1、一、實一、實 驗驗 目目 的的1.1.掌握磺胺類藥物血漿藥物濃度的測定方法掌握磺胺類藥物血漿藥物濃度的測定方法2.2.掌握藥物半衰期的計算方法掌握藥物半衰期的計算方法3.3.了解藥物血漿半衰期測定及計算的臨床意了解藥物血漿半衰期測定及計算的臨床意 義義第1頁/共21頁二、實二、實 驗驗 原原 理理1.1.多數(shù)藥物在體內(nèi)按一級動力學規(guī)律消除多數(shù)藥物在體內(nèi)按一級動力學規(guī)律消除, ,靜脈注射后，如以血靜脈注射后，如以血漿藥物濃度的對數(shù)值為縱坐標，時間為橫坐標，其時量關系常漿藥物濃度的對數(shù)值為縱坐標，時間為橫坐標，其時量關系常呈直線。呈直線。 2.2.藥物血漿半衰期（藥物血漿半衰期（half life

2、half life，T T1/21/2）為：）為：eKT693. 02/1tKCCet303. 2loglog0Ke=2.303(logCKe=2.303(logC1 1-logC-logC2 2)/t)/t2 2-t-t1 1第2頁/共21頁二、實二、實 驗驗 原原 理理3.3.呈色原理：呈色原理： 磺胺類藥物在磺胺類藥物在酸性溶液酸性溶液中，與亞硝酸鈉起重氮反中，與亞硝酸鈉起重氮反應，生成重氮鹽。此重氮鹽在應，生成重氮鹽。此重氮鹽在堿性溶液堿性溶液中與酚類中與酚類 化合物起偶聯(lián)反應，生成橙紅色的偶氮化合物。化合物起偶聯(lián)反應，生成橙紅色的偶氮化合物。 偶氮化合物的顯色深淺與磺胺的濃度有關。偶

3、氮化合物的顯色深淺與磺胺的濃度有關。 偶氮染料（橙紅色）麝香草酚重氮鹽磺胺藥堿三氯醋酸NaOHNaNO2測定管光密度標準管光密度標準管濃度血漿中磺胺的濃度%mg%mg第3頁/共21頁三、實三、實 驗驗 動動 物物家兔（體重左右）家兔（體重左右）第4頁/共21頁四、實四、實 驗驗 器器 材材 和和 藥藥 品品1. 1. 器材：分光光度計、離心機、兔手術臺、手器材：分光光度計、離心機、兔手術臺、手術器術器 械、動脈夾、動脈插管、磅秤、注射械、動脈夾、動脈插管、磅秤、注射器、器、 移液管、離心管、試管等移液管、離心管、試管等 分光光度計分光光度計 離心機離心機第5頁/共21頁四、實四、實 驗驗 器器

4、 材材 和和 藥藥 品品2.2.藥品：藥品：20%20%磺胺嘧啶鈉溶液、磺胺嘧啶鈉溶液、1%1%肝素鈉溶液、肝素鈉溶液、 0.02%0.02%磺胺嘧啶鈉溶液（標準液）、磺胺嘧啶鈉溶液（標準液）、 7.5% 7.5%三氯醋酸溶液、三氯醋酸溶液、0.5%0.5%亞硝酸鈉溶液、亞硝酸鈉溶液、 0.5% 0.5%麝香草酚溶液、麝香草酚溶液、20%NaOH20%NaOH溶液、溶液、 20% 20%烏拉坦溶液、蒸餾水烏拉坦溶液、蒸餾水第6頁/共21頁五、實五、實 驗驗 步步 驟驟 （一）動物基本操作（一）動物基本操作 （二）測定液和標準液的配制（二）測定液和標準液的配制 （三）比色管的配制（三）比色管的配

5、制 （四）比色與計算（四）比色與計算第7頁/共21頁（一）動物基本操作（一）動物基本操作( (血液標本的采集）血液標本的采集）1.1. 抓取家兔抓取家兔1 1只，稱重，用只，稱重，用2020烏拉坦溶液烏拉坦溶液5mL/kg5mL/kg行耳緣靜脈麻醉，然后固定于手行耳緣靜脈麻醉，然后固定于手術臺上。術臺上。第8頁/共21頁2.2.氣管插管氣管插管 手術區(qū)剪毛，沿正中線剪開頸部皮膚，鈍性分離皮下組織及肌肉，找出并游離氣管，穿一根線備用。確定甲狀軟骨的位置，在其下34環(huán)裝軟骨處切一倒“T”形切口，插管固定。第9頁/共21頁( (一一) )動物基本操作動物基本操作( (血液標本的采集）血液標本的采集）

