1、單元質(zhì)量評(píng)估（一）（專題 1）（90 分鐘100分）一、選擇題（共 20 小題,每小題 2.5 分,共 50 分）1.（2019 邢臺(tái)高二檢測）基因工程是 DNA 分子水平的操作，下列有關(guān)基 因工程的敘述中，錯(cuò)誤的是（）A. 限制酶只用于切割獲取目的基因B. 載體與目的基因必須用同種限制酶處理C. 基因工程所用的工具酶是限制酶、DNA 連接酶D. 帶有目的基因的載體是否進(jìn)入受體細(xì)胞需檢測【解析】選人在基因工程中獲取目的基因和構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程 中都需要限制酶的參與。2.下列黏性末端屬于同一種限制酶切割而成的是（）TCG1CA2：I.A-ATTY3AGCTT4【解析】選 Bo 經(jīng)同一種限制酶

2、切割產(chǎn)生的 DNA 片段末端堿基能互補(bǔ)配 對,所以是由同一種限制酶切割產(chǎn)生的?！狙a(bǔ)償訓(xùn)練】在基因工程中使用的限制性核酸內(nèi)切酶，其作用是（）A.B.C.D.A. 將目的基因從染色體上切割出來B. 識(shí)別并切割特定的 DNA 核苷酸序列C. 將目的基因與載體結(jié)合D. 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞【解析】選 B。限制性核酸內(nèi)切酶可以識(shí)別并切割特定的核苷酸序列。3. 要使目的基因與對應(yīng)的載體重組 , 所需的兩種酶是 ( )1限制酶 連接酶 解旋酶 還原酶A. B.C.D.【解析】選 A。目的基因與對應(yīng)的載體結(jié)合起來的過程是： 先用限制酶分別處理目的基因和載體 , 使之露出相同的黏性末端 ; 將切下的目的基 因

3、的片段插入載體切口處，再用 DNA 連接酶將處理好的目的基因和載體 的黏性末端接好 , 就完成了基因的重組。4. (2019 無錫高二檢測)利用 PCR 技術(shù)從某種生物的基因組 DNA 中獲 取目的基因。下列有關(guān)這一過程的說法錯(cuò)誤的是 ( )A. 有目的基因的 DNA 片段，作為模板進(jìn)行復(fù)制B. 有一段已知目的基因的核苷酸序列 , 以便根據(jù)這一序列合成兩種引物C. 有足夠的脫氧核苷酸作為原料D. 加入足夠數(shù)量的 DNA 連接酶進(jìn)行指數(shù)式擴(kuò)增【解析】選 Db PCF 技術(shù)可以在體外進(jìn)行 DNA 的復(fù)制過程,需要 DNA 復(fù) 制所需的條件：酶、模板、原料 , 同時(shí)還需要引物。在這一過程中所需 的酶

4、為耐高溫的 DNA 聚合酶,而不是 DNA 連接酶?！狙a(bǔ)償訓(xùn)練】多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR 技術(shù))是體外酶促反應(yīng)合成特異 DNA片段的一種方法，由高溫變性、低溫復(fù)性及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一 個(gè)周期，循環(huán)進(jìn)行,使目的 DNA 得以迅速擴(kuò)增，其簡要過程如下圖所示 下列關(guān)于PCF 技術(shù)敘述不正確的是（）A. PCR 技術(shù)是在實(shí)驗(yàn)室中以少量 DNA 制備大量 DNA 勺技術(shù)B. 反應(yīng)中新合成的 DNA 又可以作為下一輪反應(yīng)的模板C. PCF 技術(shù)中以核糖核苷酸為原料，以指數(shù)方式擴(kuò)增D. 應(yīng)用 PCF 技術(shù)與探針雜交技術(shù)可以檢測基因突變【解析】 選 Co PCF 技術(shù)是人工合成 DNA 勺方法,原料是脫氧

5、核苷酸，而 不是核糖核苷酸。5. （2019 南京高二檢測）下列對基因工程的敘述,正確的是（）A. 基因工程必須使用的工具酶是限制酶、 DNA 連接酶和 RNA 聚合酶B. 基因工程的核心步驟是將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞C. 載體上的標(biāo)記基因可用于檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞D. 目的基因是否表達(dá)可通過 DNA 分子雜交技術(shù)來檢測【解析】選 C?；蚬こ瘫仨毷褂玫墓ぞ呙甘窍拗泼?、DNA 連接酶,A錯(cuò)誤；基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建,B 錯(cuò)誤；標(biāo)記基因可 用于檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞,C 正確；目的基因是否表達(dá)可通 過抗原-抗體雜交實(shí)驗(yàn)來檢測，D 錯(cuò)誤。6. 在基因工程技術(shù)中，下列方法

