1、色譜分析色譜法的分離原理：混合物中各組分在經(jīng)過由固定相和流動(dòng)相組成的體系時(shí)，由于各組分性質(zhì)上的差異，在兩相中具有不同的分配系數(shù);當(dāng)兩相作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，各組分隨流動(dòng)相一起流動(dòng)，并在兩相中進(jìn)行反復(fù)多次的分配，使各組分最終得以分離。一、氣相色譜a.a.概念氣相色譜：流動(dòng)相是氣體,固定相是固體或液體的色譜法稱為氣相色譜法?；€：反映檢測(cè)器系統(tǒng)噪聲隨時(shí)間變化的線基線漂移：基線隨時(shí)間定向的變化基線噪聲：由各種因素引起的基線起伏保留值：試樣中各組分在色譜柱中的滯留時(shí)間，由色譜分離過程中的熱力學(xué)因素控制，作定性參數(shù)死時(shí)間 tM:tM:不被固定相吸附或溶解的物質(zhì)進(jìn)入色譜柱時(shí)，從進(jìn)樣到出現(xiàn)極大值所需時(shí)間保留時(shí)間 t

2、R:tR:試樣從進(jìn)樣到柱后出現(xiàn)峰極大值所經(jīng)歷的時(shí)間調(diào)整保留時(shí)間 tR:tR:tRtR，= =tR-tMtR-tM程序升溫：指色譜柱的溫度按照組分沸程設(shè)置的程序連續(xù)地隨時(shí)間線性或非線性逐漸升高,使柱溫與組分的沸點(diǎn)相互對(duì)應(yīng)， 以使低沸點(diǎn)組分和高沸點(diǎn)組分在色譜柱中都有適宜的保留、 色譜峰分布均勻且峰形對(duì)稱。 各組分的保留值可用色譜峰最高處的相應(yīng)溫度即保留溫度表示。b.b.流程示意圖9 9色譜柱圖4-1氣相色譜儀流程示意圖1 1氣源銅瓶2 2小化器.3 3松壓閥4 4針軍閥1 15 5壓力計(jì)事6 6流聶計(jì),7 7進(jìn)祥器】8 8氣化室9 9色諾柱】1010檢測(cè)器，1111晶膜流量計(jì)|112112控制僅j

3、 j1313圮錄儀c.c.分離過程溶解-脫溶解-再溶解-再脫溶d.d.原理氣相色譜法亦稱氣體色譜法或氣相層析法，是以氣體為流動(dòng)相的柱色譜分離技術(shù)。它分離的主要依據(jù)是利用樣品中各組分在色譜柱中吸附力或溶解度不同，也既是利用各組分在色譜住中氣相和固定相的分配系數(shù)不同來達(dá)到樣品的分離。對(duì)于氣一固色譜(也叫吸附色譜)，它的分配系數(shù)確切地講，應(yīng)稱吸附平衡常數(shù)，主要用于永久性氣體或氣態(tài)煌等的分離分析。本課程主要介紹氣一液色譜。e.e.色譜流出曲線這種以組分的濃度變化(或某種信號(hào))作為縱坐標(biāo)，以流出時(shí)間(或相應(yīng)流出物的體積)作為橫坐標(biāo)，所繪出的曲線稱為色譜流出曲線。f.f.色譜分析的依據(jù)(1)(1)色譜峰的

4、位置(即保留時(shí)間或保留體積) )決定于物質(zhì)的性質(zhì)，是色譜定 T T 生的依據(jù)；(2)(2)色譜峰的高度或面積是組分濃度或含量的量度，是色譜定量的依據(jù);(3)(3)色譜峰的位置與其寬度，可以對(duì)色譜柱分離的情況進(jìn)行評(píng)價(jià)。(4)(4)樣品中所含組分?jǐn)?shù)(峰個(gè)數(shù))g.g.理想的氣液色譜法條件(1)(1)在色譜柱內(nèi)任何點(diǎn)兩相的比例恒定。(2)(2)載氣流在色譜柱內(nèi)任何部位均一樣.(3)(3)在兩相中無論哪一相里都不發(fā)生成分分子的縱向擴(kuò)散作用。(4)(4)組分分子在兩相間的分配平衡能瞬間完成。h.h.分離度為判斷兩種難分離組分在色譜柱中真實(shí)的分離效果，常用分離度 R R 作為色譜柱的總分離效率(能)指標(biāo)，其

