1、真真 菌菌真真 菌菌機(jī)體內(nèi)寄生機(jī)體內(nèi)寄生37含動(dòng)物蛋白含動(dòng)物蛋白培養(yǎng)基培養(yǎng)基 yeast沙保氏培養(yǎng)基沙保氏培養(yǎng)基2525普通培養(yǎng)基普通培養(yǎng)基2525 mold真菌真菌繁殖結(jié)構(gòu)繁殖結(jié)構(gòu)，一條菌絲可生成一條菌絲可生成 多個(gè)孢子多個(gè)孢子 孢孢 子子芽芽 胞胞作用作用真菌繁殖結(jié)構(gòu)真菌繁殖結(jié)構(gòu)細(xì)菌休眠結(jié)構(gòu)，細(xì)菌休眠結(jié)構(gòu)，抵御不良環(huán)境抵御不良環(huán)境低抗力低抗力 不強(qiáng)，加熱不強(qiáng)，加熱6070短時(shí)間即可死亡短時(shí)間即可死亡強(qiáng) ， 有 的 可 耐強(qiáng) ， 有 的 可 耐100數(shù)小時(shí)數(shù)小時(shí)分生孢子分生孢子葉狀孢子葉狀孢子孢子囊孢子孢子囊孢子芽生孢子芽生孢子厚膜孢子厚膜孢子關(guān)節(jié)孢子關(guān)節(jié)孢子大分生孢子大分生孢子小分生孢子小

2、分生孢子芽生孢子芽生孢子厚膜孢子厚膜孢子關(guān)節(jié)孢子關(guān)節(jié)孢子孢子囊孢子注意注意實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)臨床標(biāo)本臨床標(biāo)本直接檢查直接檢查檢測(cè)抗原檢測(cè)抗原直接鏡檢直接鏡檢固定標(biāo)固定標(biāo)本染色本染色墨汁負(fù)墨汁負(fù)染色法染色法KOH法法毛發(fā)毛發(fā)指甲指甲皮屑皮屑腦脊液腦脊液分離培養(yǎng)分離培養(yǎng)沙氏培養(yǎng)基沙氏培養(yǎng)基2537觀察菌落觀察菌落分子生物學(xué)檢測(cè)分子生物學(xué)檢測(cè)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)檢測(cè)抗體檢測(cè)抗體病理檢查病理檢查鏡檢、生化反應(yīng)鏡檢、生化反應(yīng)真菌的致病性真菌的基本特性：菌絲、孢子、培養(yǎng)特性標(biāo)本采集注意事項(xiàng)常用的檢查方法：顯微鏡檢查、分離培養(yǎng)、生化實(shí)驗(yàn)1.簡(jiǎn)述真菌的致病性特點(diǎn)。簡(jiǎn)述真菌的致病性特點(diǎn)。2.真菌標(biāo)本采集是有哪些注

3、意事項(xiàng)？真菌標(biāo)本采集是有哪些注意事項(xiàng)？3.形態(tài)學(xué)檢查和培養(yǎng)在真菌檢查中的意義。形態(tài)學(xué)檢查和培養(yǎng)在真菌檢查中的意義。（一）掌握毛癬菌屬、表皮癬菌屬和小孢子絲 菌生物學(xué)特性、微生物學(xué)檢驗(yàn)方法及鑒定。（二）熟悉淺部真菌感染的種類目的要求皮下組織感染真菌皮下組織感染真菌毛癬菌屬毛癬菌屬表皮癬菌屬表皮癬菌屬小孢子菌屬小孢子菌屬表面感染真菌表面感染真菌皮膚癬真菌皮膚癬真菌糠秕馬拉色菌 著色真菌孢子絲菌 位置：寄居于人體皮膚和毛干的最表層。因不接觸組織細(xì)胞，很少引起宿主細(xì)胞反應(yīng)。 嗜脂性酵母樣菌 代表：秕糠馬拉色菌(Malasseziafurfur) 癥狀：皮膚表面出現(xiàn)花斑癬（汗斑）1直接顯微鏡檢查直接顯微

