1、DOC格式論文，方便您的復(fù)制修改刪減抗-HIV假陽性1例并文獻(xiàn)復(fù)習(xí)（作者：單位：郵編：）【關(guān)鍵詞】艾滋病；陽性抗-HIV假陽性常見于風(fēng)濕性疾病等，但發(fā)生于胸椎結(jié)核者少見。患 者無任何HIV感染的癥狀及體征，僅在術(shù)前檢查或輸血前檢查篩選時(shí) 檢出。筆者在工作中遇見1例，現(xiàn)報(bào)告如下。1病歷摘要患者，男，14歲，因反復(fù)背部疼痛、體重下降1+年，脊柱后突畸形 1+個(gè)月就診。患者既往體健，無冶游史、手術(shù)史及輸血史。胸椎CR片提示：胸椎于第八胸椎處成角，T8椎體明顯變扁，該處軟組織可 見腫脹，余胸T8椎體改變考慮為T8結(jié)核？椎體嗜酸性肉芽腫？血沉 35mm/1 h。TB-Ab陽性。彩超提示：左頸部皮下低回聲

2、團(tuán)。抗結(jié)核治 療4周后擬行“前路T8椎體病灶清除+椎間植骨融合+鋼板固定術(shù)”， 術(shù)前我院篩檢發(fā)現(xiàn)HIV陽性，送縣醫(yī)院復(fù)檢陽性。囑患者回家休養(yǎng)， 等待結(jié)果。1個(gè)月后省疾控中心復(fù)檢結(jié)果發(fā)現(xiàn) HIV陰性。再次通知患 者行病灶清除+ 椎間植骨融合+鋼板固定術(shù)。術(shù)后患者恢復(fù)良好，癥狀 明顯改善。T7手術(shù)所見:T8胸椎旁見“豆腐渣樣”壞死物，椎體壓縮呈楔形, 下緣、T8椎體、T9上緣骨質(zhì)疏松，椎間盤變性。2討論1982年9月，美國疾病控制中心(CDC正式提出了獲得性免疫缺陷綜合征(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)的概念，隨后的調(diào)查研究證明這是一種新的傳染病。

3、1983年，法國巴斯德研究所的Mon tag nier等首先從1例淋巴瘤患者的淋巴結(jié)中分離出一種 病毒，被稱為淋巴結(jié)病相關(guān)病毒(lymphade nopathy associatedvirus,LAV),1984年初，美國國立衛(wèi)生研究院國立癌癥研究所的Gallo等從艾滋病患者的外周血單核細(xì)胞(PBMC中分離到稱為人嗜T淋巴細(xì)胞病毒皿型(human T-cell lymphotropic virus type皿，HTLV-皿)的病毒。同年，美國加州大學(xué)的Levy等也從艾滋病患者的 外周血淋巴細(xì)胞中分離出一種病毒，稱艾滋病相關(guān)病毒(AIDSrelated virus,ARV )。1986年，國際病

4、毒分類委員會(huì)(InternationalCommittee on Taxonomy of Viruses,ICTV)將 LAV/HTLV-皿 /ARV統(tǒng)一命名為人免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV )， 又稱艾滋病毒。由HIV感染而引起的疾病稱為艾滋病，全稱為獲得性免疫缺陷綜合征(acquired immunodeficiency syndrome，AIDS)，該病患者的免疫功能部分或完全喪失，CD4鈿胞數(shù)目減少，繼而發(fā)生機(jī)會(huì)性感染、 腫瘤等，臨床表現(xiàn)多種多樣。該病傳播速度快、病死率高，且目前無 法治愈。HIV在病毒分類學(xué)上屬逆轉(zhuǎn)錄病毒科( retr