5、定義為相鄰兩組分的色譜峰保留值之差與兩個(gè)組分峰寬總和之半的比值( (t tR2R2tR1R1) )R=212（Yi+i+丫2 2）i.i.檢測(cè)器(1)(1)積分型檢測(cè)器：顯示某一組分含量隨時(shí)間的累加，該檢測(cè)器所給的響應(yīng)信號(hào)與流出組分總量成比例。(2)(2)微分型檢測(cè)器：i i . .濃度型微分檢測(cè)器被測(cè)組分和載氣相混合檢測(cè)器的響應(yīng)值和組分的濃度成比例，檢測(cè)器的瞬間響應(yīng)值(峰高)本質(zhì)上與載氣流速無關(guān)，而積分響應(yīng)值(峰面積)則與流速成反比。包括熱導(dǎo)、電子捕獲(非離解型卜氣體密度、超聲等檢測(cè)器。iiii. .質(zhì)量型微分檢測(cè)器載氣把被測(cè)組分帶入檢測(cè)器，檢測(cè)器的響應(yīng)信號(hào)和單位時(shí)間內(nèi)進(jìn)入檢測(cè)器的組分的量成

6、比例，檢測(cè)器的響應(yīng)值(峰高)取決于單位時(shí)間組分進(jìn)入檢測(cè)器的質(zhì)量;也就是說當(dāng)進(jìn)樣量一定時(shí)，峰高與流速成正比，而峰面積則與流速無關(guān)。包括氫焰離子化、火焰光度計(jì)以及氮磷檢測(cè)器等。j.j.檢測(cè)器的性能指標(biāo)(1)(1)噪聲：短時(shí)噪聲是信號(hào)在有限的范圍內(nèi)較迅速的偏移。長(zhǎng)時(shí)噪聲是較長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)信號(hào)逐慚地偏移。(2)(2)靈敏度：可用相當(dāng)于單位量的被測(cè)成分的峰面積表示靈敏度。iiiiii . .濃度型檢測(cè)器_峰面積載氣流量成分量iv.iv.質(zhì)量型檢測(cè)器(3)(3)檢測(cè)限(亦稱檢測(cè)度或敏感度):):噪聲水平是噪聲連續(xù)存在時(shí)的平均值，而檢測(cè)限 D D 則是能區(qū)別于這個(gè)噪聲水平 N N 的最小檢測(cè)量，通常它相當(dāng)于噪聲

7、水平的 2 2 倍。2ND=(4)(4)選擇性:峰面積S=-成分的量熱導(dǎo)檢測(cè)器是基于樣品和載氣有不同的導(dǎo)熱率， 因而它是通用型檢測(cè)器。 而電子捕獲檢測(cè)器則是對(duì)捕獲電子能力強(qiáng)的物質(zhì)有很高的敏感度；火焰光度檢測(cè)器對(duì)硫和磷化物比對(duì)燒類的靈敏度高幾千倍，所以二者均為選擇性檢測(cè)器。(5)(5)線性范圍檢測(cè)器的線性范圍是指樣品濃度和應(yīng)答值呈線性關(guān)系范圍內(nèi)最大與最小濃度之比。(6)(6)響應(yīng)時(shí)間指進(jìn)入檢測(cè)器的一個(gè)組分輸出達(dá)到其真值的 63%63%所需的時(shí)間(7)(7)基流(也稱“本底電流”或“零電流) )沒有任何樣品加到載氣中時(shí)，檢測(cè)器所產(chǎn)生的信號(hào)。這里我們傾向于稱為“零電流”，因?yàn)檫@樣更適用于所有檢測(cè)器。