4、鏡檢查可采用透明膠帶粘貼可采用透明膠帶粘貼取材法，將透明膠帶直接貼于皮膚表面，取材法，將透明膠帶直接貼于皮膚表面，數(shù)分鐘后揭下，直接貼于載玻片上鏡檢數(shù)分鐘后揭下，直接貼于載玻片上鏡檢或經(jīng)棉藍(lán)染色或革蘭染色后鏡檢。可見(jiàn)或經(jīng)棉藍(lán)染色或革蘭染色后鏡檢。可見(jiàn)孢子和菌絲。孢子為圓形或卵形，厚壁，孢子和菌絲。孢子為圓形或卵形，厚壁，芽頸較寬，常成簇分布；菌絲粗短，呈芽頸較寬，常成簇分布；菌絲粗短，呈臘腸樣。臘腸樣。2 2分離培養(yǎng)與鑒定分離培養(yǎng)與鑒定 毛癬菌屬（Trichophyton）屬半知菌亞門絲孢菌目叢梗孢菌科，有20余種，其中14種能引起人和動(dòng)物的感染。 臨床上常見(jiàn)的有 紅色毛癬菌(trichoph

5、yton rubrum) 須癬毛癬菌(T.mentagrophytes,又稱石膏樣毛癬菌) 許蘭毛癬菌(T.schoenleinii,又稱黃癬菌) 紫色毛癬菌（T.violaceum） 斷發(fā)毛癬菌（T.tonsurans）毛癬菌：菌落灰白、紅、橙或棕色毛癬菌：菌落灰白、紅、橙或棕色,表面呈絨毛狀、粉粒狀或蠟樣。表面呈絨毛狀、粉粒狀或蠟樣。大分生孢子細(xì)長(zhǎng)棒狀薄壁。菌絲有大分生孢子細(xì)長(zhǎng)棒狀薄壁。菌絲有螺旋狀、球拍狀、鹿角狀和結(jié)節(jié)狀螺旋狀、球拍狀、鹿角狀和結(jié)節(jié)狀1標(biāo)本采集標(biāo)本采集采集新發(fā)生的皮膚損害邊緣皮屑；指甲采集新發(fā)生的皮膚損害邊緣皮屑；指甲近尖端下面甲屑；拔取無(wú)光澤病發(fā)。近尖端下面甲屑；拔取無(wú)

6、光澤病發(fā)。2直接顯微鏡檢查直接顯微鏡檢查皮屑皮屑10%KOH液；指甲液；指甲25%KOH/25%NaOH處理處理鏡檢可見(jiàn)透明、有隔，常有分支的菌絲及成鏈的關(guān)節(jié)孢子。鏡檢可見(jiàn)透明、有隔，常有分支的菌絲及成鏈的關(guān)節(jié)孢子。皮膚癬菌感染的毛發(fā)皮膚癬菌感染的毛發(fā) 三.分離培養(yǎng) 標(biāo)本 70%乙醇或在青、鏈霉素混合液內(nèi)處理5min 生理鹽水洗3次 接種沙氏瓊脂斜面25培養(yǎng)觀察菌落特征。四.其他鑒定試驗(yàn) 毛發(fā)穿孔試驗(yàn) 脲酶試驗(yàn) 特殊營(yíng)養(yǎng)需要試驗(yàn) 將頭發(fā)發(fā)剪成lcm長(zhǎng)，置于已加入25ml蒸餾水和23滴10酵母浸膏液的平皿內(nèi)，高壓滅菌。將待檢皮膚真菌接種于平皿內(nèi)，置25孵育四周，每周檢查一次，每次取數(shù)根毛發(fā)置載玻

