1、會計學1病毒的細胞培養(yǎng)病毒的細胞培養(yǎng)第1頁/共43頁第2頁/共43頁第3頁/共43頁第4頁/共43頁第5頁/共43頁第6頁/共43頁第7頁/共43頁第8頁/共43頁第9頁/共43頁第10頁/共43頁第11頁/共43頁第12頁/共43頁第13頁/共43頁第14頁/共43頁（5）丙酮酸鈉、葡萄糖：）丙酮酸鈉、葡萄糖：是屬碳水化合物的成分，是細是屬碳水化合物的成分，是細胞生命的能量來源。胞生命的能量來源。（6）抗生素抗生素：最終濃度為青霉素最終濃度為青霉素 100 Uml，鏈霉素，鏈霉素100Uml（青霉素為（青霉素為80萬萬U瓶，將其溶解于瓶，將其溶解于4ml三蒸三蒸水中，每升培養(yǎng)液中加人；鏈霉素

2、為水中，每升培養(yǎng)液中加人；鏈霉素為100萬萬U瓶，將其瓶，將其溶解在溶解在5ml三蒸水中，每升培養(yǎng)液加）。三蒸水中，每升培養(yǎng)液加）。（7）凍存液：二甲基亞砜）凍存液：二甲基亞砜（8）細胞生長液：）細胞生長液：是用以維持細胞生長增殖的液體。是用以維持細胞生長增殖的液體。其是配方：其是配方： 基礎(chǔ)培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基 8090 血清血清 10% 雙抗雙抗 100u/ml （9）細胞維持液：）細胞維持液：用以維持細胞緩慢生長或不死的培養(yǎng)用以維持細胞緩慢生長或不死的培養(yǎng)液。液。其是配方：其是配方： 基礎(chǔ)培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基 95 血清血清 25 雙抗雙抗 100u/ml 第15頁/共43頁第16頁/共43頁第

3、17頁/共43頁貼附生長型細胞生長型細胞細胞培養(yǎng)常用的培養(yǎng)瓶細胞培養(yǎng)常用的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)皿、6孔板、孔板、96孔孔板板第18頁/共43頁懸浮生長型細胞懸浮生長型細胞第19頁/共43頁第20頁/共43頁第21頁/共43頁第22頁/共43頁第23頁/共43頁第24頁/共43頁第25頁/共43頁第26頁/共43頁第27頁/共43頁第28頁/共43頁操作步驟操作步驟 將長滿細胞的培養(yǎng)瓶中原來的培養(yǎng)液棄去。將長滿細胞的培養(yǎng)瓶中原來的培養(yǎng)液棄去。 用用1-2ml營養(yǎng)液或營養(yǎng)液或PBS緩沖液，清洗培養(yǎng)瓶，倒出緩沖液，清洗培養(yǎng)瓶，倒出 加入加入1ml含有含有EDTA的胰酶，清洗五面，倒出的胰酶，清洗五面，倒出 在加入在加入1ml含有含有EDTA的胰酶，當看到培養(yǎng)瓶上含有的胰酶，當看到培養(yǎng)瓶上含有一兩個小空斑，也可看到有灰白色渾濁時，將胰酶倒掉一兩個小空斑，也可看到有灰白色渾濁時，將胰酶倒掉 加入培養(yǎng)液，用移液管吹洗貼有細胞的一面，將細加入培養(yǎng)液，用移液管吹洗貼有細胞的一面，將細胞從培養(yǎng)瓶壁上吹下來胞從培養(yǎng)瓶壁上吹下來 然后進行傳代然后進行傳代第29頁/共43頁消化傳代的步驟消化傳代的步驟第30頁/共43頁第31頁/共43頁第32頁/共43頁第33頁/共43頁第34頁/共43頁第35頁/共43頁第36頁/共43頁第37頁/共43頁第38頁/共43頁第