1、 2.2.1 動物細胞培養和核移植技術動物細胞培養和核移植技術專題專題2細胞工程細胞工程 2.2動物細胞工程動物細胞工程 植物細胞工程常用的技術手段植物細胞工程常用的技術手段有哪些？有哪些？ 那么動物細胞常用的技術手段那么動物細胞常用的技術手段 呢？呢？ 植物組織培養植物組織培養, 植物體細胞雜交植物體細胞雜交問題探討問題探討動物細胞工程：動物細胞工程：動物細胞培養、動物細胞核移植、動物細胞培養、動物細胞核移植、動物細胞融合、生產單克隆抗體等動物細胞融合、生產單克隆抗體等 動物細胞培養技術是其他動物動物細胞培養技術是其他動物細胞工程技術的基礎細胞工程技術的基礎 從動物機體中取出相關的組從動物機

2、體中取出相關的組織，將它分散成單個細胞，然織，將它分散成單個細胞，然后，放在適宜的培養基中，讓后，放在適宜的培養基中，讓這些細胞生長和增殖。這些細胞生長和增殖。原理：細胞增殖 注意關鍵詞注意關鍵詞: 細胞貼壁細胞貼壁 接觸抑制接觸抑制 原代培養原代培養 傳代培養傳代培養動物細胞培養的過程動物細胞培養的過程:動物胚胎或幼齡動動物胚胎或幼齡動物的組織、器官物的組織、器官細胞懸浮液細胞懸浮液10代細胞代細胞50代細胞代細胞傳代培養傳代培養無限傳代無限傳代單個細胞單個細胞加培養液加培養液（分解彈性纖維）（分解彈性纖維）原代培養原代培養胰蛋白酶胰蛋白酶剪碎剪碎細胞株細胞株細胞系細胞系動物組織細胞間隙中動

3、物組織細胞間隙中含有一定量的彈性纖含有一定量的彈性纖維等蛋白質，將細胞維等蛋白質，將細胞網絡起來形成具有一網絡起來形成具有一定彈性和韌性的組織定彈性和韌性的組織和器官。和器官。遺傳物質遺傳物質未改變未改變遺傳物質遺傳物質已改變已改變細胞株：細胞株：原代細胞一般傳至原代細胞一般傳至1010代左右細胞代左右細胞生長停滯，大部分細胞衰老死亡，少數細胞存生長停滯，大部分細胞衰老死亡，少數細胞存活到活到40504050代，這種傳代細胞為細胞株。代，這種傳代細胞為細胞株。 細胞系：細胞系：細胞株傳代至細胞株傳代至5050代后又出現細胞代后又出現細胞生長停滯狀態，只有部分細胞由于遺傳物質的生長停滯狀態，只有

4、部分細胞由于遺傳物質的改變，使其在培養條件下可以無限制傳代，這改變，使其在培養條件下可以無限制傳代，這種傳代細胞為細胞系。種傳代細胞為細胞系。 細胞株和細胞系的區別：細胞株和細胞系的區別： 細胞系的遺傳細胞系的遺傳物質改變，具有癌細胞的特點，失去接觸抑制，物質改變，具有癌細胞的特點，失去接觸抑制，容易傳代培養。容易傳代培養。 原代培養：原代培養：從機體取出后立即培養的細胞為從機體取出后立即培養的細胞為原代細胞。培養的第原代細胞。培養的第1 1代細胞與傳代細胞與傳1010代以內代以內的細胞稱為原代細胞培養。的細胞稱為原代細胞培養。 傳代培養：傳代培養：將原代細胞從培養瓶中取出，配將原代細胞從培養

5、瓶中取出，配制成細胞懸浮液，分裝到兩個或兩個以上的制成細胞懸浮液，分裝到兩個或兩個以上的培養瓶中繼續培養，稱為傳代培養培養瓶中繼續培養，稱為傳代培養。培養器皿動物細胞培養瓶內表面為什么動物細胞培養瓶內表面為什么要光滑、無毒？要光滑、無毒？1、無菌、無毒的環境、無菌、無毒的環境 （添加一定量的（添加一定量的抗生素抗生素，定期更換培養液），定期更換培養液）2、營養、營養（葡萄糖、氨基酸、無機鹽、微量元素、葡萄糖、氨基酸、無機鹽、微量元素、動物血清、血動物血清、血漿漿等。等。）3、溫度和、溫度和PH 36.5 +0.5度 ；PH為7.2-7.4。4、氣體環境：、氣體環境： O2和和CO2（95%空氣

6、和空氣和5% CO2 ）補充合成培養基補充合成培養基中缺乏的物質中缺乏的物質（1 1）生產蛋白質生物制品：病毒疫苗、干擾）生產蛋白質生物制品：病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等。素、單克隆抗體等。（2 2）獲得大量自身的皮膚細胞，用于植皮。）獲得大量自身的皮膚細胞，用于植皮。（3 3）用于檢測有毒物質）用于檢測有毒物質（4 4）用于生理、病理、藥理等方面的研究，）用于生理、病理、藥理等方面的研究，為治療和預防疾病提供理論依據為治療和預防疾病提供理論依據2、為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組、為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做動物細胞培養材料？織做動物細胞培養材料？1、動物細胞培養液的主

7、要成分是什么？較植、動物細胞培養液的主要成分是什么？較植物組培培養基有何獨特之處？物組培培養基有何獨特之處？主要成分：葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生主要成分：葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等。素和動物血清等。獨特之處有：獨特之處有：1、液體培養基、液體培養基 2、成分中有、成分中有動物血清等動物血清等因為這些組織或器官上的細胞生命力旺因為這些組織或器官上的細胞生命力旺盛，分裂能力強盛，分裂能力強3、為什么培養前要將組織細胞分散成單個細、為什么培養前要將組織細胞分散成單個細胞？胞？4、動物細胞培養能否像綠色植物組織培養、動物細胞培養能否像綠色植物組織培養那樣最終培養成新個體？那樣最終培養成新個體？成塊組織不利培養，分散了做成細胞懸浮成塊組織不利培養，分散了做成細胞懸浮液利于培養液利于培養不能，動物細胞培養只能使細胞數目增多，不能，動物細胞培養只能使細胞數目增多，不能發育成新的動物個體不能發育成新的動物個體細胞的全能性細胞的全能性細胞株、細胞系細胞株、細胞系植物體或組織植物體或組織培養結果培養結果獲得細胞獲得細胞或細胞分泌蛋白或細胞分泌蛋白快速繁殖、培育快速繁殖、培育無病毒植株等無病毒植株等培養目的培