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文檔簡介
1、太子參均一多糖的分離與表征 Isolation and Characterization of Pseudostellaria heterophylla polysaccharideYANG Bin1PANG Wensheng1HU Juan1,2* 1.The college of Pharmacy , FuJian University of Traditional Chinese Medicine, Fuzhou 350122 ,China ; 2.Fujian Academy of Traditional Chinese Medicine , Fuzhou 350003 , China
2、 :ObjectiveTo further purified and characterized of Pseudostellaria heterophylla polysaccharide. Methods After crushing Radix Pseudostellariae , the polysaccharide was extracted by water and ethanol precipitationmethod(40%ethanol ) . The column of Cellulose DE-52 and Sephacryl S-300HR was used to se
3、parate and purify it. High performance gel permeation chromatography ( HPGP)C was used to analyze the average molecular weight , high performance liquid chromatography (HPLC) of 1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone( PMP) pre-column derivatization was used to analyze its monosaccharide components. ResultsA
4、 novel homogeneous polysaccharide , named as H-1-1 , was obtained. The mean molecular weight of HPh-1-1 was 18400Da and it was only composed of glucose. ConclusionThe Pseudostellaria heterophylla homogeneouspolysaccharide HPh-1-1 was a kind of dextran. Keywords: Pseudostellaria Heterophylla Polysacc
5、haride ;Molecular Weigh;Monosaccharide Components 太子參為石竹科植物孩兒參 Pseudostellaria heterophylla ( Miq) Pax ex Pax et Hoffm. 的干燥塊根,具有 益氣健脾、 生津潤肺作用 1 。多糖是太子參重要活性成分之一, 研究表明,太子參多糖具有降低血糖、血脂 23、改善胰島素 抵抗 4 等功效。課題組前期對太子參粗多糖以40%的乙醇沉淀, 經藥理實驗驗證,得到其抗二型糖尿病活性部位(PF40)5 。 本研究采用DEAE纖維素、葡聚糖凝膠柱層析方法,對PF40進 行分離純化,得到均一多糖;并分析
6、其分子量及單糖組成,為進 一步探討太子參多糖的化學組成及藥理相關性研究奠定基礎。 1 儀器與材料 11儀器Ultimate 3000 高效液相色譜儀(Dionex公司); UV-3200型紫外分光光度計(上海美譜達儀器XX公司); MOKULYOD-23型冷凍干燥儀(Thermo Fisher公司);層析柱(上 海錦華層析設備廠);HL-2D定時數顯恒流泵;DBS-100電腦全 自動部分收集器(上海滬西分析儀器廠XX公司);AE240S型 ? 子分析天平(梅特勒-托利多XX公司);BC-R501B旋轉蒸發器 (上海生物化工設備 XX公司);HH-4型恒溫水浴鍋(國華電器 XX公司);DHG-9
7、140A型電熱恒溫鼓風干燥箱(上海精宏實驗設 備XX公司)。 12材料太子參(福建柘參種業 XX公司);Cellulose DE-52 (Whatman公司,批號:1030A024); Sephacryl S-300HR (GE 公司,批號: 10222040);葡聚糖分子量標準套(中國食品藥品 鑒定研究院,批號,201203); D-葡萄糖、D-甘露糖(分析純, 國藥集團化學試劑 XX公司,批號:20140117); L-鼠李糖、D- 葡萄糖醛酸、D-半乳糖醛酸、D-半乳糖、D-阿拉伯糖(分析純, Sigma公司,批號:20120203),乙腈(色譜純, Merck公司, 批號:608000
8、203),1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP、氯化 鈉、硝酸鈉、無水乙醇、丙酮、濃硫酸、苯酚、濃鹽酸、氫氧化 鈉(分析純,國藥集團化學試劑XX公司,批號:20140617)。 2 方法與結果 21 太子參均一多糖的提取與分離干燥太子參粉碎后過 40目 篩,經90%乙醇回流提取3次;藥渣經水提3次,每次2h,過濾, 濾液經減壓蒸餾濃縮至原體積 1/20 ; Sevage法脫蛋白,溶液經 90%乙醇沉淀,離心;沉淀用蒸餾水溶解,以終濃度40%的乙醇 沉淀;離心,沉淀經無水乙醇、丙酮反復洗滌后冷凍干燥,得 PF40多糖。經 Cellulose DE-52 柱和 Sephacryl S-300HR 柱進 一步分離純化,用苯酚 -硫酸法跟蹤檢測,收集水洗脫餾分,經 濃縮、透析后冷凍干燥, 得到1 種均一多糖組分, 命名為 HPh-1-1, 分離流程見圖 1 。 3 討論 近年來, 太子參多糖的研究在化學成分、 藥理等各方面都不 斷深入。本研究采用 DEAE纖維素、葡聚糖凝
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