5、oviridae )慢病毒屬（lentivirus ）,目前已發(fā)現(xiàn)兩種HIV，分別為HIV-1和HIV-2。兩者 具有相似的病毒結(jié)構(gòu)和傳播途徑。HIV-2主要分布于非洲西部，在歐 洲和美洲的一些感染者中也被檢測到。其毒力和傳播力都低于HIV-1， 引起的艾滋病病程較慢且較緩和。HIV-1廣泛分布于世界各地，是引 起全世界AIDS流行的病原，目前HIV的研究也是以HIV-1為主進(jìn)行 的。HIV的流行呈世界性分布，非洲為 HIV的發(fā)源地和重災(zāi)區(qū)，歐洲和 美洲也為主要流行區(qū)，近年HIV在亞洲的流行呈高速增長的趨勢。 我 國自1985年首次發(fā)現(xiàn)HIV感染者，至今已有6080萬人發(fā)生了感染， 專家估計(jì)，

6、如果不迅速采取有效的預(yù)防措施，按目前的年平均30%勺增長速度，到2010年，我國的HIV感染者將超過1 000萬。在非洲 的有些國家，HIV的感染率達(dá)總?cè)丝?30%以上。因此，預(yù)防和治療艾 滋病，已不僅僅是挽救個(gè)人生命的問題，而是關(guān)系到民族存亡的大事:16。2.1 HIV 檢測的特殊性HIV檢測不同于其他病原微生物檢測，要求 十分嚴(yán)格，任何錯(cuò)誤的診斷，包括假陽性或假陰性，都會(huì)對(duì)被檢者產(chǎn) 生十分重要的影響。因此，HIV檢測必須嚴(yán)格按照國家制定的艾滋 病檢測工作管理辦法和艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范（以下簡稱規(guī)范） 進(jìn)行，檢測的實(shí)驗(yàn)室須經(jīng)當(dāng)?shù)匦l(wèi)生行政部門審批合格，從事艾滋病檢測工作的技術(shù)人員須接受專門的技術(shù)

7、培訓(xùn)，并獲合格證書，診斷試劑應(yīng)選擇高敏感和高特異的，篩查呈陽性反應(yīng)的需用特異性更強(qiáng)的方法（如：免疫印跡試驗(yàn)）進(jìn)行確認(rèn)，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程應(yīng)有嚴(yán)格的質(zhì)量保證體系。2.2 HIV抗體檢測 目前國外用于HIV抗體篩查的方法很多，根據(jù)檢 測原理不同分為酶聯(lián)免疫吸附法、凝集法和層析法，可對(duì)血液、唾液 和尿液標(biāo)本進(jìn)行常規(guī)或快速檢測。在實(shí)際工作中常用的有酶聯(lián)免疫吸 附試驗(yàn)（ELISA）、明膠凝集試驗(yàn)和各種快速診斷試劑。自1985年第一代ELISA試劑問世以來，隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展，包被抗原已從 一代的全病毒裂解物發(fā)展為目前以基因重組和多肽抗原包被和標(biāo)記、 有著良好敏感性和特異性的三代雙抗原夾心試劑，檢測亞型包括

8、 HIV-1、HIV-2和HIV-1型的0亞型，窗口期由10周縮短至34周。 為避免窗口期傳染，荷蘭、法國等國已研制出第四代以重組的多肽抗 原和抗P24抗體包被的雙抗原夾心法試劑盒，可同時(shí)檢測抗原抗體， 使窗口期縮短了 23周，但其臨床價(jià)值有待評(píng)估。按規(guī)范要求， 我國采供血機(jī)構(gòu)進(jìn)行血液篩查和各醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)常規(guī)篩查檢測宜采 用ELISA法，自采自供血的單位必須進(jìn)行 HIV抗體檢測，在尚未建立 艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室的偏遠(yuǎn)地區(qū)或大醫(yī)院急診手術(shù)前，可由經(jīng)過培訓(xùn)的技術(shù)人員在規(guī)定的場所用快速試劑進(jìn)行血液篩選。對(duì)用ELISA試劑或快速診斷試劑進(jìn)行的篩查實(shí)驗(yàn)如呈陰性反應(yīng)，即報(bào)告HIV抗體陰性；對(duì)呈陽性反應(yīng)的標(biāo)本，

