1、基因工程高考題總結(jié)-CAL-FENGHAI-(2020YEAR-YICAI)_JINGBIAN選修三現(xiàn)代生物技術(shù)基因工程(2012浙江卷1.天然的玫瑰沒有藍色花，這是由于缺少控制藍色色素合成的基因B,而 開藍色花的矮牽牛中存在序列已知的基因B?，F(xiàn)用基因工程技術(shù)培育藍玫瑰，下列操作 正確的是A.提取矮牽牛藍色花的mRNA,經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得互補的DNA,再擴增基因BB.利用限制性核酸內(nèi)切酶從開藍色花矮牽牛的基因文庫中獲取基因BC.利用DNA聚合酶將基因B與質(zhì)粒連接后導(dǎo)入玫瑰細胞D.將基因B直接導(dǎo)入大腸桿菌，然后感染并轉(zhuǎn)入玫瑰細胞(2012四川卷)2.將大腸桿菌的質(zhì)粒連接上人生長激素的基因后，重新置入大

2、腸桿菌的細胞內(nèi)，通過發(fā)酵就能大量生產(chǎn)人生長激素。下列敘述正確的是A .發(fā)酵產(chǎn)生的生長激素屬于大腸桿菌的初級代謝產(chǎn)物B .大腸桿菌獲得的能產(chǎn)生人生長激素的變異可以遺傳C ,大腸桿菌質(zhì)粒標記基因中腺噂吟與尿喀咤含量相等D,生長激素基因在轉(zhuǎn)錄時需要解旋酶和DNA連接酶(2012江蘇卷)3.圖1表示含有目的基因D的DNA片段長度(bp即堿基對)和部分堿基 序列，圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列。現(xiàn)有Msp I、BamH I、Mbo I、 Sma I 4種限制性核酸內(nèi)切酶切割的堿基序列和酶切位點分別為C I CGG、G I GATCC. I GATC、CCC I GGGo請回答下列問題：目的地因D/

3、m 門【1TTrrm【i11 口 ” 11GGATCCqGCGGGCCCGGGGGATCCCCTAGGG(jGCCCGGGCCCCCTAGGi 門 i 11 i 11 lj ill；111 i.m i 11 i I.【i.534bp179 6 bp w 658 bp >(1)圖1的一條脫氧核昔酸鏈中相鄰兩個堿基之間依次由 連接。(2)若用限制酶Sma I完全切割圖1中DNA片段，產(chǎn)生的末端是末端，其產(chǎn)物長度為 o(3)若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對被T-A堿基對替換，那么基因D就突變?yōu)榛騞。從雜合子分離出圖1及其對應(yīng)的DNA片段，用限制酶Sma I完全切割，產(chǎn)物中共有一 種不同DNA片段。

4、(4)若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進行，形成重組質(zhì)粒，那么應(yīng) 選用的限制酶是c在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后，為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，一般需要用添加 的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。經(jīng)檢測，部分含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌株中目的基因D不能正確表達，其最可能的原因是O(2012天津卷，4.生物分子間的特異性結(jié)合的性質(zhì)廣泛用于生命科學(xué)研究。以下實例DNAift為體外處理“蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合體”獲得DNA片段信息的過程圖。據(jù)圖回答：(1)過程酶作用的部位是鍵，此過程只發(fā)生在非結(jié)合區(qū)DNA,過程酶作用的部位是鍵。(2)、兩過程利用了酶的 特性。(3)若將得到的DNA片段用于構(gòu)建重組質(zhì)粒，需要過程的測序結(jié)果

