聚六亞甲基雙胍抗藥性研究進展余 剛摘要 聚六亞甲基雙胍（Poly(hexamethylenebiguanide) hydrochloride簡寫PHMB）作為一種廣譜的抗菌劑在歐洲被開發(fā)應用已經有20多年的歷史，它的應用范圍包括作為外用的消毒劑、紡織的抗菌劑以及很低用量時作為一種抑菌劑。然而在聚六亞甲基雙胍得到廣泛應用的同時，有關它的抗藥性研究也在不斷增加。本文主要就國外有關研究機構對聚六亞甲基雙胍抗藥性的研究加以綜述。關鍵詞 聚六亞甲基雙胍；抗藥性PHMB是一種廣譜的抗菌劑，其在低濃度下對革蘭氏陽性、革蘭氏陰性細菌即有很強的抑制作用，并且由于其比較穩(wěn)定，可長期保持有效地抗菌效果。同時PHMB由于毒性低，不刺激眼睛，因此已經廣泛在日化、水處理、醫(yī)藥和食品工業(yè)中使用。例如在化妝品中添加0.10.2%的聚六亞甲基雙胍即可以有效防止細菌及真菌的滋生，在隱形眼鏡護理液中是常用的抑菌劑以及被用來治療一種嚴重的眼科疾病棘阿米巴角膜炎。除此之外它還應用于包括纖維浸漬來抑制細菌生長，游泳池水處理，各類固體表面的消毒，清洗口腔，孵化蛋的處理以防止沙門氏菌的感染，以及防霉處理等等。盡管PHMB具有以上的優(yōu)點及已經廣泛的應用，它同時也被越來越多的研究機構發(fā)現(xiàn)細菌會對它產生抗藥性。棘阿米巴角膜炎是一種潛在的致盲病，近二十年來發(fā)病率呈上升趨勢。這種嚴重疾病的醫(yī)療前景尚不樂觀，PHMB作為一種治療棘阿米巴角膜炎的藥物曾得到廣泛應用，然而英國斯卡伯若夫醫(yī)院眼科P. P.Syam證實：從病人獲得的棘阿米巴角膜炎菌株，在實驗室和活體檢驗中都表現(xiàn)出對PHMB和氯己啶有抗藥性，盡管在開始使用時效果良好。Clark D.L; Silver S 也系統(tǒng)報導了抗藥性，他的結論是：假單胞菌的原生質對PHMB，F(xiàn)MA（florescein mercuric acetate）和MBR（merbromin）都有抗藥性。金黃葡萄球菌的原生質對FMA 和 PHMB 有抗藥性。為找出細菌會對PHMB產生抗藥性的機理，各國的研究人員也做了很多深入的研究。英國卡蒂芙大學生物科學學院 Andrew P. Morby 深入研究了棘阿米巴角膜炎菌株和大腸桿菌對PHMB產生抗藥性的機理：當PHMB濃度低時（110mg/l)，對細菌是非活性的，而在高濃度時，對細菌的生長及活性的抑制力是隨著聚合度的增加而增加的。致死作用被認為是與細胞膜作用造成細胞膜的整體性發(fā)生非特征的變化所致。所提出的對于聚合度效應的基礎是PHMB與酸性胞膜脂作用造成相分離并形成區(qū)塊(domain)，大的PHMB分子形成大的區(qū)塊，因而造成較大的破裂。用高濃度PHMB處理的棘阿米巴角膜炎菌株含有密集的染色沉淀的菌株。與未處理的對照組相比，PHMB的處理會增加細胞內部的磷含量，這一累積往往局限于細胞壁和細胞核。細胞膜的滲透性降低，會保留住磷，蛋白質凝固，卵磷脂凝聚，應該是造成磷含量增高的原因，而不是由于PHMB和核酸的結合造成的，盡管20年來這方面的文獻迅速增加。添加PHMB會改變大腸桿菌的生長特性。濃度 = type=#_x0000_t7510 mg/ l則為殺菌劑。在大腸桿菌生長率D600 03時，添加7.5 mg PHMB/l造成4-5個小時生長的暫時停止，此后恢復生長。所有染色體缺失變異的PHMB抗藥性表型可以用最小抑菌濃度（MIC）測定。野生類型的rhsB核 或rhs核的過度表現(xiàn)度使對PHMB的抗藥性增大。而曼徹斯特大學醫(yī)藥和化學系P. Broxton等人則通過研究了PHMB和大腸桿菌細胞胞膜之間的相互作用。用不同聚合度的PHMB（n=2，5.5以及=10）進行試驗。提出了抗藥性產生機理的假說。