《臨床基本技能》臨床血液學檢驗血液樣本采集與處理靜脈采血法通常采用肘部靜脈、手背靜脈、內踝靜脈或股靜脈等。成人多取肘部靜脈，嬰幼兒可用頸外靜脈采血。采血時，先在采血部位上方約5-7cm處系上止血帶，囑患者握拳使靜脈充盈顯露，常規消毒皮膚，以左手拇指固定靜脈穿刺部位下端，右手持注射器針頭斜面向上與皮膚呈15°-30°角刺入靜脈，見回血后，將針頭略放平，再沿靜脈走向深入少許，然后抽取所需血量。采血完畢，松開止血帶，囑患者松拳，用消毒棉球按壓穿刺點，拔出針頭。毛細血管采血法適用于僅需微量血液的檢驗項目，如血常規、血型鑒定等。常用部位為手指或耳垂。以手指采血為例，先用75%乙醇消毒采血部位皮膚，待干后，用采血針迅速刺入皮膚2-3mm，深度以能自然流出少量血液為宜，勿用力擠壓，用干凈的微量吸管吸取血液，將血液注入相應的抗凝管或檢測容器中。采血后，用消毒棉球壓迫止血。抗凝劑的選擇與使用不同的檢驗項目需要使用不同的抗凝劑。如血常規檢驗常用乙二胺四乙酸（EDTA）鹽抗凝，它能與血液中的鈣離子結合形成螯合物，從而阻止血液凝固。一般每毫升血液需加入1.5-2.2mg的EDTA-K?。凝血功能檢查常用枸櫞酸鈉抗凝，其與血液的比例為1:9，它通過與鈣離子結合，起到抗凝作用。標本的運送與保存采集好的血液標本應盡快送往實驗室進行檢測。運送過程中要注意避免劇烈震蕩，防止標本溶血。對于不能及時檢測的標本，應根據不同的檢驗項目采取適當的保存方法。如血常規標本室溫下可保存數小時，而凝血功能標本應在采集后1小時內檢測，若不能及時檢測，可將標本置于4℃冰箱保存，但保存時間不宜過長。紅細胞檢驗紅細胞計數原理是將一定體積的全血經等滲稀釋液稀釋后，充入計數池，在顯微鏡下計數一定體積內的紅細胞數量，然后換算成每升血液中的紅細胞數。參考值男性為（4.0-5.5）×1012/L，女性為（3.5-5.0）×1012/L。紅細胞增多可見于相對性增多，如嚴重嘔吐、腹瀉、大量出汗等導致的血液濃縮；絕對性增多，如真性紅細胞增多癥等。紅細胞減少常見于各種貧血，如缺鐵性貧血、巨幼細胞貧血等。血紅蛋白測定常用氰化高鐵血紅蛋白法，血液中的血紅蛋白被高鐵氰化鉀氧化為高鐵血紅蛋白，再與氰離子結合形成穩定的氰化高鐵血紅蛋白，在特定波長下比色，根據吸光度計算出血紅蛋白含量。參考值男性為120-160g/L，女性為110-150g/L。血紅蛋白測定結果與紅細胞計數有密切關系，但在某些情況下，兩者的變化并不完全平行，如缺鐵性貧血時，血紅蛋白降低比紅細胞計數降低更為明顯。血細胞比容測定是指一定體積的全血中紅細胞所占的百分比。常用溫氏法，將抗凝血注入溫氏管中，以一定的速度離心一定時間后，讀取紅細胞層的高度，計算出血細胞比容。參考值男性為0.40-0.50L/L，女性為0.35-0.45L/L。血細胞比容的變化與紅細胞數量和血漿量有關，可用于診斷貧血及判斷貧血的類型。紅細胞平均值參數計算包括平均紅細胞容積（MCV）、平均紅細胞血紅蛋白量（MCH）和平均紅細胞血紅蛋白濃度（MCHC）。MCV是指每個紅細胞的平均體積，計算公式為MCV（fl）=每升血液中紅細胞比容/每升血液中紅細胞數×101?。