1、.生物技術理論第34講微生物的培養和利用考試說明 1.微生物的別離和培養實驗與探究才能。2.某種微生物數量的測定實驗與探究才能。3.培養基對微生物的選擇作用實驗與探究才能。4.微生物在其他方面的應用實驗與探究才能。考點一微生物的實驗室培養 1.培養基1概念:人們按照微生物對的不同需求,配制出供其生長繁殖的。2營養成分:水、無機鹽四類營養物質,另外還需要滿足微生物生長對、特殊營養物質以及的要求。3類型:培養基含凝固劑,培養基不含凝固劑。 2.無菌技術1目的:獲得。2關鍵:防止的入侵。3無菌技術的主要方法及適用對象連線 措施 操作對象 主要方法ya消毒b.滅菌.培養基.接種環.操作者雙手.培養皿.

2、無菌室.牛奶灼燒滅菌干熱滅菌巴氏消毒紫外線消毒化學消毒高壓蒸汽滅菌 3.制備牛肉膏蛋白胨固體培養基1步驟:計算溶化倒平板。2倒平板的過程在火焰旁右手拿錐形瓶,左手。右手拿錐形瓶,使錐形瓶的瓶口迅速通過。左手將培養皿翻開一條縫隙,右手將培養基倒入培養皿,左手立即蓋上。待平板冷卻凝固后,將平板放置,使皿蓋在下、皿底在上。 4.純化大腸桿菌1原理:在培養基上將細菌稀釋或分散成細胞,使其長成單個的菌落,這個菌落就是純化的細菌菌落。圖11-34-12平板劃線法圖11-34-1中:通過接種環在瓊脂固體培養基外表的操作,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基的外表。3稀釋涂布平板法圖11-34-1中:將菌液進展一

3、系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到的外表,進展培養。當稀釋倍數足夠高時,即可獲得單個細菌形成的。 5.菌種的保藏1對于頻繁使用的菌種,可以采用法。2對于需要長期保存的菌種,可以采用法。 1.消毒和滅菌的區別條件結果消毒較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體外表或內部一部分對人體有害的微生物不包括芽孢和孢子滅菌強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物,包括芽孢和孢子 2.兩種純化細菌的方法的比較比較工程平板劃線法稀釋涂布平板法關鍵操作接種環在固體平板培養基外表連續劃線一系列的梯度稀釋涂布平板操作優點可以根據菌落的特點獲得某種微生物的單細胞菌落既可以獲得單細胞菌落,又能對微生物計數缺點不能

4、對微生物計數操作復雜,需要涂布多個平板適用范圍適用于好氧菌適用于厭氧菌和兼性厭氧菌 3.平板劃線操作3個易錯點1灼燒接種環之后,要冷卻后再進展接種,以免溫度太高殺死菌種。2劃線時最后一區域不要與第一區域相連。3劃線用力要大小適當,防止用力過大將培養基劃破。1.2019廣東韶關一模 為了調查北江河中細菌的污染情況,某研究性學習小組同學進展了實驗。實驗包括制備培養基、滅菌、接種及培養、菌落觀察計數。請答復與此實驗相關的問題。1實驗中制備的牛肉膏蛋白胨培養基的部分成分列表如下:成分牛肉膏蛋白胨NaCl蒸餾水含量0.5 g1 g0.5 g100 mL表中各成分含量的比例確定的原那么是。2對培養基進展滅

5、菌,通常采用的方法是。為了使培養基到達良好的滅菌效果,一般在壓力為100 kPa,溫度為的條件下,維持1530 min。3為了更好地對細菌計數,一般采用的接種方法是,該方法的操作是將菌液進展一系列的,然后再分別到瓊脂固體培養基的外表。4接種后放在恒溫箱培養一段時間后,為保證結果準確,選擇菌落數在的平板進展計數。該組同學在菌落計數時發現,統計的菌落數比實際數目要低,可能的原因是。2.2019福建漳州三模 如圖11-34-2為微生物的實驗培養和純化醋酸菌的部分操作步驟。請答復以下問題:圖11-34-21是制備培養基時中的主要操作,該操作需使錐形瓶的瓶口通過火焰,目的是通過,防止瓶口的微生物污染培養

