1、 Beckman Coulter ACCESSâ系列全自動微粒子化學發(fā)光免疫分析系統(tǒng)常見問題及答疑目錄第一部分：化學發(fā)光基礎知識 第1-17問第二部分：儀器應用部分 第18-74問第三部分：項目應用部分 第75107問第一部分：化學發(fā)光基礎知識1 什么是化學發(fā)光，與放免、酶免比較有何不同？化學發(fā)光免疫分析（Chemiluminescence Immunoassay，CLIA）是將化學發(fā)光與免疫反應相結合，用于檢測微量抗原或抗體的一種新型標記免疫測定技術?；瘜W發(fā)光免疫分析比放射免疫，酶聯(lián)免疫具有更高靈敏度，具備操作簡便、快速的特點，易于標準化操作。且測試中不使用有害的試劑，試劑保存期長

2、，應用于生物學、醫(yī)學研究和臨床實驗診斷工作，成為非放射性免疫分析法中最有前途的方法之一。（1）與放免（RIA）產品比較 與放射免疫試劑（RIA）比較，化學發(fā)光避免了放射性核素的污染以及對操作人員的傷害，大大縮短了反應時間，同時兼具高靈敏度的優(yōu)勢。 （2）與酶免（ELISA）產品比較 靈敏度與可測范圍遠遠高于酶免產品，兼具ELISA法簡便的操作方法與較短的反應時間。2 什么是標記免疫技術，它的三大要素是什么？ 將Ag或Ab用標記物(如熒光素、酶、放射性同位素、化學發(fā)光物質等)進行標記，在與標本中的相應Ab或Ag反應后，可以不必測定Ag-Ab復合物本身，而測定復合物中的標記物，通過標記物的放大作用

3、，進一步提高了免疫技術的敏感性。 三要素：通常在檢測系統(tǒng)中會使用到一種叫標記物（labeling）的物質,常標記在抗體上通常會有一個分離（separation）的過程在最后讀取信號前需要去仔細關注一下分析的模式（format） 3 標記免疫技術主要有哪幾種？ 主要經歷了四種標記免疫技術的發(fā)展：熒光素(Fluorophores) FIA放射性同位素(Radioisotopes) RIA酶(Enzymes) EIA化學發(fā)光物質 - CLIA4 ACCESS化學發(fā)光原理？分析方法及過程 ACCESS系統(tǒng)采用磁性微粒作為固相載體，以AMPPD作為發(fā)光劑，固相載體的應用擴大了測定的范圍。以競爭法、夾心法

4、等免疫測定方法為基礎。試劑包裝采用特殊的設計，每個試劑包有5個小室分別把不同的試劑分開，減少了交叉污染，保證了檢測質量。 、抗原抗體結合：將包被單克隆抗體的順磁性微粒和待測標本加入反應管中，標本中的抗原與微粒子表面的抗體結合，再加入堿性磷酸酶標記的抗體，經溫育后形成固相包被抗體-抗原-酶標記抗體復合物。 、洗滌、分離：在電磁場中進行3次洗滌，很快將未結合的多余抗原和酶標記抗體洗去。 、加入底物AMPPD發(fā)光劑：AMPPD被結合在磁性粒子表面的堿性磷酸酶的催化下迅速去磷酸基因，生成不穩(wěn)定的中介體 AMPD。AMPD很快分解，從高能激發(fā)態(tài)回到低能量的穩(wěn)定態(tài)，同時發(fā)射出光子，這種化學發(fā)光持續(xù)而穩(wěn)定，

5、可達數(shù)小時之久。通過 光量子閱讀系統(tǒng)記錄發(fā)光強度，并從標準曲線上計算出待測抗原的濃度。 3 化學發(fā)光項目的免疫學原理？· 抗原、抗體特異性結合· 小分子采用(一步、二步)競爭結合法：一步竟爭法：Total T4, Cortisol, T Uptake, Digoxin, Theophylline, Total T3二步竟爭法: FT4, B12, Folate, FT3 大分子采用(一步、二步)夾心法：ßhCG， hTSH ，F(xiàn)erritin， Prolactin ，PSA ， CEA， hFSH hLH IgE4 一步和二步分析法是怎么回事？同步和分步是按照：試

6、劑/樣品加入的順序，孵育的次數(shù)(步驟)，清洗分離的次數(shù)(步驟)來區(qū)分的，像一步分析法是試劑和樣品同步加入，進行一次孵育一次清洗。像二步分析法是先加入樣品進行孵育和清洗后再加入試劑，進行第二次孵育和清洗。5 什么是鉤狀效應（hook effect），如何判斷及解決？免疫測定的實質是抗原抗體反應，抗原抗體反應是按一定的分子比例結合，當二者比例適中時，形成的免疫反應最強烈，形成復合物或檢測的信號與所測的抗原或抗體成比例關系，但當抗原或抗體其中一者過量時，免疫反應將減弱，測定值呈現(xiàn)假性低值。 在化學發(fā)光中像二步分析法一般都能避免鉤狀效應，對于一步夾心法項目說明書中都提到了產生鉤狀效應的上限如人絨毛膜促

