1、哺乳類實驗動物病理剖檢方法 一、         基本要求（一）實驗動物背景資料記錄（1）      實驗動物來源、種類、年齡、性別、原編號、體重、臨床癥狀等。（2）      剖檢時間、地點，麻醉方法、時間、麻醉者，處死方法、解剖者、記錄人、溫度、濕度。（3）      其他指標：動物剖殺前禁食（不禁水）時間一致，為12h。（二）體表檢查一般用于組織學取材

2、的實驗動物剖殺前應先隔離檢疫710d，用于實驗組和對照組動物的病理剖檢視不同動物實驗的要求而定。剖檢前的體表檢查項目如下：1  發育狀態體格發育是否與年齡、品種相稱，各部發育比例是否正常，有無畸形。2  營養狀態豐滿還是消瘦，檢查時可用手撫摸實驗動物背、腰部，營養良好時，背腰部厚實，皮膚彈性好。營養不良時，背腰部椎骨突出，肋骨明顯。3  精神狀態實驗動物的自主活動、運動情況，對外界的反應（遲鈍或亢進）、步態如何。4  感覺器官眼睛的瞳孔是否清晰等，有無分泌物，眼瞼有無發炎及紅腫，球結膜顏色變化，有否潮紅、蒼白、黃染或發紺。5  呼吸系統呼吸動物

3、如呼吸次數、節律、有無呼吸困難；上呼吸道檢查如鼻腔分泌物多少、有無噴嚏和咳嗽；必要時可通過聽診檢查肺部。6  消化系統采食與飲水觀察，包括食欲廢絕、減退、亢進和異嗜，口腔黏膜顏色和氣味。有無嘔吐、腹瀉、便秘，肛周有無污物，糞便數量、硬度、顏色、氣味等。7  被毛和皮膚檢查皮膚顏色、溫度、彈性、有無創傷、膿瘍、疥癬、濕疹，毛發色澤、疏密、有無脫落。（三）          病理取材基本要求（1）  病理檢查應分層次進行，先進行一般外觀觀察，然后剖檢觀察，再進行光鏡詳細檢查。（2

4、）  通常選擇正常與病變交界處組織，即包括病變本身及病變周圍組織。（3）  對照組動物相同器官取材時，選材部位應盡量一致。（4）  肉眼看不到的明顯病變時，各試驗組選取標本位置應一致。（5）  所選組織應包括臟器全部層次結構或重要結構，如腎應包括皮質、髓質和腎盂。（6）  體積大和分葉的器官，應視不同組織選取多個部位，小器官可整體取材并固定，如淋巴結、扁桃體、甲狀腺等。（7）  胃腸標本應將內容物沖洗掉，以免內容物影響組織固定，產生自溶。（8）  所取材料應盡量保持肉眼標本的完整性，不宜過厚或過薄，一般厚約35mm，大小為1

5、.52cm2。（9）  切取組織時不要擠壓，使用鋒利刀具，少用剪刀，勿選用被器械鉗壓過的部位。（10）標本取材要熟悉，盡可能快的完成整個過程，特別是易自溶的組織，如腸道、腦、腺體等。（11）剖檢記錄應客觀、詳細，用形象描述而不能用診斷的病名來代替。（12）同一實驗中的對照組和實驗組動物應交叉剖檢，嚴格統一各種條件和操作，盡量避免各種可能的干擾因素。 二、         病理剖檢基本操作（一）常用器械及使用方法1  解剖刀主要用于切開和分割軟組織，刀片宜用血管鉗（可持針鉗）夾持安裝，避

6、免割傷手指。常用的持刀法有以下4種：執弓式、抓持式、執筆式、反挑式。2  手術剪用于分離與剪開3  血管鉗用于分離和鉗夾組織，鉗夾縫合針和布巾等。4  手術鑷用于夾持組織，以利于解剖和縫合。5  拉鉤用于牽引和暴露（二）基本操作1切開在同一平面上時，先繃緊組織，將刀刃與平面垂直，用力要得當，一次垂直切開，切口整齊而不偏斜，禁止斜切和鋸切，以減少損傷。切開多層組織時，一般應按組織層次分層切開，避免損傷深層組織器官。2組織分離法可用銳性分離法，使用刀、剪等銳性器械直接切割，如皮膚、黏膜、精細結構和緊密連結組織的分離；也可用鈍性分離法，使用分柄、止血鉗、剝離器