7、片上，經(jīng)乳酚棉藍(lán)染色后，置低倍鏡下觀察。若毛發(fā)有裂口或陷凹者為陽(yáng)性，否則為陰性。對(duì)對(duì)灰黃霉素、伊曲康唑灰黃霉素、伊曲康唑等藥物敏感。等藥物敏感。 表皮癬菌屬（Epidermophyton）目前只有一個(gè)種，即絮狀表皮癬菌（E.floccosum）, 能引起人類感染。 絮狀表皮癬菌是一種常見(jiàn)的皮膚癬菌，可引起皮膚感染如股癬、足癬、體癬、手癬和甲癬。 皮屑和甲屑經(jīng)+10%KOH液消化 鏡檢可見(jiàn)分枝斷裂的有隔菌絲，少見(jiàn)孢子 培養(yǎng)后，菌落初為白色鵝毛狀，以后轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色粉末狀。鏡下可見(jiàn)球拍狀菌絲、卵圓形或巨大棒狀薄壁大分生孢子，無(wú)小分生孢子，在陳舊培養(yǎng)物中可見(jiàn)厚膜孢子。表皮癬菌：菌落初為表皮癬菌：菌落初為

8、白色鵝毛狀白色鵝毛狀, ,以后變?yōu)橐院笞優(yōu)辄S綠色粉末狀。粗棒黃綠色粉末狀。粗棒狀薄壁大分生孢子。狀薄壁大分生孢子。菌絲球拍狀菌絲球拍狀 我國(guó)常見(jiàn)的有鐵銹色小孢子菌、石膏 樣小孢子菌和狗小孢子菌等。 小孢子菌屬感染皮膚和毛發(fā)，很少感 染甲。 皮屑和毛發(fā)+10%KOH處理 鏡檢，皮屑中有分枝斷裂菌絲，在毛發(fā)中呈現(xiàn)小孢子鑲嵌 的鞘包裹著發(fā)干。 在沙氏培養(yǎng)基中可見(jiàn)白色、棕黃色或黃褐 色、粉末或絨毛狀菌落。鏡下可見(jiàn)梳狀、球 拍狀或結(jié)節(jié)狀菌絲，卵圓形小分生孢子、厚 壁梭形（紡錘形）大分生孢子。小孢子癬菌：菌落為灰色、橘紅色或棕黃色，厚壁大分生孢子，菌絲有結(jié)節(jié)狀、梳狀和球拍狀毛癬菌屬表皮癬菌屬小孢子癬菌屬

9、主要有著色真菌和孢子絲菌 著色真菌感染發(fā)生在暴露部位，稱著色真菌病。卡氏枝孢霉和裴氏著色芽生菌。 申克孢子絲菌，屬腐生性真菌，常因外傷接觸帶菌的花草等引起感染。此菌可引起孢子絲菌下疳。此菌也可引起深部感染。是一種二相性真菌。分生孢子：分生孢子：樹(shù)枝型、樹(shù)枝型、劍頂型、劍頂型、花瓶型：花瓶型：多發(fā)生四肢暴露部位，開(kāi)始為小丘疹，表面干多發(fā)生四肢暴露部位，開(kāi)始為小丘疹，表面干燥或濕潤(rùn)，有鱗屑或鱗痂，逐漸形成斑塊結(jié)節(jié)，燥或濕潤(rùn)，有鱗屑或鱗痂，逐漸形成斑塊結(jié)節(jié)，呈疣狀增殖。呈疣狀增殖。直接顯微鏡檢查直接顯微鏡檢查：?jiǎn)蝹€(gè)或成群厚壁孢子，有橫隔單個(gè)或成群厚壁孢子，有橫隔或中間十字分隔。或中間十字分隔。培養(yǎng)：

