1、 問答題 10 四、問 答 題（僅供參考）1、 什么是微生物？主要特點，舉例說明。 微生物是一切肉眼看不見或看不清的微小生物的總稱。 特點：a.體積小，面積大：典型的菌株體積僅1m3左右，比面積卻有6104 b.吸收多，轉化快：發酵乳糖的細菌1小時可分解其自重1000-10000倍的乳糖 c.生長旺，繁殖快：大腸桿菌每分裂1次時間為12.5-20.0分中，每晝分裂72次，后代4722366500億萬個。 d.適應強，易變異：某些硫細菌可在250甚至300高溫下生存。 e.分布廣，種類多：人體腸道中聚居著100-400種不同微生物，個數大于100萬億。2、 試述G+菌和G-菌細胞壁的特點，并說明

2、革蘭氏染色的機理及重要意義？ G-菌細胞壁的特點是厚度較G+菌薄，層次較多，肽聚糖層很薄（僅2-3nm），故機械強度較G+菌弱。 機理：通過結晶紫液初染和碘液媒染后，在細菌的細胞膜內可形成不溶與水的結晶紫與碘的復合物。G+菌由于其細胞壁較厚，肽聚糖網層次多和交聯致密，故遇脫色劑乙醇處理時，因失水而使網孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇的處理不會溶出縫隙，因此能把結晶紫和碘的復合物牢牢留在壁內，使其保持紫色。而G-菌因其細胞壁薄，外膜層類脂含量高，肽聚糖層薄和較聯度差，遇脫色劑乙醇后，以類脂為主的外膜迅速溶解，這時薄而松散的肽聚糖網不能阻擋結晶紫與碘的復合物的溶出，因此細胞退成無色，這時，再經沙黃

3、等紅色染料復染，就使G-菌呈紅色，而G+菌仍為紫色。 意義：通過這一染色過程，可把幾乎所有細菌分為G+和G-兩類，是分離鑒定菌種的重要指標。同時證明了G+和G-主要由于其細胞壁化學成分的差異而引起了物理特性（脫色能力）的不同，正由于這一物理特性的不同才決定了最終染色反應的不同。3、 試比較G+和G-在一系列生物學特性上的差異。比較項目G+細菌G-細菌革蘭氏染色反應能阻留結晶紫而染成紫色可經脫色而復染成紅色肽聚糖厚，層次多薄，一般單層磷壁酸多數含有無外膜無有脂多糖（LPS）無有類脂和脂蛋白含量低（僅抗酸性細菌含有類脂）高鞭毛結構基體上著生兩個環基體上著生4個環產毒素以外毒素為主以內毒素為主對機械

4、力的抗性強弱細胞壁抗溶菌酶弱強對青霉素和磺胺敏感不敏感對鏈霉素、氯霉素、四環素不敏感敏感堿性染料的抑菌作用強弱對陰離子去污劑敏感不敏感對疊氮化鈉敏感不敏感對干燥抗性強抗性弱產芽孢有的產不產4、 細胞芽孢有何實踐重要性，產芽孢的細菌有哪幾類？芽孢是某些細菌在其生長發育后期，在細胞內形成的一個圓形或橢圓形、壁厚、含水量低、抗屈性強的休眠構造。無繁殖功能，芽孢有極強的抗熱抗輻射，抗化學藥物和抗靜水壓等特性。芽孢具有極強的休眠能力，可以保存幾年至幾十年而不死亡，芽孢的有無、形態和位置，在細菌分類和鑒定中是重要的形態學指標，實踐上芽孢的存在亦利于菌種的篩選與保藏，有利于對各種消毒、殺菌措施優劣的判斷等。

5、產芽孢的菌有：革蘭氏陽性菌：芽孢桿菌屬，梭菌屬，芽孢八疊球菌屬 革蘭氏陰性菌：脫硫腸狀菌屬5、 如何理解“放線菌是介于細菌與絲狀真菌間而更接近細菌的一類微生物”？放線菌是一類主要呈菌絲狀生長和以孢子繁殖的陸生性較強的原核生物，它與細菌十分接近。細胞壁主要為肽聚糖，菌絲直徑與細菌相仿，革蘭氏呈陽性，都屬于原核生物，都是單倍體，多核。而其細胞呈絲狀分枝，形成基內菌絲，氣生菌絲，氣生菌絲有分化為孢子絲，與絲狀真菌的基本單位“菌絲”類似，但是它們差異很大，真菌的菌絲比放線菌粗，細胞壁的成分完全不同，絲狀真菌的細胞壁由幾個質層，蛋白質層，葡聚糖蛋白網層等構成，菌絲體分化不同，絲狀真菌菌絲體分化成營養菌絲