8、零電流一般越小越好，檢測(cè)器零電流的大小，是衡量檢測(cè)器是否正常的重要數(shù)據(jù)之一。(8)(8)穩(wěn)定性穩(wěn)定性系指檢測(cè)器的噪聲和基線漂移，以及檢測(cè)器對(duì)操作條件(氣體流速、壓力、溫度)的波動(dòng)，對(duì)敏感度和響應(yīng)值的重現(xiàn)性。檢測(cè)器的穩(wěn)定性是檢測(cè)器固有的性質(zhì)，它僅與檢測(cè)器的設(shè)計(jì)、結(jié)構(gòu)和操作條件有關(guān)，而儀器的穩(wěn)定性是儀器的綜合性能。k.k.常用檢測(cè)器表 4-2 常用戔相色道檜測(cè)器惶熊一德表檢測(cè)器熱導(dǎo)(TCD)氫蠟離子化(F1D)噌子桶獲(ECD)火焰光度FYD1用途所有化合物有機(jī)化合物鹵生物及含氧化合物瑜:，磁化合物響應(yīng)性質(zhì)濃度型演量型濃度吧(非離解型力成城型(惠解型)居量型載氣N、Ar+5%CH.檢洞廢2x101

9、0-uUT1、八1QFw7m穩(wěn)定性良優(yōu)可可拄性他圍1011QR1IO1-1溫度極限4UQ400225T5QP小七響應(yīng)時(shí)間1005Qms1ms1-Ss1ms設(shè)備要求流速.疆度要恒定，測(cè)歐電新用高精度供電電源氣源要嚴(yán)格凈化,放大器能測(cè) i(TYA) )無干擾載氣要除 5,果用脈沖式 ECD質(zhì)最好的加光片和光電倍增管、合適的 SH比(1)(1)熱導(dǎo)檢測(cè)器(TCD)(TCD)原理是根據(jù)不同物質(zhì)有不同白導(dǎo)熱系數(shù)。如圖中的 A A 和 B B 兩個(gè)通氣孔道都通人純載氣時(shí)，由于氣體把熱絲上的熱量帶走一部分，熱絲(4)(4)及(5)(5)的溫度均下降，但是因?yàn)?4)(4)與(5)(5)的阻值(即相當(dāng)于圖中的

10、RSRS 和 S1)S1)相等，載氣氣流速度也相等，即帶走的熱量也相等，兩根熱絲(通過電流使其加熱到一定的溫度)的溫度下降也相等。因而在平衡時(shí)，RSRS 和 S1S1 的電阻也相等。反映在惠斯登電橋上無信號(hào)輸出。但是當(dāng) B B 通氣孔道有樣品通過時(shí)，樣品的導(dǎo)熱系數(shù)和載氣不同，因而從 A A、B B 二孔道帶走的熱量就不相等，熱絲(4)(4)與(5)(5)溫度就不同，相應(yīng)的電阻值就不一樣。所以惠斯登電橋就不平衡了，于是就有信號(hào)輸出。而且當(dāng) B B 孔道中樣品濃度越大、兩個(gè)孔道中熱絲的電阻差別也越大，輸出的信號(hào)也越大。圖4-16圾始的子化檜澗解1即1i收她3也比國(guó)金一TC值嘎6點(diǎn)大致凰G轅謝匿生庫