10、培養(yǎng)：沙氏培養(yǎng)基，生長(zhǎng)緩慢，菌落從灰黑色至沙氏培養(yǎng)基，生長(zhǎng)緩慢，菌落從灰黑色至黑色，有氣生菌絲。菌落涂片鏡檢可見(jiàn)三種類型黑色，有氣生菌絲。菌落涂片鏡檢可見(jiàn)三種類型的分生孢子，有鑒定價(jià)值。的分生孢子，有鑒定價(jià)值。生化反應(yīng)生化反應(yīng)：不能水解淀粉，不凝固牛奶，能同：不能水解淀粉，不凝固牛奶，能同化硝酸鹽，需維生素化硝酸鹽，需維生素B1。對(duì)對(duì)5-FC、伊曲康唑、氟康唑、伊曲康唑、氟康唑敏感，易產(chǎn)生耐藥性敏感，易產(chǎn)生耐藥性傳染源：人和動(dòng)物傳染源：人和動(dòng)物傳播途徑：經(jīng)破損傳播途徑：經(jīng)破損皮膚接觸感染。皮膚接觸感染。二相性真菌。二相性真菌。(1)直接顯微鏡檢查：卵圓形的孢子。直接顯微鏡檢查：卵圓形的孢子。(

11、2)、分離培養(yǎng)與鑒定：將標(biāo)本接種于沙、分離培養(yǎng)與鑒定：將標(biāo)本接種于沙氏培養(yǎng)基上氏培養(yǎng)基上25培養(yǎng)，培養(yǎng)，2-3d開(kāi)始生長(zhǎng)，開(kāi)始生長(zhǎng)，初為白色濕潤(rùn)的酵母型菌落，以后變?yōu)槌鯙榘咨珴駶?rùn)的酵母型菌落，以后變?yōu)榈Х壬辽詈稚５Х壬辽詈稚?7培養(yǎng)培養(yǎng)2-3d，可，可形成乳白色或淡褐色酵母型菌落。形成乳白色或淡褐色酵母型菌落。（3）、對(duì)）、對(duì)碘化鉀、伊曲康唑、特比萘芬碘化鉀、伊曲康唑、特比萘芬等藥物敏感。等藥物敏感。 腳氣是一種常見(jiàn)的真菌感染性皮膚病。 多見(jiàn)于趾間,足底及足緣,有深在性水皰,糜爛及鱗屑,伴有瘙癢等癥狀.多見(jiàn)于成人,夏秋重,冬春輕,足多汗及常穿膠鞋者易患本病 主要致病菌為紅色毛癬菌、

12、石膏樣毛癬菌和絮狀表皮癬菌。 醫(yī)學(xué)上通常將腳氣分三型：糜爛型、水皰型、角化型 本病是由皮膚癬菌所引起的。足部多汗潮濕或鞋襪不通氣等都可誘發(fā)本病。皮膚癬菌常通過(guò)污染的澡堂、游泳池邊的地板、浴巾、公用拖鞋、洗腳盆而傳染。 1要保持腳的清潔干燥，勤換鞋襪，鞋子要通氣良好。 2不要用別人的拖鞋、浴巾、擦布等，不要在澡堂、游泳池旁的污水中行走。 3公用澡堂、游泳池要做到污水經(jīng)常處理，以防相互傳染。 灰黃霉素、伊曲康唑灰黃霉素、伊曲康唑 派瑞松:曲安奈德益康唑乳膏 達(dá)克寧:硝酸咪康唑軟膏（一）掌握深部感染真菌概念、分類、檢驗(yàn)程序；掌握假絲酵母、隱球菌、卡氏肺孢菌微生物學(xué)特性、檢驗(yàn)方法及鑒定要點(diǎn)。（二）熟悉

