1、概述概述 高效液相色譜高效液相色譜(HPLC)(HPLC)是以是以溶劑液體為流動(dòng)相溶劑液體為流動(dòng)相的色譜方法。的色譜方法。 早期液相色譜，包括早期液相色譜，包括TswettTswett的工作，都是在直徑的工作，都是在直徑15cm15cm, , 長(zhǎng)長(zhǎng)50500cm50500cm的玻璃柱中進(jìn)行的。為保證有一定的柱流速，填充的的玻璃柱中進(jìn)行的。為保證有一定的柱流速，填充的固定相顆粒直徑多在固定相顆粒直徑多在150200150200 m m范圍內(nèi)。即使這樣，流速仍然范圍內(nèi)。即使這樣，流速仍然很低很低(1mL/min)(BC正、反相色譜中極性和保留時(shí)間的關(guān)系正、反相色譜中極性和保留時(shí)間的關(guān)系1 1分離機(jī)

2、制分離機(jī)制 離子對(duì)模型離子對(duì)模型非極性或弱極性3 3用途用途 適用于有機(jī)酸、堿、鹽的分離，以及用離適用于有機(jī)酸、堿、鹽的分離，以及用離子交換色譜法無(wú)法分離的離子型和非離子型子交換色譜法無(wú)法分離的離子型和非離子型化合物的混合物的分離。化合物的混合物的分離。可以避免用普通的可以避免用普通的HPLCHPLC儀器長(zhǎng)期進(jìn)行儀器長(zhǎng)期進(jìn)行IECIEC時(shí)，時(shí)，流動(dòng)相（酸、堿）對(duì)泵與流路的腐蝕。流動(dòng)相（酸、堿）對(duì)泵與流路的腐蝕。此法在藥物分析中應(yīng)用很廣此法在藥物分析中應(yīng)用很廣 （四）離子抑制色譜法（四）離子抑制色譜法 在反相色譜法中，通過(guò)調(diào)節(jié)流動(dòng)相的在反相色譜法中，通過(guò)調(diào)節(jié)流動(dòng)相的pHpH值，值，抑制樣品組分的

3、解離，增加它在固定相中的抑制樣品組分的解離，增加它在固定相中的溶解度，以達(dá)到分離有機(jī)弱酸、弱堿的目的，溶解度，以達(dá)到分離有機(jī)弱酸、弱堿的目的，稱為離子抑制色譜法（稱為離子抑制色譜法（ISCISC）。）。 （一）離子色譜法（一）離子色譜法 離子色譜離子色譜( (ICIC) )是是7070年代發(fā)展的新方法。其分年代發(fā)展的新方法。其分離原理與離子交換色譜原理一樣，只是流出的各離原理與離子交換色譜原理一樣，只是流出的各種離子用電導(dǎo)檢測(cè)器檢測(cè)。但由于流動(dòng)相都是強(qiáng)種離子用電導(dǎo)檢測(cè)器檢測(cè)。但由于流動(dòng)相都是強(qiáng)電解質(zhì)，其電導(dǎo)率比待測(cè)離子約高電解質(zhì)，其電導(dǎo)率比待測(cè)離子約高2 2個(gè)數(shù)量級(jí)，這個(gè)數(shù)量級(jí)，這種強(qiáng)背景電導(dǎo)