11、(2)(2)氫焰離子化檢測(cè)器(FID)(FID)在農(nóng)藥常量分析中廣為應(yīng)用?；瘜W(xué)離子化理論，即正離子的產(chǎn)生是由于有機(jī)物在火焰中產(chǎn)生裂解，生成被激發(fā)的分子、自由基和自由原子，它們進(jìn)行碰撞和能量交換，從而形成正離子。也產(chǎn)生電子。(3)(3)電子捕獲檢測(cè)器(ECD)(ECD)廣泛用于殘留量分析。載氣 N2N2 被放射源放出來的 3 3 射線電離，生成正離子和低能量電子，在此過程中大量的自由電子在電場(chǎng)作用下奔向陽極，在大量電子向陽極運(yùn)動(dòng)的過程中有一部分又與正離子復(fù)合，達(dá)到平衡時(shí)就形成檢測(cè)器的基流。當(dāng)有電負(fù)性的組分進(jìn)入檢測(cè)池時(shí)，它就捕捉池2ILH中的電子，于是基流就降低。形成色譜峰。-I-I-, ,甲 r

12、ifrif.二，.”1用怩2明愛的綠體.3池體.4放時(shí)/(4)(4)火焰光度檢測(cè)器(FPD)(FPD)在農(nóng)藥的殘留量分析中具有重要作用。從色譜柱流出的含硫或含磷化合物的載氣，先與空氣混合，從檢測(cè)器下部進(jìn)入火焰噴嘴，噴嘴周圍的小孔供給過量的氫氣(富氧火焰)，點(diǎn)燃后可形成一穩(wěn)定的火焰。在適當(dāng)?shù)臏囟认铝蚧衔锟缮杉ぐl(fā)態(tài)的分子，當(dāng)它回到基態(tài)時(shí)，發(fā)射出 350350430430nmnm 的特征光譜，在 394nm394nm 的最大波長(zhǎng)處，借助濾光片測(cè)定其光強(qiáng)，從而測(cè)得化合物的含量。l l.色譜柱m.m.固定液涂于色譜柱(空心柱除外)填充物表層的液膜狀物質(zhì)即固定液。它在氣相色譜分析中對(duì)各組分的分離起著決

13、定性作用。n.n.氣-液填充色譜柱是在柱管中裝填著表面涂有一薄層高沸點(diǎn)有機(jī)物液膜的惰性固體作為固定相，高沸點(diǎn)有機(jī)化合物是固定液，而惰性固體是載體。o o 擔(dān)體承擔(dān)固定液的固體材料。擔(dān)體又稱載體。把固定液涂漬在擔(dān)體表面上，形成均勻薄膜，就構(gòu)成氣液色譜柱的填充物。擔(dān)體表面的活性是造成色譜峰形成拖尾的主要原因p.p.試漏只要將柱管全部浸入水中，將出口堵死，人口通人氮?dú)?N2)(N2)在高于使用的操作壓力下，以管壁沒有氣泡冒出為合格。q.q.定性分析一般根據(jù)色譜保留值進(jìn)行定性分析r.r.定量分析依據(jù)：被測(cè)組分的重量或該組分在載氣中的濃度與色譜圖上的峰面積或峰高成正比。常用的定量方法：用出蠟尤應(yīng)檜身器I

14、-北電笆埴管1：地光3下英畝4火烙區(qū)1E一喉/H一靴/兒F1(1)(1)歸一化法(2)(2)內(nèi)標(biāo)法若測(cè)定樣品中某一組分或某幾個(gè)組分的含量，可以把一定量的某一種純物質(zhì)，加入到樣品內(nèi)作為內(nèi)標(biāo)物，然后液相色譜a.a.選擇性色譜離的指標(biāo)，亦稱分離因子。它是兩柱的選擇性是衡量二個(gè)化合物能否分個(gè)組分凈保留時(shí)間的比或兩個(gè)組分的平衡分配之比。t t0為溶劑保留時(shí)間，t ti和 t t2為峰 1 1 和峰 2 2 的保留時(shí)間，a（選擇性）2-to=反式中 k ki和 k k2是農(nóng)藥 1 1 和 2 2 的分配系數(shù)。titoki（即相對(duì)保留值）b.b.容量因子某一特定化合物在色譜柱上的容量因子是衡量該柱對(duì)此化合物

