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1、2020版藥典微生物限度計數一耐膽鹽革蘭陰性菌2020版本藥典(1) 菌種及菌液制備1)菌液制備將銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、沙門菌分別 接種在胰酪大豆腺瓊脂培養基上，35°C條件下培養24小時，將新鮮 培養物用PH7.0的0.9%無菌氯化鈉溶液制成適宜濃度的菌懸液。(2) 控制菌檢查方法適用性試驗控制菌檢査用培養基的適用性檢查項目包括促生長能力、抑制 能力及指示特性的檢查，各培養基的檢查項目及所用的菌株見表1。表1控制菌檢査用培養基的促生長能力.抑制能力和指示特性控制菌培養基特性試驗菌耐膽鹽革蘭陰腸道菌增菌液體培養基促生長能力大腸埃希菌、銅綠性菌假單胞菌抑制能力金黃色

2、葡萄球菌紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養基促生長能力+人腸埃希菌、銅綠指示能性假單胞菌沙門菌RV沙門菌增菌液體培養基促生長能力乙型副傷寒沙門菌抑制能力金黃色葡萄球菌木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂促生長能力+乙型副傷寒沙門菌培養基指示能性三糖鐵瓊脂培養基指示能性乙型副傷寒沙門菌耐膽鹽革蘭陰性菌檢查方法適用性試驗1、腸道菌增菌液體培養基促生長能力檢查：分別接種不人于lOOcfii的人腸埃希菌和銅綠假單胞菌于被檢培養基以及對照培養基中, 在35°C條件下培養24小時。2、腸道菌增菌液體培養基抑制能力檢查：分別接種不大于 lOOcfh的金黃色葡萄球菌于被檢培養基和對照培養基中，在35°C條件 下培

3、養48小時。3、紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養基促生長能力檢查：分別接種不大 于lOOcfU的大腸埃希菌和銅綠假單胞菌于被檢培養基以及對照培養基 中，在35°C條件下培養18小時。4、紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養基指示能性檢查：分別接種不大于 lOOchi的大腸埃希菌和銅綠假單胞菌于被檢培養基以及對照培養基中, 在35°C條件下培養18小時。5、紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養基抑制能力檢查：分別接種不大于 lOOchi的金黃色葡萄球菌于被檢培養基和對照培養基中，在35°C條件 下培養24小時。（3）耐膽鹽革蘭氏陰性菌檢査1）供試液制備和預培養供試品的控制菌檢查按經方法適用性試驗確認的方

4、法進行。取 供試品，用胰酪人豆豚液體培養基作為稀釋劑制成1:10供試液，混 勻，在25°C條件下培養，培養時間使供試品屮的細菌充分恢復但不 增殖（2小時）。2）定性試驗取相當于10ml供試品的上述預培養物接種至適宜體積90ml腸道 菌增菌液體培養基屮，35°C培養24小時后，劃線接種于紫紅膽鹽葡 萄糖瓊脂培養基平板上，35°C培養24小時。如果平板上無菌落生長, 判供試品未檢出耐膽鹽革蘭陰性菌。3）定量試驗選擇和分離培養取相當于o.lg、O.Olg和O.OOlg供試品的預培養 物分別接種至9ml體積腸道菌增菌液體培養基中，35°C培養24小時。 上述每一培養物分別劃線接種于紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養基平板上,35°C培養24小時。 （具體流程見下頁）單擊頭I下載2020版本藥典其它資料O 34 0總評分4.9 文檔量單擊頭像I

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