7、性腺激素的鉤狀效應值是100萬mIU/ml.在實際工作中如遇到測定值與臨床嚴重不符的結果要考慮到鉤狀效應，解決辦法是稀釋此樣本。磁性微相載體，為抗原提高發(fā)光強度、快速達到穩(wěn)定、持續(xù)發(fā)光。6 什么是嗜異性抗體？病人樣品中可能自然產生一些針對動物免疫球蛋白的抗體(通常是鼠或羊)，一般來源于暴露于這些動物或接受過動物血清的治療，分析的干擾：可以在雙單克隆夾心法分析模式中引起假陽性，可以在單克隆/多克隆分析模式中出現(xiàn)假陰性。廠家在試劑生產中會加入封閉劑，封閉劑可以加在反應基質中或整合在試劑盒內：鼠 (鼠科類), 鳥 (鳥科類) 和羊蛋白，各個廠家生產的分析試劑都有可能會不同程度的受到任何一個病人血清的

8、影響！當遇到與臨床不符的結果時要詢問病史看是否有嗜異性抗體的干擾。7 什么是基質效應？基質是指的是樣品中被分析物以外的組分。基質常常對分析物的分析過程有顯著的干擾，并影響分析結果的準確性。目前最常用的去除基質效應的方法是，通過已知分析物濃度的標準樣品，同時盡可能保持樣品中基質不變，建立一個校正曲線（calibration curve）。8 稀釋樣品時稀釋物不對為何有基質效應？我們在稀釋樣品時要考慮到基質效應的影響，稀釋必須在適當?shù)幕|中進行，對于大多數(shù)測定而言，適當?shù)幕|就是零校準品，如果分析物稀釋基質效應中所含成分濃度不正確，稀釋回收率就不能對它們進行準確的測定，因為它們稀釋后會與Bing

9、agent形成新的平衡。9 什么是AMPDD，化學結構，如何發(fā)光？AMPPD是一種金剛基二螺4，4二氧己烷的磷酸酯。經ALP水解生成一種不穩(wěn)定的陰離子，該陰離子分解時持續(xù)發(fā)光。發(fā)光強度穩(wěn)定，與ALP量成比例?；瘜W式是4-甲氧基-4-（3-苯磷酸鹽）螺-（1，2-二螺4，4二氧己烷-3，2-金剛烷10 試劑盒中有哪幾種試劑，作用都是什么？有五個倉，以FRT4為例：R1a: 包被著鏈霉親和素的Dynabeads* 順磁性微粒溶于TRIS 緩沖液含有蛋白質( 鳥類)、表面活性劑、0.125% NaN3和0.125% ProClin* 300。R1b: 含蛋白質( 鳥類)、表面活性劑、< 0.1

10、% NaN3和0.1% ProClin 300 的TRIS 緩沖鹽水。R1c: 含蛋白質( 鳥類)、表面活性劑、0.125% NaN3和0.125% ProClin 300 的TRIS 緩沖鹽水。R1d: 三碘甲狀腺原氨酸- 堿性磷酸酶( 牛) 結合物溶于TRIS 緩沖液 含蛋白質( 鳥類)、表面活性劑、< 0.1% NaN3和0.1% ProClin 300。R1e: 結合了生物素的小鼠單克隆抗甲狀腺素(T4) 溶于TRIS 緩沖液含蛋白質( 鳥類和鼠類)、表面活性劑、0.125% NaN3和0.125% ProClin 300。以該測試項目反應原理說明：Access Free T4

11、測定是兩步酶免法測定。將結合了生物素的單克隆抗甲狀腺素(T4)抗體、樣本、緩沖蛋白溶液以及包被著鏈霉親和素的固相加至反應管中。在這首次溫育過程中，結合了生物素的抗T4 抗體與固相及樣本內的游離T4 相結合。在反應管內溫育完成后，結合在固相上的物質將置于一個磁場內被吸住，而未結合的物質被沖洗除去。然后，將緩沖蛋白溶液及三碘甲狀腺原氨酸(T3)- 堿性磷酸酶結合物添加至反應管中。T3- 堿性磷酸酶結合物與空缺的抗T4 抗體結合位點結合。在反應管內溫育完成后，結合在固相上的物質將置于一個磁場內被吸住，而未結合的物質被沖洗除去。然后，將化學發(fā)光底物Lumi-Phos* 530 添加到反應管內，由照度計

12、對反應中所產生的光進行測量。所產生光的量與樣本內游離T4 的濃度成反比。樣本內分析物的量由所儲存的多點校準曲線來確定。11 如何看待說明書中的方法局限性？此章節(jié)的內容極為重要，實驗室工作人員必須對其進行理解，因為它關系到實驗室能否對樣本分析結果進行正確的解釋。在解釋結果時，需參照該病人的整體臨床情況，包括：癥狀、臨床病史以及其它測試所得的數(shù)據(jù)和其它相應的信息。12 如何理解最高可報告值？當樣品濃度高時，可以報告大于最高校準品值的結果，有些試劑生產商的的測定系統(tǒng)通常用亮點調整來代替完全校準，這樣的話他們可報告范圍是一個擬合而出的最高水平（而非實際測定值）。而在ACCESS檢測系統(tǒng)中，用戶自己創(chuàng)建