4、會(huì)完全掩蓋待測(cè)離子信號(hào)。種強(qiáng)背景電導(dǎo)會(huì)完全掩蓋待測(cè)離子信號(hào)。 為解決此問(wèn)題，為解決此問(wèn)題，19751975年年SmallSmall提出，在離子交提出，在離子交換柱之后，再串結(jié)一根抑制柱。該柱裝填與分離換柱之后，再串結(jié)一根抑制柱。該柱裝填與分離柱電荷完全相反的離子交換樹脂。通過(guò)分離柱后柱電荷完全相反的離子交換樹脂。通過(guò)分離柱后的樣品再經(jīng)過(guò)抑制柱，使具有高背景電導(dǎo)的流動(dòng)的樣品再經(jīng)過(guò)抑制柱，使具有高背景電導(dǎo)的流動(dòng)相轉(zhuǎn)變?yōu)榈捅尘半妼?dǎo)的流動(dòng)相，從而可用電導(dǎo)檢相轉(zhuǎn)變?yōu)榈捅尘半妼?dǎo)的流動(dòng)相，從而可用電導(dǎo)檢測(cè)器檢測(cè)各種離子的含量。測(cè)器檢測(cè)各種離子的含量。該法可以分析無(wú)機(jī)與有機(jī)陰、陽(yáng)離子和氨基該法可以分析無(wú)機(jī)與有

5、機(jī)陰、陽(yáng)離子和氨基酸，以及糖類和酸，以及糖類和DNADNA、RNARNA的水解產(chǎn)物等。的水解產(chǎn)物等。該法的不足之處在于：抑制柱要定期再生、該法的不足之處在于：抑制柱要定期再生、譜峰在經(jīng)過(guò)抑制柱后會(huì)展寬，降低分離度。因譜峰在經(jīng)過(guò)抑制柱后會(huì)展寬，降低分離度。因此有人提出了使用電導(dǎo)率很低的溶液此有人提出了使用電導(dǎo)率很低的溶液( (如苯甲如苯甲酸鹽稀溶液酸鹽稀溶液) )作流動(dòng)相。作流動(dòng)相。 原理原理：利用生物大分子和固定相表面存在的某種特異性親和力，進(jìn)行選擇性分離。 先在載體表面鍵合上一種具有一般反應(yīng)性能的所謂間隔臂(環(huán)氧、聯(lián)胺等)，再連接上配基(酶、抗原等)，這種固載化的配基將只能和具有親和力特性吸

6、附的生物大分子作用而被保留。改變淋洗液后洗脫。時(shí)間，時(shí)間，min固定相：固定相：C1固定相：固定相：C8固定相：固定相：C18硅膠硅膠-烷基鍵合相中烷基鏈長(zhǎng)對(duì)反相色譜分離的影響烷基鍵合相中烷基鏈長(zhǎng)對(duì)反相色譜分離的影響1-尿嘧啶；尿嘧啶；2-苯酚；苯酚；3-乙酰苯；乙酰苯；4-硝基苯；硝基苯；5-苯甲酸甲酯；苯甲酸甲酯；6-甲苯甲苯可見(jiàn)：反相鍵合色譜中，鍵合相碳鏈越長(zhǎng)，分離效果越好。可見(jiàn)：反相鍵合色譜中，鍵合相碳鏈越長(zhǎng)，分離效果越好。2211-4nkkR 3 3 傳質(zhì)阻抗傳質(zhì)阻抗 由三個(gè)系數(shù)組成： C Cs CmCsm Cs固定相傳質(zhì)阻抗 Cm流動(dòng)相傳質(zhì)阻抗 Csm靜態(tài)流動(dòng)相傳質(zhì)阻抗 sfssD

7、dC2（1）固定相傳質(zhì)阻抗mpmmDdC2m m是由柱和填充的性質(zhì)決定的因子是由柱和填充的性質(zhì)決定的因子mpsmsmDdC2 smsm與顆粒微孔中被流動(dòng)相所占據(jù)部分的分與顆粒微孔中被流動(dòng)相所占據(jù)部分的分?jǐn)?shù)及容量因子有關(guān)。數(shù)及容量因子有關(guān)。采用ODS柱為固定相，甲醇-水為流動(dòng)相，用HPLC來(lái)分離兩種弱堿性藥物（pKa=89）,但分離效果不理想：主要表現(xiàn)為柱效能低，保留時(shí)間過(guò)短。試設(shè)計(jì)通過(guò)改變流動(dòng)相來(lái)提高分離效能的方案。(10分)流程流程進(jìn)樣器餾分收集器記錄儀檢測(cè)器分離和進(jìn)樣系統(tǒng)分離和進(jìn)樣系統(tǒng) （一）進(jìn)樣系統(tǒng)（一）進(jìn)樣系統(tǒng) 與與GCGC相比，相比，HPLCHPLC柱要短得多，因此由于柱柱要短得多，