6、基。2該純化醋酸菌的接種方法是。完成步驟的操作,接種共需要次灼燒處理。3純化的醋酸菌菌種將頻繁用于果醋消費,那么可以采用的方法保存菌種,但這種方法保存的時間不長,原因是。4將醋酸菌參加果酒中,乙醇可為醋酸菌的生命活動提供,將溫度控制在,可以獲得較多果醋。考點二土壤中分解尿素的細菌的別離與計數 1.挑選菌株1自然界中目的菌株挑選的根據:根據它對的要求,到相應的環境中去尋找。2實驗室中微生物挑選的原理:人為提供有利于生長的條件包括營養、溫度、pH等,同時抑制或阻止其他微生物生長。3選擇培養基:允許特定種類的微生物生長,同時和其他種類微生物生長的培養基。 2.統計菌落數目1常用方法:法。2統計根據:

7、當樣品的足夠高時,培養基外表生長的一個菌落,來源于樣品稀釋液中的一個。通過統計平板上的菌落數,就能推測出樣品中大約含有多少活菌。3其他方法:還可利用計數。 3.設置對照設置對照的主要目的是排除實驗組中對實驗結果的影響,進步實驗結果的,例如為了排除培養基被雜菌污染的可能性,需以培養基培養作為空白對照。 4.實驗設計工程內容實驗原理1能合成的細菌才能分解尿素2配制以為唯一氮源的培養基,可以生長的細菌就是能分解尿素的細菌實驗流程土壤取樣富含配制土壤溶液和制備培養基涂布平板與培養菌落鑒定1方法:在以尿素為唯一氮源的培養基中參加指示劑培養分解尿素的細菌2原理:細菌分解尿素的反響中,細菌合成脲酶將尿素分解

8、成了,其會使培養基中的增強,pH升高 1.選擇培養基的作用原理1在培養基中參加某種化學物質,如參加青霉素可以別離出酵母菌和霉菌;參加高濃度的食鹽可以得到金黃色葡萄球菌。這里的參加是在滿足根本所需培養成分的根底上參加。2改變培養基中的營養成分,如缺乏氮源時可以別離出固氮微生物;以石油作為唯一碳源時,可以別離出能消除石油污染的微生物。3改變微生物的培養條件,如將培養基放在高溫環境中培養可以得到耐高溫的微生物。4通過某些特殊環境別離微生物,如在高鹽環境中可別離出耐鹽菌;在高溫環境中可別離得到耐高溫的微生物。 2.培養基的種類與應用分類根據種類特點應用物理性質液體培養基不加凝固劑工業消費半固體培養基加

9、凝固劑少觀察微生物的運動、微生物的別離、鑒定固體培養基加凝固劑多微生物的別離、鑒定,活菌計數、保藏化學成分天然培養基含化學成分不明的天然物質工業消費合成培養基培養基成清楚確或用一定化學物質配制分類、鑒定用處選擇培養基添加某物質,抑制雜菌生長,促進所需微生物生長培養別離出特定微生物鑒別培養基根據微生物的代謝特點,在培養基中參加某種指示劑鑒別微生物3.兩種計數方法的比較比較工程間接計數法稀釋涂布平板法直接計數法顯微計數法原理當樣品的稀釋度足夠高時,培養基外表生長的一個菌落,來源于樣品稀釋液中的一個活菌,通過統計平板上的菌落數,就能推測出樣品中大約含有多少活菌利用特定細菌計數板或血細胞計數板,在顯微

