的合成是分開進行的。行的。病毒核酸鏈接入寄主核酸鏈病毒核酸鏈接入寄主核酸鏈 病毒核酸復制病毒核酸復制病毒核酸的復制病毒核酸的復制 成熟（裝配）成熟（裝配） 已合成的各部件進行自行裝配成新的噬菌體的過程。已合成的各部件進行自行裝配成新的噬菌體的過程。T偶數噬菌體裝配過程模式圖偶數噬菌體裝配過程模式圖被感染細胞裂解，成熟的子代噬菌體轉移到外界。被感染細胞裂解，成熟的子代噬菌體轉移到外界

23、。開始新的生活史。開始新的生活史。 裂解（釋放）裂解（釋放） 裂解量：平均每一宿主細胞裂解后所產生的裂解量：平均每一宿主細胞裂解后所產生的 子代噬菌體數。子代噬菌體數。有囊膜病毒以有囊膜病毒以“出芽出芽”方式釋方式釋放放2、噬菌體效價的測定、噬菌體效價的測定效價（噬菌斑形成單位數、感染中心數）：每效價（噬菌斑形成單位數、感染中心數）：每ml樣品中所含有的具侵染性的噬菌體粒子數。樣品中所含有的具侵染性的噬菌體粒子數。測定方法：測定方法： 斑點試驗法、液體稀釋管法、單層平板法、斑點試驗法、液體稀釋管法、單層平板法、 雙層平板法、快速玻片法雙層平板法、快速玻片法瓊脂平板瓊脂平板菌液菌液+ +噬菌體試

24、樣噬菌體試樣+ +瓊脂培養基瓊脂培養基培養培養1010余小時余小時計數噬菌斑計數噬菌斑噬菌斑數噬菌斑數= =試樣中噬菌體數試樣中噬菌體數雙層平板法雙層平板法3、噬菌體增殖規律的描述方法、噬菌體增殖規律的描述方法 一步生長曲線一步生長曲線定量描述烈性噬菌體生長規律的實驗曲線。定量描述烈性噬菌體生長規律的實驗曲線。（1）一步生長曲線的基本實驗步驟）一步生長曲線的基本實驗步驟離離 心心 術術抗病毒血清抗病毒血清培養培養定時取樣測噬菌斑數定時取樣測噬菌斑數以培養時間為橫坐標，以噬菌斑數為縱坐標，以培養時間為橫坐標，以噬菌斑數為縱坐標，繪出的曲線為一步生長曲線。繪出的曲線為一步生長曲線。（2 2）一步生

25、長曲線的三個階段）一步生長曲線的三個階段: :潛伏期、裂解期、平穩期潛伏期、裂解期、平穩期 1）潛伏期）潛伏期 噬菌體的核酸侵入宿噬菌體的核酸侵入宿主細胞至第一個成熟噬菌體粒子主細胞至第一個成熟噬菌體粒子裝配前的一段時間。可分為兩個裝配前的一段時間。可分為兩個階段：隱晦期、胞內累積期。階段：隱晦期、胞內累積期。2）裂解期）裂解期 緊接在潛伏期后的宿主緊接在潛伏期后的宿主細胞迅速裂解、溶液中噬菌體粒細胞迅速裂解、溶液中噬菌體粒子急劇增多的一段時間。子急劇增多的一段時間。3）平穩期）平穩期 感染后的宿主細胞已全感染后的宿主細胞已全部裂解，溶液中噬菌體效價達到部裂解，溶液中噬菌體效價達到最高點的時期

26、。最高點的時期。溫和噬菌體特點溫和噬菌體特點游離態游離態溫和整合態溫和整合態( (原噬菌體）原噬菌體）營養態營養態具有整合能力；具有整合能力；具有同步復制能力；具有同步復制能力；都是都是dsDNA;4、溶源性、溶源性溶源性：溫和噬菌體侵入宿主細菌細胞后，由于其溶源性：溫和噬菌體侵入宿主細菌細胞后，由于其核酸整合到宿主核基因組上，并隨宿主核酸同步復核酸整合到宿主核基因組上，并隨宿主核酸同步復制，并不引起宿主細胞裂解的特性。子代均具有溶制，并不引起宿主細胞裂解的特性。子代均具有溶源性。源性。溫和噬菌體存在形式溫和噬菌體存在形式溶源性與溶源性細菌溶源性與溶源性細菌v溶源性細菌：含有原噬菌體的細菌稱為