6、與目的基因獲得無關(guān)的是（）A. 輻射誘變法B. 基因文庫法C. 反轉(zhuǎn)錄法D. 人工合成法【解析】選 A。輻射誘變法只能使細(xì)胞內(nèi)的基因發(fā)生突變，并不能將特 定的基因從生物體內(nèi)分離出來，因此不是獲取目的基因的方法。7.（2019 石家莊咼二檢測）下圖是四種不同質(zhì)粒的示意圖，其中 ori 為 復(fù)制必需的序列，amp 為氨芐青霉素抗性基因，tet 為四環(huán)素抗性基因，箭頭表示同一種限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)。下列有關(guān)敘述正確的是（）A. 基因 amp 和 tet 是一對等位基因，常作為基因工程中的標(biāo)記基因B. 質(zhì)粒包括細(xì)菌細(xì)胞中能自我復(fù)制的小型環(huán)狀的 DNA 和病毒中的 DNAC. 限制性核酸內(nèi)切酶的作

7、用部位是 DNA 分子中特定的兩個(gè)核苷酸之間 的氫鍵D. 用質(zhì)粒 4 將目的基因?qū)氪竽c桿菌，該菌不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上 生長【解析】選 D。質(zhì)粒上不含等位基因；質(zhì)粒是獨(dú)立于細(xì)菌擬核 DNA 之外 能夠自主復(fù)制的很小的環(huán)狀 DNA 分子；限制性核酸內(nèi)切酶的作用部位是 DNA分子中特定的兩個(gè)相鄰核苷酸之間的磷酸二酯鍵，而不是氫鍵。8.科學(xué)家在培育抗蟲棉時(shí)，經(jīng)過了許多復(fù)雜的過程和不懈的努力，才獲 得成功。起初把蘇云金芽孢桿菌的抗蟲基因插入載體質(zhì)粒中，然后導(dǎo)入A. B.棉花的受精卵中 , 結(jié)果抗蟲基因在棉花體內(nèi)沒有表達(dá)。 然后在插入抗蟲 基因的質(zhì)粒中插入啟動(dòng)子 ( 抗蟲基因首端 ), 導(dǎo)入棉花受精

8、卵 , 長成的棉 花植株還是沒有抗蟲能力?？茖W(xué)家又在有啟動(dòng)子、抗蟲基因的質(zhì)粒中 插入終止子( 抗蟲基因末端 ), 導(dǎo)入棉花受精卵 , 結(jié)果長成的植株有抗蟲 能力。由以上過程推知 , 作為重組載體應(yīng)具備的結(jié)構(gòu)是( )A. 目的基因、啟動(dòng)子B. 目的基因、終止子C. 啟動(dòng)子、終止子D. 目的基因、啟動(dòng)子、終止子【解析】選 D?；虮磉_(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的基本步驟也是核心，其目的是使目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在 , 并可以遺傳給下一代 , 同 時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用?；虮磉_(dá)載體包含目的基因、啟 動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因 , 材料中體現(xiàn)的結(jié)構(gòu)包括目的基因、啟動(dòng)子、 終止子。9. 目的基因?qū)?/p>

9、受體細(xì)胞后 , 是否可以穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳特性 , 只 有通過鑒定與檢測才能知道。 下列屬于目的基因檢測和鑒定的是 ( )1檢測受體細(xì)胞中是否有目的基因2檢測受體細(xì)胞中是否有致病基因3檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了 mRNA4檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)【解析】選 G 檢測受體細(xì)胞中是否有目的基因以及目的基因是否轉(zhuǎn)錄 出了C.D.mRN/和翻譯成蛋白質(zhì)都屬于目的基因檢測和鑒定的內(nèi)容。10. 人們試圖利用基因工程的方法，用乙生物生產(chǎn)甲生物的一種蛋白 質(zhì)。生產(chǎn)流程是：甲生物的蛋白質(zhì)-mRNA 目的基因 與質(zhì)粒重組、 導(dǎo)入乙生物細(xì)胞 -獲得甲生物的蛋白質(zhì)。下列說法正確的是()A. 過程需要的酶是反轉(zhuǎn)錄酶