10、鏡下計算一定容積的樣品中微生物的數量公式每克樣品中的菌落數:CVM。C:某稀釋度下平板上生長的平均菌落數;V:涂布平板時所用的稀釋液的體積mL;M:稀釋倍數每毫升原液所含細菌數:每小格平均細菌數40010 000稀釋倍數缺點當兩個或多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落不能區分細胞死活結果比實際值偏小比實際值偏大【題組訓練】1.2019南昌一模 下表為某微生物培養基的配方,請答復相關問題:成分含量成分含量Na2HPO43 g尿素1.0 gK2HPO41 gC6H12O630 gMgSO47H2O0.5 g瓊脂15 gFeSO40.01 gH2O1000 mLNH4NO30.3 g1按物

11、理性質劃分,該培養基屬于培養基,無論配制何種培養基,在原料稱量、溶化之后都要先,然后分裝、包扎并滅菌,常用的滅菌方法是。2根據培養基的成分判斷,該培養基能否用于別離土壤中分解尿素的細菌?,原因是。3為檢測尿素分解菌是否存在,還應參加,假如存在,將出現反響。4微生物常用的接種方法有。2.某研究小組從牛的瘤胃中采集樣本,進展分解尿素的微生物的別離與計數。實驗根本步驟如圖11-34-3所示。配制培養基滅菌、倒平板接種培養觀察、統計圖11-34-31分解尿素的微生物含有,因此,配制培養基時以尿素作為唯一氮源,尿素會被分解成,使培養基的堿性增強。2配制培養基時,需添加瓊脂,瓊脂起的作用;培養基中添加作為

12、指示劑,可使目的菌落的周圍產生紅色環帶。3對尿素溶液進展滅菌的最適方法是滅菌。A.高壓蒸汽B.干熱C.添加抗生素D.過濾E.紫外線照射F.70%酒精浸泡4該小組在接種前,隨機取假設干滅菌后的空白平板先行培養了一段時間,這樣做的目的是;然后將1 mL瘤胃樣液稀釋1000倍,在3個平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液;經適當培養后,3個平板的菌落數分別為49、47和45。據此可得出每升瘤胃樣液中分解尿素的微生物活菌數為個,理論上,統計的菌落數往往填“低“等或“高于接種的實際活菌數目。易錯點撥“選擇菌落數在30300的平板的提醒1只得到1個菌落數在30300的平板是錯誤的,原因是不符合實驗的重復

13、原那么,易受到偶爾因素的影響。2得到3個或3個以上菌落數在30300的平板,也不一定正確,原因是假如不同平板間差異較大,如得到3個平板,菌落數分別為230、34、240,雖然菌落數均在“30300,但由于34與另外兩個平板差異較大,應找出原因并重新實驗。考點三分解纖維素的微生物的別離 1.纖維素酶1纖維素酶是一種復合酶,一般認為它至少包括、和三種組分。2作用:纖維素。 2.纖維素分解菌的挑選1方法:法。纖維素分解菌2原理:剛果紅纖維素紅色消失,出現。3培養基:以為唯一碳源的選擇培養基。4實驗流程土壤取樣:富含的環境選擇培養:用培養,以增加纖維素分解菌的濃度 :制備系列稀釋液涂布平板:將樣品涂布

14、到的培養基上 挑選產生的菌落 1.別離纖維素分解菌所用的兩種培養基比較別離纖維素分解菌的實驗中先用選擇培養基,再用鑒別培養基。1選擇培養基為液體培養基,以纖維素為碳源和能源的微生物可以正常生長,而其他絕大多數微生物不能正常生長;因培養基中無凝固劑,故其為液體培養基,利用液體培養基能使營養成分被充分消耗,以增加纖維素分解菌的濃度。2鑒別培養基含瓊脂,為固體培養基,細菌可在培養基上形成肉眼可見的菌落。剛果紅染色法應用的就是鑒別培養基。 2.挑選微生物的兩個實例比較比較工程土壤中分解尿素的細菌的別離分解纖維素的微生物的別離方法利用以尿素為唯一氮源的選擇培養基進展選擇培養利用以纖維素為唯一碳源的選擇培