27、溶源性細菌溶源性細菌：含有原噬菌體的細菌稱為溶源性細菌（lysogenic bacteria）或溶源化細胞）或溶源化細胞(lysogeniccell)。溶源菌是一類能和溫和噬菌體長期共存，一般不會出溶源菌是一類能和溫和噬菌體長期共存，一般不會出現有害影響的細胞。現有害影響的細胞。v溶源性（溶源現象）：是溫和噬菌體侵入宿主細菌細溶源性（溶源現象）：是溫和噬菌體侵入宿主細菌細胞后，由于其核酸整合到宿主核基因組上，并隨宿主胞后，由于其核酸整合到宿主核基因組上，并隨宿主核酸同步復制，并不引起宿主細胞裂解的特性。核酸同步復制，并不引起宿主細胞裂解的特性。v凡能引起溶源性的噬菌體即為溫和噬菌體。凡能引起溶

28、源性的噬菌體即為溫和噬菌體。 v溶源性廣泛存在于各種細菌中，如大腸桿菌、假單溶源性廣泛存在于各種細菌中，如大腸桿菌、假單胞菌、沙門氏菌、鏈球菌、芽孢桿菌、棒桿菌、弧胞菌、沙門氏菌、鏈球菌、芽孢桿菌、棒桿菌、弧菌和極毛桿菌等。菌和極毛桿菌等。v溶源性菌株命名：在敏感菌株的名稱后面加一括號，溶源性菌株命名：在敏感菌株的名稱后面加一括號，其中寫上溶源性噬菌體，例如其中寫上溶源性噬菌體，例如E.coliK12()。（5）裂解性循環與溶原性循環的關系）裂解性循環與溶原性循環的關系裂解性循環和溶源性循環的相互關系裂解性循環和溶源性循環的相互關系溶源性細菌的測定溶源性細菌的測定 1）將少量溶源菌與大量敏感性

29、的指示菌相混合；）將少量溶源菌與大量敏感性的指示菌相混合；2）與瓊脂培養基混勻后倒平板；）與瓊脂培養基混勻后倒平板；3）經培養后溶源菌長出如圖菌落。）經培養后溶源菌長出如圖菌落。噬菌體的應用噬菌體的應用 噬菌體會給人類造成損失，利用微生物進行發酵的噬菌體會給人類造成損失，利用微生物進行發酵的工業常深受其害。但是，由于噬菌體的某些生物學工業常深受其害。但是，由于噬菌體的某些生物學特性，使其在人類的生產實踐和生物學基礎理論研特性，使其在人類的生產實踐和生物學基礎理論研究中都有一定價值。可概括為以下幾方面。究中都有一定價值。可概括為以下幾方面。 1)用于鑒定未知細菌用于鑒定未知細菌 在醫學上，有些難

30、鑒別的病原菌，在醫學上，有些難鑒別的病原菌，利用噬菌體對宿主細胞的高度專化性的敏感性，不僅利用噬菌體對宿主細胞的高度專化性的敏感性，不僅可鑒定到菌種，而且可鑒定到菌型。可鑒定到菌種，而且可鑒定到菌型。2)用于臨床用于臨床 治療某些傳染性疾病。治療某些傳染性疾病。 如果將噬菌體制劑與如果將噬菌體制劑與抗生素或者磺胺藥物配合應用，則效果更好。抗生素或者磺胺藥物配合應用，則效果更好。3)檢驗植物病原菌檢驗植物病原菌 利用噬菌體可以檢驗由種子攜帶的植利用噬菌體可以檢驗由種子攜帶的植物病原菌。物病原菌。4)測定輻射劑量測定輻射劑量 某些噬菌體某些噬菌體(如如T2)對輻射劑量的反應敏對輻射劑量的反應敏感而