9、篩查實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用原有試劑和另外一種不同原理 或不同廠家的試劑進(jìn)行重復(fù)檢測，如兩種試劑復(fù)測均呈陰性反應(yīng)，則 報(bào)告HIV抗體陰性；如均呈陽性反應(yīng)，或一陰一陽，需送艾滋病確認(rèn) 實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確認(rèn)。篩查試劑必須是HIV-1/2混合型、經(jīng)國家藥品監(jiān)督 管理局（SDA注冊(cè)批準(zhǔn)、批檢合格、臨床評(píng)估質(zhì)量優(yōu)良、在有效期內(nèi)的試劑。HIV抗體篩查呈陽性反應(yīng)的標(biāo)本由于存在假陽性的可能，必須做確 認(rèn)試驗(yàn)。國際上有3種確認(rèn)試驗(yàn)方法，包括免疫印跡試驗(yàn)、條帶免疫 試驗(yàn)及免疫熒光試驗(yàn)，目前以免疫印跡試驗(yàn)最為常用。確認(rèn)試劑必須 經(jīng)SDA注冊(cè)批準(zhǔn)。免疫印跡試劑有 HIV-1/2混合型和單一型，按規(guī) 范要求，一般先用HIV-1/2混合型試

10、劑進(jìn)行檢測，根據(jù)規(guī)范中 判定免疫印跡試驗(yàn)結(jié)果的基本原則并參照所用試劑說明書綜合判定， 無HIV抗體特異帶出現(xiàn)的報(bào)告HIV抗體陰性；出現(xiàn)HIV抗體特異帶， 符合HIV-1抗體陽性判定標(biāo)準(zhǔn)，則報(bào)告HIV-1抗體陽性。如出現(xiàn)HIV-2 型的特異性條帶，需用HIV-2型免疫印跡試劑再做單一的HIV-2型抗 體確認(rèn)試驗(yàn)，呈陰性反應(yīng)，報(bào)告HIV-2抗體陰性；呈陽性反應(yīng)的則報(bào) 告HIV-2抗體血清學(xué)陽性，如需鑒別應(yīng)進(jìn)行核酸序列分析。如果出現(xiàn) HIV抗體特異帶，但帶型不足以判定為陽性，則判為HIV抗體不確定。 對(duì)HIV抗體不確定者應(yīng)按規(guī)范要求進(jìn)行隨訪，必要時(shí)可做HIV-1P24 抗原或核酸測定，但檢測結(jié)果只能

11、作為輔助診斷依據(jù)， 確認(rèn)報(bào)告要依 據(jù)血清學(xué)隨訪結(jié)果。由于目前唾液檢測試劑的敏感性和尿液檢測試劑的特異性明顯低于 血液檢測試劑，故我國SDA已注冊(cè)批準(zhǔn)的HIV抗體篩查和確認(rèn)試劑只 能用于血液標(biāo)本檢測7，8。2.3 HIV抗體檢測的質(zhì)量控制 在所有實(shí)驗(yàn)中必須包含有內(nèi)部對(duì)照質(zhì) 控血清和外部對(duì)照質(zhì)控血清。內(nèi)部對(duì)照質(zhì)控血清指示劑盒內(nèi)提供的陽性和陰性對(duì)照血清。內(nèi)部對(duì)照是質(zhì)量控制的基礎(chǔ)，每次檢測必須使用內(nèi)部對(duì)照，而且只能在同批 號(hào)的試劑盒中使用。夕卜部對(duì)照質(zhì)控血清是由實(shí)驗(yàn)室設(shè)置的弱陽性對(duì)照，一般以該試劑盒 臨界值（Cutoff ）的23倍為宜。該血清可到專門單位購買，也可由 實(shí)驗(yàn)室自己制備。制備方法是：收集