13、莢膜組織胞漿菌孢子鑒別要點(diǎn)。（三）了解抗真菌藥物分類及臨床應(yīng)用。目的要求目的要求（一）假絲酵母菌屬：分類、臨床意義、生物學(xué)特性、微生物學(xué)檢驗(yàn)。（二）隱球菌屬；分類、臨床意義、生物學(xué)特性、微生物學(xué)檢驗(yàn)。（三）曲霉菌屬：分類、臨床意義、生物學(xué)特性、微生物學(xué)檢驗(yàn)。（四）組織胞漿菌屬：分類、臨床意義、生物學(xué)特性、微生物學(xué)檢驗(yàn)。（五）卡氏肺孢菌：分類、臨床意義、生物學(xué)特性、微生物學(xué)檢驗(yàn)。 教學(xué)內(nèi)容教學(xué)內(nèi)容條件致病：皮膚粘膜感染鵝口瘡，陰道炎內(nèi)臟感染：肺炎、關(guān)節(jié)炎、膀胱炎，腎盂腎炎中樞神經(jīng)感染：腦膜（腦）炎、腦膿腫新生隱球菌（墨汁負(fù)染色）新生隱球菌（墨汁負(fù)染色） 新生隱球菌菌落新生隱球菌菌落w病原性隱球菌

14、在病原性隱球菌在2525和和3737生長(zhǎng)，而非病生長(zhǎng)，而非病原性隱球菌在原性隱球菌在3737時(shí)不生長(zhǎng)。培養(yǎng)時(shí)不生長(zhǎng)。培養(yǎng)25d25d后后觀察觀察菌落形態(tài)特點(diǎn)菌落形態(tài)特點(diǎn)，并取菌落作印度墨汁負(fù)，并取菌落作印度墨汁負(fù)染色鏡檢。染色鏡檢。曲霉結(jié)構(gòu)圖曲霉結(jié)構(gòu)圖曲霉菌曲霉菌返回返回?zé)熐咕錈熐?光鏡 X400黃曲霉菌落黃曲霉,光鏡 X200 黑曲霉菌落 黑曲霉,光鏡 X200土曲霉菌落 土曲霉，光鏡 X200 構(gòu)巢曲霉菌落 構(gòu)巢曲霉,光鏡 X400雜色曲霉菌落雜色曲霉,光鏡 X400返回返回 莢膜組織胞漿菌菌落為棉絮狀，鏡檢可見(jiàn)細(xì)長(zhǎng)有莢膜組織胞漿菌菌落為棉絮狀，鏡檢可見(jiàn)細(xì)長(zhǎng)有隔菌絲，菌絲側(cè)面或孢子柄

15、上長(zhǎng)有特殊的圓形大隔菌絲，菌絲側(cè)面或孢子柄上長(zhǎng)有特殊的圓形大分生孢子，厚壁，四周有棘突，排列如齒輪。血分生孢子，厚壁，四周有棘突，排列如齒輪。血液標(biāo)本油鏡下鏡檢可見(jiàn)在中性粒細(xì)胞或單核細(xì)胞液標(biāo)本油鏡下鏡檢可見(jiàn)在中性粒細(xì)胞或單核細(xì)胞中有卵圓形或圓形的酵母細(xì)胞中有卵圓形或圓形的酵母細(xì)胞毛霉科毛霉科根霉屬根霉屬犁頭霉屬犁頭霉屬毛霉屬毛霉屬根毛霉屬根毛霉屬少根根霉少根根霉米根霉米根霉毛霉毛霉 根霉根霉 梨頭霉梨頭霉 馬內(nèi)菲青霉 菌絲相棕紅色蠟棕紅色蠟樣、褶皺，樣、褶皺，白色絨毛白色絨毛樣菌絲，樣菌絲，菌落周圍菌落周圍培養(yǎng)基背培養(yǎng)基背面變?yōu)榧t面變?yōu)榧t葡萄酒色葡萄酒色馬內(nèi)菲青霉 酵母相腦回樣腦回樣皺褶，皺褶，淺灰褐淺灰褐色、濕色、濕潤(rùn)的菌潤(rùn)的菌落落假絲酵母菌隱球菌曲霉菌組織胞漿菌卡氏肺孢菌毛霉目真菌馬內(nèi)菲青霉菌鐮刀菌深部