1、選修-一生物技術實踐|考切自主梳理|第33講微生物的培養與應用考綱考情知考向核心素養一一提考能最新考綱1 .微生物的別離和培養2 .培養基對微生物的選擇作用3 .某種微生物數量的測定4 .微生物在其他方面的應用科學思維分析培養基的成分及其作用,比擬平板劃線法和稀釋涂布平板法的異同近三年考情2021全國卷I(37)、2021全國卷n(37)、2021全國卷田(37)、2021全國卷I(37)、2021全國卷I(39)、2021全國卷m(39)科學探究設計實驗探究微生物培養的條件社會責任關注宿害微生物的控制及宣傳健康生活考點一微生物的實驗室培養窮基固本提精華1.培概念：人們根據微牛物對營養物質的不

2、同需求、配制出供其牛長繁殖的營養基質.(2)營養組成：一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽.止匕外,還需要滿足微生物生長對出、氧氣以及特殊營養物質的要求.(3)種類根據物理性質可分為液住培養基、固體培養基、半固體培養基.根據成分的來源可分為天然培養基和合成培養基.根據功能用途可分為選擇培養基、鑒別培基等02 .無菌技術含義：在培養微生物的操作中,所有預防雜菌污染的方法.(2)常用方法區別：能殺死3 .大腸桿菌的純化培養制備牛肉膏蛋白豚固體培養基I計算稱量IT溶化口區H一倒在(2)純化大腸桿菌的方法純化培養原理：想方設法在培養基上得到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的菌落,即可獲得較純的菌種.純化大腸桿

3、菌的關鍵步驟：接種.常用的微生物接種方法有兩種a.平板劃線法：是通過接種環在瓊脂固體培養基外表連續劃線的操作,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基的外表.如下圖B區域出現了單個菌落,正常情根卜.產生每個前落的最初細菌數目是1在培養基上劃線接種時.劃線的順序依次是A-C-Hb.稀釋涂布平板法:是將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養基的外表,進行培養.(3)菌種的保存方法對于頻繁使用的菌種,可以采用臨時保藏的方法.對于需要長期保存的菌種,可以采用甘油管藏的方法.O深挖教材(1)(中圖版選修一P3“實踐案例拓展)請你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌.如果需要,請選

4、擇適宜的方法.培養細菌用的培養基與培養皿玻棒、試管、燒瓶和吸管實驗操作者的雙手提示需要滅菌；需要消毒.2中圖版選修一P6“穩固提升T2改編為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？平板冷凝后,為什么要將平板倒置？提示通過灼燒滅菌,預防瓶口的微生物污染培養基.平板冷凝后,皿蓋上會凝結水珠,凝固后的培養基外表的濕度也比擬高,將平板倒置,既可以使培養基外表的水分更好地揮發,又可以預防皿蓋上的水珠落入培養基,造成污染.I應即對接高考I感悟高考找規律1.2021全國卷II,37生物一一選彳1:生物技術實踐在生產、生活和科研實踐中,經常通過消毒和滅菌來預防雜菌的污染.答復以下問題：在實驗室中,玻璃和金屬材質的實驗

5、器具填“可以或“不可以放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌.2牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法,與煮沸消毒法相比,這兩種方法的優點是密閉空間內的空氣可采用紫外線照射消毒,其原因是紫外線能.在照射前,適量噴灑,可強化消毒效果.水廠供給的自來水通常是經過填“氯氣“乙醇或“高鈕酸鉀消毒的.某同學在使用高壓蒸汽滅菌鍋時,假設壓力到達設定要求,而鍋內并沒有到達相應溫度,最可能的原因是.解析1在實驗室中,能耐高溫的、需要保持枯燥的物品,如玻璃器皿和金屬材質的實驗器具等可以放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌.2巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法與煮沸消毒法相比,其優點表現為在到達消毒目的的同時,營養物質損失較少.3紫外