8、因此由于柱本身所產(chǎn)生的峰形展寬相對(duì)要小些。即，本身所產(chǎn)生的峰形展寬相對(duì)要小些。即，HPLCHPLC的展寬多因一些柱外因素引起。這些因的展寬多因一些柱外因素引起。這些因素包括：進(jìn)樣系統(tǒng)、連接管道及檢測(cè)器的死素包括：進(jìn)樣系統(tǒng)、連接管道及檢測(cè)器的死體積。進(jìn)樣裝置包括兩種。體積。進(jìn)樣裝置包括兩種。 1. 1. 隔膜注射進(jìn)樣：使用微量注射器進(jìn)樣。隔膜注射進(jìn)樣：使用微量注射器進(jìn)樣。裝置簡(jiǎn)單、死體積小。但進(jìn)樣量小且重現(xiàn)性裝置簡(jiǎn)單、死體積小。但進(jìn)樣量小且重現(xiàn)性差。差。2. 2. 高壓進(jìn)樣閥：目前最常用的為六通閥。由高壓進(jìn)樣閥：目前最常用的為六通閥。由于進(jìn)樣量可由樣品管控制，因此進(jìn)樣準(zhǔn)確，于進(jìn)樣量可由樣品管控制

9、，因此進(jìn)樣準(zhǔn)確，重復(fù)性好，如圖。重復(fù)性好，如圖。（二）（二） 色譜柱色譜柱由柱管與固定相組成，柱管多用不銹鋼制成，由柱管與固定相組成，柱管多用不銹鋼制成，管內(nèi)壁要求具有很高的光潔度。固定相采用勻管內(nèi)壁要求具有很高的光潔度。固定相采用勻漿法高壓（漿法高壓（80 80 100MPa100MPa）裝柱。）裝柱。色譜柱按規(guī)格不同分為分析型與制備型兩類色譜柱按規(guī)格不同分為分析型與制備型兩類分析型柱分析型柱 常量柱：內(nèi)徑常量柱：內(nèi)徑2 24.6mm4.6mm，柱長(zhǎng)，柱長(zhǎng)1010 25cm25cm。半微量柱：內(nèi)徑半微量柱：內(nèi)徑1 1 1.5mm1.5mm，柱長(zhǎng)，柱長(zhǎng)1010 20cm20cm實(shí)驗(yàn)室制備型柱：

10、內(nèi)徑實(shí)驗(yàn)室制備型柱：內(nèi)徑2020 40mm40mm，柱長(zhǎng)，柱長(zhǎng)101030cm30cm 常用色譜柱柱效評(píng)價(jià)條件如下：常用色譜柱柱效評(píng)價(jià)條件如下：硅膠柱硅膠柱 樣品：苯、萘、聯(lián)苯及菲（用己烷配制）；樣品：苯、萘、聯(lián)苯及菲（用己烷配制）；流動(dòng)相：無(wú)水己烷。流動(dòng)相：無(wú)水己烷。反相色譜柱反相色譜柱（ODSODS柱等）樣品：尿嘧啶（測(cè)死時(shí)間用）、硝柱等）樣品：尿嘧啶（測(cè)死時(shí)間用）、硝基苯、萘及芴（或甲醇配制的硅膠柱樣品）；基苯、萘及芴（或甲醇配制的硅膠柱樣品）；流動(dòng)相：甲醇流動(dòng)相：甲醇水（水（8585：1515） 乙腈乙腈水（水（6060：4O4O）。）。正相色譜柱（氰基與氨基柱等）正相色譜柱（氰基與氨

