1、沙門氏菌基本知識及檢測方法沙門氏菌屬(Salmonella是腸桿菌科的一個大屬，有2000多個血清型，我國發現的約有100個。沙門氏菌廣泛存在于豬、牛、羊、家禽、鳥類、鼠類等多種動物的腸道和內臟中。1880年Eberth首先發現傷寒桿菌，1885年Salmon分離到豬霍亂桿菌，由于Salmon發現本屬細菌的時間較早，在研究中的貢獻較大，遂定名為沙門氏菌屬Salmonella 。本屬細菌絕大多數成員對人和動物有致病性，能引起人和動物的敗血癥與胃腸炎，甚至流產，并能引起人類食物中毒，是人類細菌性食物中毒的最主要病原菌之一。根據沙門氏菌的致病范圍，可將其分為三大類群。第一類群：專門對人致病。如傷寒沙

2、門氏菌、副傷寒沙門氏菌(甲型、 乙型、丙型。第二類群：能引起人類食物中毒食物中毒沙門氏菌群，如鼠傷寒沙門氏菌、豬霍亂沙門氏菌、腸炎沙門氏菌、紐波特沙門氏菌等。第三類群：專門對動物致病，很少感染人，如馬流產沙門氏菌、雞白痢沙門氏菌。致病性最強的是豬霍亂沙門氏菌(Salmonella cholerae，其次是鼠傷寒沙門氏菌(Salmonella typhimurium和腸炎沙門氏菌(Salmonella enteritidis。一、 沙門氏菌屬的生物學特征：1.形態染色特性：G-無芽孢桿菌。大小通常為 0.71.5m ×2.05.0m，菌端鈍圓，散在，偶有短絲狀，無莢膜，除雞白痢沙門氏菌

3、和雞傷寒沙門氏菌外均有周身鞭毛，能運動，絕大多數菌株有菌毛。需氧或兼性厭氧菌，生長溫度范圍為1042，最適生長溫度為37，適宜pH為6.87.8，對營養要求不高，在普通培養基中生長旺盛，膽鹽可促進其生長。2.培養特性：需氧或兼性厭氧菌；生長溫度范圍為1042，最適生長溫度為37；適宜pH為6.87.8；對營養要求不高，在普通培養基中生長旺盛；膽鹽可促進其生長。§普通瓊脂：圓形、光滑、無色半透明、邊緣整齊或不太整齊的中等大小(2 4mm菌落。雞白痢、雞傷寒、豬副傷寒、甲型副傷寒沙門氏菌等只能長成細小菌落。§麥康凱瓊脂和伊紅美蘭瓊脂(EMB：菌落無色半透明§SS瓊脂和

4、DHL瓊脂：無色半透明、中心黑色或幾乎全部黑色(多數菌株的菌落§HE瓊脂：形成藍綠色或藍色菌落，產硫化氫菌株菌落中心帶黑色。3.生化特性：發酵葡萄糖、麥芽糖、甘露醇和山梨醇產氣；不發酵乳糖、蔗糖、水楊苷和側金盞花醇；產生硫化氫；原硝酸鹽；不水解尿素；不液化明膠；V-P反應陰性;不產吲哚(靛基質試驗陰性；能利用枸櫞酸鹽(個別菌株不利用。                 表  沙門氏菌屬細菌一般生化特性

5、0;           硫化氫     +     枸櫞酸鹽利用        d        甘露醇           +尿素酶  

6、   -     賴氨酸脫羧酶        +        棉子糖           -靛基質     -     精氨酸雙水解酶   

7、0;  (+      鼠李糖           +M.R.       +     鳥氨酸脫羧酶         +       蔗糖   

8、60;         -V-P        -     苯丙氨酸脫羧酶       -       衛矛醇           +KCN 

9、0;      -     分解葡萄糖產氣       +       丙二酸鈉         -動力       +     側金盞花醇  

10、60;        -       明膠(22       -水楊苷     -     氧化酶          -       乳糖  

11、0;  -    O/F試驗  發酵型            注：+  陽性；- 陰性；d  有不同的生化型；(+ 遲緩陽性二、 沙門氏菌屬的致病性：沙門菌的致病因素有侵襲力、內毒素和腸毒素3種。臨床上可引起胃腸炎、腸熱癥、菌血癥或敗血癥等。其中腸熱癥屬法定傳染病。 1.腸熱癥：即傷寒與副傷寒病。由傷寒與副傷寒沙門菌所引起的慢性發熱癥狀。為法定傳染病之一。 2.食物中毒：引起食物中毒的沙門菌以鼠傷寒、腸炎、湯卜遜、豬

12、霍亂、乙型及丙型副傷寒沙門菌為常見。 3.慢性腸炎：沙門菌可引起老人和兒童的慢性腸炎。 4.敗血癥：多由豬霍亂沙門菌引起。 5.沙門菌的局部感染如頸部、腰部等。 三、 沙門氏菌屬的微生物學檢查：1.標本采集：根據不同疾病采取不同的標本進行分離與培養。腸熱癥的第一、二周采血液，第二、三周采糞便與尿液。整個病程中骨髓分離細菌陽性率較高。食物中毒采集食物與糞便。 2.檢查方法及鑒定 （1）分離培養 1）糞便：一般將糞便或肛拭直接接種于SS和麥康凱平板上，用兩種培養基的目的是為提高標本的陽性檢出率。 2）血液和骨髓：抽取患者血液5ml或骨髓0.5ml，立即接種于含0.5%膽鹽肉湯或葡萄糖肉湯5ml試管

13、中進行增菌，48h將培養物移種到血平板和腸道鑒別培養基上，若有細菌生長取菌涂片革蘭染色并報告結果。對增菌培養物連續培養7天，仍無細菌生長時，則報告陰性。 3）尿液：取尿液23ml經硫磺酸鹽肉湯增菌后，再接種于腸道菌選擇培養基或血平板上進行分離培養，亦可將尿液離心沉淀物分離培養。 4）局部感染的膿液。 （2）鑒定：沙門菌屬的鑒定與志賀菌屬相同，須根據生化反應和血清學鑒定兩方面進行。 1）初步鑒定：如為革蘭陰性桿菌時作氧化酶試驗，陰性時，挑取可疑菌落分別移種于KIA和MIU上。并作生化反應。以沙門菌多價診斷血清作玻片凝集試驗。 凡符合KIA：KA、產氣+-、H2S+-、MIU：動力+、吲哚-、脲酶+，氧化酶-，觸酶+，硝酸鹽還原+，以沙門菌多價血清作