1、減味藿香正氣水藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的研究                                           作者：李康，宋粉云，李煥丹，袁勁松，趙琳【關(guān)鍵詞】 

2、 減味藿香正氣水；藥效物質(zhì)基礎(chǔ)；厚樸酚Abstract:Objective  To study on the pharmacodyamic material basis of Jianwei Huoxiang Zhengqi liquid. Methods Regression and correlation analysis were applied to interrelate the areas of 40 peaks and inhibition rates of rabbits' isolated duodenum activated by acetylcholin

3、e.Results Pearson's correlation coefficients and regression equation of 40 peaks were achived. Conclusion The chemical substances for X3 and X25 are defined as the pharmacodyamic material basis of Jianwei Huoxiang Zhengqi liquid. The chemical substance for X25 is magnolol. Cortrx Magnoliae Offic

4、inalis is the main crude drug in Jianwei Huoxiang Zhengqi liquid.  Key words:Jianwei Huoxiang Zhengqi liquid; pharmacodyamic material basis; magnolol減味藿香正氣水是在湖南省中醫(yī)研究院彭志輝1等人用正交設(shè)計(jì)法對藿香正氣水組方研究的基礎(chǔ)上減味得到，從原來的11味降低到5味，包括厚樸、陳皮、蒼術(shù)、半夏、廣藿香油。減味藿香正氣水對家兔離體十二指腸具有很強(qiáng)的抑制率1。本文以減味藿香正氣水40個色譜峰的相對峰面積為自變量，對乙酰膽堿刺激的

5、家兔離體十二指腸的抑制率為因變量，進(jìn)行相關(guān)分析和回歸分析，探討其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。1  儀器與材料1.1  儀器肌肉張力換能器JZ100型（高碑店市新航機(jī)電設(shè)備有限公司），電子分析天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司天平儀器廠），電熱恒溫箱（北京長源實(shí)驗(yàn)設(shè)備廠），氧氣吸入器（江蘇魚躍醫(yī)療設(shè)備有限公司），氧氣瓶（深圳中宏工業(yè)氣體有限公司），Agilent1100型高效液相色譜儀。1.2  藥物減味藿香正氣水根據(jù)中國藥典2005版全方制備方法減味制備成1 g·mL-1的藥液。厚樸、陳皮、蒼術(shù)、半夏由深圳一致藥材公司提供，廣藿香油購自江西吉水贛州香料油廠（批號20020

6、302），氯乙酰膽堿購自上海化學(xué)試劑廠，Tyrodes液自制。1.3  試劑乙腈和甲醇為色譜純 (德國Merk公司)；氯仿為分析純 (汕頭光華化學(xué)試劑廠)；水為超純水（>18兆歐），并經(jīng)0.45 m水系濾膜過濾；厚樸酚和甲基橙皮苷購于中國藥品生物制品檢定所。1.4  動物家兔購自中山大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)中心,合格證號 SCXK2003011。2  方法與結(jié)果2.1  10份減味藿香正氣水的制備厚樸39 g，陳皮39 g，蒼術(shù)39 g，半夏39 g，廣藿香油3090 L (廣藿香藥典用量39 g，廣藿香油在藿香正氣水中體積用量為其他藥材質(zhì)量的0.01倍，經(jīng)計(jì)

7、算為3090 L) ，進(jìn)行均勻設(shè)計(jì)，得到10個組方。厚樸、陳皮、蒼術(shù)用60%（體積分?jǐn)?shù)）乙醇作溶劑，在室溫浸漬24 h后進(jìn)行滲濾，分別收集滲濾液各400 mL，在40 減壓濃縮至小體積；生半夏用冷水浸泡，每8 h換水1次，泡至透心，并按照27320的質(zhì)量比加入干姜,加10倍質(zhì)量的蒸餾水煎煮2次，第1次3 h，第2次2 h，合并水煎液，常溫減壓濃縮至小體積；廣藿香油用乙醇適量溶解。以上所得到的醇提液、水煎液和廣藿香油乙醇液合并混勻，用60%（體積分?jǐn)?shù)）乙醇適量調(diào)整，得到生藥材質(zhì)量濃度為1 g·mL-1的10個樣品，于4 冰箱冷藏。2.2  對乙酰膽堿刺激的離體兔腸的抑制實(shí)驗(yàn)2

