1、第三章 細胞生物學的研究方法名詞解釋1 .分辨率(resolution)2 .細胞培養(cell culture)3 .原代培養(primary cult)4 .傳代培養(secondary culture)5 .細胞系(cell lin)6 .等電聚焦電泳(isoelectric focusing)7 . cDNA 克隆(CDNA cloning)8 .非細胞體系(cell free system)9 .蛋白質組學(proteomics)10 .核酸原位雜交技術(in situ hybridization, ISH)11 .放射性自顯影技術(autoradiography)12 .顯微結構(

2、microscopic structure)13 .超微結構(ultramicroscopic structure)14 .單細胞測序技術(single cell sequencing)15 .轉基因小鼠(transgenic mouse)二、單項選擇題1 .離心法是分離細胞器及細胞組分的重要手段,下面描述錯誤的是A.差速離心法只能將大小顯著不同的成分分開B.平衡沉降法分離取決于細胞成分的大小和形狀C.利用免疫磁珠,無需高速離心，即可將膜性細胞器分離出來D.速度沉降可以使tRNA與其他成分分開E.超速離心法可以根據生物大分子的沉降系數較精確的測定其分子量2 .檢測特異DA分子的方法是A.噬菌體

3、展示B. ISH C. Western blotD. Southern blot E. ChlP3 .蘇丹染料可以顯示的細胞中成分是A.蛋白質B. DNAC. RNAD.糖E.脂肪4 .掃描隧道顯微鏡的側分辨率約為A. 2 UmB. 0. 2 mnC. 0. 2nmD. 2nmE. 2A5.目前廣泛應用的高效基因敲除技術是A. cDNA 克隆B. RNAiC. CRISPR/Cas9D. ChIPE.轉基因6 .可得到完整的細胞三維結構圖像的顯微鏡是A.透射電子顯微鏡B.熒光顯微鏡C.暗視野顯微鏡D.相差顯微鏡E.共聚焦激光掃描顯微鏡7 .關于免疫沉淀技術的錯誤描述是A.用耦聯在磁珠上的目的蛋

4、白抗體將目的蛋白及其相互作用的蛋白沉淀出 來8 .可通過SDS二PAGE或生物質譜對沉淀出來的蛋白進行鑒定C.屬于體內實驗方法,能得到細胞內蛋白相互作用的動態結果D.細胞內本來沒有相互作用的蛋白質在破碎細胞時可能發生凝聚,產生假陽 性E.簡便易行8.無需染色、標記,即可直接用于觀察活細胞狀態的顯微鏡是A.掃描電子顯微鏡8 .透射電子顯微鏡C.普通光學顯微鏡D.倒置相差顯微鏡E.熒光顯微鏡9 .關于RNAi的基本原理,錯誤的描述是A. Dicer酶將外源性雙鏈RNA切割成短SIRNAB. SIRNA參與形成RNA誘導沉默復合物C.每個RISC都包含一個SIRNA和一個DicerD.激活RISC需

5、要依賴ATP將小分子RNA解雙鏈E.激活的RISC通過堿基配對定位到同源mRNA轉錄本上 10.制作透射電子顯微鏡超薄切片時，下列不必要的是A.固定B.包埋C.切片D.金屬投影E.染色n.能夠在溶液中對生物大分子進行高分辨率結構測定的技術是A. X射線晶體衍射技術B.核磁共振技術C.掃描電子顯微鏡D.冷凍電鏡E.共聚焦激光掃描顯微鏡12 .透射電子顯微鏡借助一定的技術手段可獲取細胞亞顯微結構的三維圖 像,下面手段不可行的是A.金屬投影B.金屬復型C.金屬染色D.冰凍斷裂E.冰凍蝕刻技術高13 .與化學合成的SIRNA相比，利用慢病毒構建的短發卡shrna載體所具有 的顯著優勢是A.更特異地阻斷

