1、簡明生化分析臨床知識目錄11.常用臨床生化項目的分類：21.1.按化學性質分類：21.1.1.酶類：21.1.2.底物/代謝產物類：21.1.3.無機離子類：21.1.4.特種蛋白類：21.2.按臨床應用分類22.常用臨床生化項目的主要測定原理和臨床意義：23.試劑：73.1.臨床生化檢測試劑的發展歷史73.2.雙試劑的優點74.全自動生化分析儀采取二步法測定的意義84.1.雙試劑與單試劑的區別84.2.測定時采用一步法還是兩步法94.2.1.試劑本身的干擾94.2.2.樣品干擾91. 常用臨床生化項目的分類：1.1. 按化學性質分類：1.1.1. 酶類：包括ALT（谷丙轉氨酶），AST（谷草

2、轉氨酶），ALP（堿性磷酸酶），ACP（酸性磷酸酶），r-GT（谷氨酰轉移酶），-HBDH（羥丁酸酶），LDH（乳酸脫氫酶），CK（肌酸激酶），CK-MB（肌酸激酶同功酶）,-AMY（淀粉酶），MSO（），ADA（），ChE（膽堿脂酶）等。1.1.2. 底物/代謝產物類：包括TG（甘油三脂），TC（總膽固醇），HDL-C（高密度脂蛋白膽固醇），LDL-C（低密度脂蛋白膽固醇），UA（尿酸），UREA（尿素氮），Cr（肌酐），Glu（葡萄糖），TP（總蛋白），Alb（白蛋白），T-Bil（總膽紅素），D-Bil（直接膽紅素），TBA（總膽汁酸），NH4+（血氨）,CO2（二氧化碳）等。1.1.3

3、. 無機離子類：包括Ca（鈣），P（磷），Mg（鎂），Cl（氯）等。1.1.4. 特種蛋白類： (1)脂蛋白類：包括apoA1（載脂蛋白A1），apoB（載脂蛋白B），Lp(a) （脂蛋白a）等。(2)補體類：包括C3，C4，PFB(B因子)等。(3)免疫球蛋白類：包括IgG，IgA，IgM，Kappa鏈，Lambda鏈等。(4)急性時相反應蛋白：包括CRP (C反應蛋白)，AAG (a1酸性糖蛋白)，CER(銅藍蛋白)等。(5)其它：包括AAT (a1抗胰蛋白酶)，AMG (a2巨球蛋白)，TRF(轉鐵蛋白)，HPT(觸珠蛋白)，AT-III(抗凝血酶III)，PAB(前白蛋白)，B2M(2

4、微球蛋白)，MA(微白蛋白)，A1M(a1微球蛋白)，ASO(抗鏈球菌溶血素O)等。1.2. 按臨床應用分類無機離子：包括Ca，P，Mg，Cl等。肝功能：包括ALT，AST，r-GT，ALP，MSO，T-Bil，D-Bil，TBA，TP，Alb等。腎功能：UA，UREA，Cr等。心肌酶譜：CK，CK-MB，LDH，-HBDH，AST，MSO等。糖尿?。篏LU等。前列腺疾?。篈CP，p-ACP等。胰腺炎：-AMY。血脂：TC，TG，HDL-C，LDL-C，apoA1，apoB，Lp(a)。痛風：UA中毒：ChE免疫性疾?。篊3，C4，PFB(B因子)， IgG，IgA，IgM，Kappa鏈，La

5、mbda鏈。急性炎癥反應：CRP (C反應蛋白)，AAG (a1酸性糖蛋白)，CER(銅藍蛋白)，ASO(抗鏈球菌溶血素O)。2. 常用臨床生化項目的主要測定原理和臨床意義：項目測定原理臨床意義ALTNADH的減少，引起340nm吸光度的下降，下降速率與ALT活性成正比(動力學法)。ALT主要存在于肝細胞中，心肌細胞次之，活性升高表示有肝細胞損傷，也可見于心肌及骨骼肌損傷。ASTNADH的減少，引起340nm吸光度的下降，下降速率與AST活性成正比(動力學法)。AST主要存在于心肌細胞中，肝細胞次之，活性升高表示有心肌損傷，也可見于肝細胞及骨骼肌損傷。ALP對硝基苯酚的生成，引起405nm吸光