6、線照射能消毒的原因是其能夠破壞微生物細胞中的DNA分子.在利用紫外線照射前,適量噴灑石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液,可強化消毒效果.自來水通常采用氯氣消毒.5采用高壓蒸汽滅菌時,假設壓力到達設定要求,而溫度未到達相應要求,最可能的原因是沒有排盡高壓蒸汽滅菌鍋內的冷空氣.答案1可以2在到達消毒目的的同時,營養物質損失較少3破壞DNA結構消毒液4氯氣5未將鍋內冷空氣排盡2.2021河北衡水中學七調以下表格是某公司研發的一種培養大腸桿菌的培養基配方,請結合所學知識,答復以下相關問題.成分含量蛋白陳10.0g乳糖5.0g5.0gK2HPO42.0g顯色劑伊紅美藍0.2g瓊脂12.0g將上述物質溶解后,用蒸

7、儲水定咨到1000mL根據用途劃分,該培養基屬于培養基,假設要別離能分解尿素的細菌,需對培養基做出的最關鍵的調整是,假設還需鑒定分解尿素的細菌.需做出的調整是.2從培養基的成分上看,大腸桿菌的同化類型為.該培養基能否用于別離篩選出大腸桿菌？為什么？在實驗室培養微生物時,獲得純潔培養物的關鍵是,紫外線可對空氣進行滅菌的原因是某同學嘗試純化大腸桿菌,其中一個平板的菌落分布如上圖,推測該同學接種時可能的操作失誤是二解析1伊紅美藍是鑒定大腸桿菌的試劑,因此該培養基從用途上分屬于鑒別培養基；假設要別離能分解尿素的細菌,那么需要保證培養基中以尿素為唯一氮源,即將蛋白陳換成尿素；鑒定分解尿素的細菌,需要使用

8、酚紅指示劑.2大腸桿菌需要從培養基中獲得碳源,因此其同化作用類型是異養型；由于表格中的培養基中的碳源種類很多,可供多種微生物生存,因此該培養基不能用于別離篩選出大腸桿菌.3微生物培養時,關鍵是預防外來雜菌的感染；空氣中的細菌可用紫外線殺滅,其原因是紫外線能讓蛋白質變性,同時還能破壞DNA的結構.4由題圖可知,接種時該同學采用的是稀釋涂布平板法,但菌落比擬集中,沒有很好地分散開來,可能是涂布不均勻導致的.答案1鑒別將蛋白陳換成尿素將伊紅美藍換成酚紅指示劑2異養型不能,原因是培養基中的碳源種類很多,可供多種微生物生存3預防外來雜菌的感染紫外線能使蛋白質變性,還能破壞DNA的結構4涂布不均勻I歸納提

9、煉I走出微生物培養的5個誤區不是所有微生物培養基中均需參加特殊營養物質.碳源、氮源、水分、無機鹽是微生物生長必需的四大營養成分,有些微生物可自行合成特殊營養物質,而對那些合成水平有限或不能合成特殊營養物質的微生物如乳酸菌,那么需在培養基中添加諸如維生素等物質.2平板劃線法純化大腸桿菌時不同階段灼燒接種環的目的不同第一次操作：殺死接種環上原有的微生物.每次劃線之前：殺死上次劃線后接種環上殘留的菌種,使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端.劃線結束后：殺死接種環上殘存的菌種,預防細菌污染環境和感染操作者.倒平板的溫度一般在50C左右適宜,溫度過高會燙手,溫度過低培養基又會凝周.平板冷卻凝固后需倒

10、置,這樣既可使培養基外表的水分更好地揮發,又預防皿蓋上的水珠落入培養基,造成培養基污染.考點二微生物的篩選和計數|考點自主梳理|金基固本提精華1 .土壤中分解尿素的細菌的別離與計數(1)原理與流程實驗摩理一髓合成幽的細菌才能分解尿素_里制以尿素為唯一氮源的培養基.能夠生長的細甫就是能夯解尿素的細菌一接計數法(顯微鏡卜-用特定細菌汁數極或血細胞一計數板)一間摟計數法；稀怦涂而土境取樣-配制上燧溶液和制備培養基/垂幽把網廠一涂布平板與培養-落計一(2)統計菌落數目時,培養基外表生長的1個菌落,來源于樣品稀釋液中1個活菌.為了保證結果準確,一般選擇菌落數在30300的平板講行計數.從平板上的菌落數推