13、了標準曲線，當該標準曲線意境通過并且質控檢測被接受時，就可以證實其可報告的上限。當樣本分析所得的RLU值高于最高校準品時，以樣本結果大于最高校準品值的形式報告，多數(shù)實驗室對大多數(shù)測定項目的分析結果使用這種直接報告模式，如果需要獲得確切的測定值，則需要進行機外人工稀釋并重新分析樣本。13 如何理解最低可報告值？所有的定量測定在曲線的下端通常都有一個零標準，該標準允許計算結果低至零，當測定結果越接近零時，測定結果就越不那么精確。在說明書中給出了項目的檢測最低下限，建議以低于該下限來報告結果。14 什么是分析靈敏度？分析零敏度通常是對標準曲線上的零點校準品距零值的2SD值范圍來進行測定計算的（而SD

14、值是將零校準品作為未知濃度樣品經多管檢測后計算均值所得）15 什么是功能靈敏度？ 功能靈敏度(Functional sensitivity)為<20%CV時所能檢測到的最低極限濃度，它反映在實際樣品檢測時所能達到精確定量的檢測極限。16 如何理解說明書中的稀釋回收率？稀釋回收率與稀釋線性不不完全是一回事，但是二者可用同一個研究方式來檢驗，要進行稀釋回收率測定首先用戶需要選取一個已知濃度的病人樣本，在分析項目的線性范圍內對其進行多點稀釋后進行檢測，如果所測得結果與最初的樣本稀釋系數(shù)結果相匹配，那么就驗證了稀釋回收率與檢測線性范圍。稀釋線性與回收率的區(qū)別在于，將一組分析物校準品當未知樣品進行

15、分析，來對其檢測線性范圍進行驗證。17 現(xiàn)在ACCESS檢測系統(tǒng)在市場上有哪幾種機型？化學發(fā)光儀系列：ACCESS、ACCESS2、DXI600（速度200速，50試劑位）、DXI800（速度最快達400速）生化免疫一體機系列：DXC00i（DXC600+CTA+ACCESS2）、DXC880i(DXC800+UCTA+DXI800)第二部分：儀器應用部分18 我想開展一個新項目如IL-6，詳細程序是什么？首先在發(fā)光項目速查手冊（或說明書）中查到該項目訂貨信息：試劑A16369定標液A16370質控品A16371稀釋液*S0或樣品稀釋液 A（81909）Ø 激活IL-6：主菜單下按F

16、8-系統(tǒng)設置；按F2-項目；在項目列表中找到IL-6（210）在Enabled打上對勾選擇打開按F2-單位選擇；將光標點到所需設置樣本類型處，按下拉框后出現(xiàn)單位列表；選擇所需單位，按F1確認；將光標右移到有效位數(shù)處，可輸入“1”、“2”、“3” 表示小數(shù)點后的位數(shù)；按Back-主菜單注意：在儀器和中文電腦上選擇的項目單位必須一致，才能保證結果準確Ø 在主菜單按F5定標再按F5定標設置按F1增加定標液當出現(xiàn)對話框后，掃描定標液的條形碼（或手工輸字符）按OK確認。Ø 然后加載試劑，定標即可。19 反應管最多加入多少？在ACCESS與ACCESS2上一次最多加入3盒，共294只試

17、管，切記放RV管架之前要檢查是否有松動的RV管。DXI800一次最多可加入2袋（2000只），注意將管均勻分散。20 裝載基質液注意什么，有何影響？ 提前18小時將需更換的新基質置室溫預溫，否則會造成光量子值偏低，進而影響有些結果（夾心法）值偏低而有些結果（競爭法）偏高。21 裝載試劑注意什么,有何影響？ 裝載試劑前須將試劑輕輕倒轉混勻，使灰色倉均勻渾濁后（尤其注意粘附在壁上的試劑）裝載，否則使結果偏低，但一旦開瓶使用后不可再混勻22 試劑可以在運行中裝載嗎？試劑可以在儀器運行中加載，選擇試劑加載申請后，儀器會有提示剩余多長時間可進行加載，這時儀器會將正做測試的試劑處理完后允許加載。23 儀器

18、在運行的時候，為什么有些試劑盒上面有一個小鎖的標志？這表明儀器正在使用這盒試劑，不能更換該盒試劑24 我想知道某個項目在不同單位之間的換算系數(shù)，如何查找？更換該項目的單位后，定標曲線里面的濃度值相應會發(fā)生變化，可以記錄不同單位下高濃度定標點（如S4,S5點）的數(shù)值進行換算。25 主探針上的超聲發(fā)射裝置有什么作用？超聲裝置的作用：混勻試劑、混勻RV內容物、檢測樣本液面、清潔主探針26 為什么在裝載新試劑包前需上下顛倒混勻？在裝載新的試劑包前應輕輕地上下顛倒混勻，這樣可去除試劑包頂部粘附的磁性粒子。27 基質液更換的注意事項？注意避免污染基質液 - 不要讓基質液瓶中的管道及基質液瓶蓋的內表面接觸到

19、任何物體的表面避免使用有滑石粉的手套基質液裝上機器前，必須放置在室溫平衡18個小時.基質液開瓶后效期為14天28 為什么在打開ACCESS2的儀器外蓋前需要先關閉效用檢測功能？即使ACCESS2儀器的外蓋打開后，效用檢測功能 (如果被打開) 也可自動運行。在檢查系統(tǒng)液路模塊時，這將導致危險。任何時候，在打開儀器外蓋時，應先關閉效用檢測功能.29 什么時候需要清除病人結果？如果您的實驗室要重復使用同一樣號或您發(fā)現(xiàn)您的系統(tǒng)軟件反應明顯變慢，您可以從數(shù)據(jù)庫中清除病人的測試結果。您可把軟件設置成自動完成這項工作。30 為什么在裝載新試劑包前需上下顛倒混勻？在裝載新的試劑包前應輕輕地上下顛倒混勻，這樣可