10、，原料是 A、U G CB. 要用限制性核酸內(nèi)切酶切割質(zhì)粒，再用 DNA 連接酶將目的基因與質(zhì) 粒連接在一起C. 如果受體細(xì)胞是動(dòng)物細(xì)胞，過程可用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法D. 過程中用的原料不含有 A、U、G C【解析】選 Bo 甲生物的 mRN 經(jīng)過程合成目的基因?yàn)榉崔D(zhuǎn)錄，需反轉(zhuǎn) 錄酶,原料是 A、T、G C;為基因表達(dá)載體的構(gòu)建，需用限制性核酸內(nèi) 切酶切割質(zhì)粒，再用 DNA 連接酶將目的基因與質(zhì)粒連接在一起；如果受 體細(xì)胞是動(dòng)物細(xì)胞，過程可用顯微注射法；過程為目的基因的表達(dá) 需要的原料含有 A、U G G11. 科研人員現(xiàn)已獲得 H5N1 禽流感病毒的抗體，其中一多肽鏈片段為“-甲硫氨酸-脯氨酸-蘇氨

11、酸-甘氨酸-纈氨酸-”,相應(yīng)密碼子分別為：甲硫氨酸(AUG)、脯氨酸(CCU CCC CCA)蘇氨酸(ACU ACC ACA) 甘氨酸(GGU GGA GGG)纈氨酸(GUU GUC GUA。 由該多肽鏈人工 合成的相應(yīng) DNA片段如下圖所示：T A C G G G T G GC(:匚匚AT T I I I! I I I I I I I I I I IT G(/ C N匚(J Ci fi (1召T八廠釘卜卜根據(jù)以上材料，下列敘述正確的是()A. 該 DNA 片段可能取自禽流感病毒的質(zhì)粒B. 在基因工程中，限制酶作用于處，DNA 連接酶作用于處C. 該 DNA 片段轉(zhuǎn)錄的模板是B鏈D. 若該 D

12、NA 片段最右側(cè)堿基對 T/ A 被G/C 替換,不會(huì)引起性狀的改變【解析】選 B 本題綜合考查基因工程、密碼子、基因突變等相關(guān)知識(shí) 點(diǎn)。禽流感病毒沒有質(zhì)粒，是 RNA 病毒,而且該片段為人工合成的相應(yīng) DNA 故A 錯(cuò)；限制酶和 DNA1接酶都作用于處，故 B 錯(cuò)；由甲硫氨酸的 密碼子是 AUG 可知 ,該 DNA 片段轉(zhuǎn)錄的模板是a鏈，故 C 錯(cuò)；若該 DNA 片 段最右側(cè)堿基對 T/ A 被G/C 替換，則突變后，密碼子由 GUA 變?yōu)?GUC, 但所翻譯的氨基酸都是纈氨酸(GUU GUC GUA)故 D 正確。12. 關(guān)于目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的描述，不正確的是()A. 基因槍法導(dǎo)入植物

13、體細(xì)胞的方法最常用，比較經(jīng)濟(jì)有效B. 顯微注射技術(shù)是轉(zhuǎn)基因動(dòng)物中采用最多的方法C. 大腸桿菌最常用的轉(zhuǎn)化方法是：使細(xì)胞的生理狀態(tài)發(fā)生改變D. 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞最常用的方法【解析】選人基因工程中根據(jù)受體細(xì)胞的不同選取的目的基因?qū)敕?法也不同，常用的將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞中的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最常用的方法是顯微注射技術(shù)；將目的基因?qū)爰?xì)菌的方法是鈣離子處理法。13. (2019 西安高二檢測)下列關(guān)于目的基因的檢測與鑒定的敘述,錯(cuò) 誤的是( )A. 目的基因在真核細(xì)胞中能否穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是目的基因是否插入質(zhì)粒 DNA 中B. 檢測受體細(xì)胞是否含有目的基