6、特定基因表達B.效率更高C.可以整合到受感染細胞的基因組,進行長時間的穩定表達D.操作更簡便E.有正反互補的短干擾RNA序列14.關于冷凍電子顯微鏡技術的錯誤描述是A.對溶液中生物分子進行高分辨率結構測定B.需要比較大量的樣品C.結構解析主要是指單顆粒三維重構技術D.不需要樣品結晶E.快速冷凍可以使蛋白質保持其天然結構狀態15.能夠從組織切片中精確分離單一細胞的方法是A.免疫磁珠法B.熒光激活細胞分選儀C. Percoll精細密度梯度離心D.細胞克隆E.激光捕獲顯微切割技術16.有關原子力顯微鏡的錯誤描述是A.在掃描隧道顯微鏡基礎之上發展起來的B.不需要所檢測的樣品具有導電性C.可對單個分子進

7、行操控D.分辨率比掃描隧道顯微鏡高E.顯示樣品表面微細結構的三維特征17.用物理的方法裂解細胞產生的微粒體,主要來自的細胞器是A.過氧化物酶體B.高爾基復合體C.線粒體D.溶酶體E.內質網18 . 一般情況下,細胞裂解液中不能含有的成分是A.滲透壓維持劑B.蛋白酶C.陰離子去垢劑SDSD.非離子型去垢劑Triton X-100E.兼性離子型去垢劑CHAPS19 .生物醫學研究中，最常用于個體水平基因操作特別是基因敲除的模式動 物是A.小鼠B.果蠅C.秀麗隱桿線蟲D.斑馬魚E.爪蟾20 .操作簡單、特異性強,能夠在多細胞懸液中分離特定細胞的方法是A.免疫磁珠法B.熒光激活細胞分選儀C. Perc

8、oll精細密度梯度離心D.利用細胞貼壁生長和懸浮生長的特性進行細胞培養E.激光捕獲顯微切割技術21 .細胞培養時所用的培養基中不包含A.血清B.氨基酸C.二氧化碳D.維生素E.微量元素22 .考察細胞侵襲和轉移能力變化的方法是A.嵌套小室(transwell法)B.軟瓊脂集落形成實驗C.細胞生長曲線繪制D.流式細胞儀的DNA倍體分析E.細胞活力檢測（MTT法）23 .常用于細胞DXA和RNA抽提的試劑是A.滲透壓維持劑B.蛋白酶抑制劑C.異硫氟酸呱D.陰離子去垢劑E.兼性離子型去垢劑24 .將細胞勻漿以100000g超速離心,上清液部分含有A.線粒體B.溶酶體C.細胞核D. RNAE.微粒體2

9、5 .超分辨顯微技術可使光學顯微鏡的分辨率達到A. 2 Um B. 50nm C. 0. 2nm D. 2nm E. 2A26 .對體外非細胞體系進行蛋白翻譯,不需要的成分或結構是A.已知序列的mRNAB. IRNAC.核糖體D. ATP£.即人聚合酶1。11【）27 . 一般來說,分離純化蛋白質最有效的方法是A.親和層析B.陰離子交換層析C.陽離子交換D.凝膠濾過層析E.疏水性層析28 .能揭示蛋白質精確三維結構的方法是A.掃描電子顯微鏡B.柱層析C.X射線晶體衍射技術D. SDS-PAGEE.共聚焦激光掃描顯微鏡29 .用凝膠濾過層析分離蛋白，最先流出的蛋白的分子量為A 500k

10、DaB. 200k DaC. lOOkDaA. 50kDaE. lOkdaO30 .從細胞中分離染色質,抽提液中不能含有A. DNA酶B. RNA酶C.異硫制酸呱D.氯仿E.蛋白酶K31.二硫蘇糖醇(DTT)在SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳中的作用是A.與蛋白質疏水區結合B.使蛋白質帶負電荷C.使蛋白質中的二硫鍵斷裂D.使蛋白質分子折疊E.控制凝膠孔的大小32 .電子顯微鏡觀察生物標本的分辨率約為A. 2 u mB. 0. 2 um C. 0. 2run D. 2nm E. 2A33 . SDS在SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳中的作用是A.與蛋白質親水區結合B.控制凝膠孔的大小C.使蛋白質中的二硫鍵斷