20、去除試劑包頂部粘附的磁性粒子。31 有些項目定標液有時里有兩張卡（白卡和黃卡），應該用那一張？ 這種情況是有些項目在升級初期時，定標液里配兩張卡可以用于定標未升級項目和已升級項目，以雌二醇為例說明：批號>800000的試劑名稱改為E2;批號為722861以上的定標液里面有兩張卡，黃卡用于E2（243）,白卡用于Estrdl（203）以下項目也屬于此情況：游離T3、游離T4、生長激素、甲狀腺球蛋白抗體、癌胚抗原。詳細說明請參閱試劑盒中的說明。32 hTSH 定標液里有三張卡，如何使用，有何區(qū)別？ 該測定能提供第三代( 超敏hTSH) 和/ 或第二代(快速hTSH) 的結果。l Fast h

21、TSH測定的一個APF修改新的檢測ID為246測試名為fTSH2，修改后的兩種版本的ACCESS FasthTSH protocol協(xié)議都將提供校準卡.測試名測試名檢測號所用校準卡顏色AccessFasthTSH（modified） fTSH2246藍Fasth TSH Fast hTSH206黃HYPER hTSH TSH183白快速hTSH與hTSH區(qū)別： 快速hTSH hTSH 樣本量l 55 110 反應時間（分鐘） 20 45 分析靈敏度uIU/ml 0.01 0.00333 PSA和fPSA定標液里有兩張卡，如何選擇，有何區(qū)別？Access PSA 校準品 對PSA 可以提供Hyb

22、ritech （白卡）和 WHO（黃卡） 兩種溯源定標，供用戶自由選擇。Hybritech 校準：Access Hybritech PSA Calibrators 內的分析物可溯源至生產商的工作用校準品。WHO校準：通過與一組標準化為PSA (WHO 96/670)第一國際標準品(1st IS)進行比較，對原參考校準品Access Hybritech PSA Calibrators 內的分析物進行溯源。Hybritech PSA 檢測范圍： 0.008-150ng/ml 參考范圍0-4ng/mlWHO PSA 檢測范圍： 0.008-121ng/ml 參考范圍0-3.1ng/ml34 TnI定

23、標都應該注意什么？ 注意收到TnI定標液后即冷凍在-20或-20以下環(huán)境中，使用前要輕輕倒轉以徹底混勻成分，防止形成氣泡，每次使用完后放在2-8（穩(wěn)定期可維持60天），不要再冷凍已打開的小瓶。請注意計算TnI定標液使用量，S0與S1點定標液都要重復四次，所以計算定標量： 死腔量+樣本量×4 其他S0與S1都要重復4次的項目還有：E2及Prog定標液S0 重復4次，S1重復3次。35 樣本值如果超出線性范圍，該如何稀釋樣本？具體請查閱“發(fā)光項目速查”，“稀釋液”部分，樣本稀釋分為5種：沖洗緩沖液（如TBhCG2，DHE-S）, S0或樣本稀釋液 A（81908）,S0（有貨號），S0,

24、樣品稀釋液A（81908）,請按照說明使用正確的稀釋液，否則因基質效應會造成實際結果偏差。36 結果后的異常信息注釋如何看？ 詳細請參閱SOP中異常結果信息注釋部分，現(xiàn)就幾種常見錯誤信息代碼進行解釋：（1）UNR 和 IND 是因為該樣本光量子值超出S0或S5（定標液最高點）的光量子值Access Classic Access 2, SYNCHRONLXi, or UniCel DxI 800 UNR: For sandwichassays, which use positive slope curves, the result is at the low dose end of the cu

25、rve (S0) and cannot be distinguished from a system failure because the relative light unit (RLU) reading is too low. For competitiveassays, which use negative slope curves, the result is at low end of the dose curve (S0) and cannot be distinguished from a system failure because the RLU reading is to

26、o high. IND: For sandwichassays, which use positive slope curves, the result is at the low dose end of the curve (S0) and cannot be distinguished from a system failure because the RLU reading is too low. For competitiveassays, which use negative slope curves, the result is at either: The highend of

27、the dose curve and cannot be distinguished from a system failure because the RLU reading is too low or The lowend of the dose curve and cannot be IND: For competitiveassays only, which use negative distinguished from a system failure because slope curves, the result is at highend of the dose the RLU

28、 reading is too high. curve (S5 or highest calibrator) and cannot be distinguished from a system failure because the RLU reading is too low. ACCESSACCESS2、DXI800UNR：對于夾心法，樣本RLU結果太低在S0RLU值邊緣以致儀器不能與系統(tǒng)錯誤區(qū)分。 對于競爭法：樣本RLU結果太高在S0RLU值邊緣以致儀器不能與系統(tǒng)錯誤區(qū)分。對于夾心法，樣本RLU結果太低在S0RLU值邊緣以致儀器不能與系統(tǒng)錯誤區(qū)分。 對于競爭法：(1)樣本RLU結果太高在