5、與 酶的識別序列進行對比，已確定選用何種酶。(4)如果復(fù)合體中的蛋白質(zhì)為RNA酶聚合，則其識別、結(jié)合DNA序列位基因的(5)以下研究利用了生物分子間的特異性結(jié)合的有 (多選)A.分離得到核糖體，用蛋白酶酶解后提rRNAB.用無水乙醇處理菠菜葉片，提取葉綠體基粒膜上的光合色素C.通過分子雜交手段，用熒光物質(zhì)標記的目的基因進行染色體定位D .將抑制成熟基因?qū)敕眩鋗RNA與催化成熟酶基因的mRNA互補結(jié)合，終 止后者翻譯，延遲果實成熟。5 .圖為某種質(zhì)粒表達載體簡圖，小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切酶EcoRI、BamHI的酶切位 點，ampR為青霉素抗性基因，tcfR為四環(huán)素抗性基因，P為啟動因子

6、，T為終止子，ori 為復(fù)制原點。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內(nèi)的多種酶的酶切位點。(1)將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒表達載體分別用EcoRI酶切，酶切產(chǎn)物用DNA連 接酶進行連接后，其中由兩個DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有 _、三種。若要從這些連接產(chǎn)物中分離出重組質(zhì)粒，需要 對這些連接產(chǎn)物進行 O(2)用上述3種連接產(chǎn)物與無任何抗藥性的原核宿主細胞進行轉(zhuǎn)化實驗。之后將這 些宿主細胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產(chǎn)物 是；若接種到含青霉素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產(chǎn)物是 O(3)目的基因表達時，RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點是

7、其合成的產(chǎn)物是 O(4)在上述實驗中，為了防止目的基因和質(zhì)粒表達載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任 意連接，酶切時應(yīng)選用的酶是O6 .轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過程如圖所示。質(zhì)粒上有Pst I、Sma【、EcoR I、Apa I等四 種限制酶切割位點。請回答：P.w I Sina I EcoR I 農(nóng)桿菌千 八香他級縱塊-5-ori(1)構(gòu)建含抗病基因的表達載體A時，應(yīng)選用限制酶,對 進行切割。(2)培養(yǎng)板中的卡那霉素會抑制香蕉愈傷組織細胞的生長，欲利用該培養(yǎng)篩選已導(dǎo) 入抗病基因的香蕉細胞，應(yīng)使基因表達載體A中含有，作為標記基因。(3)香蕉組織細胞具有,因此，可以利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗病基因的 香蕉組織

8、細胞培育成植株。圖中、依次表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細胞的,7 .為擴大可耕地面積，增加糧食產(chǎn)量, 科學(xué)家應(yīng)用耐鹽基因培育出了耐鹽 新品系。黃河三角洲等鹽堿地的開發(fā)利用備受關(guān)注。我國水稻DNA 中的3(1)獲得耐鹽基因后，構(gòu)建重組 分子所用的限制性內(nèi)切酶作用于圖處，DNA連接酶作用于一處。(填“屋或“b”)(2)將重組DNA分子導(dǎo)入水稻受體細胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和 法。(3)為了確定耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素標記的 作探針進行分子雜交檢測，又要用 方法從個體水平鑒定水稻植株的耐鹽性。8 .在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kan)常作為標記基因，只有含卡那霉

9、素抗性基因的細胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長。下圖為獲得抗蟲棉的技術(shù)流程。請據(jù)圖回答：(1) A過程需要的酶有(2) B過程及其結(jié)果體現(xiàn)了質(zhì)粒作為運載體必須具備的兩個條件是(3) C過程的培養(yǎng)基除含有必要營養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂和激素外，還必須加入(4)如果利用DNA分子雜交原理對再生植株進行檢測，D過程應(yīng)該用作為探針。(5)科學(xué)家發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因植株的卡那霉素抗性基因的傳遞符合孟德爾遺傳規(guī)律。將轉(zhuǎn)基因植株與 雜交，其后代中抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型的數(shù)量比為1 ： lo若該轉(zhuǎn)基因植株自交，則其后代中抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型的數(shù)量比為若將該轉(zhuǎn)基因植株的花藥在卡那霉素培養(yǎng)基上作離體培養(yǎng)，則獲得的再生植株 群