15、的保留特性，化合物的凈保留時(shí)間與非滯留時(shí)間之比,c c 柱效柱效是衡量某一特定色譜柱對(duì)化合物的譜帶展寬度和改善分離的能力使用理論塔板白相當(dāng)高度 HETPHETP（或 H H）較方便，它也是柱效率的量度。d.d.分離度相鄰兩個(gè)峰的分離程度稱為分離度 R R。兩個(gè)峰尖之間距離越大，分離度越大；兩峰越寬則分離度越低。e e 流程圖1 1.高壓輸液系統(tǒng)toLHETP=一N-tiR一/ /、,、(-)(Wi+W2)高壓泵分離什器T郵卡0（貯液器、輸液泵、梯度淋洗裝置）2 2.進(jìn)樣系統(tǒng)（進(jìn)樣器）3 3.分離系統(tǒng)（色譜柱）4 4.檢測(cè)系統(tǒng)（檢測(cè)器）5 5.數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)（記錄儀和積分儀）進(jìn)行色譜定量計(jì)算。計(jì)算

16、方法為：通過測(cè)出內(nèi)標(biāo)物的峰面積和欲測(cè)定組分的峰面積后，計(jì)算該組分的含量。（3 3）外標(biāo)法。用配制已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣進(jìn)行色譜分析，以各組分的峰高或峰面積和與其相對(duì)應(yīng)的濃度作標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后在與標(biāo)準(zhǔn)試樣測(cè)定時(shí)同樣的操作條件分析試樣并與標(biāo)準(zhǔn)樣進(jìn)行比較。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，從標(biāo)準(zhǔn)曲線中計(jì)算出試樣的濃度。工廠的日常控制分折，較多采用這種方法。表 4-84-8 各種定方法的比較外標(biāo)法計(jì)算公式產(chǎn)*=“1010。/適用范圍適用于常量分析，試樣中全部更分流出優(yōu)點(diǎn)作鮑件對(duì)堵果影響不大缺點(diǎn)前定低含量粕微量雜質(zhì)時(shí)誤差較大，不宜采用對(duì)松溯器高線性要求對(duì)俎分仝部組分流出都有晌應(yīng)ptXKK100%4 4 人適用于假鼠組分的精碉定宿等

17、結(jié)果較精確，對(duì)操作條件要求不嚴(yán)每次分析，要求林址較為麻填，需要純內(nèi)擇物傀被測(cè)組分與內(nèi)標(biāo)物流出T并有響應(yīng)產(chǎn)，X1QO適用于工廠常規(guī)分析快速方便擷作條件對(duì)結(jié)屣影響較大中需鑒純的外振物低被溯見分流出有響應(yīng)小雞猴子工作室f.f.常用的除氣方法1)1)加熱法2)2)抽真空法3)3)超聲波處理可在貯液容器中充滿氮?dú)饣虬睔夥乐鼓撤N溶劑被氧化g g 梯度洗脫所謂梯度洗脫是在一個(gè)色譜分析周期里不斷改變流動(dòng)相的化學(xué)組分，使一些復(fù)雜混合物的分析能做到：1)1)提高分辨能力；2)2)峰形得到改善；3)3)縮短分析周期。h.h.進(jìn)樣系統(tǒng)進(jìn)樣器進(jìn)樣、閥進(jìn)樣、自動(dòng)進(jìn)樣器。i.i.保護(hù)柱在分析柱前連接一根 3-5cm3-5c