29、S0RLU值邊緣以致儀器不能與系統(tǒng)錯誤區(qū)分。 （2）樣本RLU結果太低在S5（定標液最高點）RLU值邊緣以致儀器不能與系統(tǒng)錯誤區(qū)分。IND：只對于夾心法，樣本RLU結果太低在S0RLU值邊緣以致儀器不能與系統(tǒng)錯誤區(qū)分。37 如何計算ACCESS、ACCESS2樣本量尤其是定標液的量？總樣本量=A樣本檢測量+B樣本容器死腔量+C樣本主探針多吸量A樣本檢測量是指每一個請求測試所需的樣本吸取量的總和。要找到每一個檢測項目相應的樣本吸取量，請查閱化學發(fā)光項目速查 吸樣量部分。B樣本容器死液量是指在容器中的不能被儀器分樣吸取的樣本量。2ml樣品杯死液量為150ul 0.5ml樣品杯死液量為80ulC樣本

30、主探針多吸量為 20 µL 或者 5% 的檢測樣本量，哪一個數(shù)值較大就以哪一個進行計算?？偠艘毫? A樣本檢測量×重復次數(shù)+B樣本容器死腔量+C樣本主探針多吸量請注意：一般項目重復次數(shù)為2，計算TnI、E2定標液使用量，S0與S1點定標液都要重復四次， Prog定標液S0 重復4次，S1重復3次。38 如何計算DXI800樣本量尤其是定標液的量？計算足夠的樣本量總樣本量=A樣本檢測量+B反應管死液量+樣本主探針多吸量+樣本容器死液量 A樣本檢測量是指每一個請求測試所需的樣本吸取量的總和。要找到每一個檢測項目相應的樣本吸取量，請查閱化學發(fā)光項目速查 吸樣量部分。B反應管死液

31、量是指在反應管中的不能被儀器使用的樣本量。對于每 500 µL 樣本檢測量，其反應管死液量是 60 µL。C樣本主探針多吸量為 20 µL 或者 5% 的檢測樣本量，哪一個數(shù)值較大就以哪一個進行計算。D樣本容器死液量是指在容器中的不能被儀器分樣吸取的樣本量。2ml樣品杯死液量為150ul 0.5ml樣品杯死液量為80ul 舉例肌鈣蛋白檢測的樣本吸取量是 40 µL，CK-MB 檢測的樣本吸取量是 55 µL。以下舉例說明如果您使用 2 mL 樣本杯對上述兩個項目進行檢測，應該如何計算總的所需樣本量。A請求測試的總的樣本吸取量(40 µ

32、L + 55 µL) 95 µLB對 A 中數(shù)字，每 500 µL 需要 60 µL 60 µLC20 µL 或 5% 的 A 中樣本量數(shù)字(5.5 µL)，使用較大的一個數(shù)字進行計算20 µLD 2 mL 樣本杯的死液量 (見表 A-2)150 µL總的所需樣本量325 µL總定標液量= A樣本檢測量×重復次數(shù)+ B反應管死液量+樣本主探針多吸量+樣本容器死液量請注意：一般項目重復次數(shù)為2，計算TnI、E2定標液使用量，S0與S1點定標液都要重復四次， Prog定標液S0 重復4次，

33、S1重復3次。39 、ACCESS2 和DXI800 架號設置，規(guī)格不同為什么不能混用？n 對于ACCESS2 樣品架n 為了容納大小不同的樣品容器，儀器使用三種不同類型的樣品架： 13 mm(用于12 mm 和13 mm 樣品試管) 16 mm 抬升( 用于16x75 mm 樣品試管) 16 mm(用于16x100 mm 樣品試管)系統(tǒng)掃描樣品架條形碼標簽，確認樣品架上樣品容器的類型，然后系統(tǒng)可以此確定吸入樣品時使用合適的移液器插入深度。注意事項：僅可將樣品容器安裝在貼有正確條形碼編號的樣品架上。Access 2.0 mL/13 mm 樣品杯 邊緣：暗綠色 樣品架編號：1 - 99 or 4

34、00 -499 (僅400 - 499 帶有此圖標) 死體積：150 µL 樣品架：13 mmn 對于DXI800應按如下程序進行管類型設置。主菜單下按F8-系統(tǒng)設置；選擇F1系統(tǒng)設置 選擇F8架子號設置 選擇F2 Add Racks 選擇相應架子號和相應規(guī)格樣品杯、試管。40 定標液儲存條件注意事項？ HCG：-20度保存，每次使用間復溶 Folate/RBC Folate：開瓶前-20度保存 Free T3：開瓶前-20度保存 Progesterone：開瓶前-20度保存 Prolactin：開瓶前-20度保存 注意：在定標液盒外表有一溫度計標志，提示保存條件。41 定標液為凍干

35、粉的一些注意事項？ 如 CK-MB Insulin T Uptake凍干粉定標液復溶：復溶水的水質 加樣容器的準確度 加樣的技術 混勻/旋轉復溶后定標液保存： 使用合適的冷凍保存試管 正確標簽 無霜冰箱保存42 有些項目定標失敗后如何處理？Ø 當定標失敗時，有以下幾種常見的錯誤代碼：（1） Insuff Data 由于定標液不夠或儀器錯誤導致某一點濃度定標測試被取消；（2） Not Fit測得足夠數(shù)據(jù)，但軟件不能將其擬合為曲線；（3） Max Iter軟件能擬合曲線，但不能得出最佳擬合；（4） Bad Fit軟件擬合到最佳曲線，但曲線未通過軟件的精密度協(xié)議文件；（5） CV std