14、因及其是否成功轉(zhuǎn)錄的方法都是分子 雜交法C. 目的基因的鑒定可以在個(gè)體水平上進(jìn)行D. 如在受體細(xì)胞內(nèi)檢測到目的基因表達(dá)的蛋白質(zhì)，可確定目的基因首端含有啟動(dòng)子【解析】選人目的基因在真核細(xì)胞中能否穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是目的基因 是否插入到核 DNA 中;檢測目的基因是否導(dǎo)入用的方法是 DNA 分子雜交 法，檢測是否轉(zhuǎn)錄出 mRNA 用的是 DNA-RNA 分子雜交法;檢測目的基因 是否表達(dá)可以用抗原 -抗體分子雜交法 ,也可以觀察個(gè)體是否表現(xiàn)目的 性狀; 目的基因能成功表達(dá) , 說明其首端含有啟動(dòng)子。14. 科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞 核中 ,經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠 ,

15、其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長 激素并分泌到尿液中 , 在醫(yī)學(xué)研究及相關(guān)疾病治療方面都具有重要意 義。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( )A. 選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因?yàn)檫@種細(xì)胞具有全能性B. 采用 DNA 分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)C. 人的生長激素基因能在小鼠細(xì)胞內(nèi)表達(dá) , 說明遺傳密碼在不同種生 物中可以通用D. 將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植（克?。?可以獲得多個(gè)具有外源基 因的后代【解析】選 B。受精卵的全能性最高；采用 DNA 分子雜交技術(shù)可檢測受 體細(xì)胞是否含有目的基因 ; 人的生長激素基因能在小鼠細(xì)胞內(nèi)表達(dá) , 說 明生物共用一套遺傳密碼；通過克隆得到的

16、后代所含遺傳物質(zhì)相同。15. （2019 石家莊高二檢測）關(guān)于基因工程應(yīng)用的敘述,正確的是（）A .基因治療就是把缺陷基因誘變成正?；駼. 基因診斷的基本原理是 DNA 分子雜交C. 一種基因探針能檢測水體中的各種病毒D. 原核生物的基因不能用來進(jìn)行真核生物的遺傳改良【解析】選 B?；蛑委熓窍蚓哂腥毕莼虻募?xì)胞內(nèi)導(dǎo)入正常基因，利 用正?；虻谋磉_(dá)使細(xì)胞功能恢復(fù)正常 ,A 項(xiàng)錯(cuò)誤；基因診斷是對基因 探針的利用，原理是DNA分子雜交,B項(xiàng)正確；一種基因探針只能檢測一 種DNA,C項(xiàng)錯(cuò)誤；由于不同細(xì)胞內(nèi) DNA 分子結(jié)構(gòu)都相同，基因表達(dá)的過 程都遵循中心法則 , 因此原核細(xì)胞的基因也可以用于改造

17、真核生物的 遺傳性狀 ,D 項(xiàng)錯(cuò)誤。16. 基因工程中 , 需使用特定的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒 , 便于重組和篩選。已知限制酶I的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)是一6 GATC,限制酶H的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)是一GAT。 根據(jù)圖示判斷下列操作正確的 是（ ）GCiATCf目的碁圍dATCLLIJJ1111LLLILLLLL Lm（j.EtiLGWICE tUGcac n誕示兩種鼻促基囲.。表示限制商位脅的像刖序列秋大A. 目的基因和質(zhì)粒均用限制酶H切割B. 目的基因和質(zhì)粒均用限制酶I切割C. 質(zhì)粒用限制酶H切割，目的基因用限制酶I切割D. 質(zhì)粒用限制酶I切割，目的基因用限制酶H切割【解析】選 D 解答本題

18、要遵循一個(gè)原則：不能同時(shí)將兩個(gè)標(biāo)記基因切 開,至少保留一個(gè)，所以只能用限制酶I切割質(zhì)粒，而從目的基因右側(cè) 堿基序列可知只能用限制酶H切割目的基因才能得到含有目的基因的DNA 片 段。17. 科學(xué)家為提高玉米中賴氨酸含量，計(jì)劃將天冬氨酸激酶的第 352 位 的蘇氨酸變成異亮氨酸，將二氫吡啶二羧酸合成酶中 104 位的氨基酸由 天冬酰胺變成異亮氨酸，就可以使玉米葉片和種子中的游離賴氨酸含 量分別提高 5 倍和 2 倍。下列對蛋白質(zhì)的改造，操作正確的是（）A. 直接通過分子水平改造蛋白質(zhì)B. 直接改造相應(yīng)的 mRNAC. 對相應(yīng)的基因進(jìn)行操作D. 重新合成新的基因【解析】選 C。蛋白質(zhì)工程的目的是對

