1、36（8分）基因工程的基本過程包括：獲取目的基因、目的基因與載體重組、DNA分子導入受體細胞、篩選含目的基因的受體細胞。下圖示培育基因工程細菌制造人生長激素的基本流程。據圖分析回答：（1）本例中的“目的基因”是 ，受體細胞是 。（2）“目的基因”的獲取既可以從生物活細胞內直接獲取，也可以人工合成。在從生物體內獲取“目的基因”時，首先應在生物體DNA上準確定位到“目的基因”，然后再利用 酶進行切取；如果人工合成“目的基因”時，通常是以目的基因轉錄的 為模板 成互補的單鏈DNA，然后在酶的作用下合成雙鏈DNA。（3）基因工程中，常選用 作為目的基因的運載體，把目的基因連接到運載體的酶稱 酶。 （4

2、）一般來說，獲取的目的基因，其每端的兩條脫氧核苷酸鏈都不等長，推測其中的原因或作用 。36（8分）（1）人生長激素基因 ， 細菌細胞（2）DNA內切酶 mRNA 逆轉錄（3）細菌的質粒 DNA連接（4）能通過堿基配對與運載體（質粒）重組連接39（11分）下圖（一）為某基因工程中利用的質粒筒圖，小箭頭所指分別為限制性內切酶EcoRI、BamHI的酶切位點，ampR為青霉素（抗生素）抗性基因，tctR為四環素（抗生素）抗性基因，P為啟動因子，T為終止子，ori為復制原點。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內的多種酶的酶切位點。下圖（二）為幾種酶作用于基因的位置。請回答下列問題：

3、（1）在基因工程中常用的工具有三種：一是用作切取目的基因的 酶；二是將目的基因與運載體拼接的 酶；三是作為運載體的質粒。 （2）將含有目的基因的DNA與經特定的酶切后的動載體（質粒）進行拼接形成重組DNA，理論上講，重組DNA可能有“ ”、“ ”、“ ”三種，其中有效的（所需要的）重組DNA是 ，因此需要對這些拼接產物進行分離提純。 （3）利用圖（一）所示的質粒拼接形成的3種拼接產物（重組DNA）與無任何抗藥性的原核宿主細胞接種到含四環素的培養基中，能生長的原核宿主細胞所含有的拼接產物（重組DNA）是 。 （4）有效的重組DNA成功導入受體細胞進行表達時，首先需要進行轉錄，RNA聚合酶識別和結

4、合的位點是圖（一）中的 。在動物基因工程中，將重組DNA導入受體細胞的常用方法是 。 （5）在基因工程中，作用于圖（二）所示a位置的酶是 ；作用于b位置的酶是 。39（1）限制酶（限制性內切酶） DNA連接酶 （2）目的目的基因 目的基因運載體 運載體運載體 目的基因動載體 （3）運載體運載體目的基因運載體 （4）P（啟動子） 顯微注射法 （5）限制酶（限制性內切酶） DNA解旋酶。 (普陀區）40（6分）下圖是利用基因工程技術生產人胰島素的操作過程示意圖，請據圖作答。（1）能否利用人的皮膚細胞來完成過程？ 。（2）過程必需的酶是 酶。（3）在利用A和B獲得C的過程中，必須用 切割A和B，使它

5、們產生 ，再加入 ，才可形成C。（4）上述生產人胰島素的基因工程技術中常選擇大腸桿菌等微生物作為受體細胞的原因是 。 40（6分） （1）不能 （2）逆轉錄（3）同一種限制性內切酶 相同的黏性末端 DNA連接酶 （4）微生物繁殖迅速、結構簡單、遺傳操作較容易。 （浦東）38、（11分）某科研單位在調查湖水中細菌的污染情況時進行了實驗。實驗包括制備培養基、滅菌、接種及培養、菌落觀察計數。（1）培養基中含有蛋白胨、淀粉分別為細菌培養提供了_。對培養基進行滅菌，應該采用的方法是_。接種時通常采用 方法，把聚集的菌種逐步分散到培養基的表面。如果提高培養基中NaCl的濃度，可以用于篩選耐鹽細菌，這種培養

6、基被稱為_。小麥細胞導入含耐鹽基因的小麥細胞（2）該細菌所含的耐鹽基因可通過 途徑獲取，作為基因工程中的目的基因導入小麥中，其過程如左圖所示。其中A為 ，含耐鹽基因的小麥細胞還應經 ，在此過程中還將使用 兩種植物激素，從而最終可獲取含耐鹽基因的小麥植株，當然這些小麥植株并不一定具有耐鹽的特性，這是因為 。若在遺傳過程中小麥植株丟失1條染色體，則不能產生正常配子而高度不育，則可用 處理幼芽，以便獲得可育植株。（3）圖中C還可用于其他工程細菌中，若成功導入大腸桿菌內，則可能使大腸桿菌獲得哪些特性？（多選） A. 耐鹽 B. 抗四環素 C. 抗氨芐青霉素 D. 固氮 38、（11分）（1）氮源和碳源