31、精確。感而精確。5)噬菌體在分子生物學研究中的作用噬菌體在分子生物學研究中的作用 噬菌體現已成為進噬菌體現已成為進行分子生物學研究的較為理想的重要材料。行分子生物學研究的較為理想的重要材料。（二）植物病毒（二）植物病毒已知的植物病毒多達已知的植物病毒多達700種（種（1989年），多數是年），多數是ssRNA病毒。病毒。形態：桿、絲、球狀，一般無包膜。形態：桿、絲、球狀，一般無包膜。1619年荷蘭畫師描畫的有病郁金香的畫像。年荷蘭畫師描畫的有病郁金香的畫像。 病毒侵染對花瓣顏色的影響因葉綠體被破壞或不能合成葉綠素而因葉綠體被破壞或不能合成葉綠素而使葉片發生花葉、黃化或紅化癥狀；使葉片發生花葉、

32、黃化或紅化癥狀；植株發生矮化、叢枝或畸形；植株發生矮化、叢枝或畸形；形成枯斑或壞死。形成枯斑或壞死。病毒侵染對花瓣顏色的影響借昆蟲刺吸式口器進入、通過借昆蟲刺吸式口器進入、通過傷口或嫁接進入傷口或嫁接進入 ，再通過胞，再通過胞間連絲或輸導組織迅速向其它間連絲或輸導組織迅速向其它部位擴散引起普遍感染。部位擴散引起普遍感染。1、“侵入侵入”方式方式3、核酸的復制和蛋白質的合成、核酸的復制和蛋白質的合成2、脫殼、脫殼植物病毒侵入宿主細胞后才能發生脫殼。植物病毒侵入宿主細胞后才能發生脫殼。增殖過程增殖過程 4、裝配（成熟）、裝配（成熟）（三）人類和脊椎動物病毒（三）人類和脊椎動物病毒在人類與脊椎動物中

33、廣泛寄生著相應的病毒。人類傳在人類與脊椎動物中廣泛寄生著相應的病毒。人類傳染病染病80由病毒引起（由病毒引起（300種），脊椎動物病毒種），脊椎動物病毒900種，許多病毒引起人畜共患病。另一些病毒感染種，許多病毒引起人畜共患病。另一些病毒感染動物后，并不致死宿主細胞，而是引起腫瘤。動物后，并不致死宿主細胞，而是引起腫瘤。種類種類 dsDNA、ssDNA、dsRNA、ssRNA。衣殼外有的有包膜，有的無包膜，有的包膜上有刺突。衣殼外有的有包膜，有的無包膜，有的包膜上有刺突。病毒感染的防治病毒感染的防治接種疫苗、接種疫苗、 生物制劑、生物制劑、 中藥預防、中藥預防、 干擾素等。干擾素等。增殖過程增

34、殖過程與噬菌體的增殖大致相同，可分為五個連續步驟：與噬菌體的增殖大致相同，可分為五個連續步驟：1）吸附）吸附 具高度專一性地吸附于敏感細胞表面的受體。具高度專一性地吸附于敏感細胞表面的受體。2）侵入）侵入 以胞飲、包膜溶入細胞膜、特異受體轉移等方以胞飲、包膜溶入細胞膜、特異受體轉移等方式侵入敏感細胞內。式侵入敏感細胞內。3）脫殼）脫殼 脫去衣殼和包膜。脫去衣殼和包膜。4）生物合成）生物合成 核酸的復制和蛋白質的合成。核酸的復制和蛋白質的合成。5）裝配和成熟）裝配和成熟 分別合成的核酸和蛋白質組合成完整的、分別合成的核酸和蛋白質組合成完整的、新的病毒粒子。新的病毒粒子。6）釋放大量有侵染性的子代

35、病毒。）釋放大量有侵染性的子代病毒。 多角體：多角體：多數昆蟲病毒可在宿主細胞內形成光多數昆蟲病毒可在宿主細胞內形成光鏡下呈多角形的包涵體。鏡下呈多角形的包涵體。 直徑一般直徑一般3m（0.510m），堿溶性蛋白，），堿溶性蛋白，內包裹數目不等的病毒粒，可在細胞核或細胞內包裹數目不等的病毒粒，可在細胞核或細胞質內形成。質內形成。功能：功能：保護病毒粒免受外界不良環境的破壞。保護病毒粒免受外界不良環境的破壞。（四）昆蟲病毒（四）昆蟲病毒（無脊椎動物病毒）（無脊椎動物病毒）已知昆蟲病毒已知昆蟲病毒1671種（種（1990），其中），其中80以上鱗以上鱗翅目昆蟲的病原體。翅目昆蟲的病原體。昆蟲病毒的