11、基柱等）樣品： 四氯乙烯（測(cè)死時(shí)間用）、鄰苯二甲酸二甲酯、鄰苯二甲酸二正丁酯及肉桂醇。也可用偶氮苯、氧化偶氮苯及硝基苯為樣品；流動(dòng)相：正庚烷 按上述條件，測(cè)得各組分的W1/2。及tR，求出理論塔板數(shù)n及相鄰組分的分離度R（l5）。 色譜柱柱效指標(biāo)色譜柱柱效指標(biāo) 填料粒徑為填料粒徑為3m3m、4m4m、5m 5m 、7m7m或或10m10m時(shí)，柱效應(yīng)分別大于時(shí)，柱效應(yīng)分別大于8 8萬(wàn)、萬(wàn)、6 6萬(wàn)、萬(wàn)、5 5萬(wàn)、萬(wàn)、4 4萬(wàn)及萬(wàn)及 2 25 5萬(wàn)理論塔板數(shù)米（或用萬(wàn)理論塔板數(shù)米（或用 m m1 1表示表示）。）。 色譜柱的再生色譜柱的再生 反相色譜柱反相色譜柱 以甲醇一水（以甲醇一水（9595：

12、5 5）、純）、純甲醇及一氯甲烷等為流動(dòng)相，依次沖洗，順甲醇及一氯甲烷等為流動(dòng)相，依次沖洗，順序不得顛倒。每種流動(dòng)相的沖洗體積應(yīng)序不得顛倒。每種流動(dòng)相的沖洗體積應(yīng)2020倍倍于柱體積。然后，再以相反順序依次沖洗。于柱體積。然后，再以相反順序依次沖洗。 正相色譜柱（含硅膠柱）正相色譜柱（含硅膠柱）以嚴(yán)格脫水的以嚴(yán)格脫水的正己烷、異丙醇、一氯甲烷及甲醇為流動(dòng)相正己烷、異丙醇、一氯甲烷及甲醇為流動(dòng)相，依次沖洗，順序不得顛倒。其它步驟同上，依次沖洗，順序不得顛倒。其它步驟同上。 三、檢測(cè)系統(tǒng)三、檢測(cè)系統(tǒng) 要求：靈敏度高、噪聲低、線性范圍寬、要求：靈敏度高、噪聲低、線性范圍寬、重復(fù)性好、適用性廣等。重復(fù)

13、性好、適用性廣等。 應(yīng)用最多的是紫外檢測(cè)器（應(yīng)用最多的是紫外檢測(cè)器（UVDUVD）。其）。其次是熒光檢測(cè)器（次是熒光檢測(cè)器（FDFD）與電化學(xué)檢測(cè)器（）與電化學(xué)檢測(cè)器（ECDECD）。示差折光檢測(cè)器（）。示差折光檢測(cè)器（RIDRID）雖是泛用型）雖是泛用型檢測(cè)器，因受溫度影響較大，靈敏度不夠高檢測(cè)器，因受溫度影響較大，靈敏度不夠高，除還用于糖類的檢測(cè)外，已少用。，除還用于糖類的檢測(cè)外，已少用。 新型蒸發(fā)光散射檢測(cè)器及發(fā)光檢測(cè)器是新型蒸發(fā)光散射檢測(cè)器及發(fā)光檢測(cè)器是有發(fā)展前途的檢測(cè)器。有發(fā)展前途的檢測(cè)器。（一）紫外檢測(cè)器（一）紫外檢測(cè)器（UVDUVD或或UVUV）HPLCHPLC分析中因此該類檢測(cè)