36、0重復測試的CV%超出范圍；（僅用于TU）Ø 錯誤原因分析原則及步驟（1 ） 檢查錯誤信號的內容，看是否有“QNS”，或系統(tǒng)錯誤而 導致定標失??；（2 ） 觀察各點結果精密度；如果精密度良好，錯誤有可能來自 某些操作失誤；再觀察RLU值是否接近上一次對應的值；（3 ） 檢查是否作了每日保養(yǎng)及每周保養(yǎng)；（4 ） 觀察定標得到的目標值濃度是否接近印在定標卡上的值， 如果不是，則可通過系統(tǒng)設置來修改對應的值；（5 觀察RLU值是否隨曲線平滑上升（夾心法）或下降（競爭法）， 如果不是，須檢查是否把定標液位置擺錯，或者某一濃度的定 標液受到污染；（6） 如果定標曲線非常平坦，而且RLU值很低（

37、夾心法）或RLU 值很高（競爭法），表明使用了錯誤的定標液或試劑盒；（7） 如果定標曲線平坦，且不論夾心法或競爭法，RLU值均很低， 則須檢查發(fā)光劑是否用完或發(fā)光劑液路是否正常；（8） 如果定標結果精密度較差，原因可能是： 緩沖液或發(fā)光劑液路內混入氣泡； 采樣針太臟； 清洗轉盤混勻功能故障； 超聲系統(tǒng)故障； 與排液或吸液有關的泵或閥門故障。43 化學發(fā)光項目是否可以使用血漿等其他樣本類型，有無影響并不是所有的免疫項目都可以使用血漿，具體請參閱項目說明書或項目速查表，樣本類型：描述，如FT3可以使用血清、血漿（H）肝素抗凝，對同一患者必須使用同一樣本類型監(jiān)測。44 樣本溶血、脂血對化學發(fā)光結果項

38、目有影響嗎？樣本溶血、脂血、黃疸對化學發(fā)光項目同樣是有影響的，不過影響機制與影響比色等項目不同。如溶血對胰島素影響是因為樣本溶血后紅細胞釋放一種胰島素滅活酶而使樣本中胰島素濃度減少。不同項目對樣本禁忌要求不同，具體請查閱“化學發(fā)光項目速查 樣本禁忌內容”。45 樣本分析前處理都應該注意什么?有以下幾點需特別注意：一、 采血管質量，有無失效，添加劑是否適當，采血員專業(yè)水平二、 采血量是否適當，是否及時進行混勻，血漿應該8-10次，血清應該5次。三、 血清凝固時間是否充足，離心是否徹底，離心機是否定期校正。四、 貯存條件是否適當。46 對于一些測試發(fā)生錯誤如何分析？ 不同項目發(fā)生錯誤應該按照相應方

39、法去重點分析原因。 l 2步分析法 對傳送位置/調整非常敏感l(wèi) 需預處理的項目，如： 衣原體(Chlamydia) 紅細胞葉酸鹽(RBC Folate) 尿可的松(Urine Cortisol)l 需要稀釋的項目， 對精密泵較敏感。如： AFP (1/20) Cortisol (1/9.6) Dil-TotBHCG(1/200) Myoglobin (1/50) Rubella IgG (1/10) Toxo IgG (1/40) Most ID/BV assaysl 高光量子值的測試，如： CK-MB Myoglobin Troponin-I 所有感染性疾病項目l 對磁性微粒子粘度敏感的項目

40、，與試劑盒混勻/調整有關。如： Vit B12 Chlamydia RBC Folate/Folate47 結果差異處理流程？（1） 是否僅發(fā)生于病人標本結果？ 是否同時發(fā)生于病人標本與質控標本？（2） 只發(fā)生于病人標本時 ：檢查病人標本處理過程（3） 同時發(fā)生于病人標本/質控標本時：檢查其它項目結果是否差異？ 如果是，檢查儀器性能狀態(tài)（4）如果只發(fā)生于1種項目，首先須排除該項目敏感的儀器因素（5）如果排除儀器因素后，進入該特定項目故障排除流程48 為何有的項目定標通過后試劑盒處仍顯示紅色未定標？ 這種情況一般發(fā)生在TSH、PTH、PSA等有兩種測定模式的項目，下面以PSA為例說明：在PSA定

41、標液盒中有Hybritech （白卡）和 WHO（黃卡） 兩種溯源定標，供用戶自由選擇。如選擇白卡進行定標，請將PSA-Hybritech （Test 170）測試激活，將PSA-WHO（Test 231）項目關閉，如兩種測試均激活，即使定標通過后試劑盒仍顯示紅色。49 ACCESS、ACCESS2的耗材能在儀器運行中加載嗎？對于清洗緩沖液、廢液、RV管、試劑可以在運行中隨時加載，而底物、RV廢物袋只有在處于Ready時才能更換，在運行前請檢查并加足耗材。50 如何查閱儀器的報警信息？ 對于ACCESS，請按eventlog鍵按鈕查詢儀器的所有報警信息。 對于ACCESS2、DXI800 事件