10、體中抗卡那霉素型植株占%o9 .以重組DNA技術(shù)為核心的基因工程正在改變著人類的生活。請回答下列問題,(1)獲得目的基因的方法通常包括 和 O-7 -(2)切割和連接DNA分子所使用的酶分別是和。(3)運送目的基因進入受體細胞的載體一般選用病毒或,后者的形狀成o(4)由于重組DNA分子成功導(dǎo)入受體細胞的頻率 所以在轉(zhuǎn)化后通常需要進行操作。(5)將人胰島素基因分別導(dǎo)入大腸桿菌與酵母菌，從兩者中生產(chǎn)的胰島素在功能和序列上是相同的。10、 (2011年江蘇卷)33 . (8分)請回答基因 工程方面的有關(guān)問題：(1)利用PCR技術(shù)擴增目的基因，其原理與細胞內(nèi) DNA復(fù)制類似(如右圖所示)。圖中引物為單

11、鏈 DNA片段，它是子鏈合成延伸的基礎(chǔ)。從理論上推測，第四輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物A 的DNA片段所占的比例為一o在第 輪循環(huán)產(chǎn)物中開始出現(xiàn)兩條脫氧核首酸鏈等長的DNA片段。設(shè)計引物是PCR技術(shù)關(guān)鍵步驟之一。IIIIIIIIIIIIIIIII1IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIII1IIIIIIIIII第一輪循環(huán)(退火某同學(xué)設(shè)計的兩組引物(只標注了部分堿基序列)都不合理(如下圖)，請分別說明 理由。j引物 IT 1 ! I第I初引物|CAGGCT心曲 IIm-r-rnA G C CT G1初一一 1m 一 夏_1工：A ACTGC AG TT引物II、 I I I I II I I I

12、ICG 人 CTGATT A第組： ；第2組：o(3) PCR反應(yīng)體系中含有熱穩(wěn)定DNA聚合酶，下面的表達式不能正確反映DNA聚合酶的 功能，這是因為，(4)用限制酶氏。RV、Mbol單獨或聯(lián)合切割同一種質(zhì)粒，得到的DNA片段長度如下圖(1 kb14kb即1000個堿基對)，請在答題卡的指定位置畫出質(zhì)粒上EcoRV、Mbol的切割位點。£ccRV質(zhì)粒Mbo2.5kb11.5kbEcoRN2.5kb5.5 kb6kb/ +MboI-17 -環(huán)狀DN A示意圖A、B、C、D表示能與機“應(yīng)T-DNA戰(zhàn) 互補、長度相等的單鏈DNA片段： 箭頭指示DN A合成方向。11、(11年北京卷)T-D

13、NA可能隨機插入植物基因組內(nèi)，導(dǎo)致被插入基因發(fā)生突變。用此方法誘導(dǎo)擬南 芥產(chǎn)生突變體的過程如下：種植野生型擬南芥，待 植物形成花蕾時，將地上部分浸入農(nóng)桿菌(其中的 DNA上帶有抗除草劑基因)懸浮液中以實現(xiàn)轉(zhuǎn) 化。在適宜條件下培養(yǎng)，收獲種子(稱為T代)。(1)為促進植株側(cè)枝發(fā)育以形成更多的花蕾，需 要去除,因為后者產(chǎn)生的 會抑制側(cè)芽的生長。(2)為篩選出已轉(zhuǎn)化的個體，需將明代播種在含 的培養(yǎng)基上生長，成熟后自交，收獲種子(稱為代)。(3)為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將丁2代播 種在含 的培養(yǎng)基上，獲得所需個體。(4)經(jīng)過多代種植獲得能穩(wěn)定遺傳的抗鹽突變體。為確定抗鹽性狀是否由單基因突變引起，

