1、砷鹽檢查一一古蔡法一、簡述1、用途：砷鹽檢查法中的第一法（古蔡氏法）用作藥品中砷鹽的限量檢查2、原理：古蔡氏法是利用金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)的氫與藥品中微量亞砷酸 鹽反應(yīng)生成具有揮發(fā)性的砷化氫，遇溴化汞試紙產(chǎn)生黃色至棕色的砷斑，與 同一條件下定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液所產(chǎn)生的砷斑比較，以判定砷鹽的限量。二、儀器與器具A為100ml標(biāo)準(zhǔn)磨口錐形瓶；B為中空的標(biāo)準(zhǔn)磨口塞，上連導(dǎo)氣管 C （外徑 8.0mm，內(nèi)徑6.0mn），全長約180mrp D為具孔的有機(jī)玻璃旋塞，其上部為 圓形平面，中央有一圓孔，孔徑與導(dǎo)氣管 C的內(nèi)徑一致，其下部孔徑與導(dǎo) 氣管C的外徑相適應(yīng)，將導(dǎo)氣管 C的頂端套入旋塞下部孔內(nèi)，并使管壁與

2、 旋塞的圓孔相吻合，黏合固定；E為中央具有圓孔（孔徑6.0mm的有機(jī)玻 璃旋塞蓋，與D緊密吻合。按藥典規(guī)定：有機(jī)玻璃旋塞 D和E的孔徑應(yīng)與導(dǎo)氣管C內(nèi)徑一致，以免生 成的色斑直徑不同，影響比色的準(zhǔn)確度； B磨口塞，C管頂端與D E有機(jī) 玻璃旋塞塞蓋間應(yīng)緊密吻合，以防砷化氫泄漏。三、試藥與試液標(biāo)準(zhǔn)砷溶液、溴化汞試紙、醋酸鉛棉花、碘化鉀試液、酸性氯化亞錫試液、鋅粒、鹽酸1、標(biāo)準(zhǔn)砷溶液:精密稱取105C干燥至恒重的三氧化二砷 0.132g，置1000ml量瓶中，加20% 氫氧化鈉溶液5ml溶解后，用稀硫酸適量中和，再加稀硫酸10ml，用水稀釋 至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前，精密量取貯備液10ml，

3、置1000ml量瓶中，加稀硫酸10ml，用水稀 釋至刻度，搖勻，即得（每1ml相當(dāng)于1yg勺As）。2、溴化汞試紙：乙醇制溴化汞試液 按藥典規(guī)定，應(yīng)置棕色磨口塞玻璃瓶內(nèi)，在暗處保存。 取質(zhì)地較疏松的中速定量濾紙條浸入乙醇制溴化汞試液中，1小時后取出，在暗處干燥，即得。本試紙宜置棕色磨口塞玻璃瓶內(nèi)保存。3、醋酸鉛棉花 取脫脂棉，浸入醋酸鉛試液與水的等容混合液中，濕透后，瀝去過多的溶液，并使之疏松，在100C以下干燥后，貯于磨口塞玻璃瓶中備用。4、碘化鉀試液：按藥典規(guī)定，應(yīng)臨用新制。5、酸性氯化亞錫試液：按藥典規(guī)定，配成后3個月即不適用。6鋅粒：以能通過1號篩的細(xì)粒無砷鋅為宜，如使用鋅粒較大時，用

4、量酌情增加，反 應(yīng)時間亦應(yīng)延長為1小時。四、操作方法1、標(biāo)準(zhǔn)砷斑的制備取醋酸鉛棉花適量（60100mg撕成疏松狀，每次少量，用細(xì)玻璃棒均勻地 裝入導(dǎo)氣管C中，松緊要適度，裝管高度 6080mm用玻璃棒夾取溴化汞試 紙1片（其大小以覆蓋D端口徑而不露出平面外為宜），置旋塞D頂端平面上， 蓋住孔徑，蓋上旋蓋E并旋緊。精密量取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2ml，置A瓶中，加鹽酸5ml與水21ml,再加碘化鉀試 液5ml與酸性氯化亞錫試液5滴，在室溫放置10分鐘后，加鋅粒2g,立即將 準(zhǔn)備好的導(dǎo)氣管C密塞于A瓶上，并將A瓶置2540C水浴中反應(yīng)45分鐘， 取出溴化汞試紙，即得。若供試品需經(jīng)有機(jī)破壞后再行檢砷，則應(yīng)精密量

5、取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2ml代替供試品，照該品種項下規(guī)定的方法處理后，依法制備標(biāo)準(zhǔn)砷斑。2、樣品測定取按各品種項下規(guī)定方法制成的供試液，置A瓶中，照標(biāo)準(zhǔn)砷斑的制備，自“再加碘化鉀試液5ml”起依法操作。將生成的砷斑與標(biāo)準(zhǔn)砷斑比較，即得。五、記錄與計算1、記錄必須記錄采用的方法，供試品取樣量，標(biāo)準(zhǔn)砷溶液取用量，操作過程，使用特殊試劑、試液的名稱和用量，實驗過程中出現(xiàn)的現(xiàn)象及實驗結(jié)果等。2、計算2.1標(biāo)準(zhǔn)砷溶液濃度的計算1mol的三氧化二砷質(zhì)量為197.82g,含砷（A） 2X 74.92g，稱取三氧化二砷0.132g溶于1000ml溶液中配成的貯備液，每1ml含A量為：2 74.92 0.132 1000