11、測出每克樣品中的菌落數的計算方法是(平均菌落數C+涂布的稀釋液體積VX稀釋倍數M)點悟利用稀釋涂布平板法成功統計菌落數目的關鍵是恰當的稀釋度(4)實驗結果分析與評價對照的吊葬Hi中無藺落生位,未被雜菌污染朵染斷無污判有前的培并物中藺落形態多樣.闈落數偏高波朵菌污染蔭施心怨多樣.而藩骷偏高培養物中混入其他期源J分.解聯素的細菌別離實驗中)基其作養否選結是端選將培養基上的菌薄數U遠少于牛肉旺培養他上的菌落數H選擇培養基區篩選作用樣品稀擇評價重亞組的結果2 .分解纖維素的微生物的別離(1)纖維素酶及纖維素分解菌篩選原理、方法組成：纖維泰酶是一種更是酹,一般認為它至少包f括三種組分.即口酶、u酶和用箱

12、糖舒酹f作用：纖維素旦L纖維二郎/退更漸簡糖hE剛果紅原理二二纖維素JLJ標I紅色豆谷物絲場吃紅色消失.維分菌而忐纖興解的迷t西昊合物出現透F歸凰二培舞基：以組蝮為唯一碳源的選擇培祥基稀擅方法：剛果紅法色法,即通過是否產生透明圈來篩選纖雎票分解菌(2)實驗流程上取樣卜一含釬唯一的環境I國還吏以用養,培養.以增加纖維素分解菌的液度I眄國*制備系列稀群液r徐布平板卜將樣乩涂布到罌別野唯盍讓解悶的培養基上1、1挑選產生透明陽的菌落)別離纖維素分解菌所用的兩種培養基比擬別離纖維素分解菌的實驗中先用選擇培養基,再用鑒別培養基.選擇培養基為液性培養基,以纖維素作為碳源和能源的微生物可以正常生長,而其他絕大

13、多數微生物不能正常生長.鑒別培養基含瓊脂,為固性培養基,細菌可在該培養基上形成肉眼可見的菌落剛果紅染色法應用于鑒別(選擇、鑒別)培養基.I應試網接高考I感悟高考找規律2021河南大一大聯考“互聯網+餐飲為群眾生活帶來了諸多改變,動動手指點外賣已經成為普通群眾的生活方式.為檢測外賣糕點中微生物指標,食品監管人員通過無菌操作,將25g樣品以及225mL磷酸鹽緩沖液一起置于均質器中以800010000r/min的速度處理1min,獲得均勻稀釋液待用.請答復以下問題：磷酸鹽磷酸眈瞬酸拉璘酸鹽繳沖液緩沖液城仲液城沖液配制牛肉膏蛋白陳培養基時,在各成分都溶化后和倒平板前,要進行的操作是、分裝和滅菌.對培養

14、基進行滅菌的常用工具是倒平板時,一般需冷卻至50C左右,并在酒精燈火焰旁進行操作.接種之前進行的一系列稀釋操作,目的是在培養基外表形成,這種接種方法2假設培養基上平均有40個菌落,那么1g樣品中大致的活菌數量是個.該結果往往較實際值偏小,原因是有人認為,此處統計的菌落總數實際上僅為糕點樣品中總細菌數的一局部,理由答案1調pH高壓蒸汽滅菌鍋單個菌落稀釋涂布平板法24X106少數菌落可能是由兩個或多個細菌形成的每種細菌需求的營養物質和生長條件不同,培養時需滿足其營養、溫度、pH、需氧性等條件,因而實際只能獲得糕點樣品細菌中的一局部答案合理即可澄清易錯易混強化科學思維易錯易混易錯點1混淆兩種“對照組

15、與“重復組點撥1兩種對照組作用比擬判斷培養基中“是否有雜菌污染,需將未接種的培養基同時進行培養.判斷選擇培養基“是否具有篩選作用,需設置牛肉膏蛋白陳培養基進行接種后培養,觀察兩種培養基上菌落數目,進行比照得出結論.重復組的設置及作用為排除偶然因素對實驗結果的干擾,在每一稀釋度下宜設置3個平板作重復組,選擇菌落數均在30300且數目相差不大的三個平板,用“平均值代入計數公式予以計算菌落數.易錯點2不清楚為什么測定活菌的數量不能用平板劃線法？點撥由于在所劃的線中,一般只有最后一次劃線的末端才會形成只由一個細菌形成的菌落,而其他一些菌落往往由兩個細菌或多個細菌繁殖而成,而在計數時一個菌落對應著一個細