42、日志（Event log）選擇來顯示事件日志屏幕以獲得關于Access 2、DXI800系統(tǒng)所中發(fā)生事件的信息。l 黃色 系統(tǒng)產生了一個注意事項事件。l 紅色 系統(tǒng)產生了一個警告事件，提示一個嚴重的故障或錯誤情況的發(fā)生這些信息包括： 可能引起事件的原因 故障排除指示的要點 與詳細步驟的連接。51 暫停（Pause）和停止（Stop）鍵有何區(qū)別？u 暫停選擇該按鈕來暫停儀器，系統(tǒng)在完成對當前樣品的移液后會停止移液。已在進行中的樣品將繼續(xù)處理。u 停止選擇該按鈕停止儀器。系統(tǒng)停止運行并取消任何進行中的檢測。50 在保養(yǎng)中何時運行特殊清潔例行程序？如果使用Access 2、ACCESS、DXI800

43、系統(tǒng)來處理維生素B12（因試劑粘度較高）分析，那么在每日工作結束后或者儀器在八小時或更長時間內不處理樣品時，都應運行特殊清潔例行程序。51 樣品針通過什么原理檢測樣本中的凝塊？裝有壓力檢測器的儀器通過監(jiān)測吸取樣品所需的壓力，能夠在吸取樣品時探測主探頭內的凝塊。若吸取樣品所需的壓力超出了可接受的限度，那么檢測將被取消并標記CLT( 凝塊) 重大標記，且會記錄下此事件。若同一個樣品連續(xù)發(fā)生了兩次該錯誤，任何該樣品未完成的檢測將被取消。若同一個樣品連續(xù)發(fā)生了五次該錯誤，那么當正在運行的檢測分析完成時，系統(tǒng)將中止預定任何其它檢測并進入未就緒模式。操作人員此時必須初始化系統(tǒng)并且檢查，清潔或必要時，替換探

44、頭。52 如何使用Reflex（追加測試）？ 以Dil-hCG2為例說明方法： 主屏幕下F8設置F5追加測試F4添加測試Reflext Test ：選擇需追加測試如Dil-hCG2，在Condition中編輯： ThCG2=OVR，點F1，在Enable處打勾即可。對于DXI800須進行保留體積設置或反射體積設置。53 對于婦產醫(yī)院經常對hCG經常先做152+,如測定值小于1000再自動進行15+這時如何設置條件?這時條件設置公式為:Dil-hCG<=100054 如何設置雙重條件，如PSA在4-10灰區(qū)時自動進行FPSA的反射測試？Reflex Test 為 free PSA 條件設置

45、為：PSA-Hyb>=4 AND PSA-Hyb<1055 DXI800中保留體積“Reserve Volume Setup”和Reflex Volume Setup 是怎么回事？系統(tǒng)可以設置為吸取患者的額外體積和 QC 樣品，以便系統(tǒng)產生反射檢測、LIS 下載反射檢測、再次檢測或以后的 LIS 請求。 額外的體積被稱為保留體積。 當系統(tǒng)設定為吸取保留體積時，將從所有患者和QC 樣品中吸取標準的保留體積并放入保留體積樣品架中。您可以在“Reserve Volume Setup”（保留體積設置）窗口中激活保留體積功能并設置吸取的樣品數(shù)量。系統(tǒng)計算死體積和過量吸取，并吸取足夠的樣品以確

46、保全部保留體積足夠檢測使用。 如果檢測要求的體積加保留體積之和不能滿足一個反應容器，則所有的保留體積被注入一個或多個反應容器中。系統(tǒng)僅從用于保留體積的樣品架上的樣品容器中吸取保留體積。 您可以在“Rack ID Setup”（樣品架編號設置）窗口中指定保留體積的樣品架。 未指定為保留體積的樣品架應該標注“非保留體積”標簽。對于新版本（XP操作系統(tǒng)）的DXI800可以單獨進行Reflex Volume Setup。56 DXI800的樣品處理順序？UniCel DxI 800 系統(tǒng)根據(jù)下列標準確定最佳處理順序。系統(tǒng)首先處理優(yōu)先級最高的樣品。分裝樣品時指定優(yōu)先級。在所有樣品集分裝后，校準品和保養(yǎng)樣

47、品將被指定優(yōu)先級。如果兩個或更多的樣品集擁有相同優(yōu)先級，系統(tǒng)將先處理首先分裝的樣品。如果由于系統(tǒng)資源（如：試劑盒）不可用而導致高優(yōu)先級的檢測無法開始，那么低優(yōu)先級的檢測將先行處理。處理順序標準：（1） STAT 樣品（2） 校準品樣品（3） 質控樣品（4） 患者樣品（5） 保養(yǎng)57 ThCG2（151+）與Dil-hCG2（152+）是怎么回事，如何選擇？對于樣本含量< 1000 mIU/mL 總hCG 的樣本進行測定, 選擇ThCG2（151）作為測試名。對于含> 1000 mIU/mL 總hCG 的樣本進行測定，選擇Dil-hCG2（152） 作為測試名。兩種測定可用同一試劑盒

48、和同一定標曲線，定量測定含1000200000 mIU/mL的樣本，選擇Dil-hCG2測試。此測試使用ThCG2試劑盒。 當需要Dil-hCG2，系統(tǒng)自動用緩沖液稀釋樣本并從ThCG2 校準曲線上讀取相應的劑量。這一系統(tǒng)通過乘以軟件定義的稀釋系數(shù)(200) 來計算最終測試結果。 AFP 與Dil-AFP也屬此情況。58 如果遇到 ThCG2（151+）做出來結果提示> 1000 mIU/mL的標本，我使用Dil-hCG2（152+）重做，結果又提示< 1000 mIU/mL ，怎么辦？答：手工稀釋該樣本（可按5倍、10倍、20倍等倍數(shù)）后上機使用ThCG2（151+）測試，然后換