7、，手指等分離，如肌肉，疏松結締組織等的分離。3結扎用絲線打結的方法扎組織和血管，參與縫合器官和皮膚。4止血大量出血導致胸、腹部積血使剖檢視野模糊不清，可能會影響和干擾病變的辨別和取材，因此動物剖檢有時要求止血。（1）  紗布塊壓迫止血法。剖檢過程中，為觀察病變性質和部位，辨清組織和神經、血管通路，以及對較廣泛的毛細血管滲出，可用紗布按壓施行短暫性的止血，但不可用紗布來回擦拭血液，以免損傷組織。（2）  鉗夾止血法。先用紗布塊止血，看清出血點或血管后用止血鉗的尖端垂直對準出血點，迅速而準確的鉗夾并捻轉，使血管閉塞而止血。（3）  結扎止血法。用于動脈出血或較大的血管

8、出血。 三、            剖檢取材程序（一）實驗動物尸體的固定通常為仰臥位固定。（二）剖檢順序多為先腹腔后胸腔，再腦、脊髓、骨髓、皮膚肌肉等。取材順序基本與此相同。（三）              檢查內容1  位置有無移位、異位2  大小體積增大、縮小或腫大3  色澤整體或局部顏色的增減改變。4 

9、 附加物有無出血、積液、粘連。5  質地硬、韌、軟等。6  切面多汁、泡沫狀、帶血、膿汁、干燥等。7  中空器官的黏膜面有無出血、潰瘍、增厚、隆起物等。（四）剖檢和取材程度1      腹腔和腹腔器官沿腹部正中線切開劍突至肛門之間的腹前壁，再沿最低位肋骨分別向左右兩側切開側腹壁至脊柱兩旁，完全暴露腹腔器官。觀察有無積液、血液和炎性滲出物，如有則用吸管吸出，測量容積并經離心沉淀涂片檢查，必要時作細菌培養。檢查粘膜是否光滑，有無充血、瘀血、出血、破裂、膿腫、粘連、腫瘤、寄生蟲等，膈的緊張度及有無破裂。（1） 

10、   脾臟。檢查大小、厚薄、硬度、性狀、色澤、有否肥厚、破裂等。然后沿長軸將脾切成兩半，切面要平整，檢查脾小梁、紅髓、濾泡的色澤，切面的出血量。（2）    胰腺。檢查胰腺色澤和硬度，切面檢查有無出血。（3）    胃腸。檢查胃的大小、胃腸道漿膜面的色澤，有無粘連、腫瘤、寄生蟲結節。然后沿胃大彎、腸系膜附著部依次剪開胃、十二指腸、空腸、回腸、盲腸、結腸、直腸。觀察胃內有無異物，內容物的氣味及性狀，除去內容物，檢查黏膜顏色，有無充血、出血、化膿。采用邊剪開邊觀察的辦法檢查腸管，觀察腸內容物數量、性狀，有無氣體、血液、

11、異物、寄生蟲，腸黏膜皺壁有無增厚、水腫、充血、粘液量、潰瘍、壞死、淋巴組織性狀及有無炎癥。（4）    腎臟。首先檢查腎臟大小、硬度、被膜是否容易剝離，腎表面的色澤、平滑度，有無疤痕、出血變化。然后檢查切面皮質和髓質的色澤，有無瘀血、出血、化膿和梗死。注意觀察皮質和髓質交界處的切面是否隆突，以及腎盂、輸尿管、腎淋巴結的性狀，有無腫瘤及寄生蟲等。（5）    肝臟。首先檢查肝臟的大小、被膜的性狀、邊緣的厚薄、實質的硬度和色澤，以及肝淋巴結、血管、肝管等的性狀。然后作切面，檢查切面的出血量、色澤，肝小葉性狀、有無膿腫、肝壞死等變化。（6）

12、    腎上腺。觀察外形、大小、色澤和硬度，作縱切和橫切，檢查皮質和髓質的色澤及有無出血。2盆腔器官（1）    膀胱。檢查膀胱的大小、尿量及色澤，黏膜有無出血、炎癥和結石等。（2）    雄性生殖器官。檢查睪丸、附睪、凝固腺、前列腺有無粘連、出血、水腫、積液等。（3）    雌性生殖器官。沿子宮體背側剪開子宮角，檢查子宮內膜的色澤、有無充血、出血、炎癥等，觀察卵巢和輸卵管有無粘連、出血、水腫、積液等。3胸腔、口腔及其器官用鑷子夾住胸骨劍突，剪斷膈肌與胸骨的連結，提起胸骨，在