16、菌,這樣在劃線所得的平板中,菌落數目遠低于活菌的實際數值,所以不能用平板劃線法測定活菌數量.易錯點3易混淆選擇培養基與鑒別培養基點撥1選擇培養基允許特定的微生物生長,同時抑制或阻止其他種類微生物生長.土壤中分解尿素的細菌的別離利用的是選擇培養基.鑒別培養基是在培養基中參加某種特殊的化學物質,某種微生物在培養基中生長后能產生某種代謝產物,而這種代謝產物可以與培養基中的特殊化學物質發生特定的化學反響,產生明顯的特征性變化,根據這種特征性變化,可將該種微生物與其他微生物區分開來的培養基.用于篩選纖維素分解菌的培養基就是鑒別培養基.深度糾錯2021湖北長望瀏寧四縣一模農業生產上有一種廣泛使用的除草劑在

17、土壤中不易被降解,長期使用會污染土壤.為修復被污染的土壤,可按圖示程序選育出能降解該除草劑的細菌.該除草劑(含氮有機物)在水中溶解度低,含一定量該除草劑的培養基不透明.請分析答復：口E微生物接種是微生物學研究中最常用的根本操作技術,該技術的核心是(2)在選育過程中,應將土壤浸出液接種于以該除草劑為唯一的培養基上.通過比擬單菌落周圍的大小,可篩選出高效的目的菌.實驗結果如上圖顯示的AE五種菌株中,是最理想菌株.假設想對初步篩選得到的目的菌進行純化并計數,可采用的接種方法是.將1mL土壤溶液分別稀釋10倍和100倍,每種稀釋度各在3個平板上分別接入0.1mL稀釋液,經過適當培養后,6個平板上的菌落

18、數分別為59、57、58和2、7、5,空白對照組的平板上沒有菌落,那么每升土壤溶液中活菌數的理論值為個.實際上每升土壤溶液中的活菌數比通過統計所得的這一數值要大,由于科研人員用放射線處理該細菌,獲得突變株A和B,然后對突變株A和B進行實驗,結果如下表所示：接種的菌種一般培養基實驗處理及結果A不生長添加營養物質甲,能生長B不生長添加營養物質乙,能生長A+B能生長不添加營養物質甲、乙,能生長請分析突變株A和B混合在一起接種于一般營養基中能生長的最可能原因解析1微生物接種技術的核心是預防雜菌污染.2該除草劑為含氮有機物,在水中溶解度低,含一定量該除草劑的培養基不透明；降解該除草劑的細菌能分解培養基中

19、的該除草劑,使培養基中出現透明圈.可見,在選育能降解該除草劑的細菌的過程中,應將土壤浸出液接種于以該除草劑為唯一氮源的培養基上.通過比擬單菌落周圍透明圈的大小,可篩選出高效的目的菌.實驗結果圖顯示的AE五種菌株中,E菌落周圍的透明圈最大,因此E是最理想菌株.3對初步篩選得到的目的菌進行純化并計數,可采用稀釋涂布平板法進行接種.統計菌落數目時,一般選擇菌落數在30300的平板進行計數,因此應選擇稀釋度為10倍的、分別接入0.1mL稀釋7W勺3個平板上的菌落數分別為59、57、58進行統計,那么每升土壤溶液中活菌數的理論值為59+57+58哥X10包.1X10-3=5.8X106個.由于統計結果是

20、用菌落數來表示的,當兩個或多個細菌連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落,所以實際上每升土壤溶液中的活菌數比通過統計所得的這一數值要大.4分析表中信息可知：突變株A生長需要營養物質甲,突變株B生長需要營養物質乙,據此可推知,突變株A和B混合在一起接種于一般培養基中能生長的最可能原因是：突變株A生長需要營養物質甲,突變株B可以提供；突變株B生長需要營養物質乙,突變株A可以提供.答案1預防雜菌污染無菌操作2氮源透明圈E3稀釋涂布平板法5.8X106統計結果是用菌落數來表示的,當兩個或多個細菌連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落4突變株A生長需要營養物質甲,突變株B可以提供；突變株B生長需要營養物