18、m 長(zhǎng)的保護(hù)柱，可防止來自流動(dòng)相和樣品中的不溶性微粒對(duì)色譜掛的堵塞，還可避免硅膠或鍵合相的流失，可維護(hù)柱效。j.j.檢測(cè)器是用于連續(xù)檢測(cè)柱流出物中不同組分及其含量的部件，主要用于監(jiān)測(cè)經(jīng)色譜柱分離后的組分濃度的變化，并由數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)繪出圖譜來進(jìn)行定性和定量分析。k.k.常用的檢測(cè)器紫外檢測(cè)器(UVD)(UVD)、示差折光檢測(cè)器( (RIDRID) )、電導(dǎo)檢測(cè)器( (ECDECD) )、熒光檢測(cè)器( (FD)FD)和蒸發(fā)激光散射檢測(cè)器( (ELSDELSD) )l l.判定檢測(cè)器性能的指標(biāo)(1)(1)靈敏度:以組分響應(yīng)曲線的斜率來表示,斜率愈大，表示靈敏度愈高。(2)(2)噪聲：與樣品無關(guān)的輸出

19、信號(hào)的變化,除了由于儀器的電子系統(tǒng)、電源電壓或溫度的波動(dòng)外，洗脫液的氣泡和污染可能是出現(xiàn)噪聲的主要原因。(3)(3)漂移：基線隨時(shí)間增加而產(chǎn)生的定向緩慢變化，噪聲和漂移都直接影響檢測(cè)能力和分析工作的誤差。(4)(4)最小檢測(cè)限：色譜峰高度為最大噪聲兩倍時(shí)的檢出量。(5)(5)線性范圍：檢測(cè)器輸出信號(hào)與被測(cè)組分量呈線性關(guān)系的范圍。m.m.液固吸附色譜根據(jù)樣本中各組分對(duì)固定相表面吸附作用的差異，適用于分離溶于有機(jī)溶劑、具有中等分子量、非離子型的化合物。競(jìng)爭(zhēng)吸附現(xiàn)象：試樣分子取代溶劑分子而吸附在吸附劑表面。如果溶劑分子吸附性強(qiáng)，則被吸附的試樣分子(X)(X)相應(yīng)減少。流動(dòng)相：e e0 0 值表示該流

20、動(dòng)相在選定吸附劑上相對(duì)極性地大小： 0=0=(E0)a/Ae(E0)a/Ae0 0 值大，表示流動(dòng)相地極性大，反之流動(dòng)相地極性小?；旌先軇┫到y(tǒng)：(1)(1)洗脫劑將樣品溶解和將各組分分離(2)(2)調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)保留時(shí)間的長(zhǎng)短，并改善樣品中某些分離不理想的組分。n.n.液液分配色譜根據(jù)樣品組分在互不相溶的兩種液相中分配系數(shù)的不同，來實(shí)現(xiàn)分離分析的。組分在固定相中的狗莖&組分在固定相中的濃度和在流動(dòng)相中的濃度之比即為分配系數(shù)K2組分在流動(dòng)相中的癡KVK K 侑大：物質(zhì)在柱中停留時(shí)間長(zhǎng)：移動(dòng)辣唐慢：保留體積大：保留時(shí)間長(zhǎng);K K 值小.移動(dòng)諫回快.保留時(shí)間短。正相液?色譜：極性固定相和非極性溶劑作流動(dòng)

21、相反相液?色譜：非極性固定相和極性流動(dòng)相采用強(qiáng)極性溶劑如水、甲醇、乙睛或無機(jī)鹽的緩沖液作為流動(dòng)相。(以水為基本溶劑，改變水一甲醇或水一乙睛的配比，可改變樣品組分的 KK值，因而獲得較好的分離。)采用的固定相表面是極性小的煌基，如十八烷基、辛烷基和苯基等。正相和反相液液色譜的區(qū)別：固定相極性溶劑極性樣本洗脫次序增加溶劑極性的效果o.o.離子交換色譜基于離子交換劑上可電離的離子與流動(dòng)相中具有相同電荷的組分離子間進(jìn)行可逆交換。凡是能在流動(dòng)相中離解的組分都可以用離子交換色譜法進(jìn)行分離和分析。陽離子交換劑：其骨架帶負(fù)電荷，能吸引或保留帶正電荷的離子。帶有磺酸基和竣基陰離子交換劑：其骨架帶正電荷，能吸引或