6、體和氣生菌絲體，繁殖方式不同，絲狀真菌的氣生菌絲體回轉化成子實體，孢子在其里面或外面產生，放線菌則通過氣生菌絲分化成孢子絲，并通過橫割分裂方式，產生成串分生孢子。6、如何理解“菌落特征與菌體細胞結構、生長行為及環境條件有關”？菌落特征取決與組成菌落的細胞結構，生長行為及個體細胞形態的差異，都會密切反映在菌落形態上，如有些細菌有莢膜，在其細胞壁外就會有一層厚度不定的透明膠狀物質，而有些細菌有鞭毛，也會反映與它的菌落特征上，同時菌落在不同環境條件下的形態特征也有差異，在利于生長和不利生長的情況下，細菌的形態有差異，有些細菌在惡劣的條件下能形成芽孢等休眠體結構，培養基的種類不同也會形成菌落形態的不同

7、，使用固體，半固體，液體培養基培養同一種細菌時，其菌落特征不盡相同。7、列表比較細菌、放線菌、霉菌、酵母菌細胞結構、群體特征及繁殖方式的異同點。 細胞結構群體特征繁殖方式細菌單細胞原核生物，細胞由細胞壁，細胞膜。細胞質和內含物，核區組成，少數含有特殊結構，如鞭毛、莢膜等。革蘭氏染色有G+、G-菌落一般呈現濕潤較光滑，較粘稠，易挑起，質地均勻，菌落正反面及邊緣中心部位顏色一致主要為裂殖少數為牙殖放線菌單細胞多核原核生物，革蘭氏染色顯陽性，細胞壁的成分主要為肽聚糖，細胞呈絲狀分枝，形成基內菌絲，氣生菌絲干燥、不透明、表面呈致密的絲絨狀，上有一層彩色“干粉”難挑起，菌落正反面顏色不一致多數進行孢子繁

8、殖，少數以基內菌絲分裂，形成孢子狀細胞進行繁殖霉菌由菌絲構成，直徑3-10m，與酵母菌細胞類似，細胞壁主要有幾丁質構成，少數含有維生素菌落的形態較大，質地疏松，外觀干燥，不透明，呈現或松或緊的蛛網狀、絨毛狀、棉絮狀，與培養基結合緊密，不易挑起氣生菌絲轉化成各種子實體，子實體上或里面產生無性或有性孢子，進行繁殖。酵母菌細胞直徑為細菌10倍，是典型的真核微生物細胞主要由細胞壁，細胞膜，細胞核構成。細胞壁分為三層，成分為酵母維生素較濕潤，較透明，表面較光滑，容易挑起，菌落知底均勻，正反面以及邊緣與中央部位的顏色一致。無性繁殖：牙殖，裂殖，無性孢子有性繁殖：產生子囊孢子8、為什么霉菌菌落的中央邊緣、正

9、面與反面在外形、顏色、構造等方面常有明顯差別？放線菌、細菌和酵母菌呢？ 霉菌菌落正反面顏色呈現明顯差別，是氣生菌絲尤其是由它分化出來的子實體顏色比分散在固體基質內的培養菌絲顏色深；而菌落中心與邊緣顏色及結構不同，是因為越接近中心的氣生菌絲其生理年齡越大，發育分化和成熟也越早，顏色一般也較深，這樣它與菌落邊緣尚未分化的氣生菌絲比起來，自然存在明顯的顏色和結構上的差異。9、如何獲得細菌（G+、G-）、放線菌、酵母菌、霉菌的原生質體？G+菌原生質體獲得：青霉素、溶菌酶G-菌原生質體獲得：EDTA鰲合劑處理，溶菌酶 放線菌原生質體獲得：青霉素、溶菌酶霉菌原生質體獲得：纖維素酶酵母菌原生質體獲得：蝸牛消