7、高壓蒸汽滅菌平板劃線選擇培養基 （2）酶切質粒 組織培養 生長素和細胞分裂素 基因選擇型表達 秋水仙素（3）A 、C （嘉定）（2009高考上海生物）人體細胞內含有抑制癌癥發生的p53基因，生物技術可對此類基因的變化進行檢測。（1）目的基因的獲取方法通常包括_和_。（2）上圖表示從正常人和患者體內獲取的p53基因的部分區域。與正常人相比，患者在該區域的堿基會發生改變，在上圖中用方框圈出發生改變的堿基對；這種變異被稱為_。（3）已知限制酶B識別序列為CCGG，若用限制酶E分別完全切割正常人和患者的p53基因部分區域（見上圖），那么正常人的會被切成_個片段；而患者的則被切割成長度為_對堿基和_對堿

8、基的兩種片段。（4）如果某人的p53基因區域經限制酶E完全切割后，共出現170、220、290和4答案：（1）從細胞中分離 通過化學方法人工合成（2）見下圖 基因堿基對的替換（基因突變）（3）3 460 220（4）P+P 60堿基對的四種片段，那么該人的基因型_（以P表示正常基因，P異常基因）。37（12分）真核細胞的基因由編碼區和非編碼區兩部分組成（如下圖一示），其中編碼區包括能夠編碼蛋白質的序列（外顯子）和一般不能夠編碼蛋白質的序列（內含子）。在真核細胞基因表達時，首先由DNA轉錄出前驅RNA，然后經過裁接（將內含子的轉錄部分切除并將外顯子的轉錄部分連接起來）才能形成成熟的RNA。但在裁

9、接時有可能會發生選擇性裁接（在裁接時可能會同時切除某一個或幾個外顯子的轉錄部分，即形成不同的裁接形式）和RNA編輯（將前驅RNA上的核苷酸序列加以修改，包括堿基置換或堿基增減）。選擇性裁接和RNA編輯的存在，進一步增加了蛋白質結構和功能的多樣性。請分析回答了蛋白質結構和功能的多樣性。請分析回答（1）寫出遺傳信息的傳遞和表達過程圖式： 。（2）由于DNA分子的雙鏈靠堿基之間的的氫鍵相結合，因而增強了DNA分子結構的穩定性。下列雙鏈DNA結構在復制時，最不容易解旋的是（）A、 B、 C、 （3）選擇性裁接和RNA編輯作用發生在細胞中的（部位）。（4）人的apoB基因在肝細胞中表達出apoB100蛋

10、白質（數字表示該蛋白質含有的氨基酸數），但是在小腸細胞中， apoBRNA上靠近中間位置的某一個“CAA”密碼子上的“C”被編輯為“U”，因此只能表達出apoB50蛋白質。則下列有關分析中正確的是（ ）（多選）A、apoB基因含有606個脫氧核苷酸；B、apoB基因在肝細胞中轉錄的RNA長度約是小腸細胞中轉錄的RNA長度的2倍；C、apoB100蛋白質和apoB50蛋白質有50個氨基酸完全一樣；D、apoB100蛋白質和apoB50蛋白質都是apoB基因的表達產物；E、apoB50蛋白質的產生是因為apoB基因在轉錄時發生選擇性裁接的結果。（5）科學家將人的生長激素基因導入大腸桿菌以獲取人生長

11、激素（如圖二）。已知限制酶I的識別序列和切點是GGATCC ，限制酶II的識別序列和切點是GATC。目的基因可以通過 方法獲取。重組質粒構建過程中需要用到的酶包括限制性內切酶和 酶。在DNA雙鏈上，被限制性內切酶特異性識別（酶切位點處）的堿基序列特點是 。據圖分析，在構建基因表達載體過程中，應選用 （限制酶I / 限制酶II）切割質粒，選擇理由是。成功導入該重組質粒的細菌能否生長在含四環素的培養基上？；能否生長在含抗氨芐青霉素素的培養基上？；根據此原理可完成轉基因工程的篩選（工程菌）環節。 （6）如果某基因中的一個堿基發生突變，則突變基因控制合成的蛋白質與正常蛋白（正常基因控制合成）相比是否一定不同，并說明理由？ 。37.(12分)（1）略