21、質乙,突變株A可以提供隨堂真題&預測1 .2021全國卷I,37生物一一選彳1:生物技術實踐將馬鈴薯去皮切塊,加水煮沸一定時間,過濾得到馬鈴薯浸出液.在馬鈴薯浸出液中參加一定量蔗糖和瓊脂,用水定容后滅菌,得到M培養基.答復以下問題:1M培養基假設用于真菌的篩選,那么培養基中應參加鏈霉素以抑制的生長,參加了鏈霉素的培養基屬于培養基.2M培養基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養物質,營養物質類型除氮源外還有答出兩點即可.氮源進入細胞后,可參與合成的生物大分子有答出兩點即可.假設在M培養基中用淀粉取代蔗糖,接種土壤濾液并培養,平板上長出菌落后可通過參加顯色劑篩選出能產淀粉酶的微生物.參加的顯

22、色劑是,該方法能篩選出產淀粉酶微生物的原理是04甲、乙兩位同學用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數量,在同一稀釋倍數下得到以下結果：甲同學涂布了3個平板,統計的菌落數分別是110、140和149,取平均值133;乙同學涂布了3個平板,統計的菌落數分別是27、169和176,取平均值124.有人認為這兩位同學的結果中,乙同學的結果可信度低,其原因是.解析1在微生物學中,將允許特定種類的微生物生長,同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養基,稱做選擇培養基.假設M培養基是用于真菌的篩選,那么應參加鏈霉素以抑制細菌的生長,其屬于選擇培養基.2馬鈴薯浸出液中含有淀粉、蛋白質、脂質、無機鹽、水等多

23、種物質,因此,除氮源外其中還有微生物生長所需要的碳源、無機鹽等營養要素.進入細胞的氮源可參與合成蛋白質、核酸DNA、RNA等含氮的生物大分子.3參加顯色劑碘液后,淀粉遇碘變藍,而淀粉的水解產物那么不發生這種反響.假設在M培養基中用淀粉取代蔗糖,接種土壤濾液并培養,土壤中能產生淀粉酶的微生物可將淀粉分解,菌落周圍就會出現透明圈,這樣,我們就可以通過是否產生透明圈來篩選能產淀粉酶的微生物了.4乙同學的結果中,1個平板的計數結果與另2個相差太遠,說明在操作過程中可能出現了錯誤,結果的重復性太差,不能簡單地將3個平板的計數值用來求平均值.答案(1)細菌選擇(2)碳源、無機鹽蛋白質、核酸(3)碘液淀粉遇

24、碘液顯藍色,產淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解,形成透明圈(4)乙同學的結果中,1個平板的計數結果與另2個相差懸殊,結果的重復性差2 .(2021高考預測)纖維素酶在生物燃料制作、布料處理中起重要作用.目前,利用微生物提升纖維素酶產量是主要開展方向.如圖甲,用紫外線照射含有纖維素分解菌的土樣,別離、培養,再檢測各菌株的纖維素酶的產生量.請回答以下相關問題：測定纖維青酶的產量乙紫外線照射的目的是,Ao組未經紫外線處理,其作用是作為(2)經高壓滅菌鍋滅菌的培養基,需要冷卻后才能用來倒平板.常用于估計培養基已冷卻到50c左右的簡便方法為上述培養皿中的培養基除含有水和無機鹽、酵母膏、水解酪素、瓊脂等外,還應