15、養基進展選擇培養續表比較工程土壤中分解尿素的細菌的別離分解纖維素的微生物的別離原理分解尿素的細菌可以合成脲酶,故能在以尿素為唯一氮源的培養基上生長培養基中含有豐富的纖維素,可以分解纖維素的微生物具有更多的生存時機而大量繁殖鑒定在培養基中參加酚紅指示劑,指示劑變紅說明尿素被分解,從而說明菌落中的細菌為分解尿素的細菌剛果紅染色法,菌落周圍出現紅色消失的透明圈,該菌落為分解纖維素的微生物的菌落1.2019成都一診 牛的食物主要是草莖類,其中含有大量的纖維素。牛胃內的微生物在幫助消化和利用植物纖維素方面起了決定性的作用。答復以下問題:1纖維素是地球上含量最豐富的多糖類物質,組成纖維素的單體為。牛胃中某

16、些微生物可以產生纖維素酶,這種酶是一種復合酶,其中的能使纖維素分解成纖維二糖。 2實驗室培養牛胃內的微生物,別離得到高純度纖維素分解菌的關鍵環節是。為防止周圍環境中微生物的污染,實驗操作應在附近進展;倒平板用的培養皿需要保持枯燥,可以采用法進展滅菌。3為了從牛胃的食糜中別離出纖維素分解菌,配制的選擇培養基要以為唯一碳源。挑選纖維素分解菌時,常用的剛果紅染色法有兩種,一種是先培養微生物,再參加剛果紅進展顏色反響,另一種是。在涂布平板時滴加到培養基外表的菌懸液量不宜過多,原因是。2.2019河北石家莊二模 為了別離和純化高效分解石油的細菌,科研人員利用被石油污染過的土壤進展如圖11-34-4所示的

17、實驗。圖11-34-41配制好的培養基通常使用法滅菌。步驟與步驟中培養基成分相比,最大的區別是。2同學A進展步驟的操作,其中一個平板經培養后的菌落分布如圖乙所示。該同學的接種方法是,出現圖乙結果可能的失誤操作是。3同學B也按照同學A的接種方法進展了步驟的操作:將1 mL樣品稀釋100倍,在3個平板上分別接入0.1 mL稀釋液;經適當培養后,3個平板上的菌落數分別為56、58和57。據此可得出每升樣品中的活菌數為個。4步驟需要振蕩培養,原因是5步驟后取樣測定石油含量的目的是。歷年真題明考向1.2019全國卷 某些土壤細菌可將尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。答復以下問題:1有些細菌能分

18、解尿素,有些細菌那么不能,原因是前者能產生。能分解尿素的細菌不能以尿素的分解產物CO2作為碳源,原因是但可用葡萄糖作為碳源,進入細菌體內的葡萄糖的主要作用是答出兩點即可。2為了挑選可分解尿素的細菌,在配制培養基時,應選擇填“尿素“NH4NO3或“尿素+NH4NO3作為氮源,不選擇其他兩組的原因是3用來挑選分解尿素細菌的培養基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有答出兩點即可。2.2019江蘇卷 苯酚及其衍生物廣泛存在于工業廢水中,對環境有嚴重危害。小明同學準備根據圖11-34-5操作步驟,從處理廢水的活性污泥中別離挑選酚降解高效菌株。請答復以下問題: 圖11-34-51酚降解菌富集培養基含

19、有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作為碳源的有。2將采集到的樣品接種培養,苯酚用量應隨轉接次數增加而逐漸,以到達富集酚降解菌的目的。假設上圖平板中菌落過于密集,應進一步,以便于菌落計數與別離。制備平板培養基時除了需要水、營養物質外,還必須添加。3圖11-34-6為連續劃線法示意圖,在圖中填圖中序號區域更易獲得單菌落。 圖11-34-64采用比色測定法使用苯酚顯色劑檢測降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系列濃度梯度并進展顯色反響,下表中15號比色管的苯酚濃度應分別為管號123456苯酚濃度mg/L1 假如廢水為50 mg/L 苯酚溶液,降解后約有21%的苯酚殘留,那么需將殘留液稀