14、需將該突變體與 植株進行雜交，再自交 代后統(tǒng)計性狀分離比。(5)若上述T-DNA的插入造成了基因功能喪失，從該突變體的表現(xiàn)型可以推測野生型基因的存在導(dǎo)致植物的抗鹽性 O(6)根據(jù)T-DNA的已知序到，利用PCR技術(shù)可以擴增出被插入的基因片段。其過程是：提取 植株的DNA,用限制酶處理后，再用 將獲得的DA片 段連接成環(huán)(如右圖)以此為模板，從圖中A、B 為引物進行擴增，得到的片斷將用于獲取該基 因的全序列信息。12 . 1979年，科學(xué)家將動物體內(nèi)的能夠合成胰 島素的基因與大腸桿菌的DNA分子重組，并且 在大腸桿菌體內(nèi)表達成功。請根據(jù)圖回答問 題：(1)此圖表示的是采取從 中獲取C、D四種單鏈

15、DNA片斷中選取作目的基因的過程。(2)圖中DNA是以 為模板，形成單鏈DNA,在酶的作用下合成雙鏈DNA,從而獲得了所需要的基因。(3)圖中代表的是在它的作用下將質(zhì)粒(DNA)切出末，山(4)圖中代表 DNA,含.0 圖中表示將：表示 DNA隨大腸桿菌的繁殖而進行。(2012浙江卷)6 .天然的玫瑰沒有藍色花，這是由于缺少控制藍色色素合成的基 因B,而開藍色花的矮牽牛中存在序列已知的基因B。現(xiàn)用基因工程技術(shù)培育藍玫瑰， 下列操作正確的是A .提取矮牽牛藍色花的mRNA,經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得互補的DNA,再擴增基因BB .利用限制性核酸內(nèi)切酶從開藍色花矮牽牛的基因文庫中獲取基因BC .利用DNA聚合酶

16、將基因B與質(zhì)粒連接后導(dǎo)入玫瑰細胞D.將基因B直接導(dǎo)入大腸桿菌，然后感染并轉(zhuǎn)入玫瑰細胞【答案】A【命題透析】通過特定的實例考查基因工程的相關(guān)概念及操作要領(lǐng)。【思路點撥】控制藍色色素合成的基因B即為我們所需要的目的基因，可通過逆轉(zhuǎn)錄法 獲得基因B,再進行擴增以增加其數(shù)量；基因文庫中保存的是各基因片段，提取時無須 使用限制性核酸內(nèi)切酶；為使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在且能向下一代遺傳，應(yīng)先 在體外使用DNA連接酶構(gòu)建基因表達載體，然后再導(dǎo)入大腸桿菌。（2012四川卷）2.將大腸桿菌的質(zhì)粒連接上人生長激素的基因后，重新置入大腸桿 菌的細胞內(nèi)，通過發(fā)酵就能大量生產(chǎn)人生長激素。下列敘述正確的是A.發(fā)酵產(chǎn)生

17、的生長激素屬于大腸桿菌的初級代謝產(chǎn)物B.大腸桿菌獲得的能產(chǎn)生人生長激素的變異可以遺傳C.大腸桿菌質(zhì)粒標記基因中腺喋吟與尿喀淀含量相等D.生長激素基因在轉(zhuǎn)錄時需要解旋酶和DNA連接酶【答案】B【解析】A初級代謝產(chǎn)物是微生物生長必需的，而人的生長激素不是大腸桿菌必需的.幫A錯。B可遺傳的變異有基因突變、基因重組和染色體變異，大腸桿菌是原核生物， 但其變異來源是基因重組。C基因為有遺傳效應(yīng)的DNA片段，不含有U。D轉(zhuǎn)錄時不需 要形成磷酸二酯鍵，不需要DNA連接酶匚（2012江蘇卷）32 .圖1表示含有目的 基因D的DNA片段長度（bp即堿基對）和部分堿基序列，圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和 部分堿基序列。

18、現(xiàn)有Msp I、BamH I、Mbo I、Sma I 4種限制性核酸內(nèi)切酶切割的 堿基序歹IJ和酶切位點分另IJ為C1CGG、G1GATCC、 I GATC、CCC ； GGGO請回答下 列問題：目的基因DGGATCCqCiCGGGCCCGGGGGATCCCCTAGGGjdGCCCGGGCCCCCTAGGI I I I 門口 I.：l I：I I I I I.門 II I I.534bp1：1796 bpi 658 bp 族佟12(1)圖1的一條脫氧核昔酸鏈中相鄰兩個堿基之間依次由 連接。(2)若用限制酶Sma I完全切割圖1中DNA片段，產(chǎn)生的末端是末端，其產(chǎn)物長度為 o(3)若圖1中虛線方

