1、復方心腦腎康對大鼠心肌缺血再灌注損傷的抗氧化作用         【摘要】  目的研究復方心腦腎康對急性心肌缺血再灌注損傷的保護作用。方法連續給大鼠灌胃復方心腦腎康10 d后,以結扎冠狀動脈左前降支的方法建立心肌缺血再灌注損傷模型（MIR）,缺血30 min再灌注60 min后檢測心肌丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)、一氧化氮合酶(NOS)、ATP酶的活性,并觀察心肌組織的病理改變。結果與模型組相比，高、中、低3個劑量心腦

2、腎康用藥后均能減輕缺血后心肌細胞的病理損傷，顯著降低了心肌組織勻漿中MDA的含量及ROS，NOS活性,增加SOD，ATP酶活性（P<0.05)并呈劑量依賴性，其中,高劑量效果最好,優于陽性對照藥(P<0.05)。結論心腦腎康對心肌缺血損傷具有良好的保護作用()。 The small courtesies sweeten life; the greater ennoble it.  【關鍵詞】  復方心腦腎康； 心肌缺血； 保護作用Abstract:ObjectiveTo study the p

3、rotective effects of Xinaoshenkang(XNSK) on the acute myocardial ischemia-reperfusion injury in rats.MethodsThe acute myocardial ischemia-reperfusion injury model of rats given XNSK by intra

4、gastrical injection for 10 days was establishied by ligation of left anterior descending coronary artery for 30 minutes,followed by reperfusion for 60 minutes .The pathological

5、0;changes of myocardium was observed and the content of MDA,the activities of SOD,ROS,NOS and ATPase in myocardial homogenate were detected.ResultsCompared with model group, XNSK a

6、t high, middle, low dosage lessened the degree of myocardial injury and decreased the content of MDA,the activities  ROS,NOS and increased the activities of SOD, ATPase&#

7、160;significantly(P<0.05) in a dose dependent manner. The high dosage had better effect than positive control group (P<0.05). ConclusionXNSK has good protective effects against th

8、e acute ischemic myocardium.Key words:XNSK;  Myocardial ischemia;  Protective effect    復方心腦腎康(XNSK)由茶多酚(TP)、銀杏提取物(Egb761)、三七總皂苷(PNS)、丹參素(DS)配伍而成，以上各成分按一定比例配成XNSK, TP作為該復方中的主藥（占總量的40%)和質量控制指標，并用1二甲基亞砜生理鹽水助溶。其主要成分TP具有抗氧化、抑制血小板

9、聚集、抗血栓等作用,佐以Egb761、DS等活血化瘀藥,通過動物實驗觀察其對心肌缺血再灌注損傷的保護作用,為心肌缺血的新藥開發提供實驗依據。A thing is bigger for being shared.  1  材料與儀器A faithful friend is hard to find.  1.1  藥物復方心腦腎康(XNSK)由本課題組研制，已通過急毒和長毒實驗，組方中各活性提取物均購自成都華高天然藥物有限公司,包括TP(純度98%批號:20031108),Egb761(總黃酮/總內酯24:6,批號:20030710)，P

10、NS(純度90%,批號:20030911),丹參水溶性提取物(3%RS,批號:20030815),以上各成分按一定比例配成復方；復方丹參片(FFDS): 安徽華佗國藥廠，批號：Z34020961。Know thyself.  1.2  試劑MDA，SOD，ROS，NOS，ATPase，考馬斯亮藍試劑盒，均為南京建成生物工程研究所產品。1.3  儀器DH-1型動物人工呼吸機,722N紫外分光光度計,高速冷凍離心機。2  方法  2.1  分組及給藥將動物隨機分為假手術組，缺血模型對照組，

11、XNSK低、中、高劑量組，陽性對照組共6組，各組均于術前10 d開始灌胃給藥,1次/d（假手術組和缺血模型對照組給予同體積的生理鹽水），術前禁食12 h,第10天最后1次于缺血前60 min給藥，參考文獻方法1制備MIR模型。再灌注 60 min后各組動物實驗完畢，摘除部分結扎線以下左心室心肌，冰浴中制備成10%的組織勻漿，按試劑盒說明書，測定各組心肌MDA，SOD，ROS，NOS，ATP酶的含量(醫藥學/藥學論文 )。部分心肌用10%甲醛溶液固定，制成石蠟切片，蘇木素伊紅(HE)染色，病理圖像分析儀下觀察。He that runs faste