10、化酶10、列表比較微生物的四大營養類型。營養類型能源氫供體基本碳源實例光能無機營養型（光能自養型）光無機物CO2藍細菌、紫硫細菌、綠硫細菌、藻類光能有機營養型（光能異養型）光有機物CO2及簡單有機物紅螺菌科的細菌（即紫色無硫細菌）化能無機營養型（化能自養型）無機物無機物CO2硝化細菌、硫化細菌、鐵細菌、氫細菌、硫磺細菌等化能有機營養型（化能異養型）有機物有機物有機物絕大多數細菌和全部真核生物11、試分析麥康開培養基的各組分的主要作用是什么？該培養基屬于什么培養基？ A 功能蛋白胨氮源乳糖碳源NaCl無機物牛膽酸鹽生長因子PH7.4適宜菌生長1%中性紅指示劑發酵管判斷是否產氣屬于半組合培養基12

11、、列表比較有氧呼吸、無氧呼吸、發酵三種能量代謝的異同點13、如何使微生物合成比自生所需更多的產物？ 酶活調節： 酶合成調節： 膜通透性調節： 發酵條件的調節：C，N，無機鹽，通風量，PH值等。利用微生物代謝調控能力可使微生物合成比自生所需更多的產物。微生物細胞的代謝調節方式很多，例如可調節營養物質透過細胞膜而進入細胞的能力，通過酶的定位以限制它與相應底物的接近，以及調節代謝流等，其中以調節代謝流的方式最為重要，它包括調節酶的合成和調節現成酶分子的催化能力，兩者密切配合，以達最佳效果。14、試列表比較單純擴散、促進擴散、主動運輸、基團移位四種不同營養物質運送方式。比較項目特意性載體蛋白運送速度溶

12、質運送方式平衡時內外濃度運送分子能耗運送前后溶質分子單純擴散無慢由濃至稀內外相等無特異性不需不變促進擴散有快由濃至稀內外相等特異性不需不變主動運輸有快由稀至濃內外高特異性需要不變基團移位有快由稀至濃內外高特異性需要改變15、是否所有的微生物都需要生長因子？如何滿足微生物對生長因子的需要？ 生長因子是一類調節微生物正常代謝所必須，但不能用簡單的碳源、氮源自行合成的有機物。但并非任何微生物都需要從外界吸收生長因子。如：多數真菌、放線菌和不少細菌。E.Coli等都是不需要外界提供生長因子的生長因子自養微生物。生長因子異養微生物，如乳酸菌，各種動物致病菌、原生動物、支原體等。 在配置微生物培養基時，如

13、配置天然培養基，可加入富含生長因子的原料酵母膏、玉米漿、肝浸液、麥芽汁等；如配置組合培養基，可加入復合維生素溶液。16、營養要素與配置培養基的某一營養物是否同一概念？舉例說明。 非同一概念。 17、測定微生物的繁殖數常用那些方法？比較它們的優缺點？ （一）、直接法：在顯微鏡下直接觀察細胞并進行計數的方法，所的結果包括死細胞。 比例計數法：很粗的計算方法 血球計數板法：可以數出死菌和活菌的數目較精確，但亦有一定誤差。 （二）、間接計數法：活菌計數法 液體稀釋法（MPN）：不準確 平板菌落計數法：不能全面反映樣品中的活菌數，技術要求較高。18、測定微生物的生長量有那些方法？比較優缺點？ （一）、直

14、接法： a.測體積：很粗的方法，用于初步比較用。 b.稱干重：可用離心法或過濾法測定。 （二）、間接法： a.比濁法：可用目測觀察未知濃度菌的濃度高低，精確度低，方便；精確測定可用分光度計，方法簡單，可隨時測出菌體生長情況。 b.生理指標法： 測含氮量，含碳量等，精確度很高，但測定技術要求高。19、列表比較有氧呼吸、無氧呼吸、發酵的異同點。呼吸類型氧化機制最終電子受體產物產能呼吸鏈有氧呼吸有機物O2CO2、 H2O多完整無氧呼吸有機物無機氧化物延胡索酸CO2、 H2ONO、N2次之不完整發酵有機物氧化型中間代謝產物醛酮還原型中間代謝產物少無，底物水平磷酸化20、試圖示由EMP途徑的中間代謝物丙