19、蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，從而使蛋白質(zhì) 功能可以滿足人們的需求。蛋白質(zhì)功能與其高級(jí)結(jié)構(gòu)密切相關(guān)，蛋白質(zhì) 高級(jí)結(jié)構(gòu)又非常復(fù)雜，所以直接對蛋白質(zhì)改造非常困難，而蛋白質(zhì)是由 基因控制合成的，對基因進(jìn)行操作卻容易得多。另外，改造后的基因可 以遺傳, 如對蛋白質(zhì)直接改造 , 即使成功也不能遺傳。【誤區(qū)警示】 蛋白質(zhì)工程的目的是根據(jù)人們對蛋白質(zhì)特定功能的需要 , 而對蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行分子設(shè)計(jì) , 但不是直接對蛋白質(zhì)進(jìn)行改造 , 歸根到 底, 還需對相應(yīng)基因進(jìn)行操作 , 按要求進(jìn)行修飾、加工、改造 , 使之能控 制合成人類所需要的蛋白質(zhì)。18. 未來基因工程的發(fā)展非常迅猛,科學(xué)家可以用 DNA 探針和外源基因 導(dǎo)入的方

20、法進(jìn)行遺傳病的診斷和治療 , 下列做法不正確的是 ( )A. 用 DNA 探針檢測鐮刀型細(xì)胞貧血癥B. 用 DNA 探針檢測病毒性肝炎C. 用導(dǎo)入外源基因的方法治療鐮刀型細(xì)胞貧血癥D. 用基因替換的方法治療 21 三體綜合征【解題指南】 解答本題有兩個(gè)關(guān)鍵：(1) DNA 探針技術(shù)應(yīng)用的是堿基互補(bǔ)配對規(guī)律 , 只能檢測相同 ( 互補(bǔ))序 列的存在。(2) 明確各種常見病的發(fā)病原因 , 如 21 三體綜合征是由于 21 號(hào)染色體 多一條導(dǎo)致的?！窘馕觥窟x D。21 三體綜合征是染色體數(shù)目變異，多了一條染色體，導(dǎo) 入外源基因只能治療某種基因異常引起的疾病。19. 通過質(zhì)粒將人腺苷酸脫氨酶基因?qū)氪?/p>

21、腸桿菌并成功表達(dá)腺苷酸 脫氨酶。下列敘述正確的是 ( 多選) ( )A. 每個(gè)大腸桿菌細(xì)胞至少含一個(gè)重組質(zhì)粒B. 每個(gè)重組質(zhì)粒至少含一個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)C. 每個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)至少插入一個(gè)腺苷酸脫氨酶基因D. 成功的轉(zhuǎn)基因大腸桿菌中的腺苷酸脫氨酶基因至少表達(dá)一個(gè)腺苷酸 脫氨酶分子【解析】選 A、B、B 基因控制著蛋白質(zhì)的合成，大腸桿菌能夠表達(dá)出 腺苷酸脫氨酶，說明大腸桿菌內(nèi)一定含有重組質(zhì)粒,A 項(xiàng)正確;構(gòu)建重組 質(zhì)粒時(shí)要對質(zhì)粒進(jìn)行切割，因此質(zhì)粒應(yīng)該有一個(gè)或多個(gè)限制酶切割位 點(diǎn),以便和目的基因結(jié)合,B 項(xiàng)正確；重組質(zhì)粒中只要插入一個(gè)完整的目 的基因就可以，并不一定每個(gè)限制酶切割

22、位點(diǎn)都插入目的基因,C 項(xiàng)錯(cuò)誤；轉(zhuǎn)基因的成功在于受體細(xì)胞內(nèi)能表達(dá)出目的基因控制的蛋白質(zhì)，D正確。20.下圖是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人胰島素的操作過程示意圖，有關(guān)說法正確的是（多選）（）人尺島泌JA*A_廠大StFSBC叮0 0）卄人|1島盍A. 催化過程的酶是反轉(zhuǎn)錄酶，過程利用 PCF 技術(shù)B. B 上的抗性基因有利于篩選含重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞C. 催化過程的 DNA 連接酶的作用是促使堿基之間形成氫鍵D. 過程一般是在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行的【解析】選 A、B、0 由 mRN 合成 DNA 的過程是由反轉(zhuǎn)錄酶催化，人工 大量合成 DNA 利用的是 PCF 技術(shù),因此 A 項(xiàng)正確;質(zhì)粒上的抗性基因作 為