22、保留帶負(fù)電荷的離子。帶有季胺基或胺基的交換容量：以結(jié)構(gòu)內(nèi)部起交換作用的離子基團(tuán)的濃度來表示的，即每克干交換劑可交換離子的毫（微）克當(dāng)量數(shù)。pHpH 低時(shí)，陽離子交換劑的離子化受到抑制，交換容量減少。陰離子交換劑在 pHpH 高時(shí)也受到抑制。p.p.化學(xué)鍵合相色譜法化學(xué)鍵合相色譜是采用化學(xué)鍵合固定相的色譜。固定相：酯化鍵合（SiSiO OC C 型）硅烷化鍵合（SiSiO OSiSiC C 型）q.q.內(nèi)標(biāo)物在應(yīng)用氣相色譜進(jìn)行農(nóng)藥分析時(shí)，有些因素如樣本量、氣體流速、柱溫和檢測(cè)器溫度以及所用溶劑的揮發(fā)性等，都能影響檢測(cè)器的響應(yīng)，使用內(nèi)標(biāo)物可以抵消這些影響,提高精密度和準(zhǔn)確度。內(nèi)標(biāo)物的選擇條件：必須

23、是在分析的樣本中沒有的成分；其保留時(shí)間應(yīng)與樣本接近；農(nóng)藥成分與內(nèi)標(biāo)物之峰高（或峰面積）比應(yīng)該基本一致；內(nèi)標(biāo)物對(duì)樣本組分不起化學(xué)或其它作用；內(nèi)標(biāo)物應(yīng)該與樣本中所有的雜質(zhì)峰分開。此外，在高效液相色譜中，選擇內(nèi)標(biāo)物時(shí)，要注意化合物對(duì)紫外吸收光譜的響應(yīng)。內(nèi)標(biāo)物種類：氣相色譜法一一鄰苯二甲酸酯和鏈烷高效液相色譜一一鄰苯二甲酸酯 C6H4C6H4（COORCOOR）2 2、取代苯基酮 C6H5-CO-RC6H5-CO-R 和苯酚類化合物內(nèi)標(biāo)法：R R= =標(biāo)準(zhǔn)品的峰高或峰面積/內(nèi)標(biāo)的峰高或峰面積為了確定一內(nèi)標(biāo)物的保留時(shí)間，最好是取 10102020 倍于正常測(cè)定濃度的待分析農(nóng)藥，或增加儀器的靈敏度 101

24、02020倍進(jìn)樣次序?yàn)椋簶?biāo)樣溶液；樣本溶液；樣本溶液；標(biāo)樣溶液。計(jì)算：有效成分含量（%尸 RS 一R1m2R1R1標(biāo)樣與內(nèi)標(biāo)物峰高（或峰面積）比的平均值；R2R2樣本與內(nèi)標(biāo)物峰高（或峰面積）比的平均值；mlml 標(biāo)準(zhǔn)品的稱樣量，g;g;m2m2 樣本的稱樣量，g;g;P P農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品的百分含量正相極性大或中等極性小或中等非極性先出來降低洗脫時(shí)間反相極性小或中等極性中等或大極性強(qiáng)先出來增加洗脫時(shí)間3.薄層色譜法a.a.概念利用色譜原理在薄層板上對(duì)混合物中各組分進(jìn)行分離、t t 化和分析的方法。用于定性和半定量分析b.b.原理按分離機(jī)制可以分為吸附、分配、離子交換及凝膠色譜法等（1 1）吸附薄層色