11、裂D.使蛋白質分子折疊E.使蛋白質帶負電荷34.高通量測序技術可與其他基因組水平研究技術相聯合，但不包括A. Protein-sepB. RNA-seqC. ChlP-seqD. CLIP-seqE. Methyl-seq35.關于核酸電泳的錯誤描述是A.是核酸分離鑒定的主要方法B.樣品不需事先處理就可直接進行電泳C.核酸在堿性條件下向陽極移動D.可直接判定核酸的純度、完整性及片段大小E.瓊脂糖凝膠電泳分辨率高于丙烯酰胺凝膠電泳36.下列關于生物芯片技術的錯誤敘述是A.由生物學、微電子學、物理學和計算機科學等多學科交叉融合而成B.主要包括基因芯片和蛋白質芯片C.基因芯片中，熒光素直接標記待檢測

12、的mRNA分子D.可用于篩選候選基因E.可通過蛋白質-蛋白質間的相互作用對靶蛋白分子進行高通量檢測37.關于免疫細胞化學技術,錯誤的描述是A.利用抗原抗體特異性結合的原理來研究細胞中生物大分子的定位B.利用熒光染料標記的抗體可以對細胞中的特定分子進行定位C.將熒光物質或酶類直接標記一級抗體可以提高檢測靈敏度D.利用膠體金標記抗體,可在電鏡下觀察特定分子的分布情況E.可對器官、組織、細胞中的生物分子進行定性、定位研究38 . Western blot不可以用于檢測蛋白質的A.含量B.大小C.三維結構D.磷酸化E.泛素化39 .放射性自顯影技術是用放射性同位素標記生物樣品中的大分子或其前體 物質，

13、下列屬于強放射性同位素的是A. 1311 B. 35S C. 3H D. 32P E. 14C40 .可用于觀察細胞表面三維結構的顯微鏡是A.掃描電子顯微鏡B.透射電子顯微鏡C.暗視野顯微鏡D.相差顯微鏡E.熒光顯微鏡41.關于綠色熒光蛋白（GFP）的錯誤描述是A.是研究蛋白質亞細胞定位的報告分子B.是從水母中分離的一種構象很穩定的蛋白質C.在藍色光源的激發下,可發射出綠色熒光D. GFP基因可以很容易地導入到多種類型的細胞中表達E.與目的基因融合后,所表達的融合蛋白的定位是由GFP決定的42 .關于Northern印跡分析的錯誤描述是A.可檢測組織或細胞中特定的mRNAB,可使用放射性物質標

14、記的寡核甘酸為探針C.不能有效地檢測小mirna分子D.能夠定量檢測mRNA的變化E.能夠提供基因不同轉錄本的轉錄長度信息43 .雙向電泳顯現的未知差異蛋白質條帶或點,常常需要進一步鑒定,最精確的判定方法是A.免疫沉淀B.親和層析C.質譜D.高壓液相層析E. Western blot44.研究蛋白質與核酸相互作用的技術是A.酵母雙雜交B.染色質免疫沉淀C.噬菌體展示D.基因芯片E.免疫沉淀45.使基因表達下調的常用技術是A. cDNA克隆 B. RNAi C.同源重組D. ChipE.轉基因46 . SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質的依據是A.疏水性B.分子量大小 C.所帶正電荷多少D.所帶