13、胸椎兩側分別剪斷左、右側胸壁的肋骨，取下整個胸壁，打開胸腔，依次取出胸腺和心臟。將下頜骨的兩下頜支內側與舌連結的肌肉切斷，將咽、喉、氣管、食道與周圍組織分離，用鑷子夾住氣管向上提起，剪斷肺與胸膜的連結韌帶，然后將咽、喉、氣管、食道連同整個肺臟一并取出。如有積液應觀察其數量和性狀，盡量吸取，測量容積并涂片，檢查胸膜色澤，有無出血、充血或粘連。（1）  心臟。剪開心包膜，暴露心臟，注意心包的光澤度及心包內液體的情況，心臟的大小、外形、心外膜情況。自下腔靜脈入口處至右心房作直線剖開，從此直線中點沿心臟右緣剖至心尖部，從距離心尖部與心室間隔右側1cm處平行地剖至肺動脈；檢查右心房、右心室、三

14、尖瓣、肺動脈瓣、腱索有否病變。自左右靜脈入口處將左心房直線切開，沿心臟左緣剖至心尖部，再從距離心尖部與心室間隔左側1cm處平行地剖開左心室的前壁和主動脈，檢查二尖瓣、主動脈瓣、腱索有無病變，左心房、左心室內壁有無出血和感染。自冠狀動脈口起剪開前降支和旋支，在主動脈根部右側，于右心室的心外膜找到右冠狀動脈主干，先橫切一刀，再剪至后降支；觀察有無粥樣硬化和血栓等。（2）  口腔。檢查牙齒的變化，口腔黏膜的色澤、有無外傷、潰瘍和白斑，舌黏膜有無出血、外傷及舌苔的情況。（3）  咽喉。觀察喉頭、會厭軟骨黏膜的色澤、淋巴結的性狀及喉囊有無積膿。（4）  鼻腔。檢查鼻腔和鼻中

15、隔黏膜的色澤、有無出血、炎性水腫、結節、糜爛、潰瘍穿孔及疤痕等。（5）  下頜及頸部淋巴結。檢查下頜及頸部淋巴結的大小、硬度、有無出血和化膿等。（6）  氣管。檢查氣管有無出血、黏液量等。（7）  肺臟。檢查肺的色澤、有無出血、炎癥、肺氣腫、肺萎縮、腫瘤等。（8）  其他器官。胸腺，甲狀腺，扁桃體等的色澤、有無粘連、出血、水腫等。4顱腔及腦以猴為例，剝離顱頂部軟組織，沿眉弓至枕外隆凸上0.5cm處的連線，用弓形鋸環繞該線鋸開顱骨外板及板障，然后用丁字鑿輕輕鑿開內板，揭開顱蓋，此時可見覆蓋于腦表面的硬腦膜，切開硬腦膜暴露腦組織，在距顱骨鋸口斷端上0.5cm

16、處，從前向后環行剪開硬腦膜，枕部的硬腦膜應保留1.5cm長，防止取腦過程向后推壓腦組織時，枕骨斷端損壞枕葉腦組織。向后方輕輕揭起硬腦膜及大腦鐮，暴露腦組織，用手指從額骨前上方伸入顱前窩，輕輕推壓大腦額葉，直至見到篩板上的嗅球為止，切斷嗅絲與嗅球的聯系，將嗅球與腦一齊拉起，見到視神經和視交叉時立刻停止，在腦底附近依次切斷頸內動脈、視神經，再將腦向后拉，可見到垂體及漏斗，繼續將腦向后拉起，切斷連于腦的腦神經。從腦干腹側面把手術刀伸入枕骨大孔，切斷脊髓，即可將腦取出，用流水沖洗干凈備用。新鮮腦很軟，易變形和受挫傷，操作過程中必須用手扶托，取出腦后應立刻用紗布包裹，浸泡固定液中保存，以免變形。檢查軟腦

17、膜、硬腦膜血管充盈情況，腦回之間的腦溝中液體的數量與色澤，腦表面凸起或凹下的地方是否明顯，可用手觸膜判定其硬度。用刀將腦做一水平切面，保留胼胝體，暴露側腦室，注意檢查尾狀核有無出血、軟化灶。側腦室內容物數量、性質，然后將腦做多處切面，檢查有無變化。 四、臟器測量和稱重（1）    解剖后應迅速將臟器稱重，以免水分蒸發造成差異，特別是腎上腺等小器官的稱重。（2）    臟器稱重前應盡量將周圍脂肪組織和結締組織剔除，并用濾紙吸去臟器表面血液及體液，特別是腎上腺、甲狀腺、前列腺等較小的器官，更要新鮮稱重，防止器官干燥失水而重量減輕。（3）    空腔器官稱重前，應清除其