1、出口食品志賀氏菌的檢驗方法1儀器和設備1 1 恒溫培養箱：36± 11 2 恒溫水浴箱：45± 11 3 高壓滅菌鍋1 4 均質器1. 5冰箱： 0-4 和 -15 -20 1 6 試管 :18 × 150mm12 mm×100 mm1 7 錐形瓶 :500ml 250ml1 8 平皿：直徑為90mm1 9 滅菌吸管1 10 滅菌均質杯1 11 酒精棉1 12 天平 : 感量 0.1g1.13 冰箱： 0-4 和 -15 -20 2培養基的制備2 1 GN 增菌液22 HE 瓊脂23 SS 瓊脂2 4 麥康剴瓊脂2 5 伊紅美藍瓊脂2 6 三糖鐵瓊脂2

2、7 葡萄糖半固體2 8 半固體管2 9 葡萄糖胺瓊脂2 10 尿素瓊脂3 11 西蒙氏檸檬酸鹽瓊脂3 12 氰化鉀（ KCN ）培養基3 13 氨基酸脫羧酶試驗培養基：賴氨酸、鳥氨酸、及對照培養基3 14 糖發酵管3 15 5 乳糖發酵管3 16 蛋白胨水、靛基質試劑3 17 志賀氏菌屬診斷血清4檢驗程序4 1 分離和培養稱取 25g 樣品放入于 36培養 6h 8h取增菌液1 環劃線接種HE和SS225ml GN 增菌液平板一個另取 1 環劃線接種于伊紅美藍平板一個，菌落呈現無色透明挑取平板上的可疑麥康凱平板或36培養 18h24h不發酵乳糖的菌落菌落接種三糖鐵瓊脂和36培養 18h24h葡

3、萄糖半固體各1 管觀察結果4 2 血清學分型和進一步的生化試驗4 2 1 血清學分型挑取三糖鐵瓊脂上的培養物，做玻片凝集試驗。先用四種志賀氏菌多價血清檢查，如果由于K 抗原的存在而不出現凝集，應將菌液煮沸后再檢查；如果呈現凝集，則A 1、 A2B 群多價和 D 群血清分別試驗。如系 B 群福氏志賀氏菌，則用群和型因子血清分別檢查。福氏志賀氏菌各型和亞型的型和群抗原見下表。 可先用群因子血清檢查， 再根據群因子血清出現凝集的結果，依次選用型因子血清檢查。4 種志賀氏菌多價血清不凝集的菌株，可用鮑氏多價1、2、3 分別檢查， 并進一步用115 各型因子血清檢查。如果鮑氏多價血清不凝集，可用痢疾志賀

4、氏菌3 12 型多價血清及各型因子血清檢查。福氏志賀氏菌各型和亞型的型和群抗原型和亞型型抗原群抗原在群因子血清中的凝集3， 467， 81aI1，2，4，5，91bI1，2，4，5，92aII1，3，42bII1，7，8，93aIII1，6，7，8，93bIII1，3，4，64aIV1，（ 3， 4） （）4bIV1，3，4，65aV1，3，45bV1，5，7，96VI1， 2，（ 4） （）X 變體1，7，8，9Y 變體1，3，4注：凝集；不凝集；（）有或無。4 2 2 進一步的生化試驗在做血清學分型的同時，應做進一步的生化試驗，即：葡萄糖胺，西蒙氏檸檬酸鹽。賴氨酸和鳥氨酸脫羧酶， PH7.

5、2 尿素，氰化鉀（ KCN ）生長，以及水楊苷和七葉苷的分解。除宋內氏菌和鮑氏 13 型為鳥氨酸陽性外，志賀氏菌屬的培養基均為陰性結果。必要時還應做革蘭氏染色檢查和氧化酶試驗，應為氧化酶陰性的革蘭氏陰性桿菌。生化反應不符合的菌株，即使能與某種志賀氏菌分型血清發生凝集，仍不得判定為志賀氏菌屬的培養物。已判定為志賀氏菌屬的培養物，應進一步做5乳糖發酵、甘露醇、棉子糖、和甘油的發酵和靛基質試驗。 志賀氏菌屬四個生化群的培養物， 應符合該群的生化特性。 但福氏 6 型的生化特性與 A 群或 C群相似，見下表：志賀氏菌屬四個群的生化特性生化群5乳糖甘露醇棉子糖甘油靛基質A 群：痢疾志賀氏菌（） / B 群：福氏志賀氏菌（）C 群：鮑氏志賀氏菌（）