認為殺菌劑優(yōu)先與酸性的磷脂PG(phosphatidylglycerol)，DPG(Diphosphatidylglycerol)作用，由于PG降低，從而使磷耗盡而產生抗藥性。由此可見無論是革蘭氏陰性的大腸桿菌，還是革蘭氏陽性的金黃葡萄球菌，還是有致盲危險的棘阿米巴角膜炎菌株，都會產生對PHMB的抗藥性是不爭的事實。對產生抗藥性機理的研究，只能用于解釋和對使用加以限制，并指導開發(fā)不具抗藥性的新型殺菌劑的開發(fā)。A P. Morby的研究表明“大的PHMB分子形成大的區(qū)塊，因而造成較大的破裂。”是一個很好的啟示，雖然他認為當聚合度超過n=6時，效果不明顯。但事實上，PHMB的聚合度平均值為5.5，他很難得到聚合度高的PHMB。此后歐洲也在積極開發(fā)PHMB的替代產品，并在1997年由奧地利POC技術公司研發(fā)出高聚合度的聚六亞甲基胍（PHMG）。由于PHMG的聚合度一般要比PHMB的聚合度大10倍以上，真正成為線性的高分子鏈，殺菌機理也會大大改進，從而使產生抗藥性的幾率大大下降。在奧地利總醫(yī)院經過試驗證明，30種菌株(革蘭氏陽性，如金黃葡萄球菌(S.aureus)和表皮葡萄球菌( s.epidermidis);以及革蘭氏陰性菌，如大腸桿菌(E.coli), 克雷伯氏菌屬(Klebsiella sp), 銅綠假單胞菌(P. Aeruginosa)和不動桿菌屬(Acinetobacter sp.)。試驗表明，不僅ATCC菌株對PHMG敏感，而分離出的多抗藥性的兩類菌株也沒有產生抗藥性，在30代試驗后未發(fā)現(xiàn)MIC有所增加。在國內經過測試也證明，硫酸鹽還原菌在經過三十代的繁殖后，仍然未對PHMG產生抗藥性。因此，作為PHMB的替代產品，PHMG前景應該是極為光明的了。參考文獻1. N. A. Turnera, A. D. Russella,*, J. R. Furra and D. Lloydb Emergence of resistance to biocides during differentiation of Acanthamoeba castellanii a Welsh School of Pharmacy and b School of Biosciences, Cardiff University, Cardiff CF10 3XF, UK2. P. Broxton*P.M. Woodcock 1 F. HeatleyP. Gilbert Interaction of some polyhexamethylene biguanides and membrane phospholipids in Escherichia coli Department of Pharmacy, University of Aston in Birmingham, Gosta Green, Birmingham B4 7ET.3. Michael J. Allen, Graham F. White and Andrew P. Morby The response of Escherichia coli to exposure to the biocide polyhexamethylene biguanide School of Biosciences, Cardiff University, Museum Avenue, PO Box 911, Cardiff CF10 3US, UK4.Clark D.L; Silver S. Energy Citations Database5. 薛廣波主編：現(xiàn)代消毒學，北京，人民軍醫(yī)出版，2002年：P464465作者單位：上海高聚實業(yè)有限公司(上海市