23、標(biāo)記基因，其作用是用來檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞,B 項(xiàng)正確; 形成重組質(zhì)粒的過程利用 DNA 連接酶,其作用是連接磷酸二酯鍵,C 項(xiàng)錯(cuò)誤；培養(yǎng)大腸桿菌使其快速繁殖一般利用液體培養(yǎng)基，D 項(xiàng)正確 二、非選擇題（共 6 小題，共 50 分）21. （6 分） （2019 四川高考節(jié)選）將蘇云金桿菌 Bt 蛋白的基因?qū)朊藁?xì)胞中，可獲得抗棉鈴蟲的轉(zhuǎn)基因棉，其過程如下圖所示（注：農(nóng)桿菌中Ti 質(zhì)粒上只有 T-DNA 片段能轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞中）（1）過程需用同種 _ 酶對含 Bt 基因的 DNA 和 Ti 質(zhì)粒進(jìn)行酶切（2）過程中將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)，旨在讓_ 進(jìn)入棉花細(xì)胞；除盡農(nóng)桿菌后

24、，還須轉(zhuǎn)接到含卡那霉素的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)是_O（3）檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因棉的抗蟲性狀，常用方法是_。種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉能減少_ 的使用，以減輕環(huán)境污染。【解題指南】（1）題干關(guān)鍵信息：只有 T-DNA 片段能轉(zhuǎn)移，“ Bt ”代表“Bt 基因”，“Km”代表“卡那霉素抗性基因”。（2）關(guān)鍵知識(shí)：基因工程?！窘馕觥勘绢}考查基因工程工具酶、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的原理、目的基因的檢測與鑒定。（1）過程需用同種限制性核酸內(nèi)切酶對含Bt 基因的Ti質(zhì)粒頊用li戰(zhàn)粒搞花如I胞鹽仿分化解戰(zhàn)的界試管苗質(zhì)粒申-nr挖表”旳基S/-Km*代表咔那索性基因”）DNA 和 Ti 質(zhì)粒進(jìn)行酶切，以產(chǎn)生相同的黏性末端，有利于連接。（2）過程

25、中將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)，旨在讓 T-DNA 進(jìn)入棉花細(xì)胞,實(shí)現(xiàn)目的基因的轉(zhuǎn)移；除盡農(nóng)桿菌后，還須轉(zhuǎn)接到含卡那霉素的培養(yǎng)基 上繼續(xù)培養(yǎng)，目的是篩選獲得 T-DNA 片段的植物細(xì)胞進(jìn)行植物組織培 養(yǎng)。（3）檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因棉的抗蟲性狀，常用方法是投放棉鈴蟲，使其食用看 效果。種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉能減少農(nóng)藥的使用，以減輕環(huán)境污染。答案：（1）限制性核酸內(nèi)切T-DNA 篩選獲得 T-DNA 片段的植物細(xì)胞（3）投放棉鈴蟲農(nóng)藥22. （8 分）（2019 臺(tái)州高二檢測）浙江大學(xué)農(nóng)學(xué)院喻景權(quán)教授課題組研究發(fā)現(xiàn)，一種植物激素油菜素內(nèi)酯能促進(jìn)農(nóng)藥在植物體內(nèi)的降解 和代謝。用油菜素內(nèi)酯處理后，許多參與農(nóng)藥降解

26、的基因（如 P450 基因 和紅霉素抗性基因）表達(dá)和酶活性都得到提高，在這些基因“指導(dǎo)”下 合成的蛋白酶能把農(nóng)藥逐漸轉(zhuǎn)化為水溶性物質(zhì)或低毒甚至無毒物質(zhì)，有的則被直接排出體外。某課題組進(jìn)一步進(jìn)行了如下的實(shí)驗(yàn)操作，請回 答下列問題。（1）獲得油菜素內(nèi)酯合成酶基因的方法有 _、_ 。步驟用 PCF 技術(shù)擴(kuò)增基因時(shí)用到的耐高溫酶通常是指 _。（2）導(dǎo)入重組質(zhì)粒 2 以后,往往還需要進(jìn)行檢測和篩選，可用_ 制成探針,檢測是否導(dǎo)入了重組基因，在培養(yǎng)基中加入_ 可將含有目的u丸I基因含農(nóng)藥的 廣土壤樣品無我藥的土壤樣品基因的細(xì)胞篩選出來。（3）請你為該課題命【解析】（1）進(jìn)行基因工程操作時(shí)，首先要獲取目的基