15、酮酸出發的六種發酵類型及其各自的發酵產物 P11421、誘變育種的基本環節有那些？整個工作的關鍵是什么？ 工作關鍵：選擇簡便有效的誘變劑 挑選優良的出發菌株 處理單孢子懸液 選用最適誘變劑量充分利用復合處理的協同效應利用和創造形態，生理和產量相關指標設計和采用高效的篩選方案方法。創造新型篩選方法。22、試述艾姆氏（Ames）法檢測致癌劑的理論依據，一般方法和優點。 鼠傷寒沙門氏菌的組氨酸營養缺陷型菌株在基本培養基的平板上不能生長，如發生回復突變成原養型后能生長。方法大致是在含待測可疑“三致”物（例如黃曲霉毒素、二甲氨基偶氮苯、“反應停”或二堊英等）的試樣中，加入鼠肝勻漿液，經一段時間保溫后，吸

16、入濾紙片中，然后將濾紙片放置于平板中央。經過培養后，出現三種情況：在平板上無大量菌落產生，說明試樣中不含誘變劑；在紙片周圍有一抑制圈，其外周圍出現大量菌落，說明試樣中有某種高濃度誘變劑存在；在紙片周圍長有大量菌落，說明試樣中有濃度適當的誘變劑存在。 優點：快速、準確和費用省等。23、為什么在進行誘變處理時，要把成團的微生物細胞或孢子制成充分分散的單細胞或孢子懸液？ 一方面分散狀態的細胞，可以均勻的接觸誘變劑，另一方面又可避免長出不純菌落。在某些微生物中，由于許多微生物細胞內同時含有幾個核，即使用單細胞懸浮液還是易長出不純菌；有時雖處理了單核的細胞或孢子，由于誘變劑只作用DNA雙鏈中某的一條單鏈

17、，故某一突變還是無法反映在當代的表型上。只有經過DNA復制、細胞分裂后，這一變異才在表型上表述，出現不純菌落。不純菌落的存在，是誘變育種中初分離的菌株經傳代后很快出現生產性狀“衰退”的主要原因。故對霉菌、放線菌應處理分生孢子，芽孢桿菌則應處理芽孢。24、現有微生物的包藏方法可分幾類？試用表解之。方 法主要措施適宜菌種保藏期評價冰箱保藏法（斜面）低溫各大類約1-6月簡便冰箱保藏法（半固體）低溫、避氧細菌、酵母菌約6-12月簡便石蠟油封保藏法低溫、阻氧各大類約1-2年簡便甘油懸浮液保藏法低溫、保護劑干燥、無營養細菌、酵母菌約10年較簡便砂土保藏法干燥、無營養產孢子的微生物約1-10年簡便有效冷凍干

18、燥保藏法干燥、低溫、無氧、有保護劑各大類5-15年繁而高效液氮保藏法超低溫、有保護劑各大類15年繁而高效25、什么叫菌種退化？如何區別衰退、飾變與雜菌污染？ 菌種退化即生產性能退化，遺傳標記丟失，原有典型的性狀變得不典型。 衰退指由于自發突變的結果而使某物種原有一系列生物學性狀發生量或質變的現象。 飾變是指外表的修飾性改變，即一種不涉及及遺傳物質結構改變而只發生在轉錄、轉譯水平上的表型變化。雜菌污染則是指混入其它菌。26、何謂菌種的復壯？如何達到菌種復壯？ 復壯：狹義指在菌種已發生衰退的情況下通過純種分離和測定典型性狀、生產性能等指標，從衰退的群體中找出少數尚未退化的個體，以達到恢復菌株固有性

19、狀的相應措施。而廣義的復壯則應是一項積極的措施，即在菌種的典型特征或生產性狀尚未衰退前，就經常有意識的采取純種分離和生產性狀的測定工作，以期從中選擇到自發的正變個體。 達到菌種復壯的方法：a.純種分離 b.通過宿主體內生長進行復壯 c.淘汰衰退個體27、什么是微生物的正常菌群？試分析腸道正常菌群和人體的關系。 生活在健康動物各部位、數量大、種類較穩定，一般能發揮有益作用的微生物種群。關系：在一般情況下，正常菌群與人體保持著一個十分和諧的平衡關系。 腸道正常菌群對宿主有很多有益作用，包括排阻，抑制外來致病菌，提供維生素等營養，產生淀粉酶、蛋白酶等有助消化的酶類，分解有毒或致癌物質，產生有機酸，降

