能力驗證提供者認可準則在微生物領域的應用說明中國合格評定國家認可委員會 4 9 CNAS-CL03-A001:2018CNAS-CL03:2010中章、節條款號和名稱，解釋和說明內容在CNAS-CL03-A001:2018能力驗證提供者認可準則在微生物領域的應用說明GB/T28043利用實驗室間比對進行能力驗證的統計方法（ISO13528,ISO/TS22117食品和動物飼料微生物能力驗證特定要求和指南(Microbiologyoffoodandanimaguidanceforproficiencytestingbyinterlaboratoryc3.3標準菌株referencestrain進行定性微生物檢測時，能檢測到但無法給出精確數值的微生物的最小量CNAS-CL03-A001:2018微生物能力驗證計劃提供者或其分包方，應具有相應微生物項目的檢測能），開展新能力驗證計劃前通常應進行預試驗，預試驗應考慮微生物e）明確目標微生物是定性檢測和/或定CNAS-CL03-A001:2018——在使用前應確認目標微生物的特性,應根據能力驗證的目標采用適當的——能力驗證樣品中存在背景菌群尤其是疑似目標微生物時，提供者應考慮背菌群對目標微生物檢測的影響，應通過確認試驗保證樣品指定值的準確可j）有防止串通或偽造結果的措施，如多水平、多樣本設計，參加者返回應建立微生物能力驗證樣品的制備、貯存、處置的程序，包括檢畢）；——樣品的數量（要考慮完成結果評價之后，參加者對能力驗證樣品穩定CNAS-CL03-A001:2018）；篩選、選擇分離和鑒定階段的能力。對定量和定性能力驗證樣品，應建立均勻性和穩定性判定原則（附錄A）。微生物能力驗證樣品應進行穩定性評定。必要時，應將穩定性量化考慮作為能力驗證樣品指定值測量不確定度的補充分量，在能力評定中予以考檢測時間間隔及頻次取決于已知的穩定性信CNAS-CL03-A001:2018注1：開展過多輪次定量微生物能力驗證計劃的提供者，可使用經驗值作注2:通常最大可能數（mostprobablenumber,MPN）計數方法和平板菌落注3:定性微生物能力驗證計劃通常直接將參加者結果與指定值進行比較提供者應將確定微生物定性和定量計劃指定值（平均值、中位值b）給參加者的指導書應包括以提供者應控制微生物樣品的包裝，確保符合國家、地區或國CNAS-CL03-A001:2018適用時，文件控制程序應包括基于病原微生物安——使用前應確認目標微生物的特性,應根據能力驗證的目標采用適當的標CNAS-CL03-A001:2018適用時，記錄控制程序應包括基于病原微生物安全考慮的質量/技術記微生物水平較高時，可使用單因子方差分析和Ss≤0.3σ準則（Ss為樣品間參加者結果回報后獲得σ時應再次利用Ss≤0.3σ確認樣品是否均勻。如σ已知，比如根據經驗值或先期同類能力驗證計劃獲得的σ值，可利用Ss≤0.3σ進行評當微生物水平較低時，樣品間微生物計數差異可能會比較大，可能不滿足Ss≤0.3σ的要求，在后續評價參加者能力時可考慮在能力評定標準差中加入樣=m-1n2=N-m若F＜自由度（n1，n2）及給定顯著性水平α（通常α=0.05）的臨界值表1F分布表P{F(n1,n2)>Fα(n1,n2)}=αα=0.05899性條件下測試j次（j=1、2、……n）。按A.1.1.1計偏差Ss：若Ss≤0.3σ,則使用的樣品可以認為是均勻的。通常從微生物能力驗證樣品總體中隨機抽取足夠具有代表性的品進行穩定 注：為了保證平均值和標準偏差的準確度，n1和n2均≥6。P{t(n)>tα(n)}=αα=0.025（單側檢驗） 式中：x1—均勻性檢驗的總平均值 B.2.1利用Z值評定其中x為參加的結果，X為指定值,σ能力評定標準差。當參加者使用的測試方法有可靠的重復性限r和再現性限R時,可根據GB/T參加者在重復條件下n次測試的平均值x與指定值X之差|x-X|小于臨界為測試方法的再現性標準差。根據ISO4833，常規30℃需氧培養的固體培養基上的菌落計數，其方法重復性限r為0.25，再現性限R為0.45，計算CD值約為0.29。會落在指定值±3σ以內，σ為標準差。然而，實踐中仍存在實驗室間變異。大MPN計數結果的接受限應增加到±3σ和±5σ（ISO/TS22117)。MPN對數值±3σ±5σ——在指定值±3σ（含邊界）范圍內：滿意——在指定值±3σ和指定值±5σ（不含邊界）范圍內：有疑問——在指定值±5σ（含邊界）范圍外：不滿意之間的變異會逐漸減小，趨近于方法本身的變異，評價參加者結果的MPN對數值接受限可根據實際情況縮小。如英格蘭衛生局經過兩年多輪次能力驗證計劃運作之后，將參加者MPN對數值接受限分別縮小至±2.68σ和±4σ。以某次乳粉中菌落總數測定能力驗證為例。參加者使用的測試方法為ISO表4菌落總數測試結果（CFU/g）測試結果x1測試結果x2x14.6994.62324.7244.70834.7784.73244.6724.60254.6994.74864.6334.70874.6534.68184.6634.71694.6814.6724.6994.6234.685F9F臨界值F0.05(9,10)=3.02。計算的F值為1.67，該值＜臨界值，這初步表明表6模擬運輸條件放置30天后測試結果（CFU/g）12345x1x2s2tx-y≤x-y≤0.3σ值的差值x1-x2為0.002。以經驗值0.25為能力評定標準差，0.3σ為0.075，x-x-y≤0.3σCFU/g值利用CD值|x-X|＜0.291710004.8512550004.7403420004.62341800005.25556280004.4477410004.6138500004.6999310004.491520004.716541004.733175004.243475004.677495004.695450004.6530390004.591330004.519220004.342650004.813200004.301500004.699340004.531450004.6530350004.544700004.845表中加*的為有疑問結果，加§號的為不滿意將參加者結果進行對數轉換，以中位值為指定值X，以標準化四分位距為CNAS-CL03-A00