27、因，其方法有多種：從基因文庫中獲取、人工合成目的基因或PCF 合成等。（2）檢測受體細(xì)胞中是否導(dǎo)入了目的基因一般用 DNA 分子雜交技術(shù)，而對導(dǎo)入重組 質(zhì)粒的受體細(xì)胞進(jìn)行篩選時(shí)所用的方法是選擇培養(yǎng)，根據(jù)題目中圖示內(nèi)容重組質(zhì)粒中含有紅霉素抗性基因，因此選擇培養(yǎng)時(shí)選用含紅霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。（3）從圖中可以看出，最終通過對照實(shí)驗(yàn)來檢驗(yàn)轉(zhuǎn) 基因細(xì)菌對土壤中農(nóng)藥的分解能力。答案：（1）從基因文庫中獲取 人工合成目的基因或 PCR 合成 耐熱的DNA 聚合酶（2）紅霉素抗性基因紅霉素（3）油菜素內(nèi)酯能否促進(jìn)土壤中農(nóng)藥的分解23. （8 分）下圖表示從蘇云金芽孢桿菌中獲取抗蟲基因（簡稱 Bt 基因）培育

28、轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的圖解?；蜇畯?的豎 g 上嚴(yán).轉(zhuǎn)基因抗蛹原毒盍亠 蛋白酶話與昆蟲腸匕磴細(xì)胞隕雛響昆晶悴餐白）fft的毒性上的特顯性射結(jié)每蟲生長請回答：（1）圖中 a 過程要用到的酶是_ 。（2）在進(jìn)行圖中 b 過程時(shí)，由我國科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)的十分簡便經(jīng)濟(jì)的方法是_此外,也通常采用_ 法。(3) 為確定抗蟲棉是否培育成功，既要用放射性同位素標(biāo)記的_作探針進(jìn)行分子雜交測試，又要在個(gè)體生物學(xué)水平上鑒定，后者具體過 程是_。(4) 活化的毒性物質(zhì)應(yīng)是一種 _分子,可以全部或部分嵌合于昆蟲的細(xì)胞膜上，使細(xì)胞膜產(chǎn)生孔道，導(dǎo)致細(xì)胞由于滲透平衡的破壞而破裂。(5) 我國在“ 863”計(jì)劃資助下開展 Bt 抗蟲棉、抗

29、蟲水稻等研究，可以減少農(nóng)藥、殺蟲劑的使用，這將對_ 起到重要作用。【解析】(1)切割 DNA 分子以獲取目的基因需用限制性核酸內(nèi)切酶。(2) 將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉 管通道法，其中由我國科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)的方法是花粉管通道法，最常用的方 法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。(3) DNA 探針是指用放射性同位素標(biāo)記的含目的基因的DNA 片段。個(gè)體生物學(xué)水平上的鑒定是檢測其是否表現(xiàn)出抗蟲性狀。(4) 原毒素是 Bt 基因表達(dá)的產(chǎn)物，而活化的毒性物質(zhì)是由原毒素經(jīng)蛋白 酶處理得到的，為多肽。(5) Bt 轉(zhuǎn)基因抗蟲棉可以在不使用農(nóng)藥的前提下防蟲、治蟲，避免了使用農(nóng)藥對環(huán)境造成的污染。答案：

30、(1)限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)(2)花粉管通道法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化含殺蟲晶體蛋白基因(或 Bt 基因、目的基因)的 DNA 片段 讓害蟲吞 食抗蟲棉葉子，觀察害蟲的存活狀態(tài)(合理即可)（4）多肽（5）環(huán)境保護(hù)24. （10 分）（2019 黃岡高二檢測）下圖表示某抗蟲水稻主要培育流程據(jù)圖回答：（1）組建理想的載體需要對天然的質(zhì)粒進(jìn)行改造。下圖是天然土壤農(nóng)桿菌 Ti 質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖（表示部分基因及部分限制性核酸內(nèi)切酶作用位點(diǎn)）,據(jù)圖分析:制酵【塢碼產(chǎn)胸控制 一合成細(xì)胞井製站rs止子卡耶需童和新 幫素就性基因1人工改造時(shí)，要使抗蟲基因表達(dá)，還應(yīng)插入_。2人工改造時(shí)用限制酶H處理，其目的如下：第一，去除質(zhì)