25、有,目的是選擇纖維素分解菌.(4)上述檢測結果如圖乙所示.由圖可知,(填字母)組酶含量與Ao組相同,最可能的原因是.纖維素酶還常應用于植物細胞工程,以去除細胞壁,這是利用了酶的性.解析1紫外線屬于誘發基因突變的物理因素,通過紫外線照射后細菌突變頻率大大提升,從而可能篩選出人類需要的高產菌株；A0組未經紫外線處理,為對照組.2用手觸摸盛有培養基的錐形瓶剛剛不燙手時的溫度是50C左右.3以纖維素作為唯一碳源的培養基上只有產纖維素酶的細菌才能存活.4據圖乙可知A5組纖維素酶的含量與對照組相同,由于基因突變具有低頻性的特點,該組可能沒有發生基因突變.5植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠,利用酶具有專一

26、性的特點可用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁,獲得原生質體.答案1誘發基因突變,提升突變頻率,獲得高產的纖維素分解菌對照2用手觸摸盛有培養基的錐形瓶剛剛不燙手纖維素4A5沒有發生基因突變專一課后強化練習時間：35分鐘暹數練Q注重科學思維提水平1 .2021全國卷田,37生物一一選彳1:生物技術實踐答復以下與酵母菌有關的問題：別離培養酵母菌通常使用填“牛肉膏蛋白豚“MS或“麥芽汁瓊脂培養基,該培養基應采用滅菌法滅菌.假設將酵母菌劃線接種在平板上,培養一段時間后可觀察到菌落,菌落的含義是2酵母菌液體培養時,假設通入氧氣,可促進填菌體快速增殖“乙醇產生或“乳酸產生；假設進行厭氧培養,可促進填“菌體快速增殖

27、“乙醇產生或“乳酸產生.3制作面包時,為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌,酵母菌引起面包松軟的原因是解析1酵母菌為異養型生物,通常使用麥芽汁瓊脂培養基培養；培養基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌；由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體稱為菌落.2酵母菌為兼性厭氧型生物,有氧條件利于其繁殖,無氧條件下其進行酒精發酵.3酵母菌分解葡萄糖可產生二氧化碳,使面包松軟多孔.答案1麥芽汁瓊脂高壓蒸汽由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體2菌體快速增殖乙醇產生3酵母菌分解葡萄糖會產生CO2,CO2使面包松軟2 .2021河南安陽市調研沙門氏菌是一類常見的食品致病菌,可使人得胃腸炎、傷寒等.食品平安法要求

28、其限量值為0,即樣品中不得檢出這類病菌,現要檢測某批次的火腿腸中是否含有沙門氏菌,要用到1號和2號兩種培養基.請答復以下問題：1號培養基名稱含量(/1000mL)牛肉膏粉5g蛋白陳5g三號膽鹽3.5g檸檬酸鈉8.5g煌綠0.00033g乳糖10g三號膽鹽、檸檬酸鈉和煌綠抑制大多數菌群,但不影響沙門氏菌的生長2口仆名稱含量(/1000mL)牛肉膏粉5g蛋白陳5g瓊脂15g硫代硫酸鈉8.5g檸檬酸鐵1g乳糖10g硫代硫酸鈉和檸檬酸鐵用于檢測硫化氫的產生,使沙門氏菌菌落中央呈黑色抽取火腿腸檢測樣品要遵循原那么.1號培養基從物理性質上看屬于培養基,從功能上看屬于培養基；檢測樣品要先用1號培養基培養,目

29、的是2配制2號培養基的步驟是：計算一稱量一溶化一滅菌一倒平板.為保證目的菌正常的生命活動,需要將培養基pH調至7.2,pH調節應在之前.如圖采用的是法別離細菌,接種好的培養皿在恒溫箱中培養時要填“正或“倒置；培養基上產生的單個菌落在生態學中被稱為.答案1隨機取樣液體選擇增加沙門氏菌目的菌的濃度或抑制其他細菌2滅菌平板劃線倒種群3 .2021廣東廣州執彳S中學期中某同學配制含瓊脂的牛肉膏蛋白陳培養基后,對培養基和培養皿進行高壓蒸汽滅菌,當培養基溫度下降到50C時,在酒精燈火焰附近倒平板,待培養基冷卻至室溫,按如表處理：組別處理A組翻開培養皿蓋,距地面0.3m處恭露15minB組翻開培養皿蓋,距地