20、釋填序號:51020倍后,再進展比色。3.2019全國卷 空氣中的微生物在重力等作用下,可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板搜集教室空氣中的微生物,以理解教室內不同高度空氣中微生物的分布情況。實驗步驟如下:配制培養基成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O; 制作無菌平板; 設置空白對照組和假設干實驗組,進展相關操作; 將各組平板置于37 恒溫箱中培養一段時間,統計各組平板上菌落的平均數。答復以下問題:1該培養基中微生物所需的氮來源于。假設要完成步驟,該培養基中的成分X通常是。2步驟中,實驗組的操作是3假設在某次調查中,某一實驗組平板上菌落平均數為36個/平板,而空白對照組的一個平板上出現

21、了6個菌落,這種結果說明在此次調查中出現了現象。假設將30即36-6個/平板作為本組菌落數的平均值,該做法填“正確或“不正確。4.2019全國卷 某同學用新穎的泡菜濾液為實驗材料別離純化乳酸菌。別離純化所用固體培養基中因含有碳酸鈣而不透明,乳酸菌產生的乳酸能溶解培養基中的碳酸鈣。答復以下問題:1別離純化乳酸菌時,首先需要用對泡菜濾液進展梯度稀釋,進展梯度稀釋的理由是。2推測在別離純化所用的培養基中參加碳酸鈣的作用有和。別離純化時應挑選出的菌落作為候選菌。3乳酸菌在-20 長期保存時,菌液中常需要參加一定量的填“蒸餾水“甘油或“碳酸鈣。第34講微生物的培養和利用考點一【知識梳理】1.1營養物質營

22、養基質2碳源氮源pH氧氣3固體液體2.1純潔培養物2外來雜菌3a-a-a-b-b-b-3.1稱量滅菌2拔出棉塞火焰培養皿的皿蓋倒過來4.1單個2A連續劃線3B瓊脂固體培養基菌落5.1臨時保藏2甘油管藏【題組訓練】1.1根據所培養微生物對各營養成分的需求量或比例 2高壓蒸汽滅菌1213稀釋涂布平板法梯度稀釋涂布430300某些菌落可能是由兩個或多個細菌連在一起形成的解析 1培養基配制的過程中,成分含量的比例確定的原那么是根據所培養微生物對各營養成分的需求量或比例。2對培養基進展滅菌,通常采用的方法是高壓蒸汽滅菌,即將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內,為到達良好的滅菌效果,一般在壓力為1

23、00 kPa,溫度為121 的條件下,維持1530 min。3為了更好地對細菌計數,一般采用的接種方法是稀釋涂布平板法,該方法的操作是將菌液進展一系列的梯度稀釋,然后再分別涂布到瓊脂固體培養基的外表。4接種后放在恒溫箱培養一段時間后,為保證結果準確,選擇菌落數在30300的平板進展計數。由于某些菌落可能是由兩個或多個細菌連在一起形成的,因此統計的菌落比實際數目要低。2.1倒平板滅菌2平板劃線法63臨時保藏菌種容易被污染或產生變異4能量3035解析 1是制備培養基時倒平板中的主要操作,該操作需使錐形瓶的瓶口通過火焰,目的是通過滅菌,防止瓶口的微生物污染培養基。2根據圖可知,該純化醋酸菌的接種方法