19、框內(nèi)的堿基對被T-A堿基對替換，那么基因D就突變?yōu)榛騞。從雜合子分離出圖1及其對應(yīng)的DNA片段，用限制酶Sma I完全切割，產(chǎn)物中共有一 種不同DNA片段。(4)若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進行，形成重組質(zhì)粒，那么應(yīng)選用的限制酶是。在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后，為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，一般需要用添加 的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。經(jīng)檢測，部分含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌株中目的基因D不能正確表達，其最可能的原因是答案：(1)脫氧核糖、磷酸、脫氧核糖 (2)平 537bp、790bp. 661bp(3) 4(4) BamH I抗生素B同種限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D與質(zhì)粒反向連接解析

20、：(1) DNA單鏈中相鄰兩個堿基之間通過“脫氧核糖一磷酸一脫氧核糖”連接。(2) Sma I識別的序列為GGGCCC,切割后會產(chǎn)生平末端；圖1所示的DNA分子中含有兩個Sma I的識別位點，第一個識別位點在左端534bp序列向右三個堿基對的位置；第二個識別位點在右端658bp序列向左三個堿基對的位置，從這兩個位點切割后產(chǎn)生的DNA片段長度分別為534+3, 796-33 658+3,即得到的DNA片段長度分別為537bp、790bp和 661bpo(3)在雜合子體內(nèi)含有基因D和基因d,基因D的序列中含有兩個識別位點，經(jīng)過Smal完 全切割會產(chǎn)生537bp、790bp和661bp三種不同長度的

21、片段，基因d的序列中含有一個識別 位點，經(jīng)過切割后會產(chǎn)生1327bp和661bp兩種長度的片段，綜上，雜合子中分離到該基因 的DNA片段經(jīng)過切割后會產(chǎn)生4種不同長度的片段。(4)能夠獲取目的基因并切開質(zhì)粒的限制酶有識別序列為GGATCC的BamH I和識別序 列為GATC的Mbo I,若使用Mbo I會同時破壞質(zhì)粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性 基因，所以要用BamHI來切割目的基因和質(zhì)粒，切割后保留了完整的抗生素B抗性基 因，便于篩選出含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌。因為目的基因和運載體是用同種限制酶切割 的，目的基因兩端的末端和質(zhì)粒切割后的兩個末端都能進行互補，可能出現(xiàn)目的基因反 向連接在運載

22、體上的情況，導(dǎo)致基因D不能正確表達。(2012天津卷，7)7. (13分)生物分子間的特異性結(jié)合的性質(zhì)廣泛用于生命科學(xué)研究。以下實例為體外處理“蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合體,獲得DNA片段信息的過程圖。DNA曲ATGCTTC-TACGAAG-據(jù)圖回答:(1)過程酶作用的部位是鍵，此過程只發(fā)生在非結(jié)合區(qū)DNA,過程酶作用的部位是鍵C(2)、兩過程利用了酶的 特性。(3)若將得到的DNA片段用于構(gòu)建重組質(zhì)粒，需要過程的測序結(jié)果與 酶的識別序列進行對比，已確定選用何種酶。(4)如果復(fù)合體中的蛋白質(zhì)為RNA酶聚合，則其識別、結(jié)合DNA序列位基因的(5)以下研究利用了生物分子間的特異性結(jié)合的有 (多選)A.分離