15、負電荷多少E.形狀特點47 .有關掃描電子顯微鏡的錯誤描述是A.可以直接觀察標本表面的三維形態B.分辨率比透射電鏡高C.通過電子束照射在標本后產生的二次電子成像D.樣品需經固定、干燥并用重金屬膜覆蓋E.多用于細胞整體的觀察48 .將蛋白質進行分級分離并最終進行純化，常需要綜合運用多種分離手段 才能夠完成，但A.鹽析B.有機溶劑沉淀C,親和層析D.高壓液相層析E.雙向電泳49 .能夠將特定基因插入到基因組的技術是A. cDNA克隆B. RNAiC.酵母雙雜交D. ChIPE. CRISPR/Cas950.最早制造出笫一臺顯微鏡并用它觀察到細菌的科學家是A. L. HoekB. R. Hook C

16、. M. J SchleidenD. R. VirchowE. A. van Leeuwenhoek51 .與普通PCR不同的是，熒光實時定量PCR在反應體系中需加入A.模板DAB.耐熱的DNA聚合酶C. dNTPD.熒光染料E.引物52 .關于超分辨顯微技術的錯誤敘述是A.利用380740nm可見光B.具有非接觸、無損傷的特點C.可觀測細胞內部結構的特點D.難以進行內部深層三維結構成像E.可以觀測活的組織或細胞53 .以脂質體為載體,將外源性基因導入真核細胞的過程稱A.轉化B.轉導C.轉染D.感染E.轉位54 .檢測特異蛋白質分子的方法是A. PCRB. FISHC. Southern bl

17、otD. Northern blot E. Western blot55.關于CRISPR/Cas9基因編輯技術的錯誤描述是A. Cas有核酸酶活性B. Cas是CRISPR連接蛋白C. CRISPR序列轉錄產生兩個非編碼RNA分子D. Cas蛋白能夠將異二聚體RNA剪切加工成為成熟RNA分子E. Cas識別靶DNA位點的特異性完全由向導序列所決定56 .細胞內離子有著重要的生理功能,其中能夠起信號轉導和促進膜融合作 用的離子是A.鈉B.鉀C.鈣D.銅E.鐵57 .高壓液相層析的反向層析柱常常被用來分離小分子蛋白，其進行分離原 理是根據蛋白的A.疏水性B.分子量大C.所帶正電荷多少D.所帶負電

18、荷多少E.形狀特點58 .可用于研究DNA與蛋白質相互作用，并能捕捉基因表達調控的瞬時事件 的方法是A. ChipB. EMSAC.酵母單雜交系統D. CLIPE.噬菌體展示59.單分子熒光成像是活細胞體系中單分子研究的核心技術,其在細胞生物 學研究中的應用A.蛋白質結構的解析B.配體與受體的結合C.蛋白質的聚合和解聚D.mRNA的動力學行為E.病毒的示蹤60.關于紫外交聯免疫沉淀技術的錯誤敘述是A.能檢測整個細胞內與特定RNA結合蛋白結合的RNA分子B.分辨率可達單個堿基水平C.常與高通量測序技術聯合應用D. 254nm紫外線照射交聯對細胞沒有損傷E.能夠在全基因組水平揭示RNA與RNA結合

19、蛋白相互作用多項選擇題1 .從實體組織中分離活細胞的第一步是制備游離的細胞懸液,關于常用的 酶解方法的正確描述是A. EDTA和EGTA能夠增加胰蛋白酶的活性B.胰蛋白酶、膠原酶消除細胞間的連接和細胞外基質C.分離體系所用的溶液必須是等滲的D.分離體系應保持低溫，以降低細胞的代謝活動E.所用的試劑、器皿需要過濾除菌或高壓滅菌2.關于染色質免疫沉淀技術的正確描述是A.是一種體內研究DA與蛋白質相互作用的方法B.僅限于低通量的研究C.能夠捕捉到發生在染色質上的基因表達調控的瞬時事件D.分離得到的DNA可直接測序獲得基因序列信息E.比電泳遷移率變動分析更能反映基因表達調控的真實情況3.關于核酸抽提的

