1、HIV-1p24 抗原不同位區(qū)的抗體應(yīng)答HIV-1 病毒編碼 3 種結(jié)構(gòu)蛋白，即核心區(qū)（gag 區(qū)）、包膜區(qū)（env） 及酶區(qū)（pol ）。在病毒感染機(jī)體后，體內(nèi)的免疫系統(tǒng)對不同的編碼蛋白產(chǎn)生應(yīng) 答，目前研究較多的為抗體應(yīng)答 。研究 HIV-1 核心區(qū)蛋白的抗體應(yīng)答，對了 解分析核心區(qū)的免疫原性及選擇優(yōu)勢抗原位區(qū)等基礎(chǔ)研究，及在抗體檢測試劑 中優(yōu)選抗原均有重要的作用。我們利用HIV-1 p24 抗體陽性者血漿對 HIV-1p24 單克隆抗體與抗原結(jié)合的抑制，了解自然感染狀態(tài)下的機(jī)體對核心區(qū)p24抗原的抗體應(yīng)答，為 HIV-1 病毒蛋白的基礎(chǔ)研究奠定了基礎(chǔ)。材料與方法小鼠抗 HIV-1 p24

2、單克隆抗體：基因工程 HIV-1 p24 抗原免疫制備的單克 隆抗體 9 株；病毒免疫制備的單克隆抗體 2 株（2-3、2E4）。HIV-1 感染者血漿：64 份 HIV-1 感染者血漿，分別購自河南、成都等地， 經(jīng)抗HIV ELISA 篩查，并以抗 HIV p24 免疫印跡法確證。實(shí)驗(yàn)方法： 固相抗原的間接競爭抑制法， 主要步驟如下： （1） 基因工程 HIV-1 p24抗原固相；（2） 50 卩 l 適當(dāng)稀釋的單抗腹水，50 卩 l HIV-1 感染者 血漿，37C1h ;（ 3）2000 倍稀釋的羊抗鼠 HRP 結(jié)合物，37C30min ;（ 4）OPD 顯色，測定 A492正常人血漿作

3、抑制陰性對照，以 HIV-1 抗體陽性血漿 A/正常人血漿對照 A34 5 6 7 8 9 10 11血漿數(shù)1 41 46910955 38HIV 核心區(qū)蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量為 24X103,有著非常復(fù)雜的抗原位區(qū)。機(jī)體由于個體差異對不同的抗原位區(qū)應(yīng)答不一，本文結(jié)果顯示，11 株單抗雖為識別 HIV-1 p24 抗原，但 64 份陽性血漿卻顯示不同的抑制。由此提示，感染機(jī) 體之間及自然感染狀態(tài)下核心區(qū)抗原上不同的抗原位區(qū)免疫原性之間均存在著 一定的差異。此外，64 份血漿雖未見有全部被抑制的單抗，但對單抗 3H10 2C7 均顯示了較高的抑制率。 由此提示， 這兩株單抗識別的抗原位區(qū)在自然感 染

4、狀態(tài)下的免疫原性較強(qiáng)，機(jī)體感染后均能產(chǎn)生相應(yīng)的抗體應(yīng)答，同時(shí)也提 示，這兩株單抗識別的抗原位區(qū)在抗體診斷試劑研制中有重要的應(yīng)用價(jià)值。作者單位：尹紅章（中國藥品生物制品檢定所衛(wèi)生部生物技術(shù)產(chǎn)品檢定及標(biāo)準(zhǔn) 化研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室）李秀華（中國藥品生物制品檢定所衛(wèi)生部生物技術(shù)產(chǎn)品檢定及標(biāo)準(zhǔn)化研究重點(diǎn) 實(shí)驗(yàn)室）孟淑芳（中國藥品生物制品檢定所衛(wèi)生部生物技術(shù)產(chǎn)品檢定及標(biāo)準(zhǔn)化研究重點(diǎn) 實(shí)驗(yàn)室）宋愛京（中國藥品生物制品檢定所衛(wèi)生部生物技術(shù)產(chǎn)品檢定及標(biāo)準(zhǔn)化研究重點(diǎn) 實(shí)驗(yàn)室）李德富（中國藥品生物制品檢定所衛(wèi)生部生物技術(shù)產(chǎn)品檢定及標(biāo)準(zhǔn)化研究重點(diǎn) 實(shí)驗(yàn)室）參考文獻(xiàn)編號單抗Ig 亞類 ELISA 滴度抑制數(shù)抑制率（%）1 Javier B, Baillou A, Archinard P, et al. Immune response to a major epitope of p24duri ng infection with huma n immuno deficie ncy virus type 1 and implicati ons