14、器應(yīng)用很廣。分析中因此該類檢測(cè)器應(yīng)用很廣。原理原理 樣品組分通過(guò)流通池時(shí)對(duì)特定波長(zhǎng)紫樣品組分通過(guò)流通池時(shí)對(duì)特定波長(zhǎng)紫外線的吸收與濃度成正比。外線的吸收與濃度成正比。檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)系統(tǒng) 由光源、流通池、檢測(cè)元件、由光源、流通池、檢測(cè)元件、微機(jī)及記錄器等組成。微機(jī)及記錄器等組成。 常用純?nèi)軇┑慕刂共ㄩL(zhǎng)：水常用純?nèi)軇┑慕刂共ㄩL(zhǎng)：水190190、乙腈、乙腈190190、甲醇、甲醇205205、正己烷、正己烷210210、乙醚、乙醚220220、四氫、四氫呋喃呋喃225225、二氯甲烷、二氯甲烷245245、氯仿、氯仿245nm245nm。 在選擇測(cè)量波長(zhǎng)時(shí)注意在選擇測(cè)量波長(zhǎng)時(shí)注意：溶劑必須能讓所：溶劑必

15、須能讓所選擇的光透過(guò)，即所選波長(zhǎng)不能小于溶劑的選擇的光透過(guò)，即所選波長(zhǎng)不能小于溶劑的最低使用波長(zhǎng)（最低使用波長(zhǎng)（截止波長(zhǎng)截止波長(zhǎng)）。特點(diǎn)特點(diǎn) 靈敏度高靈敏度高, ,噪音低，最小檢出量可達(dá)噪音低，最小檢出量可達(dá)1010-12-12g g 不破壞樣品，能與其它檢測(cè)器串聯(lián)。不破壞樣品，能與其它檢測(cè)器串聯(lián)。 對(duì)溫度及流速波動(dòng)不敏感，可用于梯度淋對(duì)溫度及流速波動(dòng)不敏感，可用于梯度淋洗。洗。 屬濃度型檢測(cè)器。屬濃度型檢測(cè)器。弱點(diǎn)弱點(diǎn) 只能檢測(cè)有紫外吸收的樣品；只能檢測(cè)有紫外吸收的樣品； 流動(dòng)相的選擇有一定限制。流動(dòng)相的選擇有一定限制。紫外吸收檢測(cè)器的類型紫外吸收檢測(cè)器的類型 分為：固定波長(zhǎng)型、可變波長(zhǎng)型及

16、二分為：固定波長(zhǎng)型、可變波長(zhǎng)型及二極管陣列檢測(cè)器三種。極管陣列檢測(cè)器三種。1.1.固定波長(zhǎng)檢測(cè)器固定波長(zhǎng)檢測(cè)器 是光源波長(zhǎng)固定的光度計(jì)，一般波是光源波長(zhǎng)固定的光度計(jì)，一般波長(zhǎng)為長(zhǎng)為254nm254nm，相當(dāng)于定波長(zhǎng)紫外光度計(jì)。，相當(dāng)于定波長(zhǎng)紫外光度計(jì)。因波長(zhǎng)不能調(diào)節(jié)，不能選擇在最佳吸收波因波長(zhǎng)不能調(diào)節(jié)，不能選擇在最佳吸收波長(zhǎng)下檢測(cè)，長(zhǎng)下檢測(cè)，已基本淘汰已基本淘汰。 2 2可變波長(zhǎng)型檢測(cè)器可變波長(zhǎng)型檢測(cè)器 是一臺(tái)紫外是一臺(tái)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)或紫外分可見(jiàn)分光光度計(jì)或紫外分光光度計(jì)，波長(zhǎng)可按需要選擇。是光光度計(jì)，波長(zhǎng)可按需要選擇。是HPLCHPLC配置最配置最多的檢測(cè)器。其光學(xué)結(jié)構(gòu)與一般紫外分光光度

17、多的檢測(cè)器。其光學(xué)結(jié)構(gòu)與一般紫外分光光度計(jì)一致，主要區(qū)別是用流通池替代了比色池。計(jì)一致，主要區(qū)別是用流通池替代了比色池。通常其光程為通常其光程為2 210mm, 10mm, 體積約為體積約為1 110 10 L L。 3.3.光電二極管陣列檢測(cè)器（光電二極管陣列檢測(cè)器（PDADPDAD） 是是8080年代出現(xiàn)的新型紫外檢測(cè)器。人們想年代出現(xiàn)的新型紫外檢測(cè)器。人們想測(cè)定通過(guò)流通池時(shí)各組分的光譜獲得定性信息。測(cè)定通過(guò)流通池時(shí)各組分的光譜獲得定性信息。但因組分停留時(shí)間太短但因組分停留時(shí)間太短( (1 1秒秒) )，普通紫外分，普通紫外分光光度計(jì)的掃描速度跟不上，若停留掃描則破光光度計(jì)的掃描速度跟不上