12、st gets the ring.  2.2  統計方法實驗數據用 ±s 表示,采用SPSS13.0統計軟件,結果進行t檢驗。3  結果    復方心腦腎康對大鼠心肌組織生化指標及ATP酶的影響見表12，心肌組織的病理改變見圖13。    從表1 2可見，3個劑量的XNSK用藥后均使大鼠的心肌組織MDA的含量及ROS，NOS活性顯著降低，SOD和ATP酶活性顯著升高（P<0.05），高劑量組的保護作用強度優于FFDS組（

13、P<0.05）。表1  心腦腎康對大鼠心肌組織生化指標的影響，表2  心腦腎康對大鼠心肌組織ATP酶的影響（略）。    由圖13看出，缺血模型對照組心肌排列紊亂，細胞腫脹明顯，肌纖維部分斷裂，可見心肌細胞成片狀壞死，壞死區細胞核碎裂或崩解，周圍有炎性細胞浸潤。高劑量XNSK組心肌細胞排列規整，部分心肌細胞水腫變性，可見點狀的心肌細胞壞死，未見成片狀壞死，周圍有少量炎性細胞浸潤。陽性對照組心肌受損程度與中劑量XNSK 組相近。 論文教育信息網  4  討論&#

14、160;   目前實驗研究心肌缺血再灌注損傷（MIR）最常用的模型有結扎冠狀動脈左前降支（LAD）、注射異丙腎上腺素、注射垂體后葉素。結扎LAD導致心肌持續缺血進而梗死為最經典的心肌缺血再灌注損傷模型，與人體發生急性心肌梗塞的生理、病理過程最相似。    TP在體內具有很強的清除自由基、抑制脂質過氧化損傷的能力，其抗氧化作用是傳統抗氧化劑維生素E的18倍、維生素C的16倍，其中EGCG發揮著主要功效2,3。Egb761能維持心肌膜相結構的完整性、提高心肌對缺血-再灌注損傷的耐受性，對于預防心肌缺血再灌注損傷具有顯著作用46。

15、PNS可使大鼠的增快心率及高聳的T波恢復，心肌組織Na+-K+ATPase和Ca2+-Mg2+ATPase活性明顯增加，從而對心肌損傷具有保護作用7。本研究將上述4種活性成分以低于它們中每一單體的治療劑量有機配伍,抗過氧化損傷是4種活性成分的共性，但是其作用強度、作用靶點及機制又有差異，從而有理由相信它們組方后因成分優勢互補、協同增效而對心肌急性損傷有著強大保護作用。    SOD是生物體內清除活性氧自由基的重要酶類，其活力高低可以間接反映機體清除氧自由基的能力，而MDA作為脂質過氧化的數終產物成為研究抗氧化功能的常用檢測指標之一。NO對心肌的收縮起一種

16、雙向調節作用，低濃度時促進心肌的收縮，高濃度時則起抑制作用8。而心肌缺血再灌注損傷后，細胞內Ca2+超載導致能量代謝障礙，ATP酶活性降低。從實驗結果看出: 心腦腎康可明顯降低心肌組織勻漿NOS,ROS和MDA含量，升高SOD與ATP酶活性并明顯改善受損心肌組織病理學形態，表明心腦腎康對急性心肌缺血具有顯著的抗氧化損傷作用, 且呈劑量依賴性。    本研究實驗結果表明,對大鼠急性心肌缺血再灌注損傷的保護作用比復方丹參片更強，并有顯著性差異且毒副作用小,有望開發成為一種防治心肌缺血損傷的新藥,給臨床的治療提供了一種選擇。【參考文獻】&#

17、160; 1徐戎，汝玲，顧世芬，等.補心氣膠囊在麻醉大鼠心肌缺血再灌注損傷模型中的保護作用J.中成藥，2004，26（9）：739.2Higdon JV, Frei B. Tea catechins and polyphenols：health, effects, metabolism and antioxidant functionJ.Crit Rev Food Sci Nutr, 2003, 43(1)

18、：89.3武煜,顧振綸.茶多酚的藥理學作用及其機制研究進展J.中成藥,2005,27(6):722.4田云,盧向陽,易克，等. 天然植物抗氧化劑研究進展J.中草藥,2005,36(3)：468.5Liebgott T, Miollan M, Berchadsky Y, et al. Complementary cardio- protective effects of flavonoid metabolites and terpenoid constituents of Ginkgo biloba extract(EGb761)during ischemia and&