31、粒上的_ 基因，保證 T-DNA 進(jìn)入水稻細(xì)胞后不會(huì)引起細(xì)胞的無限分裂和生長。人人 I 合成殺蟲合成殺蟲基因基因（crylA）農(nóng)桿菌農(nóng)桿菌 Ti 質(zhì)粒質(zhì)粒含殺山基含殺山基因的重組因的重組質(zhì)粒質(zhì)粒呵呵含重組質(zhì)含重組質(zhì) 竺竺粒粒的土壤的土壤 農(nóng)桿農(nóng)桿菌菌 華恢華恢 1 號(hào)號(hào)”抗蟲水稻抗蟲水稻含殺蟲基因的含殺蟲基因的水稻胚細(xì)胞水稻胚細(xì)胞含成唧唏乙醴 f四環(huán)畫攪牲基因 綣碼聲狗能ifc箱一T-DMN轉(zhuǎn)移凰制原點(diǎn)-限制曲11第二，使質(zhì)粒帶有單一限制酶作用位點(diǎn)，有利于_ 。第三,使質(zhì)粒大小合適，可以提高轉(zhuǎn)化效率等。3若用限制酶I分別切割改造過的理想質(zhì)粒和帶有抗蟲基因的DNA 分子，并構(gòu)建成重組 Ti 質(zhì)粒

32、。分別以含四環(huán)素和卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)已成功導(dǎo)入抗蟲基因的水稻胚細(xì)胞，觀察到的細(xì)胞生長的現(xiàn)象是_尸rp jfi廠a若限制酶H切割 DNA 分子后形成的黏性末端為：,則該酶識(shí)G別的核苷酸序列是_?！窘馕觥浚?）基因表達(dá)載體的組成包括啟動(dòng)子、終止子、目的基因、標(biāo)記基因等，啟動(dòng)子是 RNA 聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動(dòng) 基因轉(zhuǎn)錄出 mRNA 最終獲得所需要的蛋白質(zhì)。tmr 和 tms 分別是編碼 產(chǎn)物控制合成細(xì)胞分裂素和編碼產(chǎn)物控制合成吲哚乙酸的基因，用限制酶H可將兩切點(diǎn)之間的片段切除，因此 T-DNA 進(jìn)入水稻細(xì)胞后不會(huì)引 起細(xì)胞的無限分裂和生長。改造過的理想質(zhì)粒上的四環(huán)素抗性基因 被破

33、壞，因此在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中不能生長，而限制酶H和限制酶I都沒有破壞卡那霉素和新霉素抗性基因，因此在含卡那霉素的培養(yǎng)基上能夠生長。-CTGCA-CTGCA由黏性末端可知，限制酶u切割的核苷酸序列為-G-GCTGCAt,因此該酶識(shí)別的核苷酸序列是 GACGTCGfACGTC答案：（1）啟動(dòng)子 tms 和 tmr 目的基因（或外源 DNA 準(zhǔn)確插入 在含卡那霉素的培養(yǎng)基中能夠生長，而在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中不能生 長（2）GACGTC25. （8 分）糖尿病是一種常見病，且發(fā)病率有逐年增加的趨勢，以致發(fā)達(dá)國家把它列為第三號(hào)“殺手”。目前對糖尿病I型的治療，大多采用激 素療法,所用激素為胰島素，由胰島 B 細(xì)胞分泌。這種治療用的激素過 去主要是從動(dòng)物的內(nèi)臟中提取，數(shù)量有限,20 世紀(jì) 70 年代后,開始采用 基因工程的方法生產(chǎn)，如圖所示,請回答：寧7&侖戈卞勻(1)指出圖中 2、4、6、7 的名稱：2,4,_6,7_。一般 獲 取 4 采 用 的 方 法6 的獲得必須用 _切割 2 和 4,使它們產(chǎn)生相同的再加入適量的_ 酶，才可形成。