1、島津液相色譜工作站外標法使用解析外標法又稱工作曲線法，首先配制含待測組分濃度不同的系列標準工作溶液，如果待測組分不止一個，我們也把該標準溶液稱為混合標準溶液，然后進樣得濃度不同的系列標準工作溶液的色譜圖。通常利用濃度不同的系列標準工作溶液的色譜數據建立工作曲線和線性方程，然后根據試樣的色譜數據既可以利用工作曲線查得試樣的濃度數據，也可利用線性方程計算試樣中各組分的濃度。在相同色譜條件下，可以用已建立的工作曲線或線性方程進行批量樣品分析。一、進樣首先進濃度不同的系列標準工作溶液，然后進試樣，得標樣色譜圖和試樣色譜圖并保存。如果是單次分析（手動進樣模式），在設置單次分析條件時，應將樣品瓶架設置為“

2、-1”，如圖所示，然后按電腦提示進樣，待采樣結束后停在分析。啟動或停止單次分析，既可以用助手欄“主項目”下的功能按鈕，也可用數據采集窗口中的功能按鈕，如圖所示。通常使用數據采集窗口的功能按鈕啟動和停止單次分析更為高效。無論是啟動或停止單次分析，系統均有“請稍后”的等待提示，務必等待足夠時間，方可進行下一步操作。二、色譜圖解析得到色譜圖后，套取組分的保留時間，確定組分的名稱，輸入標樣中各組分的濃度是最基本的工作。有時還要根據色譜圖的具體情況對色譜圖進行手動處理，色譜圖處理通常放在進樣完成后，停機或在流動相置換期間進行。點擊“LabSolutions Essentia主項目”窗口下的“處理工具”圖

3、標，再雙擊右邊窗口中的“再解析”圖標，彈出“再解析”（即數據處理）窗口。在數據管理器選擇文件所在的文件夾，切換到數據標簽，打開所需的數據文件，這里我們選擇打開“化妝品抗菌劑_Std11”數據文件，過程如圖所示。1.編輯色譜圖數據窗口由色譜圖視圖、結果視圖、方法視圖組成。方法視圖右上角有“視圖”和“編輯”兩個圖標，只有切換到“編輯”模式，色譜圖數據才是可以編輯的，在“視圖”模式下方法視圖里九個標簽下的編輯框是灰色的，只能瀏覽。要手動編輯色譜圖，點擊快捷圖標欄的“手動積分欄”圖標是不可少的，上述三個經常使用的圖標如圖所示。要編輯色譜圖，單擊“手動積分欄”圖標，彈出手動積分欄，如圖所示。在編輯色譜圖

4、時，經常想去掉不用的色譜峰，這時可用“去除峰（不校正）”功能按鈕，拖選不要的色譜峰使色譜圖簡潔，更有針對性。方法視圖里的九個標簽，最常用的是“積分”、“定量處理”和“化合物”三個標簽。“積分”標簽如下：一般使用默認值，但可通過修改“最小面積/高度”來控制色譜圖中峰顯示的多少。“定量處理”標簽是非常重要的標簽。這里我們要用的定量方法是外標法，所以定量方法選擇外標法，配制的羥苯混酯標準系列工作溶液有3個，所以校準曲線最大級別數選為3，如果只有一個標準溶液就設置為1，根據實際情況修改濃度單位和格式，島津工作站的濃度單位設置更為靈活，其他工作站一般是通過下拉列表框選擇合適的單位，濃度值格式更符合實際工

5、作的情況，在出報告時，我們更關心數字的有效位數。如果只有一個標樣，建議選擇工作曲線過原點，即“零截距”。“化合物”標簽更是非常重要的標簽。在這里我們要套取色譜峰的保留時間，這是定性、定量的基礎，獲取了保留時間后，輸入相應的化合物名稱和其在不同標樣里的濃度。完成上述必須的編輯修改后，保存修改后的數據文件。按相同的方法修改、保存數據文件“化妝品抗菌劑_Std12”至“化妝品抗菌劑_Std33”。需要說明的是，每個標準溶液進了3次樣， 所以“化妝品抗菌劑_Std11”至“化妝品抗菌劑_Std13”為第一個標樣的數據文件，“化妝品抗菌劑_Std21”至“化妝品抗菌劑_Std23”為第二個標樣的數據文件

6、，“化妝品抗菌劑_Std31”至“化妝品抗菌劑_Std33”為第三個標樣的數據文件。 至此，所有標樣的數據文件編輯、修改、保存完成。2.創建校準曲線島津LabSolutios有一種快速建立校準曲線的方法。打開保存的數據文件“化妝品抗菌劑_std11”，切換到視圖模式，點擊“主項目”下的“應用到方法”圖標，在彈出的“方法另存為”對話框中輸入要保存的校準曲線的名稱，這里我們輸入“化妝品抗菌劑校準曲線”保存，接著在彈出來的窗口中選中“當前設置”，勾選“數據處理參數”和“系統適用性設置”，按“確定”按鈕保存。切換到方法標簽，可以看到“化妝品抗菌劑校準曲線”方法文件已經存在了。島津把定量分析數據的校準曲

7、線文件稱為方法文件，后綴仍為“.lcm”，因此島津方法文件中可以有儀器參數方法文件和數據分析方法文件，建議把儀器參數文件和分析數據的方法文件分別建立、保存。在方法標簽的文件名框中雙擊“化妝品抗菌劑校準曲線”方法文件，在右面窗口中顯示校準曲線編輯窗口，校準曲線窗口由校準曲線視圖、方法視圖、色譜視圖和數據文件編輯窗口組成。數據文件的添加與刪除在數據文件窗口進行。在窗口右上角的數據文件窗口右擊數據文件下的“級別1”，在彈出來的菜單列表中單擊“添加”，在彈出來的窗口中選中要添加得數據文件，比如“化妝品抗菌劑_Std11”至“化妝品抗菌劑_Std13”，點擊打開，如圖所示。你會發現，在級別1下面就出現了

8、剛才選中的三個數據文件。同理，右擊數據文件下的“級別2”，在彈出來的菜單列表中單擊“添加”，選中要添加得數據文件“化妝品抗菌劑_Std21”至“化妝品抗菌劑_Std23”，點擊打開；再右擊數據文件下的“級別3”，在彈出來的菜單列表中單擊“添加”，選中要添加得數據文件“化妝品抗菌劑_Std31”至“化妝品抗菌劑_Std33”，點擊打開，可以看到，每個級別下面均有了三個文件了，添加完數據文件后的“校準曲線視圖”窗口會出現每種物質的校準曲線及相關信息，如圖所示。點擊化合物下的方向按鈕，可以切換、查看每種化合物的校準曲線和線性方程、線性相關系數R等信息，右側的色譜圖視圖中會發生相應的變化，顯示所選中物質的色譜峰。 當然，有了標準系列工作溶液的色譜數據文件后，要創建校準曲線，還可以直接在助手欄“主項目”中點擊“校準曲線”圖標，然后點擊菜單欄的“文件”/“新建方法文件”，在彈出來的窗口中選擇數據文件比如“化妝品抗菌劑_Std11”打開，進入校準曲線窗口，在窗口的數據文件小窗口里添加數據文件，在下面的方法視圖窗口再對數據文件進行編輯、保存，創建校準曲線。3.分析試樣校準曲線建好后，便可分析試樣了。校準曲線的最大好處就是可以進行批量樣品分析。島津工作站分析試樣非常簡單，首先打開要分析的試樣數據文件如“化妝品抗菌劑_Smp1.lcd”，然后點擊菜單欄“文件”/“加載方法參數