6、 =0.10mg197.8 1000貯備液定量稀釋100倍后所得標(biāo)準(zhǔn)砷溶液，每1ml含As量為1.0卩g。2.2砷限量計算進(jìn)行限量檢查時，取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2.0ml制成對照液，與供試品溶液在相同條 件下處理比較砷斑或吸收液的深淺，從而確定砷含量是否超過規(guī)定，砷限量可用下式計算：標(biāo)準(zhǔn)砷溶液體積（ml）標(biāo)準(zhǔn)砷溶液濃度（g/ml）砷限量%=X 100%供試品量（g）如取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2.0ml，標(biāo)準(zhǔn)砷溶液濃度0.000001g/ml，供試品取樣1.0g ; 則砷限量 %=2 0.000001 x 100%=0.0002（百萬分之二）2.3供試品取樣量計算1如已知砷限量為百萬分之一，取用標(biāo)準(zhǔn)砷溶液為2.0ml

7、，標(biāo)準(zhǔn)砷溶液濃度為0.000001g/ml,求供試品取樣量（g）。供試品量（g） =2.0 0.000001 x 100%=2.0（g）0.0001六、結(jié)果判定若供試液生成的砷斑比標(biāo)準(zhǔn)砷斑色淺，判為符合規(guī)定。反之，則不合格七、注意事項1、使用儀器和試液等照本法檢查，均不應(yīng)生成砷斑，或經(jīng)空白試驗至多生成僅 可辨認(rèn)的斑痕。2、新購置的儀器裝置，在使用前應(yīng)檢查是否符合要求。可將所使用的儀器裝置 依法制備標(biāo)準(zhǔn)砷斑，所得砷斑應(yīng)呈色一致。同一套儀器應(yīng)能辨別出標(biāo)準(zhǔn)砷溶 液1.5ml與2.0ml所呈砷斑的深淺。3、制備標(biāo)準(zhǔn)砷斑或標(biāo)準(zhǔn)砷對照液，應(yīng)與供試品檢查同時進(jìn)行。因砷斑不穩(wěn)定， 反應(yīng)中應(yīng)保持干燥及避光，并立

8、即比較。標(biāo)準(zhǔn)砷溶液應(yīng)于實驗當(dāng)天配制，標(biāo) 準(zhǔn)砷貯備液存放時間一般不宜超過一年。4、該反應(yīng)靈敏度約為0.75卩g （以As計），砷斑色澤的深度隨砷化氫的量而定，中國藥典規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)砷斑為2ml標(biāo)準(zhǔn)砷溶液（相當(dāng)于2卩g的As）所形成的 色斑，此濃度得到的砷斑色度適中，清晰，便于分辨。供試品規(guī)定含砷限量 不同時，采用改變供試品取用量的方法來適應(yīng)要求，而不采用改變標(biāo)準(zhǔn)砷溶 液取量的辦法。5、藥品中存在的微量砷常以三價的亞砷酸鹽或五價的砷酸鹽存在，五價狀態(tài)的 砷生成砷化氫比三價砷慢，故先加入碘化鉀和氯化亞錫為還原劑，使五價砷 還原為三價砷。6、如供試品中存在銻鹽，將干擾砷鹽檢查，所以本法不適用供試品為銻鹽的砷

9、 鹽檢查。但在中國藥典規(guī)定的實驗條件下，100卩g的銻存在不至于干擾 測定。實驗中加入氯化亞錫不僅有效的抑制銻的干擾，防止銻化氫與溴化汞 試紙作用生成銻斑或二乙基二硫代氨基甲酸銀試液反應(yīng)，干擾砷鹽檢查，還 可與鋅作用，在鋅粒表面形成鋅錫齊，起去極化作用，從而使氫能均勻連續(xù) 地發(fā)生，有利于砷斑的形成。7、 供試品和鋅粒中可能含有少量硫化物，在酸性溶液中產(chǎn)生H2S 氣體，干擾實 驗，故用醋酸鉛棉花吸收除去H2S，因此，導(dǎo)氣管中的醋酸鉛棉花，要保持疏 松、干燥，不要塞入近下端。8、制備溴化汞試紙所用濾紙的質(zhì)量，對生成砷斑的色澤有影響，用定性濾紙， 所顯砷斑色調(diào)較暗，深淺梯度無規(guī)律；用定量濾紙質(zhì)地疏松

10、者，所顯砷斑色 調(diào)鮮明，梯度規(guī)律，因此必須選用質(zhì)量較好，組織疏松的中速定量濾紙；溴 化汞紙質(zhì)一般宜新鮮制備。9、鋅粒大小影響反應(yīng)速度，為使反應(yīng)速度及產(chǎn)生砷化氫氣體適宜，需選用粒徑 2mm左右的鋅粒。反應(yīng)溫度一般控制在 30C左右，冬季可置水浴中。如反應(yīng) 太快，宜適當(dāng)降低反應(yīng)溫度，使砷化氫氣體能被均勻吸收。10、如供試品為鐵鹽， 需先加酸性氯化亞錫試液， 將高鐵離子還原為低價鐵而除 去干擾。如枸櫞酸鐵銨的砷鹽檢查。11、有機(jī)藥物中的砷鹽檢查 可溶于水的脂肪族有機(jī)酸如枸櫞酸、 乳酸及其鹽類， 氨基已酸與葡萄糖酸鈣等，一般可不經(jīng)有機(jī)破壞而直接依法檢查砷鹽；多數(shù) 環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)藥物， 因砷與雜環(huán)分子可能以共價鍵鍵合， 需先行有機(jī)破壞， 否則檢出結(jié)果偏低或難以檢出。有機(jī)破壞時