6、度的上升，上升速率與ALP活性成正比(動力學法)。ALP主要存在于骨、肝、腎和腸，活性升高見于肝膽及骨骼疾病等。r-GT5-氨基-2-硝基苯甲酸鹽的生成，引起405nm吸光度的上升，上升速率與r-GT活性成正比(動力學法)。活性升高與肝膽疾病、心肌梗塞、腦損傷、慢性酒精中毒、苯妥英鈉治療有關。-HBDHNADH的減少，引起340nm吸光度的下降，下降速率與-HBDH活性成正比(動力學法)?；钚陨吲c急性心肌梗塞有關。LDHNADH的生成，引起340nm吸光度的上升，上升速率與LDH活性成正比(動力學法)。活性升高與心肌梗塞有關,也可見于肝臟疾病、未治愈的惡性貧血、巨幼紅細胞貧血、腎臟疾病、惡性

7、腫瘤等。CKNADPH的生成，引起340nm吸光度的上升，上升速率與CK活性成正比(動力學法)。活性升高與心肌梗塞有關,也可見于肌營養不良、甲狀腺機能減退、肺梗塞、急性腦血管疾病等。CK-MB先用CK-M的抗體抑制CK-M的活性，其余同CK的測定活性升高主要見于心肌梗塞。-AMY1用生色基團對-硝基酚修飾-麥芽七糖苷(PNP-G7)作為底物，經-淀粉酶水解成小分子的寡糖苷，再經輔助酶-葡萄糖苷酶進一步水解釋放出生色基團PNP，導致405nm吸光度增加，增加速率與-AMY活性成正比， ROCHE公司等采用此法。2用生色基團對-硝基酚修飾麥芽五糖苷(PNP-G5)作為底物，其余同1。日本第一化學采

8、用此法，IFCC推薦。3采用2-氯-4-硝基苯酚-麥芽三糖(CNP-G3)做底物，不需要用輔助酶，直接由淀粉水解產生CNP，導致405nm吸光度增加，增加速率與-AMY活性成正比，科華采用此法?；钚陨咭娪诩毙砸认傺?、胰腺管道阻塞、流行性腮腺炎、細菌性腮腺炎等。TG醌亞胺的生成，導致550nm吸光度的增加，增加的程度與TG的含量成正比(終點法)。升高見于腎病綜合癥、動脈粥樣硬化、甲減、糖尿病、肝病等，降低見于營養不良、脂蛋白缺乏、甲亢、惡液質等。TC醌亞胺的生成，導致550nm吸光度的增加，增加的程度與TC的含量成正比(終點法)。升高見于動脈粥樣硬化、腎病、糖尿病、粘液水腫等，降低見于甲亢、貧

9、血、吸收障礙、惡液質等。HDL-C沉淀法：先用磷鎢酸鈉-鎂沉淀LDL-C和VLDL-C，再按TC方法測定。均相法：先用多聚陰離子化合物選擇性遮蔽LDL-C和VLDL-C，再按TC方法測定。含量越低，發生冠心病的危險越大。LDL-C沉淀法：先用PVS沉淀LDL-C，再按TC方法測定，TC值減去該測定值即為LDL-C。均相法：先用多聚陰離子化合物選擇性遮蔽HDL-C和VLDL-C，再按TC方法測定。含量越高，發生冠心病的危險越大。UA醌亞胺的生成，導致550nm吸光度的增加，增加的程度與UA的含量成正比(終點法)。升高與痛風、白血病、妊毒血癥、腎病有關。UREA二乙酰肟法：二乙酰肟與強酸作用生成二

10、乙酰，二乙酰與UREA在酸性條件下，縮合成紅色的二嗪衍生物，導致520nm吸光度的增加，增加的程度與UAEA的含量成正比(終點法)。紫外-谷氨酸脫氫酶法：NADH的減少，引起340nm吸光度的下降，單位時間內下降程度與UREA濃度成正比(固定時間法、兩點速率法)。升高主要見于腎臟疾病，也可見于脫水、糖尿病昏迷、腎上腺危相、胃腸道出血、循環虛脫，下降見于嚴重的肝臟疾病。Cr堿性苦味酸法：肌酐-苦味酸復合物的生成，導致510nm吸光度的增加，單位時間內增加量與Cr濃度成正比(固定時間法、兩點速率法)。肌氨酸氧化酶法：醌亞胺的生成，導致550nm吸光度的增加，增加的程度與Cr的含量成正比(終點法)。