30、面0.6m處恭露15minC組翻開培養皿蓋,距地面0.9m處恭露15minD組翻開培養皿蓋,距地面1.2m處恭露15minE組不翻開培養皿蓋將處理完畢的培養皿置于適宜溫度下培養23天,觀察每個培養皿中的菌落特征和數目.答復以下問題：上述實驗的目的是-假設E組的培養基外表有菌落生長,說明了2培養基中的牛肉膏和蛋白陳主要為微生物生長提供和o在酒精燈火焰附近進行相關操作是為了實驗過程特別強調溫度限制,請簡要說明以下溫控舉措的目的：“待培養基冷卻至室溫的目的有“將處理完畢的培養皿置于適宜溫度下培養的目的是4培養微生物時將培養皿倒置的目的是0實驗結束后,對使用過的培養基應進行處理.解析1根據表格可知,該

31、實驗的自變量是距離地面的高度,因此該實驗的目的是探究不同高度空氣中微生物的種類和數量；假設E組的培養基外表有菌落生長,說明培養基滅菌不合格受到雜菌污染.2培養基中的牛肉膏和蛋白陳主要為微生物生長提供碳源和氮源.在酒精燈火焰附近進行相關操作可預防周圍環境中微生物的污染.3接種時需待培養基冷卻至室溫,培養基凝固,以預防培養基溫度過高殺死接種在其上的微生物.將培養皿置于適宜溫度下培養可讓細菌在適宜的溫度下生長繁殖.4培養微生物時要將培養皿倒置,從而預防冷凝后形成的水珠滴落在培養基上污染培養基.實驗結束后,對使用過的培養基應進行滅菌處理.答案1探究不同高度空氣中微生物的種類和數量培養基滅菌不合格受到雜

32、菌污染2碳源氮源預防周圍環境中微生物的污染3使培養基凝固,防止培養基溫度過高殺死接種在其上的微生物讓細菌在適宜的溫度下生長繁殖4預防冷凝后形成的水珠滴落在培養基上污染培養基和破壞菌落滅菌4 .2021安徽省黃山市質檢農作物秸稈中含有的纖維素阻礙了堆肥技術在處理有機固體廢物領域的開展.為提升堆肥品質,科研人員探究了溫度對纖維素分解菌分解水平的影響,實驗步驟如下：纖維素分解菌的篩選、別離及純化一纖維素分解菌菌株數量測定一纖維素酶活力測定和降解濾紙水平的檢測.請答復下列問題：步驟中,假設用稀釋涂布平板法接種,那么必須將菌液進行一系列的,接種所需的培養基中通常參加制成固體培養基.纖維素酶的最適溫度在4

33、565c之間,欲從4565c的恒溫箱中篩選出能高效分解纖維素的細菌,請寫出測定纖維素酶的最適溫度的實驗思路：2步驟中,在條件適宜的環境下培養細菌10d后,用填一種實驗用具在顯微鏡下可計算細菌數量.此方法中的“條件至少包括：適宜溫度、以作為唯一碳源的填“固態“半固態或“液態培養基等.可用臺盼藍染液鑒定視野中細菌是否死亡,原理是步驟中,酶活力可用培養基上菌落直徑及來表示.解析1用稀釋涂布平板法接種時,需將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋梯度的菌液分別涂抹在瓊脂培養基外表.制作固體培養基時通常需添加瓊脂.測定4565C范圍內纖維素酶的最適溫度,需先設置一系列溫度梯度,接種細菌后放在適宜條件下

34、培養相同時間,然后測定菌落周圍透明圈的大小,透明圈越大,說明該溫度下酶活性越高.2對細菌計數時可以采用稀釋涂布平板法和血細胞計數板計數法,前者可通過肉眼計數菌落數,后者需借助顯微鏡觀察.實驗目的是統計纖維素分解菌的數量,因此培養基只能以纖維素作為唯一碳源.血細胞計數板必需滴加菌液才能統計,因此培養基需是液態的.可用臺盼藍染液鑒定視野中細菌是否死亡,原理是活細菌的細胞膜具有選擇透過性,臺盼藍不是細菌需要的物質,無法進入活細胞,而死細胞的細胞膜失去選擇透過性,臺盼藍可以進入死細胞.3酶活力可用培養基上菌落直徑及菌落周圍透明圈大小來表示.答案1梯度稀釋瓊脂取假設干以纖維素為唯一碳源的剛果紅培養基,在