18、，若停留掃描則破壞了分離狀態(tài)。而二極管陣列檢測(cè)器用壞了分離狀態(tài)。而二極管陣列檢測(cè)器用二極管二極管陣列代替光電管陣列代替光電管，一般一個(gè)二極管對(duì)應(yīng)接受光，一般一個(gè)二極管對(duì)應(yīng)接受光譜上一個(gè)納米（譜上一個(gè)納米（nmnm）譜帶寬度的單色光。可在）譜帶寬度的單色光。可在全波長(zhǎng)范圍進(jìn)行快速掃描，全波長(zhǎng)范圍進(jìn)行快速掃描，獲得三維光譜一色獲得三維光譜一色譜圖，同時(shí)得到定性、定量信息。譜圖，同時(shí)得到定性、定量信息。（二）熒光檢測(cè)器（二）熒光檢測(cè)器（FDFD） 早期的熒光檢測(cè)器是具有濾光片的熒光早期的熒光檢測(cè)器是具有濾光片的熒光光度計(jì)，已基本淘汰。光度計(jì)，已基本淘汰。 目前使用的熒光檢測(cè)器多是具有流通池目前使用的

19、熒光檢測(cè)器多是具有流通池的熒光分光光度計(jì)（直角光路）。的熒光分光光度計(jì)（直角光路）。 檢測(cè)限可達(dá)檢測(cè)限可達(dá)1 1 10 10-10-10g gmlml，比紫外檢，比紫外檢測(cè)器靈敏，但只適用于能產(chǎn)生熒光或其衍生測(cè)器靈敏，但只適用于能產(chǎn)生熒光或其衍生物能發(fā)熒光的物質(zhì)。物能發(fā)熒光的物質(zhì)。 （三）蒸發(fā)光散射、化學(xué)發(fā)光及安培檢測(cè)器（三）蒸發(fā)光散射、化學(xué)發(fā)光及安培檢測(cè)器 1 1蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（ELSDELSD） 是90年代出現(xiàn)的最新型的泛用檢測(cè)器。可用于揮發(fā)性低于流動(dòng)相的任何樣品組分的檢測(cè)，主要用于糖類、高分子化合物、高級(jí)脂肪酸及甾體類等。還可用于凝膠色譜及超臨界流體色譜的檢測(cè)。 原理

20、：原理： 將流出色譜柱的流動(dòng)相及組分先引入通載氣（高純N2）的蒸發(fā)室，加熱，使流動(dòng)相蒸發(fā)除去。組分則形成氣溶膠，被載氣帶入檢測(cè)室，用激光或強(qiáng)光照射氣溶膠而產(chǎn)生散射光（丁鋒爾光效應(yīng)），測(cè)定散射光強(qiáng)而獲得組分的濃度信號(hào)。散射光強(qiáng)I與進(jìn)入檢測(cè)器的氣溶膠中組分質(zhì)點(diǎn)的“質(zhì)量和”m的關(guān)系為： Ikmb k、b是二個(gè)與實(shí)驗(yàn)條件有關(guān)的常數(shù)2 2化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器 是近年發(fā)展起來(lái)的高選擇性、高靈敏度是近年發(fā)展起來(lái)的高選擇性、高靈敏度的新型檢測(cè)器。設(shè)備簡(jiǎn)單，自身發(fā)光不需光的新型檢測(cè)器。設(shè)備簡(jiǎn)單，自身發(fā)光不需光源，價(jià)格便宜，可自制，很有發(fā)展前途。化源，價(jià)格便宜，可自制，很有發(fā)展前途。化學(xué)發(fā)光反應(yīng)常用酶為催