12、HIV抗體陽性和陰性血清，56 C 30 min滅活，3000轉(zhuǎn)/min離心15 min，弱陽性對(duì)照可以用 HIV抗體 陰性的健康人血清梯度稀釋 HIV抗體強(qiáng)陽性血清，或用試劑盒內(nèi)提供 的陽性和陰性對(duì)照血清混合并標(biāo)定后得到，一般按1年使用量配制，用0.2卩m濾膜過濾除菌，按一周實(shí)驗(yàn)用量分裝、分類、標(biāo)記并封口， -20 C凍存。該血清不可反復(fù)凍融，融化后應(yīng)存放2 C8 C， 1周內(nèi)使用。原則上每次實(shí)驗(yàn)必須使用外部對(duì)照質(zhì)控血清，以便監(jiān)控本次實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性和穩(wěn)定性，同時(shí)了解各批試劑盒的批間差異，繪制質(zhì)量 控制圖9-12 。2.4 HIV-1P24抗原檢測HIV感染人體后有一段窗口期，在這段時(shí)期病毒抗體

13、不能被檢出，但可以檢測到病毒相關(guān)抗原或分離病 毒。故在窗口期檢測抗原是早期輔助診斷和縮短窗口期的一種方法， 在感染早期和發(fā)病期抗原檢出率相對(duì)較高。HIV-1P24抗原檢測還適用于：HIV-1陽性母親所生嬰兒的早期輔助鑒別診斷；第四代 HIV-1 抗原/抗體ELISA試劑檢測呈陽性反應(yīng)、但 HIV-1抗體確認(rèn)陰性者的 輔助診斷；監(jiān)測病程進(jìn)展和抗病毒治療效果。P24抗原檢測一般用ELISA雙抗體夾心法試劑，必須經(jīng)過 SDA批準(zhǔn)注冊(cè)HIV-1P24抗原的陽性結(jié)果必須經(jīng)過中和試驗(yàn)確認(rèn) ，該結(jié)果僅作為 HIV感染的輔助診斷依據(jù)，不能據(jù)此確診；HIV-1P24抗原檢測陰性只 表示在本試驗(yàn)中無反應(yīng)，不能排除

14、 HIV感染13-15 。2.5 HIV 核酸檢測HIV核酸檢測，通常是檢測 HIV RNA以前只能 定性檢測血液中是否存在病毒核酸，而目前的技術(shù)可定量檢測血液中 病毒復(fù)制水平。HIV核酸定性檢測可用于HIV感染的輔助診斷，如窗 口期輔助診斷、病程監(jiān)控、指導(dǎo)治療方案及療效測定、預(yù)測疾病進(jìn)程 等。通常使用PCF或 RT-PCF技術(shù)，使用分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室通用的擴(kuò) 增試劑，引物可來自文獻(xiàn)或自行設(shè)計(jì)，應(yīng)盡量覆蓋所有或常見的毒株， 也可使用復(fù)合引物。HIV核酸定量檢測多用于監(jiān)測 HIV感染者的病程 進(jìn)展和抗病毒治療效果，目前常用的測定方法有逆轉(zhuǎn)錄PCR實(shí)驗(yàn)(RT-PC) 核酸序列擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)(NASBA、分

15、支DNA雜交實(shí)驗(yàn)(bDNA 等。在不同HIV定量檢測方法的選擇中，由于目前用于統(tǒng)一不同定量 方法檢測值的標(biāo)準(zhǔn)品尚未問世，因此不同定量方法結(jié)果之間還無法直 接進(jìn)行比較，建議同一病人治療前后用同一方法進(jìn)行HIV定量檢測。值得注意的是，HIV核酸定性檢測陰性，只可報(bào)告本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果陰 性，但不能排除HIV感染；HIV核酸檢測陽性，可作為診斷 HIV感染 的輔助指標(biāo)，不能單獨(dú)用于HIV感染的診斷，報(bào)告定性檢測結(jié)果時(shí)還 應(yīng)注明反應(yīng)條件和所使用的引物序列。報(bào)告HIV核酸定量檢測結(jié)果時(shí) 應(yīng)按照儀器讀數(shù)報(bào)告結(jié)果，注明使用的試驗(yàn)方法、樣品種類和樣品量， 當(dāng)測定結(jié)果小于最低檢測限時(shí)，應(yīng)注明最低檢測限水平，低于最低檢