25、譜法由于樣本各組分的理化性質(zhì)不同，它們?cè)谖絼┥系奈阶饔靡膊煌?，在展開劑中的洗脫作用也不同，各組分隨展開劑由原點(diǎn)向預(yù)定的前沿移動(dòng)時(shí)，在兩相間反復(fù)進(jìn)行吸附和解吸附，吸附強(qiáng)的組分難于被展開劑溶解下來，移動(dòng)速度小，吸附弱的成分較易被展開劑解吸附，移動(dòng)速度較大，移動(dòng)速度的差別，使各成分分離。各組分經(jīng)展開后在薄層板上遷移距離的數(shù)值，可用比移值 RfRf（定性分析依據(jù)）表示。比移值（Rf值）:農(nóng)藥譜帶中心至原點(diǎn)的距離_（cm）f展開劑前沿至原點(diǎn)的距離（cm）影響分離效率的主要因素：展開劑的選擇和移動(dòng)速度吸附劑的顆粒大小合適的展開距離樣點(diǎn)的濃度與大小吸附劑的種類：淀粉、菊根扮、滑石、碳酸鈣、碳酸鎂、硅膠、

26、氧化鋁、活性碳、纖維素和聚酰胺等，常用的吸附劑主要是硅膠和氧化鋁。含水量高，吸附力減弱，活性降低吸附劑的細(xì)度在 30305050 刈較好展開劑的種類：石油醒、己烷環(huán)己烷苯甲苯氯仿乙醛乙酸乙酯丙酮乙醇甲醇甲酰胺水乙酸檢出方法：螢光硅膠板在紫外燈下顯色碘顯色氯化鋁顯色硝酸銀一氫氧化俊顯色定量分析法：直接測(cè)定法一一目測(cè)法、測(cè)面積法、薄層掃描儀法溶出定量法一一滴定法、極譜法、可見紫外分光光度法光譜分析1 .紅外光譜a.a.概念屬于分子吸收光譜，紅外光譜是由分子振動(dòng)能級(jí)的躍遷，并伴隨著分子中轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)的躍遷而產(chǎn)生的,所以紅外光譜又稱為分子振動(dòng)一轉(zhuǎn)動(dòng)光譜。主要是定性分析當(dāng)連續(xù)的紅外輻射通過物質(zhì).其中某些頻率

27、被物質(zhì)吸收。將通過物質(zhì)后的紅外輻射按波長(zhǎng)或波數(shù)分開。逐一地測(cè)量其透過率，并記錄下來，就獲得紅外光譜圖。b.b.主要研究?jī)?nèi)容中紅外區(qū)主要用于研究分子振動(dòng)能級(jí)的躍遷c.c.被測(cè)物性質(zhì)化學(xué)結(jié)構(gòu)的對(duì)稱性差的，紅外吸收較強(qiáng)，對(duì)稱性好的則紅外吸收較弱不同的官能團(tuán)吸收不同頻率的紅外光。不同官能團(tuán)的極性或所能引起的偶極矩變化不同，紅外吸收峰的強(qiáng)弱就不同 d.d.定量分析依據(jù)比耳一朗勃特（BeerBeerLambertLambert）定律。A A= =abcabc2 .可見紫外分光光度法（波長(zhǎng)范圍一一400nm-800nm）a.a.分光光度法概念根據(jù)物質(zhì)對(duì)光具有選擇性的吸收特征而建立起來的一種分析方法，通常又稱吸收光譜法。吸收光譜是可見光譜、紫外光譜和紅外光譜的統(tǒng)稱。物質(zhì)的分子在室溫下，一般處于基態(tài)能級(jí)，當(dāng)它受到電磁輻射的作用時(shí),吸收一定能量的光子，使分子受到激發(fā)，就從原來能量較低的基態(tài)能級(jí)躍遷到能量較高的能級(jí)（激發(fā)態(tài)），而產(chǎn)生吸收光譜。b.b.分光光度計(jì)結(jié)構(gòu)由光源、分光系統(tǒng)（單色