20、低腸道PH和促進他的蠕動，刺激機體的免疫系統并提高其免疫力，以及存在一定程度的固氮作用等。食品中檢測大腸菌群的意義：1、 測定食品中直接或間接手糞便污染程度。2、 測定腸道致病菌污染的可能性。28、用微生物法處理污水的基本原理？ 29、血清學反應的一般規律如何？比較凝集反應和沉淀反應的異同。 血清學反應：特異性、可逆性、定比性、階段性、條件依賴性。 凝集反應是顆粒性抗原與相應的抗體在合適的條件下反映并出現肉眼可見的凝集團現象。作凝集反應時，抗原體積巨大，抗原結合體相對較少，為使抗原、抗體間有合適比例，應稀釋抗體。 沉淀反應是可溶性抗原與相應的抗體在合適的條件下反映并出現沉淀的現象。沉淀原的分子

21、小，表面抗原決定簇的相對數較高，因此一般先要稀釋抗原才能獲得合適比例的抗原、抗體。30、從微生物學角度分析低酸性的食品和酸性食品如要長期保存，應分別采取什么溫度殺菌？為什么？低酸性食品：高溫高壓121。因所有微生物均能生長，芽孢的耐熱溫度是120高酸性食品：沸水90-100，酸性中酵母菌、霉菌的孢子在95以上均可以殺死。31、引起以下食品變質的微生物類群是什么？為什么？A：消毒牛奶：細菌，因細菌表面積大，生長速度最快。B：真空包裝的蜜餞產品：酵母菌，在高滲情況下，Aw0.85，兼在厭氧的酵母菌可以活。C：面粉，干霉菌，因干性霉菌可以分解淀粉，引起面粉發霉。Aw小。D：充CO不足的碳酸飲料：酵母

22、菌，PH=4呈酸性，霉菌酵母菌可以生長，但CO抑制了細菌的生長。E：殺菌不足的肉類罐頭：芽孢未殺死。32、試證明：Z=設T溫度下菌數下降10需時即。n= 溫度下菌數下降10需時即。n=則殺菌時間下降（）需溫度升高T-T故與T-T成正比關系Z=33、什么是影印培養？如何用其來說明基因突變自發性，隨機性？影印培養法就是一種通過蓋章的方式能達到在一系列培養皿的相同位置上出現相同的遺傳型菌落的接種和培養方法。它證明了微生物的抗藥性是在未接觸藥物前自發產生的，這一突變與相應的藥物環境不相干是自發的。34、設計篩選高溫淀粉酶產生菌的方案，指出關鍵步驟。1、 來源：紡織廠腐敗的漿料，面粉廠垃圾堆中采集菌樣。

23、2、 富集：淀粉作為唯一C源的培養基中高溫培養。3、 分離：依據平板菌落周圍、淀粉水解全的大小進行分離。4、 誘變：用化學或物理方法。5、 初篩6、 復篩7、35、下述微生物的生態環境如何？設想如何分離。噬鹽菌：海灘，高鹽環境，如食品淹制廠，鹽廠等，在培養基中有一定鹽厭氧菌：無氧條件；河底污泥、沼氣池，堆肥中心等。進行厭氧培養，在通過影印培養高滲酵母菌：醬油廠，糖漿等 高濃度糖的高層培養基中乳酸菌：乳制品廠周圍，蔬菜腌制中 酸的環境 ph4.5纖維素分解菌：森林、木廠、牧場、草廠等 以纖維素為C源的培養基中金黃色葡萄球菌：化膿的傷口36、菌種保藏的基本原理和冷凍干燥保藏法的過程、原理。菌種保藏原理：根據微生物生理、生化特點，選用優良的菌株，最好是他們的休眠體，人工的創造適合休眠的環境條件，即干燥、低溫、缺乏氧氣和養料等使其代謝活動處于最低狀態，但又不至于死亡，從而達到保藏的目的。冷凍干燥保藏法：1、準備安 管 2、準備菌種 3、制各菌懸液及分離 4、冷凍：迅速降溫至-40-70攝氏度 5、抽真空：完成時有干燥塊 6、抽真空，封口 7、冰箱保藏冷凍干燥保藏法原理：通過洗滌液體的所有對細胞生長有害的物質，脫脂牛奶或糖、甘油等可以與大分子形成氫鍵的物質做保護劑，防止細胞損傷；在-20攝氏度以下快速凍結，形成的冰晶小，細胞質