16、 測限的結(jié)果不能排除HIV感染6，16。文獻(xiàn)報(bào)道：31份類風(fēng)濕系列陽性和/或ANA陽性標(biāo)本中，抗HIV檢 測不合格為9份，占29.0%。我站34份抗HIV不合格標(biāo)本中，類風(fēng) 濕系列陽性或ANA陽性為10份，占29.4%。其原因可能為間接法測 抗HIV試劑盒中所用的酶標(biāo)記抗人IgG可與非特異性吸附的I gG或RF、ANA等自身抗體結(jié)合，導(dǎo)致假陽性的產(chǎn)生。可見,類風(fēng) 濕系列和抗核抗體對(duì)抗HIV間接法檢測影響較大17。總之，產(chǎn)生假陽性的原因是多方面的，主要包括：（1）個(gè)人身體原因，如一些特殊體質(zhì)、過敏體質(zhì)、孕產(chǎn)婦，容易產(chǎn)生非特異反應(yīng)。我 們?cè)谌粘z測中就遇到過。（2）感染其他疾病，如 HBV HCV

17、梅毒 等，可能會(huì)造成一些非特異的交叉反應(yīng)。（3）試劑原因，因?yàn)槿魏我?種試劑都難以達(dá)到100%準(zhǔn)確。（4）操作原因，如操作中的交叉污染。對(duì)于（1） （3）項(xiàng)，可以通過流行病學(xué)調(diào)查和其他輔助診斷方法（如核酸檢測）加以排除。對(duì)于（4）項(xiàng)，其實(shí)是一種操作錯(cuò)誤，在檢測 中應(yīng)該盡可能杜絕，這就要求檢驗(yàn)人員在檢測過程要非常仔細(xì)小心。【參考文獻(xiàn)】1 胡飛躍.中國艾滋病預(yù)防控制的政策研究 .國際技術(shù)經(jīng)濟(jì)研 究，2003，6 （3）: 40-45.2 李素敏，王潤田，趙云珠.輸血相關(guān)HIV感染的免疫學(xué)檢測進(jìn)展.中國輸血雜志，2004，17 （6）: 204-206.3 Myl on akisE,Paliou M

18、,Lally M,et al.Diag no sisandtreatment of AIDS.Am J Med,2000,109(7) :568-576.4 肖建春，趙之偉，趙啟唐.HIV P24抗原檢測技術(shù)的研究進(jìn)展.國外醫(yī)學(xué)：病毒學(xué)分冊(cè)，2003, 10 ( 4): 111-114.5 魏民，邵一鳴.HIV實(shí)驗(yàn)室研究進(jìn)展和發(fā)展趨勢.國外醫(yī)學(xué)：病毒學(xué)分冊(cè)，2003，10( 3): 65-69.6 Dow BC.Laboratorial detecti on early of AIDS.Tra nsfuse Med,2001,10（5）:97-106.7 Gurtler L,Muhlbache

19、r A,Gichi U,et al.Multice nterevaluationof a new auto mated fourth-generationhumanimmunodeficiencyvirusscreeningassay with a sensitivean tige ndetecti onmodule and high specificity.Cli nMicrobic,2002,40 （6）:1938-1946.8 尚紅.艾滋病檢測中值得重視的幾個(gè)問題.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志， 2003, 26（ 5）: 261-262.（2） :357-359.9 Weber B.HIV scree ning asswy with a sen sitive an tige n detection module.Clin Virol,2002,2510 張麒，佐拉，秦光明，等.評(píng)估第4代酶聯(lián)免疫法診斷試劑對(duì) 靜脈吸毒者感染窗口期的檢測能力.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2006,29（7）: 631-633.11