36、種類昆蟲病毒的種類除非包涵體病毒病毒外，可分為：除非包涵體病毒病毒外，可分為：核型多角體病毒核型多角體病毒(nuclear polyhedrosis virus,NPV)質型多角體病毒質型多角體病毒(cytoplasmic polyhedrosis virus,CPY)顆粒體病毒顆粒體病毒(granulosis virus,GV)昆蟲病毒做為生物農藥優點：昆蟲病毒做為生物農藥優點：專一性高專一性高毒力大毒力大 后效長后效長 使用方便使用方便對人畜安全對人畜安全 無公害無公害 缺點危害經濟動物缺點危害經濟動物1 1 1 類病毒類病毒(Viroid)擬病毒擬病毒(Virusoid)朊病毒朊病毒(P

37、rion)第二節第二節 亞亞 病病 毒毒只含核酸或蛋白質一種成分的分子病原體。只含核酸或蛋白質一種成分的分子病原體。 包括：包括：一、類病毒一、類病毒 v只含只含RNA一種成分，專性活細胞內寄生的分子病一種成分，專性活細胞內寄生的分子病原體。原體。v是寄生于高等生物細胞中一類最小的新的病原體。是寄生于高等生物細胞中一類最小的新的病原體。ssRNA，分子量約，分子量約5104Da12104Da，為已知，為已知最小病毒分子量的十分之一左右。最小病毒分子量的十分之一左右。v到目前為止，類病毒只在植物中被發現。類病毒到目前為止，類病毒只在植物中被發現。類病毒對各種化學和物理因子的作用都不敏感，對熱以對

38、各種化學和物理因子的作用都不敏感，對熱以及紫外光和離子輻射有高度抗性。及紫外光和離子輻射有高度抗性。類病毒類病毒(Viroid)馬鈴薯紡錘塊莖病的病原體馬鈴薯紡錘塊莖病的病原體長長50nm棒狀棒狀RNA分子分子179核苷酸半體核苷酸半體180核苷酸半體核苷酸半體RNA由由組成組成兩半體間有兩半體間有70堿基以氫鍵方堿基以氫鍵方 式結合共形成式結合共形成122個堿基對，個堿基對，27個內環。個內環。Viroid Diseases of PotatoViroid Diseases of Potato二、擬病毒二、擬病毒(virusoids，類類病毒，類類病毒)是包裹在動植物病毒粒子中的類病毒極其微

39、小，僅是包裹在動植物病毒粒子中的類病毒極其微小，僅由裸露的由裸露的RNA（300400個核苷酸）或個核苷酸）或DNA組成。組成。 輔助病毒：輔助病毒：類病毒類病毒“寄生寄生”的真病毒。的真病毒。擬病毒為輔助病毒的擬病毒為輔助病毒的“衛星衛星”，其復制必須依賴，其復制必須依賴輔助病毒的協助。擬病毒也可干擾輔助病毒的復輔助病毒的協助。擬病毒也可干擾輔助病毒的復制、減輕其對宿主的病害、用于生物防治中。制、減輕其對宿主的病害、用于生物防治中。v是一類不含核酸的侵染性蛋白質分子。是一類不含核酸的侵染性蛋白質分子。v小型蛋白質顆粒，分子量小型蛋白質顆粒，分子量3.31043.5104Da,約約由由250個氨基酸組成。個氨基酸組成。v能引起宿主體內現成的同類蛋白質分子發生與其相能引起宿主體內現成的同類蛋白質分子發生與其相似的構象變化而使宿主致病。似的構象變化而使宿主致病。v毒性很強，毒性很強，1g含朊病毒的鼠腦可感染含朊病毒的鼠腦可感染1億只小鼠。億只小鼠。三、朊病毒三、朊病毒引起的疾病引起的疾病羊搔癢病、瘋牛病、瘋羊病、克雅氏病。羊搔癢病、瘋牛病、瘋羊病、克雅氏病。朊病毒侵入人體大腦的過程朊病毒侵入人體大腦的過程借食物進入消化道，再經淋巴系統侵入大腦。借食物進入消化道，再經淋巴系統侵入大腦。 與真病毒的主要區別與真病毒的主