49、算成原濃度結果。59 儀器上有哪些項目具有自動稀釋功能？各自的稀釋倍數(shù)是多少？答：有甲胎蛋白AFP（17倍），鐵蛋白Fer（10倍），hCG（200倍）60 為什么其他項目無儀器自動稀釋功能？主要有兩方面的原因：一是大多數(shù)項目的檢測范圍很寬已能滿足多數(shù)項目的臨床診斷閾值。二是因為稀釋基質效應的影響，并不是所有項目都適合用緩沖液稀釋。61 有些項目升級時應該注意什么？為了使項目達到更好的性能，有些項目會升級，在升級后請注意：（1）對應最低軟件、APF版本（2）測試代碼的改變（3）對應定標液正確條碼卡使用（4）參考范圍的改變（5）樣本量的改變。下面以甲狀腺球蛋白抗體升級為例說明：甲狀腺球蛋白抗體舊

50、新名稱TgAbThgAb測試代號198227傳送代號A68A93試劑貨號33890A32898定標液貨號33895A36920最低軟件版本ACCESS（3.29） ACCESS2 （2.1） DXI800（2.01）最低APF版本ACCESS（） ACCESS2 （） DXI800（）參考值< 4.9 IU/mL<4 IU/mL標本用量（ul）201062 如何查看儀器系統(tǒng)版本及APF版本信息，有何用處？主屏幕下按F8F1F1 Assay Protocol File 如 1.10.5，對于較低版本就有可能找不到一些新升級的項目，這時需要多APF進行升級。63 能否經常改系統(tǒng)設定時間

51、，有無影響？這是不對的，如頻繁的修改系統(tǒng)時間會導致系統(tǒng)軟件文件的丟失，造成項目錯誤。64 為何有的儀器不能編程一些樣本號，如101 、102 報占用？這有可能是因為這些樣本號被用于maintenance 請求，要在儀器處于stanby時，無其他申請，儀器與LIS通訊關閉，做好數(shù)據(jù)庫備份后清除該號，具體請咨詢工程師。65 如何運行系統(tǒng)檢測？系統(tǒng)檢測作為每周保養(yǎng)內容，運行系統(tǒng)檢測(system check)可以檢查儀器的清洗、混勻、底物分配、稀釋等功能，在質控結果不好時也應不定期運行系統(tǒng)檢測。 在一個樣品架上裝載4個2毫升樣品杯，分別加入以下液體： 1號杯：未稀釋系統(tǒng)檢測液 2號杯：清洗緩沖液 3

52、號杯：空樣品杯 4號杯：1：501稀釋系統(tǒng)檢測液（20ul系統(tǒng)檢測液加10ml 清洗緩沖液） 操作步驟如下： 在主菜單下選擇F6-保養(yǎng)程序 選擇F1-裝載/卸載樣品架 輸入樣品架號 把樣品架放入轉盤 選擇F1-完成 選擇F3-系統(tǒng)檢測 選擇F1-系統(tǒng) 選擇F1-開始（運行過程需32分鐘） 清洗程序完成后，選擇F1-裝載/卸載樣品架，取出樣品架， 選擇F1-完成66 如何查看、分析系統(tǒng)檢測數(shù)據(jù)？ 查看F6Maintenance-F2System Checks-F2 System Check Data 進行查看相應數(shù)據(jù)。系統(tǒng)檢測結果范圍： 1號杯：CV of Washed RLUs must be

53、 £12% Mean of RLUs 5000-20000 3號杯：CV of Substrate RLUs must be £5% Mean of RLUs 5000-9000 4號杯：CV of Unwashed RLUs must be £2% Mean of RLUs 4000000-8000000 Mean Washed RLUs must be ³mean Substrate RLUs Wash Efficiency must be £5PPM系統(tǒng)檢測結果分析清洗檢測（washed）方法：主采樣針向10個RV中各加入150ul系統(tǒng)檢

54、測液，對各RV進行3次清洗循環(huán)。然后在各RV加入200ul發(fā)光底物，最后檢測其發(fā)光值。如果檢測結果超出范圍，需檢查RV的清洗與混勻系統(tǒng)功能清潔檢測（clean）方法：主采樣針向5個RV中各加入150ul清洗緩沖液，對各RV進行3次清洗循環(huán)。然后在各RV加入200ul發(fā)光底物，最后檢測其發(fā)光值。檢測結果RLU值不能有明顯衰減。如果有衰減則說明由于吸液針清洗不足導致交叉污染。發(fā)光底物檢測方法：在10個RV中不加入任何樣本，也不作清洗。直接向各RV加入200ul發(fā)光底物，然后測定其發(fā)光值。檢測結果的mean，SD，CV%由后6個RV 計算得出。檢測結果超出范圍說明需檢查發(fā)光底物分配系統(tǒng)或發(fā)光檢測計。未清洗檢測（unwashed）方法：主采樣針向10個RV中各加入50ul 1：501倍稀釋的系統(tǒng)檢測液，該RV不作清洗。然后向各RV加入200ul發(fā)光底物。檢測結果超出范圍，說明系統(tǒng)檢測液稀釋比例不當或主采樣針精密度需做檢查。清洗效率由Unwashed，Washed，Subst