MCH是指每個紅細胞內所含血紅蛋白的平均量，計算公式為MCH（pg）=每升血液中血紅蛋白含量/每升血液中紅細胞數×1012。MCHC是指每升血液中平均所含血紅蛋白濃度，計算公式為MCHC（g/L）=每升血液中血紅蛋白含量/每升血液中紅細胞比容。根據這些參數可以對貧血進行形態學分類，如MCV、MCH、MCHC均降低常見于缺鐵性貧血；MCV升高，MCH升高，MCHC正常常見于巨幼細胞貧血。紅細胞形態檢查在顯微鏡下觀察紅細胞的大小、形態、染色性及內含物等。正常紅細胞呈雙凹圓盤形，大小較為一致，直徑約6-9μm，染淡紅色，中央淡染區約為直徑的1/3。異常紅細胞形態包括大小異常，如小紅細胞（直徑＜6μm）常見于缺鐵性貧血，大紅細胞（直徑＞10μm）常見于巨幼細胞貧血；形態異常，如球形紅細胞常見于遺傳性球形細胞增多癥，橢圓形紅細胞常見于遺傳性橢圓形細胞增多癥；染色異常，如低色素性紅細胞常見于缺鐵性貧血；內含物異常，如嗜堿性點彩紅細胞、豪-焦小體等可見于某些貧血及造血異常疾病。白細胞檢驗白細胞計數原理與紅細胞計數相似，將血液用白細胞稀釋液稀釋后，充入計數池，在顯微鏡下計數一定體積內的白細胞數量，然后換算成每升血液中的白細胞數。參考值成人（4-10）×10?/L。白細胞增多常見于感染、炎癥、組織損傷等；白細胞減少常見于病毒感染、血液系統疾病、物理化學因素損傷等。白細胞分類計數是將血液制成涂片，經染色后在顯微鏡下觀察各類白細胞的形態，并計數各類白細胞所占的百分比。正常情況下，中性粒細胞占50%-70%，淋巴細胞占20%-40%，單核細胞占3%-8%，嗜酸性粒細胞占0.5%-5%，嗜堿性粒細胞占0-1%。中性粒細胞增多常見于急性感染、嚴重組織損傷等；淋巴細胞增多常見于病毒感染、淋巴細胞白血病等；嗜酸性粒細胞增多常見于過敏性疾病、寄生蟲感染等。白細胞形態檢查正常白細胞有各自的形態特征。中性粒細胞呈圓形，直徑10-15μm，核分葉狀，一般2-5葉，胞質內含有淡紫紅色的細小顆粒。淋巴細胞可分為大淋巴細胞和小淋巴細胞，小淋巴細胞直徑6-9μm，核圓形，染色質致密呈塊狀，胞質少，呈天藍色；大淋巴細胞直徑10-15μm，核圓形或橢圓形，染色質較疏松，胞質較多，可有少量嗜天青顆粒。單核細胞體積較大，直徑12-20μm，核呈腎形、馬蹄形或不規則形，染色質疏松呈網狀，胞質豐富，呈淡灰藍色，含有細小的嗜天青顆粒。嗜酸性粒細胞直徑13-15μm，核多為兩葉，胞質內充滿粗大、均勻的嗜酸性顆粒，呈橘紅色。嗜堿性粒細胞直徑10-12μm，核分葉不明顯，胞質內含有大小不等、分布不均的嗜堿性顆粒，呈紫黑色。異常白細胞形態包括中毒顆粒，常見于嚴重感染；空泡變性，可見于感染、中毒等；核左移，指外周血中桿狀核粒細胞增多或出現晚幼粒、中幼粒、早幼粒等細胞，常見于急性感染；核右移，指中性粒細胞核分葉過多，常見于巨幼細胞貧血等。血小板檢驗血小板計數常用的方法有顯微鏡計數法和血細胞分析儀法。顯微鏡計數法是將血液用血小板稀釋液稀釋后，充入計數池，在顯微鏡下計數一定體積內的血小板數量，然后換算成每升血液中的血小板數。參考值（100-300）×10?/L。