6、3 3. .游離頸總動脈：游離頸總動脈：分開分開肌肉層后，肌肉層后，找出一側(cè)找出一側(cè)頸總動脈并分離約頸總動脈并分離約2 23cm3cm左右，左右，在其下穿線在其下穿線兩根線備用兩根線備用。第10頁/共21頁（一）動物基本操作（一）動物基本操作4.4.全身肝素化：耳緣靜脈注射全身肝素化：耳緣靜脈注射肝素肝素5ml5ml。 線線1 1結(jié)扎遠心端，待血管充盈后，動脈夾夾閉結(jié)扎遠心端，待血管充盈后，動脈夾夾閉近心端近心端 遠心端遠心端剪一剪一“V”V”形口，動脈插管，線形口，動脈插管，線2 2結(jié)扎結(jié)扎固定（二次固定）固定（二次固定）5.5.動脈插管動脈插管（肝素潤洗）（肝素潤洗）第11頁/共21頁（一

7、）動物基本操作（一）動物基本操作6.6.取血：打開動脈夾取空白血樣取血：打開動脈夾取空白血樣2ml2ml置于用置于用肝素浸過肝素浸過的試管中待用；然后由耳緣靜脈注射的試管中待用；然后由耳緣靜脈注射2020磺胺嘧啶鈉溶磺胺嘧啶鈉溶液液2ml/kg2ml/kg，于給藥后，于給藥后10min10min及及40min40min各取血各取血2ml2ml，分別置于，分別置于同上試管同上試管中待用中待用第12頁/共21頁（二）測定液和標準液的配制（二）測定液和標準液的配制 測定液的配制：用測定液的配制：用1ml1ml注射器注射器抽取上述血液各，置抽取上述血液各，置于已盛有于已盛有 三氯醋酸溶液的玻璃試管中，

8、充分搖三氯醋酸溶液的玻璃試管中，充分搖勻，然后以勻，然后以1500r/min1500r/min，離心，離心5min5min待用。待用。 標準液的配制：取磺胺嘧啶鈉溶液，加入已裝有標準液的配制：取磺胺嘧啶鈉溶液，加入已裝有 三氯醋酸溶液試管中，搖勻待用三氯醋酸溶液試管中，搖勻待用。第13頁/共21頁成分成分空白管空白管（mL）標準管標準管（mL）測定管（測定管（mL）給藥前給藥前給藥給藥10min給藥給藥40min測定液測定液/1.51.51.5標準液標準液/1.5/蒸餾水蒸餾水1.5/0.5NaNO2 0.50.50.50.50.50.5麝麝香草酚香草酚 1.01.01.01.01.0（三）各

9、比色管的配制（三）各比色管的配制第14頁/共21頁蒸餾水蒸餾水0.02%NaSD1 1組標本各取加入組標本各取加入2 2組組2組各試管先加三氯乙酸2組測定液各取清液加入3組加2 2加1ml1ml麝香草酚 標本標本（1 1組）組） 測定液測定液（2 2組）組） 比色液比色液（3 3組）組）空白管空白管標準管標準管給藥前給藥前藥后藥后1010藥后藥后4040取取1313支試管支試管分別用記號筆分別用記號筆標記標記第15頁/共21頁（四）比色與計算（四）比色與計算 用用72722 2型分光光度計進行比色，選波長型分光光度計進行比色，選波長520nm520nm，以空白管調(diào)，以空白管調(diào)“0”“0”點，讀

10、出標準管及各測定管光密度，并點，讀出標準管及各測定管光密度，并記錄記錄。 第16頁/共21頁六、實六、實 驗驗 結(jié)結(jié) 果果標準管標準管測定管測定管給藥前給藥前 給藥后給藥后10min10min給藥后給藥后40min40min光密度值光密度值1.1.各比色管的各比色管的光密度值光密度值第17頁/共21頁六、實六、實 驗驗 結(jié)結(jié) 果果2.2.計算計算Ke Ke 及及T T1/21/2tKCCet303. 2loglog0eKT693. 02/1Ke=2.303(logCKe=2.303(logC1 1-logC-logC2 2)/t)/t2 2-t-t1 1C CNaSDNaSD=C=C標標/OD/OD標標（ODOD給藥后給藥后-OD-OD給藥前給藥前） 第18頁/共21頁七、注七、注 意意 事事 項項1.1.麻醉時一定把握好速度。麻醉時一定把握好速度。2.2.每次取血之前要先將殘血放掉。每次取血之前要先將殘血放掉。3.3.各盛血的試管及動脈插管要用肝素浸潤，動脈插管各盛血的試管及動脈插管要用肝素浸潤，動脈