23、得到核糖體，用蛋白酶酶解后提rRNAB.用無水乙醇處理菠菜葉片，提取葉綠體基粒膜上的光合色素C.通過分子雜交手段，用熒光物質(zhì)標記的目的基因進行染色體定位D .將抑制成熟基因?qū)敕?，其mRNA與催化成熟酶基因的mRNA互補結(jié)合，終 止后者翻譯，延遲果實成熟?！敬鸢浮?1)磷酸二酯鍵，肽鍵(2)專一(3)限制性DNA內(nèi)切酶(4)啟動子(5) ACD【解析】(1) DNA酶作用的部位是DNA的磷酸二酯鍵，蛋白酶作用的部位是肽 鍵。(2)過程利用了各種酶催化一種或一類化學(xué)反應(yīng)的特性，即專一性。(3) DNA要構(gòu)建重組質(zhì)粒，需要用限制性DNA內(nèi)切酶切割，再與質(zhì)粒重組。(4)RNA聚合酶識別和結(jié)合在基因

24、的啟動子上，才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄。(5)蛋白酶能特異性的酶解蛋白質(zhì)，分子雜交手段也是利用各物質(zhì)分子結(jié)合的特異 性，抑制成熟基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA與催化成熟酶基因的mRNA堿基互補結(jié)合，也具有特 異性，光和色素易溶于有機溶劑，與酒精并不是特異性的溶解，所以選ABC。13.圖為某種質(zhì)粒表達載體簡圖，小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切酶EcoRI、BamHI的酶切 位點，ampR為青霉素抗性基因，tctR為四環(huán)素抗性基因，P為啟動因子，T為終止子，ori 為復(fù)制原點。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內(nèi)的多種酶的酶切位用EcoRI酶切，酶切產(chǎn)物用DNA連接酶進行連接后，其中由兩個DNA片段之間連

25、接形 成的產(chǎn)物有_、三種。若要從這些連接產(chǎn)物中分離出重組質(zhì)粒，需要對這些連接產(chǎn)物進行 O(2)用上述3種連接產(chǎn)物與無任何抗藥性的原核宿主細胞進行轉(zhuǎn)化實驗。之后將這 些宿主細胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產(chǎn)物 是；若接種到含青霉素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產(chǎn)物日一(3)目的基因表達最RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點是,其合成的產(chǎn)物 是n(4)在上述實驗中，為了防止目的基因和質(zhì)粒表達載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任 意連接，酶切時應(yīng)選用的酶是O13 .答案(1)目的基因一載體連接物載體-載體連接物目的基因-目的基因連接物分 離純化(其他合理答案也給分)(2)

26、載體載體連接物目的基因-載體連接物、載體-載體連接物(3)啟動子mRNA(4) EcoRI和BamHI (只答一個酶不給分)14 .轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過程如圖所示。質(zhì)粒上有Pst I、Sma I、EcoR I、Apa I等 四種限制酶切割位點。請回答：(1)構(gòu)建含抗病基因的表達載體A時，應(yīng)選用限制酶對一進行切割。(2)培養(yǎng)板中的卡那霉素會抑制香蕉愈傷組織細胞的生長，欲利用該培養(yǎng)篩選已導(dǎo) 入抗病基因的香蕉細胞，應(yīng)使基因表達載體A中含有，作為標記基因。(3)香蕉組織細胞具有,因此，可以利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗病基因的 香蕉組織細胞培育成植株。圖中、依次表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細胞的、o14答案

27、Pst I、EcoR I ,含抗病基因的DNA、質(zhì)粒，(2)抗卡那霉素基因(3) 仝能神 能分伊 再分伊27 .為了大可耕:面積，1加糧食產(chǎn)量，黃河三角洲等鹽堿地的開發(fā)利用備受關(guān)注。我國科學(xué)家應(yīng)用耐鹽基因培育出了耐鹽 水稻新品系。(1)獲得耐鹽基因后，構(gòu)建重組DNA分子所用的限制性 內(nèi)切酶作用于圖中的一處，DNA連接酶作用于一處。(填“a”或"b”)(2)將重組DNA分子導(dǎo)入水稻受體細胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和法。(3)為了確定耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素標記的作探針進 行分子雜交檢測，又要用方法從個體水平鑒定水稻植株的耐鹽性。27 . (1) a a (2)基因