血小板減少常見于血小板生成減少，如再生障礙性貧血；血小板破壞增多，如特發性血小板減少性紫癜；血小板消耗過多，如彌散性血管內凝血等。血小板增多可見于原發性增多，如原發性血小板增多癥；反應性增多，如急性感染、出血后等。血小板形態檢查正常血小板呈雙凸圓盤狀，直徑2-4μm，無細胞核，胞質內含有紫紅色顆粒。在涂片上，血小板常聚集成群。異常血小板形態包括大小異常，如巨大血小板可見于某些血液系統疾病；形態異常，如血小板衛星現象，指血小板黏附于中性粒細胞表面，常見于某些藥物影響等。血小板功能檢查包括血小板聚集功能測定和血小板黏附功能測定。血小板聚集功能測定是通過加入誘導劑，如ADP、膠原等，觀察血小板的聚集情況。血小板黏附功能測定是通過讓血液與一定的異物表面接觸，測定黏附于異物表面的血小板數量。血小板功能異常可導致出血傾向，如血小板無力癥患者血小板聚集功能和黏附功能均降低。血型鑒定與交叉配血ABO血型系統根據紅細胞表面是否存在A抗原和B抗原，將血型分為A型、B型、AB型和O型。A型血紅細胞表面有A抗原，血清中有抗B抗體；B型血紅細胞表面有B抗原，血清中有抗A抗體；AB型血紅細胞表面有A抗原和B抗原，血清中無抗A和抗B抗體；O型血紅細胞表面無A抗原和B抗原，血清中有抗A和抗B抗體。血型鑒定采用正定型和反定型相結合的方法，正定型是用已知的抗A和抗B血清與受檢者紅細胞反應，反定型是用已知的A型和B型紅細胞與受檢者血清反應，兩者結果相符才能確定血型。Rh血型系統主要有D、C、c、E、e五種抗原，其中D抗原的抗原性最強。臨床上通常將紅細胞表面含有D抗原的稱為Rh陽性，不含D抗原的稱為Rh陰性。Rh血型鑒定常用抗D血清與受檢者紅細胞反應。Rh陰性的個體在輸入Rh陽性血液或Rh陰性孕婦懷有Rh陽性胎兒時，可產生抗D抗體，再次接觸Rh陽性血液時可發生溶血反應。交叉配血試驗是確保輸血安全的重要措施。包括主側配血和次側配血，主側配血是將供血者的紅細胞與受血者的血清混合，觀察有無凝集反應；次側配血是將受血者的紅細胞與供血者的血清混合，觀察有無凝集反應。如果主側和次側均無凝集反應，稱為配血相合，可以輸血；如果主側有凝集反應，稱為配血不合，絕對不能輸血；如果主側無凝集反應，次側有凝集反應，可根據情況少量緩慢輸血，并密切觀察受血者的反應。凝血功能檢驗活化部分凝血活酶時間（APTT）測定是內源性凝血系統的篩選試驗。在受檢血漿中加入活化劑和部分凝血活酶，再加入鈣離子，觀察血漿凝固所需的時間。參考值為25-37秒。APTT延長常見于凝血因子缺乏，如血友病A、血友病B等；APTT縮短可見于血栓前狀態和血栓性疾病。血漿凝血酶原時間（PT）測定是外源性凝血系統的篩選試驗。在受檢血漿中加入組織凝血活酶和鈣離子，觀察血漿凝固所需的時間。參考值為11-13秒。PT延長常見于先天性凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ缺乏及維生素K缺乏等；PT縮短可見于血液高凝狀態。纖維蛋白原測定常用凝血酶法，在受檢血漿中加入凝血酶，使纖維蛋白原轉變為纖維蛋白，根據凝固時間計算纖維蛋白原含量。參考值為2-4g/L。