24、是平板劃線法。平板劃線時,每次劃線前都要進展灼燒,最后一次劃線完畢也要進展灼燒,因此共需要6次灼燒處理。3純化的醋酸菌菌種將頻繁用于果醋消費,那么可以采用臨時保藏的方法保存菌種,但這種方法保存的時間不長,原因是菌種容易被污染或產生變異。4將醋酸菌參加果酒中,乙醇可為醋酸菌的生命活動提供能量;果醋發酵的適宜溫度是3035 。考點二【知識梳理】1.1生存環境2目的菌株3抑制阻止2.1稀釋涂布平板2稀釋度活菌3顯微鏡直接3.非測試因素可信度未接種的4.脲酶尿素有機質系列稀釋計數酚紅氨堿性【題組訓練】1.1固體調pH高壓蒸汽滅菌2不能培養基中含有NH4NO3,尿素不是唯一氮源3酚紅紅色4平板劃線法、稀

25、釋涂布平板法和稀釋混合平板法解析 微生物培養基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽,此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養物質以及氧氣的要求,對異養微生物來說,含C、N的化合物既是碳源,也是氮源,即有些化合物作為營養要素成分時并不是起單一方向的作用。1分析題中表格可知,該培養基中參加瓊脂作為凝固劑,因此屬于固體培養基,不管何種培養基,在各成分都溶化后分裝前,要先調整pH,培養基常用的滅菌方法為高壓蒸汽滅菌。2根據培養基的成分判斷,該培養基中含有NH4NO3,尿素不是唯一氮源,因此該培養基不能用于別離土壤中分解尿素的細菌。3為檢測尿素分解菌的存在與否,在以尿素為唯一氮源的選擇培養基中參加酚紅指示劑,

26、假如存在尿素分解菌,那么指示劑將變紅色。4微生物常用的接種方法有平板劃線法、稀釋涂布平板法和稀釋混合平板法。2.1脲酶或分解尿素的酶氨或NH32凝固劑酚紅3D4檢測培養基平板滅菌是否合格4.7108低解析 常用的滅菌方法:高壓蒸汽滅菌法適用于一般培養基和玻璃器皿滅菌;干熱滅菌適用于需要保持枯燥的玻璃器皿的滅菌,凡帶有橡膠的物品和培養基都不能進展干熱滅菌;無菌室、緩沖間和接種箱常用紫外線進展空氣滅菌;微生物接種時的金屬接種工具和試管口可以用灼燒滅菌;煮沸滅菌通常不能徹底殺滅一些生物的孢子和芽孢,一般適用于餐具和不耐高溫的食品等的消毒。1分解尿素的酶是脲酶,所以分解尿素的微生物含有脲酶。尿素含有C

27、、H、O、N元素,其水解產物是二氧化碳、水和氨氣,氨氣使的培養基的堿性增強。2瓊脂是凝固劑,使培養基呈固態;培養基中的堿性物質可以與酚酞反響產生紅色環帶。3對尿素溶液進展滅菌的最適方法是過濾滅菌。4空白平板的作用是檢測培養基平板是否合格,根據題干提供的數據進展計算,每升瘤胃樣液中分解尿素的微生物活菌數為49+47+4531000101000=4.7108個。由于菌種可能重疊,所以統計的菌落數往往低于接種的實際活菌數目。考點三【知識梳理】1.1C1酶CX酶葡萄糖苷酶2纖維二糖葡萄糖2.1剛果紅染色2紅色復合物透明圈3纖維素4纖維素選擇培養基梯度稀釋鑒別纖維素分解菌透明圈【題組訓練】1.1葡萄糖C

28、1酶、CX酶 2防止外來雜菌的入侵酒精燈火焰干熱滅菌3纖維素在倒平板時就參加剛果紅培養基外表的菌懸液過多會導致菌體堆積,影響別離效果解析 1纖維素是一種多糖,其根本組成單位是葡萄糖;纖維素酶是一種復合酶,其中C1酶、CX酶能使纖維素分解成纖維二糖。2微生物別離和培養的關鍵環節是防止外來雜菌的入侵;為防止周圍環境中微生物的污染,實驗操作應在酒精燈火焰附近進展;倒平板用的培養皿需要保持枯燥,可以采用干熱滅菌法進展滅菌。3為了別離出纖維素分解菌,配制的選擇培養基要以纖維素為唯一碳源。挑選纖維素分解菌時,常用的剛果紅染色法有兩種,一種是先培養微生物,再參加剛果紅進展顏色反響,另一種是在倒平板時就參加剛