28、槍法(或花粉管通道法)(X)耐鹽基因(目的基因)一定濃度鹽水澆灌(移栽到鹽堿地中)32. (14分)在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kan)常作為標記基因, 只有含卡那霉素抗性基因的細胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長。下圖為獲得抗蟲棉的技術(shù)流程C請據(jù)圖回答：(1) A過程需要的酶有(2) B過程及其結(jié)果體現(xiàn)了質(zhì)粒作為運載體必須具備的兩個條件是(3) C過程的培養(yǎng)基除含有必要營養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂和激素外，還必須加入(4)如果利用DNA分子雜交原理對再生植株進行檢測，D過程應(yīng)該用作為探針。(5)科學(xué)家發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因植株的卡那霉素抗性基因的傳遞符合孟德爾遺傳規(guī)律。將轉(zhuǎn)基因植株與 雜交，其后代中抗卡那霉

29、素型與卡那霉素敏感型的數(shù)量比為若該轉(zhuǎn)基因植株自交，則其后代中抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型的數(shù)量比為若將該轉(zhuǎn)基因植株的花藥在卡那霉素培養(yǎng)基上作離體培養(yǎng)，則獲得的再生植株 群體中抗卡那霉素型植株占%o32 . (1)限制性內(nèi)切酶和DNA連接酶(2)具有標記基因；能在宿主細胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存(3)卡那霉素(4)放射性同位素(或熒光分子)標記的抗蟲基因(5)非轉(zhuǎn)基因植株 3 ： 110028 .以重組DNA技術(shù)為核心的基因工程正在改變著人類的生活。請回答下列問題。(1)獲得目的基因的方法通常包括 和 O(2)切割和連接DNA分子所使用的酶分別是 和。(3)運送目的基因進入受體細胞的載體一般選用病毒或后

30、者的形狀成o(4)由于重組DNA分子成功導(dǎo)入受體細胞的頻率,所以在轉(zhuǎn)化后通常需要進行 操作。（5）將人胰島素基因分別導(dǎo)入大腸桿菌與酵母菌，從兩者中生產(chǎn)的胰島素在功能和序列上是相同的。28. （1）化學(xué)合成（人工合成）酶切獲?。◤娜旧wDNA分離/從生物細胞分離）（2）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）DNA連接酶（連接酶）（3）質(zhì)粒小型環(huán)狀（雙鏈環(huán)狀、環(huán)狀） （4）低篩選 （5）氨基酸 1、 （2011年江蘇卷）33 . （8分）請回答基因工程方面的有關(guān)問題：第一iiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiimmiiiiiiiiiiir門火利用PCR技術(shù)擴增目的基因，其原理 與

31、細胞內(nèi)DNA復(fù)制類似（如右圖所示）。圖中引物為單鏈DNA片段，它是子鏈 合成延伸的基礎(chǔ)。從理論上推測，第四輪循環(huán)產(chǎn)物中含有 引物A的DNA片段所占的比例為在第 輪循環(huán)產(chǎn)物中開始出現(xiàn)兩條脫氧核苦酸鏈等長的DNA片段。設(shè)計引物是PCR技術(shù)關(guān)鍵步驟之一。某同學(xué)設(shè)計的兩組引物（只標注了部分 基序列）都不合理（如下圖），請分別說明理由。即 *m第I蛆引物CAtiGC I切物 IILLF-JA G C CT G一丁H iT Y ± 丫 *A ACTGC AG TT明物 1口 I t I I II I I I ICG人CTG AT TA第1組： ；第2組:oPCR反應(yīng)體系中含有熱穩(wěn)定DNA聚合酶，下面的表達式不能正確反映DNA聚合酶的功能，這是因為 3-21 -（4）用限制酶氏。RV、Mbol單獨或聯(lián)合切割同一種質(zhì)粒，得到的DNA片段長度如下圖（1 kb即1000個堿基對），請在答題卡的指定位置畫出質(zhì)粒上EcoRV、Mbol的切割位點。1、 (2011年江