21、化劑，將酶標(biāo)記在待學(xué)發(fā)光反應(yīng)常用酶為催化劑，將酶標(biāo)記在待測(cè)物、抗原或抗體上，可進(jìn)行藥物代謝分析測(cè)物、抗原或抗體上，可進(jìn)行藥物代謝分析及免疫發(fā)光分析。及免疫發(fā)光分析。 檢測(cè)原理檢測(cè)原理 某些物質(zhì)在常溫下與發(fā)光試劑反應(yīng)，生成某些物質(zhì)在常溫下與發(fā)光試劑反應(yīng)，生成處于激發(fā)態(tài)的產(chǎn)物，當(dāng)它們由激發(fā)態(tài)返回基態(tài)處于激發(fā)態(tài)的產(chǎn)物，當(dāng)它們由激發(fā)態(tài)返回基態(tài)時(shí)發(fā)射光子。因其能量來(lái)源于化學(xué)反應(yīng)，故稱時(shí)發(fā)射光子。因其能量來(lái)源于化學(xué)反應(yīng)，故稱為化學(xué)發(fā)光。光強(qiáng)與組分濃度成正比。最小檢為化學(xué)發(fā)光。光強(qiáng)與組分濃度成正比。最小檢測(cè)量可達(dá)測(cè)量可達(dá)pgpg級(jí)（級(jí)（10101212g g）。）。3 3安培檢測(cè)器（安培檢測(cè)器（ADAD）

22、電化學(xué)檢測(cè)器包括電化學(xué)檢測(cè)器包括電導(dǎo)檢測(cè)器、安培檢電導(dǎo)檢測(cè)器、安培檢測(cè)器及極譜檢測(cè)器等。電導(dǎo)檢測(cè)器主要用于測(cè)器及極譜檢測(cè)器等。電導(dǎo)檢測(cè)器主要用于離子色譜，安培檢測(cè)器與極譜檢測(cè)器可用于離子色譜，安培檢測(cè)器與極譜檢測(cè)器可用于可氧化、還原的物質(zhì)的檢測(cè)。可氧化、還原的物質(zhì)的檢測(cè)。 其它其它 尚有紅外檢測(cè)器、介電常數(shù)檢測(cè)器及尚有紅外檢測(cè)器、介電常數(shù)檢測(cè)器及放射性檢測(cè)器等。放射性檢測(cè)器等。 接參比電極接參比電極和對(duì)電極和對(duì)電極接色譜柱接色譜柱Teflon塑料塊塑料塊1 cm工作電極工作電極(Pt, Au, 碳糊碳糊)第四節(jié)第四節(jié) 高效液相色譜分析方法高效液相色譜分析方法一、定性分析方法一、定性分析方法 H

23、PLCHPLC的定性方法與的定性方法與GCGC相似，可分為色譜相似，可分為色譜鑒定法及非色譜鑒定法兩類。鑒定法及非色譜鑒定法兩類。 1 1色譜鑒定法色譜鑒定法 保留時(shí)間或相對(duì)保留時(shí)保留時(shí)間或相對(duì)保留時(shí)間對(duì)照。間對(duì)照。 2 2化學(xué)鑒定法化學(xué)鑒定法 分離后收集組分定性。分離后收集組分定性。 3 3兩譜聯(lián)用鑒定法兩譜聯(lián)用鑒定法 （1 1）兩譜聯(lián)用法：）兩譜聯(lián)用法：用用 HPLCHPLC制備純組分，制備純組分，用光譜儀器鑒定。用光譜儀器鑒定。 （2 2）兩譜聯(lián)用儀：）兩譜聯(lián)用儀：能同時(shí)獲得定性、定能同時(shí)獲得定性、定量信息。如量信息。如HPLCHPLCUVUV、HPLCHPLCFTIRFTIR及及 HPLCHPLCMSMS等。等。 二、定量分析方法二、定量分