1、學習必備歡迎下載課題 1 微生物的實驗室培養【課標解讀】1、知道培養基的基礎知識，進行無菌技術的操作2、進行微生物的培養【教學重難點】無菌技術的操作【教學過程】（一）引入新課20xx 年 7 月 1 日，由國家標準委和衛生部聯合發布的生活飲用水衛生標準 （gb 5749-2006）強制性國家標準和13 項生活飲用水衛生檢驗國家標準正式實施。新標準中的飲用水水質指標由原標準的35 項增至 106 項，增加了 71 項。其中，微生物指標由2 項增至 6 項，其中大腸桿菌要求每公升水中不得超過3個。你用什么辦法將他們找到并準確計數？在傳統發酵技術的應用中， 都利用了微生物的發酵作用， 其中的微生物來

2、自于制作過程中的自然感染。 而在工業化生產中， 為了提高發酵的質量， 需要獲得優良菌種，并保持發酵菌種的純度。這就要涉及到微生物的培養、分離、鑒別等基本技術。現在我們開始學習微生物的培養和應用專題。（二）進行新課一、基礎知識1、培養基（閱讀教材）1.1 概念（略）1.2 培養基的種類(1)形態固體和液體培養基（瓊脂）(2)成分天然和合成培養基(3)作用選擇和鑒別培養基思考： 1、固體培養基和液體培養基你認為哪個更適合工業生產？為什么？2、如何區分 s 型細菌和 r 型細菌？3、什么是菌落？【補充】培養基的類型及其應用： （創新設計）1.3 培養基的化學成分（教材資料）思考： 1、硝化細菌、藍藻

3、與酵母菌的c 源和 n 源有不同嗎？能源呢？2、結合細胞元素組成說明大多數培養基的組成為何有4 類？一定都需要嗎？1.4 培養條件營養物質（特殊營養物質生長因子）、ph、氧氣思考： 1、微生物的營養物質就是4 類嗎? 牛肉膏和蛋白胨能為微生物提供哪些營養？標準培養基類型配制特點主要應用物理性質固體培養基加入瓊脂較多菌種 分離 ,鑒定 ,計數半固體培養基加入瓊脂較少菌種保存液體培養基不加入瓊脂工業生產 ，連續培養化學組成合成培養基由已知成分配制而成，培養基成分明確菌種分類、鑒定天然培養基由天然成分配制而成，培養基成分不明確工業生，產降低成本目的用途鑒別培養基添加某種指示劑或化學藥劑菌種的鑒別選擇

4、培養基添加（或缺少）某種化學成分菌種的分離學習必備歡迎下載2、特殊營養物質是什么？試舉一例。(介紹生長因子 ) 3、你能將土壤中酵母菌、硝化細菌、乳酸菌、固氮菌分離出來嗎？說一說最佳方案。4、分離菌種是否一定要選擇培養基？培養乳酸桿菌時需要添加維生素 ，培養霉菌時需要將培養基ph 調節為酸性 ，培養細菌時需要將ph 調節為 中性或微堿性。2、無菌技術（閱讀并思考回答下列問題）2.1 意義、對象2.2 消毒與滅菌的區別思考：芽孢是什么？為什么難殺死？（滅菌標準）2.3 消毒與滅菌的方法、適用對象思考： 1、什么是巴氏消毒法？灼燒滅菌和高壓蒸汽滅菌特別注意什么？2、以下各項分別適用哪項無菌技術？簡

5、單說明理由試管口；培養基；接種操作間；葡萄酒；培養皿；接種針（環）；口罩；手；空氣；飲用水3、無菌技術除了防止培養物被污染外，還具有什么目的？二實驗操作（錄像）1、制備牛肉膏蛋白胨固體培養基程序：計算稱量溶化調ph滅菌倒平板思考： 1、為何將牛肉膏連同稱量紙一起放入燒杯溶化？2、制備過程中要調節適宜的ph 值，要在哪一個環節操作？為什么？3、請閱讀倒平板操作（ p17）并回答討論 14 4、試管培養基常制成斜面的作用是什么？2、接種（ 4 種方法）21 平板劃線法：通過接種環在瓊脂固體培養基表面連續劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基表面。其操作步驟是：2.1.1目的2.1.2平板劃線

6、操作（略）思考：請回答 p18 討論 13 22稀釋涂布平板法： 將菌液進行一系列 梯度稀釋 ，并將不同稀釋度菌液分別涂布到瓊脂固體培養基上進行培養。當稀釋倍數足夠高時， 即可獲得單個細菌形成的標準菌落。2.2.1 目的2.2.2 系列稀釋操作：取盛有 9ml 水的無菌試管 6 支，編號 101、102、103、104、105、106。用灼燒冷卻的移液管吸取1ml 菌液注入編號為 101試管中，并 吹吸 3 次，使之混勻。比較項理化因素的作用強度消滅微生物的數量芽孢和孢子能否被消滅消毒較為溫和部分生活狀態的微生物不能滅菌強烈全部微生物能學習必備歡迎下載從 101倍液中吸取 1ml 菌液注入到編

7、號為102試管內吹打均勻，獲得102倍液。依此類推。思考：為什么操作中試管口和移液管應在離火焰12cm 處？整個操作過程中使用了幾支移液管？22.3 涂布平板操作思考： 1、涂布器操作要點及原因 2、教材 p19討論3、結果分析評價31 培養未接種培養基的作用是對照，若有菌落形成，說明培養基滅菌不徹底。32如果在培養基上觀察到不同形態的菌落，請你分析原因？33培養 12h 和 24h 后的菌落大小、位置相同嗎？；原因是什么？。4、課題延伸頻繁使用的菌種利用臨時保藏法保存，長期保存菌種的方法是甘油管藏法。前者利用固體斜面培養基培養后，保存在4冰箱中，每36 個月轉種培養一次，缺點是保存時間較短， 容易發生污染和變異； 后者將菌種與無