20、正確敘述是A.異硫氟酸呱可使膜脂、蛋白變性B.氯仿可去除細胞內的脂類C.在純化過程中加入對應的核酸酶可選擇性地保留DNA或RNA分子D.通過離心沉淀的方式可獲得保留在水相中的核酸分子E.蛋白酶K能使DNA酶和RNA酶失活,不能添加在抽提液中4.酶細胞化學反應的基本原理是將酶與其底物共同孵育,使產物與顯色劑反 應,生成物一般包括A.熒光分子B.細胞色素C.有色沉淀D.高電子密度沉淀E.有色可溶性化合物5.單細胞測序技術取得突破的主要原因包括A.全基因組及轉錄組擴增的效率大幅度提高B.高通量測序技術的使用C.高效微流體技術分離單細胞技術的應用D.高精密的熒光活化細胞分選技術的應用E.激光顯微切割技

21、術的應用6.可用于活細胞內分子示蹤的技術是A.離子探針技術B.綠色熒光蛋白示蹤C.熒光共振能量轉移D.單分子示蹤E.印跡雜交7 .基因芯片技術可應用于A.細胞的基因表達譜測定8 .篩選與基因相互作用的蛋白質C.基因多態性分析D.基因突變分析E.篩選候選基因8.基因表達定量分析技術包括A.印跡雜交技術8 .原位雜交技術C.嵌套小室(transwell法)D.熒光實時定量PCR技術E.基因克隆技術9 .關于蛋白質組學的正確描述是A.是基因組學研究進入功能基因組時代的主要標志B.雙向電泳和質譜技術是蛋白質組學研究的基本技術C.雙向電泳能有效分離高分子量及微量蛋白D.質譜法能夠實現高通量分析E.蛋白質

22、的質譜測序通常借助串聯質譜10 .研究或利用蛋白質與蛋白質相互作用的技術包括A.酵母雙雜交B.蛋白質芯C.噬菌體展示D.紫外交聯免疫沉淀技術E.免疫沉淀參考答案名詞解釋1 .分辨率(resolution):指顯微鏡或人眼能夠區分相近兩點的最小距離。2 .細胞培養(cell culture):指細胞在體外的培養技術，即無菌條件下，從機 體中取出組織或細胞，模擬機體內正常生理狀態下生存的基本條件，讓它在 培養器皿中繼續生存、生長和繁殖的方法。3 .原代培養(primary culture)：直接從體內獲取的組織或細胞進行首次培 養。4 .傳代培養(secondary culture)：當原代細胞經

23、增殖達到一定密度后，將 細胞分散，從一個培養器以一定比例移到另一個或幾個容器中的擴大培養。5 .細胞系(cell line)：指可以無限繁殖、傳代的腫瘤細胞或正常組織培養 的細胞在某些條件處理后產生的“不死”的變異細胞。6 .等電聚焦電泳(isoelectric focusing):是在丙烯酰胺凝膠兩端形成電場, 使含有不同等電點的兩性電解質在電場當中形成pH梯度，樣品中所有的蛋白 質在電泳時都向自己的等電點處移動，最后聚集、靜止于各自的等點電。7 . cDNA克隆(cDNA cloning):又稱基因克隆,即將mRNA逆轉錄形成的cDNA 或通過體外聚合酶鏈式反應得到的基因片段，插入到能進行自我復制的載體 (通常是質粒)，實現在受體細菌內大量擴增的過程。8 .非細胞體系(cell free system)：用分級分離得到的具有生物學功能的細 胞抽提物組成的活性反應體系。9 .蛋白質組學(proteomics)：以特定時空條件下某種細胞、組織或器官所含 有的全部蛋白質的存在及其活動方式為研究對象的學科。10 .核酸原位雜交技術(in situ hybridization. ISH)：以短的單鏈cDNA、 RNA片段或寡核甘酸為探針,與經過固定并提高了通透性的細胞、組織切片或 胚胎進行雜交，以熒光分子或顯色酶為報告基團，顯示特定RNA(mR