8、選健康普通家兔,體重(2.5±0.7) kg,雌雄兼用,禁食12 h,自由飲水。將動物擊昏后剖開腹腔，剪取1015 cm腸管,迅速放入盛有Tyrodes液的平皿中洗凈并浸浴,當(dāng)腸管活動明顯時,將其剪成約2 cm的腸段標(biāo)本,兩端對角穿線,放在盛有100 mL臺氏液的電熱恒溫箱中（37±0.5）水浴,上端連接張力換能器,下端系于L型鉤上,同時通入氧氣（12個氣泡/s）。標(biāo)本負(fù)荷1 g,平衡30 min待系統(tǒng)穩(wěn)定后,開始實(shí)驗(yàn)。描記5 min正常曲線后,向浴管中加入氯乙酰膽堿（22 mg·L-1）,使終質(zhì)量濃度達(dá)到10-6 g·mL-1，腸管立即收縮。待收縮達(dá)到

9、峰值后，用臺式液洗滌3次，使腸管收縮恢復(fù)至基線水平，反復(fù)操作，使峰值穩(wěn)定在同一收縮高度作為對照值，然后給藥，觀察記錄曲線變化5 min,換腸平滑肌,重復(fù)實(shí)驗(yàn)。更換腸管及藥液時更新臺氏液。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。記錄給藥前的平均收縮振幅和給藥后的平均收縮振幅，求算給藥之后的平均抑制率（%）。2.3  高效液相指紋圖譜共有色譜峰的確定3色譜條件：柱溫，25 ；流速，1.0 mL·min-1；色譜柱，Zorbax C18 (4.6 mm×250 mm,5 m)； 內(nèi)標(biāo)，甲基橙皮苷；進(jìn)樣量，10 L。     &#

10、160;                       氯仿提取物的檢測波長254 nm，梯度洗脫條件為水乙腈（0.01 min 7822；10 min 7624；35 min 6535；45 min 6040；65 min 5050；80 min 3565；85 min 7822）。殘?jiān)崛∥锏臋z測波長294 nm，梯度洗脫條件為水乙腈甲醇 （0.01min 9811；5 mi

11、n 9451；15 min 89101；25 min 87121；40 min 87121；55 min 74251；60 min 9811）。按照液相色譜條件對10份處方樣品進(jìn)行測定，其中IS為參照物色譜峰，見圖1。確定其中40個色譜峰為共有峰，得到與參照物色譜峰的相對峰面積。表1列出其中主要色譜相對峰面積值和10個樣品對離體兔腸的平均抑制率。2.4  以40個色譜峰的相對峰面積為自變量(X)，對乙酰膽堿刺激的家兔離體十二指腸的抑制率為因變量(Y)，進(jìn)行相關(guān)分析和回歸分析,相關(guān)分析結(jié)果見表2。回歸方程為：Y=-11.029+157.199 X3+2.764 X25A.氯仿提取物圖譜

12、； B.氯仿萃取后提取物圖譜圖1  減味藿香正氣水（樣品5）HPLC圖譜（略）Fig.1  HPLC chromatograms of Jianwei Huoxiang Zhengqi liquid(No.5)表1  10個樣品共有色譜峰的相對峰面積和平均抑制率（略）Tab.1  Relative peak areas and mean inhibition rates of common peaks in 10 samples表2  40個色譜峰的相對峰面積與抑制率相關(guān)分析結(jié)果（相關(guān)系數(shù)）（略）Tab.2  Pearson'

13、s correlation coefficients between values from pharmacological experiment and 40 independent3  結(jié)論以40個減味藿香正氣水共有色譜峰為自變量，以對乙酰膽堿刺激的離體兔十二指腸的抑制率為因變量，進(jìn)行相關(guān)分析和回歸分析，色譜峰X3和X25與藥理作用呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為正，并且X3相關(guān)系數(shù)顯著；從回歸方程可以得出，色譜峰X3和X25所代表的化學(xué)成分其量的增加能增強(qiáng)對乙酰膽堿刺激的家兔離體兔腸的抑制作用強(qiáng)度。確定色譜峰X3和X25所代表的化學(xué)物質(zhì)為減味藿香正氣水對家兔離體兔十二指腸抑制的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的一部分。其中，色譜峰X25所代表的化學(xué)成分為厚樸酚，這與藥味最佳配比研究中以厚樸為主藥相符。【參考文獻(xiàn)】  1彭志輝，陳立峰，趙淑慎.正