35、其上接種等量的纖維素分解菌,分別置于4565c的不同溫度的恒溫箱中培養,一段時間后,分別測定各培養基上菌落周圍的透明圈大小答案合理即可2血細胞計數板纖維素液態活細菌的細胞膜具有選擇透過性,不能被臺盼藍染色答案合理即可菌落周圍透明圈大小5 .2021鄭州三測硝基苯酚是工業污水中的重要污染物,某同學欲從污水處理廠污泥中別離分解硝基苯酚的細菌.請答復以下有關問題：為了篩選污泥中可分解硝基苯酚的細菌,在配制培養基時應選擇填“硝基苯酚“硝基苯酚+牛肉膏或“硝基苯酚+葡萄糖作為碳源,不采用其他兩組的原因是2純化菌株時,通常使用的劃線工具是.劃線的某個平板經培養后,第一劃線區域的劃線上都不間斷地長滿了菌落,

36、第二劃線區域的第一條線上無菌落,其他劃線上有菌落.分析造成第一條線無菌落的可能原因有進行梯度稀釋時的一般操作是將1mL菌液移入盛有mL的無菌水中；常用法進行活菌計數,其原理是,但統計的菌落數往往填“多于或“少于稀釋液中的活菌數,原因是省出兩點.實驗數據顯示,當培養基中參加碳源葡萄糖時,該細菌降解速率明顯提升,原因可能是解析1從污水處理廠污泥中篩選分解硝基苯酚的細菌,因此應以硝基苯酚為唯一碳源,而其他兩組中的牛肉膏、葡萄糖都能為細菌提供碳源.2純化菌株時,通常使用接種環進行平板劃線.第一劃線區域的劃線上都不間斷地長滿了菌落,第二劃線區域的第一條線上無菌落,可能原因是劃線未從第一區域劃線的末端開始

37、或接種環灼燒后未冷卻.3進行梯度稀釋時的一般操作是將1mL菌液移入盛有9mL的無菌水中,這樣就剛好稀釋了10倍.活菌計數常用稀釋涂布平板法,由于稀釋后培養基外表的一個菌落通常來源于稀釋液中的一個活菌,菌落數量就代表了細菌數量.但是有時候個別菌落可能由2個或多個細菌形成,或有些活菌在培養過程中死亡,因此統計結果往往會小于實際的活菌數量.4當培養基中參加碳源葡萄糖時,細菌碳源和能源充足,細菌大量增殖,因此會提升降解速率.答案1硝基苯酚其他兩組分別含有其他碳源,不能保證硝基苯酚是唯一碳源2接種環接種環灼燒后未冷卻劃線未從第一區域劃線的末端開始39稀釋涂布平板培養基外表的一個菌落來源于稀釋液中的一個活

38、菌少于有些活菌在培養過程中死亡；個別菌落可能是由2個或多個細菌形成4能源充足,細菌代謝繁殖加快6 .2021湖南長郡中學調研小麥赤霉病是河南省小麥生產中的一種重大病害,是小麥在抽穗揚花期感染雪腐鐮刀菌等真菌引起的,該真菌的代謝產物脫氧雪腐鐮刀菌烯醇DON,分子式為C15H20O6會嚴重影響禽畜生產和人體健康.某生物興趣小組為篩選專一降解DON的真菌進行了相關實驗,具體實驗如表所示,其他條件均適宜.請答復以下問題:實驗步驟取樣培養結果I土壤樣品葡荷糖,NH42SO4,K2HP043H20,KH2PO4,NaCl,CaCl2,MgS047H2O,加水定容培療液aR1mL液a同步驟I菌落挑取單菌落培養液b為實現篩選目的,步驟I所使用的培養基配方中,應去除并加入.制備培養基時,滅菌和調pH的先后順序是2為實現目的菌的別離和計數,在1的根底上,步驟R所使用的培養基中還應加入制成固體平板.采用的接種方法是.通過統計平板上的菌落數,可推測出樣品中大約含有的活菌數,其原理是.步驟出的目的是答案1葡萄