11、升高見于腎功能的損傷。Glu氧化酶法：醌亞胺的生成，導致500nm吸光度的增加，增加的程度與Glu的含量成正比(終點法)。己糖激酶法：NADH的生成，引起340nm吸光度的增加，增加程度與Glu濃度成正比(終點法)。升高主要見于糖尿病，也可見于甲亢、垂體或腎上腺機能亢進；降低主要見于胰島素過量、甲減、垂體機能減退、腎上腺機能減退、葡萄糖吸收障礙。TP紫紅色絡合物的生成，導致540nm吸光度的增加，增加的程度與TP的含量成正比(終點法)。升高見于各種原因失水、一種或多種球蛋白分泌增多；降低見于營養不良。Alb白蛋白溴甲酚綠復合物的生成，導致630nm吸光度的增加，增加的程度與Alb的含量成正比(

12、終點法)。升高見于各種原因失水；降低見于肝臟疾病、腎病綜合癥、營養不良、蛋白丟失。T-Bil重氮偶合法、比色法、終點法。凍干單劑型偶氮膽紅素的生成，導致545nm吸光度的增加，增加的程度與T-Bil的含量成正比(終點法)。膽紅素         釩酸鹽     > 膽綠素pH3.0表面活性劑釩酸鹽氧化法，比色法，終點法，液體雙劑型膽紅素的減少引起在波長450nm處吸光度的下降，吸光度的變化與總膽紅素含量成正比。升高見于各類肝臟疾病，也可見于溶血性疾病。D-Bil重氮偶合

13、法、比色法、終點法，凍干單劑型偶氮膽紅素的生成，導致545nm吸光度的增加，增加的程度與D-Bil的含量成正比(終點法)。膽紅素         釩酸鹽     > 膽綠素pH3.0表面活性劑釩酸鹽氧化法，比色法，終點法，液體雙劑型膽紅素的減少引起在波長450nm處吸光度的下降，吸光度的變化與直接膽紅素濃度成正比。升高見于各類肝臟疾病和膽導阻塞。NH4+NADH的減少，引起340nm吸光度的下降，下降程度與NH4+濃度成正比(終點法)。升高見于肝昏迷、肝性腦病。CO2N

14、ADH的減少，引起340nm吸光度的下降，下降程度與CO2濃度成正比(終點法)。異常見于酸堿平衡失調。iP 絡合物的生成，引起340nm吸光度的上升，上升程度與iP濃度成正比(終點法)。升高見于慢性腎炎、甲狀旁腺功能減退、VitD過多；降低見于佝僂病、骨軟化等。Ca鄰-甲酚肽絡合酮(CPC)法有色絡合物的生成，引起575nm吸光度的上升，上升程度與Ca濃度成正比(終點法)，長征公司采用此法。甲基麝香草酚蘭(MTB)法有色絡合物的生成，引起612nm吸光度的上升，上升程度與Ca濃度成正比(終點法)，科華公司采用此法。升高見于甲狀旁腺功能亢進、腫瘤骨轉移、VitD過多；降低見于甲狀旁腺功能減退、佝

15、僂病、腎病等。Mg有色絡合物的生成，引起582nm吸光度的上升，上升程度與Mg濃度成正比(終點法)。升高見于尿毒癥；降低見于吸收障礙、糖尿病性昏迷、急慢性酒精中毒、慢性腎病等。Cl紅色絡合物的生成，引起480nm吸光度的上升，上升程度與Cl濃度成正比(終點法)。升高見于柯興綜合癥、酸中毒、尿毒癥等；降低見于阿狄森氏病、堿中毒、腹瀉、尿崩等。ApoA1/ apoB抗原抗體復合物的形成，導致340nm透射濁度的增加，增加的程度與apoA1/apoB的濃度成正比(終點法)。ApoA1降低和apoB升高見于未控制的糖尿病、腎病綜合癥、肝功能低下；ApoA1和apoB均降低見于長期血液透析；ApoA1與