29、果紅。在涂布平板時滴加到培養基外表的菌懸液量不宜過多,原因是培養基外表的菌懸液過多會導致菌體堆積,影響別離效果。2.1高壓蒸汽滅菌步驟培養基中石油是唯一碳源2稀釋涂布平板法涂布不均勻35.71074進步培養液中溶解氧的含量,通過振蕩可使菌體與培養液充分接觸,進步營養物質的利用率5挑選出分解石油才能最強的細菌解析 1配制好的培養基通常使用高壓蒸汽滅菌法滅菌。步驟與步驟中培養基成分相比,最大的區別是步驟培養基中石油是唯一碳源。2同學A進展步驟的操作,其中一個平板經培養后的菌落分布如題圖乙所示。該同學的接種方法是稀釋涂布平板法,出現圖乙結果可能的失誤操作是涂布不均勻。3同學B也按照同學A的接種方法進

30、展了步驟的操作:將1 mL樣品稀釋100倍,在3個平板上分別接入0.1 mL稀釋液;經適當培養后,3個平板上的菌落數分別為56、58和57。據此可得出每升樣品中的活菌數為56+58+5730.11000100=5.7107個。4步驟需要振蕩培養,原因是進步培養液中溶解氧的含量,通過振蕩可使菌體與培養液充分接觸,進步營養物質的利用率。5步驟后取樣測定石油含量的目的是挑選出分解石油才能最強的細菌。歷年真題明考向1.1脲酶分解尿素的細菌是異養生物,不能利用CO2來合成有機物為細胞生命活動提供能量,為其他有機物的合成提供原料2尿素其他兩組都含有NH4NO3,能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用

31、NH4NO3,不能起到挑選作用3為細菌生長提供無機營養,作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩定解析 1催化尿素分解的酶為脲酶。分解尿素的細菌是異養生物,不能利用CO2來合成有機物。進入細菌體內的葡萄糖的主要作用是為細胞生命活動提供能量,葡萄糖的代謝中間產物可以作為合成其他有機物的原料。2能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4NO3,假如培養基中含有NH4NO3,那么不能起到挑選作用。3培養基中的KH2PO4和Na2HPO4可以為微生物生長提供鈉離子、鉀離子等,其還可以作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩定。2.1蛋白胨、苯酚2增加稀釋涂布凝固劑340、0.2、0.4、0.6、0.8解析

32、 1蛋白胨、苯酚都可以作為碳源。2為了挑選酚降解菌,苯酚用量應隨轉接次數增加而逐漸增加。假設平板中菌落過于密集,說明濃度太大,為方便菌落計數與別離,應進一步稀釋涂布。平板培養基為固體培養基,制備時必須添加凝固劑。3連續劃線法中在劃線的末尾區域菌種濃度最小,更易獲得單菌落。41號比色管作對照,苯酚濃度為0,16號比色管苯酚濃度由0逐漸增加到1 mg/L,且有梯度,所以15號比色管的苯酚濃度應分別為0、0.2、0.4、0.6、0.8 mg/L。廢水為50 mg/L苯酚溶液,降解后約有21%的苯酚殘留,那么需將殘留液稀釋20倍后,再進展比色。3.1牛肉膏、蛋白胨瓊脂2將各實驗組平板分別放置在教室不同高度的位置上,開蓋暴露一段時間3污染不正確解析 此題考察微生物的培養與計數,主要考察學生的識記、理解與實驗設計才能。1培養基中的牛肉膏和蛋白胨中都含有蛋白質,可作為氮源。用于計數的培養基應為固體培養基,需參加瓊