16、 apoB的比值可預測心血管疾病危險性的預測，比值高，危險性低。Lp(a)抗原抗體復合物的形成，導致340nm透射濁度的增加，增加的程度與Lp(a)的濃度成正比(終點法)。高濃度的Lp(a)是動脈粥樣硬化的獨立危險因子。3. 試劑：3.1. 臨床生化檢測試劑的發展歷史第一階段：各醫院實驗室通常自行配制簡單試劑，能開展的生化檢測的方法及檢測項目十分有限，無統一標準，準確性極差第二階段：使用時要用多種試劑配制在一起，穩定性很差，多數在冰箱內只能保存數天，并且操作繁瑣費時，容易加錯試劑第三階段：凍干試劑、干粉試劑。凍干試劑是先將各種化學試劑溶解混合后，分裝成不同試劑的瓶內，再經凍干處理。凍干試劑中殘

17、留的含水量不易精確控制，造成瓶間差較大。干粉試劑是用將各種干燥的化學試劑直接混合加工而成，各瓶內試劑中所含水量均一。凍干和干粉試劑在用前要復溶，復溶時對水質及其加入量要求很高，復溶后保存期短，穩定性差，常常造成浪費，同時不能抗干擾。第四階段：液體雙生化試劑。準確、穩定性好；抗干擾能力強，無需復溶，使用方便，不易浪費，使用前無需準備，可直接上機使用，并適用于手工法。3.2. 雙試劑的優點雙試劑是指將反應體系的全部試劑分成兩大組分，即第一試劑先與被檢樣本中的干擾物質反應，使其被扣除，然后加入第二試劑，樣本中的被檢物質與反應體系中的試劑起反應，再進行測定。3.2.1. 抗干擾反應能力強在臨床生化測定

18、過程中，血標本本身成分十分復雜，除了含有待測物質外，還含有各種酶、有機物、無機鹽等物質，這些物質都會干擾或參與測試反應，引起非特異性干擾反應。為了克服這種干擾反應，將試劑盒分為兩組，在測定過程中，試劑1與標本中的干擾物反應，使其消耗，再用試劑2啟動真正的測試反應進行測定。3.2.2. 增強了工作試劑的穩定性許多酶法測定試劑盒為冷凍干燥試劑，在4保存一般穩定期在1年以上。但復溶后的工作試劑的穩定性差，如ALT測定工作試劑4只能保存一周，AST測定工作試劑4只可保存四天，而液體雙試劑則使穩定性大大延長，如ALT、AST測定的液體雙試劑在4可穩定一年。液體酶法試劑從配制上解決了這一矛盾：a用戶可根據

19、每次標本量按一定比例配制適量工作液，當天配制當天用完這樣便可減少試劑損失b如果用戶使用的自動生化分析儀有雙試劑測定功能，那么，就不必把雙試劑混合成工作試劑進行測定，試劑的有效期一年便是工作液的有效期。對于干粉、片劑型等需復溶的生化試劑，水質的好壞直接影響了復溶后工作液的穩定性和測定重復性。目前除了一些三級醫院有自制的試劑級的蒸餾水外，其他醫院很難獲得符合試劑級要求的水，這就對干粉、片劑試劑的實際使用造成了一定的影響。目前臨床化學檢測有許多項目已經開始用酶法進行分析測定，而試劑中許多酶在水溶液中是比較“脆弱”的，許多雜質都會影響酶活力。如：a、 水中F-會引起某些酶失活b、 水中的重金屬離子會影響酶活力c、 水中某些微生物會引起酶失活d、 有些雜質會直接影響測定結果，如水中的NH4會影響尿素氮的測定。3.2.3. 提高了測定結果的重復性試劑組分的高度均一性，提高了測定結果的重復性，避免了瓶間差，試劑中每一組分均一性是影響測定重復性的一個重要因素。4. 全自動生化分析儀采取二步法測定的意義4.1. 雙試劑與單