纖維蛋白原降低常見于先天性纖維蛋白原缺乏癥、彌散性血管內凝血等；纖維蛋白原升高可見于急性感染、急性心肌梗死等。凝血酶時間（TT）測定在受檢血漿中加入標準化的凝血酶溶液，觀察血漿凝固所需的時間。參考值為16-18秒。TT延長常見于肝素增多或類肝素物質存在、纖維蛋白原降解產物增多等。常見血液學疾病的檢驗診斷缺鐵性貧血是由于體內鐵缺乏導致血紅蛋白合成減少而引起的貧血。檢驗特點為：血常規表現為小細胞低色素性貧血，MCV、MCH、MCHC均降低；血清鐵降低，總鐵結合力升高，轉鐵蛋白飽和度降低；血清鐵蛋白降低，是診斷缺鐵性貧血的敏感指標；骨髓象表現為增生活躍，以中、晚幼紅細胞增生為主，鐵染色顯示細胞外鐵消失，細胞內鐵減少。巨幼細胞貧血是由于缺乏維生素B??或（和）葉酸導致DNA合成障礙而引起的貧血。檢驗特點為：血常規表現為大細胞性貧血，MCV升高，MCH升高，MCHC正常；血清維生素B??和葉酸水平降低；骨髓象表現為增生活躍，以紅系增生為主，可見巨幼紅細胞，巨幼紅細胞的特點是細胞體積增大，核染色質疏松，呈細網狀。再生障礙性貧血是一種由于多種原因引起的骨髓造血功能衰竭癥。檢驗特點為：血常規表現為全血細胞減少，網織紅細胞絕對值減少；骨髓象表現為多部位骨髓增生減低或重度減低，造血細胞減少，非造血細胞增多。白血病是一類造血干細胞的惡性克隆性疾病。根據白血病細胞的分化程度和自然病程，可分為急性白血病和慢性白血病。急性白血病的檢驗特點為：血常規表現為白細胞計數可升高、正常或降低，可見原始和幼稚細胞；骨髓象表現為骨髓增生極度活躍或明顯活躍，原始細胞占非紅系細胞的30%以上。慢性白血病的檢驗特點為：慢性粒細胞白血病血常規表現為白細胞計數顯著升高，以中性中幼粒、晚幼粒和桿狀核粒細胞增多為主，可見嗜酸、嗜堿性粒細胞增多；骨髓象表現為骨髓增生極度活躍，以粒細胞系增生為主，中、晚幼粒細胞增多明顯。慢性淋巴細胞白血病血常規表現為白細胞計數升高，以成熟淋巴細胞增多為主；骨髓象表現為骨髓增生明顯活躍或極度活躍，淋巴細胞比例≥40%，以成熟淋巴細胞為主。臨床血液學檢驗相關習題1.成人靜脈采血時，常用的采血部位是（）A.手背靜脈B.肘部靜脈C.內踝靜脈D.股靜脈答案：B2.血常規檢驗常用的抗凝劑是（）A.枸櫞酸鈉B.肝素C.草酸鹽D.EDTA鹽答案：D3.正常男性紅細胞計數的參考值是（）A.（3.5-5.0）×1012/LB.（4.0-5.5）×1012/LC.（5.0-6.0）×1012/LD.（6.0-7.0）×1012/L答案：B4.氰化高鐵血紅蛋白法測定血紅蛋白時，血紅蛋白被氧化為（）A.高鐵血紅蛋白B.氧合血紅蛋白C.碳氧血紅蛋白D.硫化血紅蛋白答案：A5.血細胞比容是指（）A.一定體積的全血中紅細胞所占的百分比B.一定體積的全血中白細胞所占的百分比C.一定體積的全血中血小板所占的百分比D.一定體積的全血中血漿所占的百分比答案：A6.計算平均紅細胞容積（MCV）的公式是（）A.MCV（fl）=每升血液中紅細胞比容/每升血液中紅細胞數×101?B.MCV（fl）=每升血液中血紅蛋白含量/每升血液中紅細胞數×1012C.MCV（fl）=每升血液中血紅蛋白含量/每升血液中紅細胞比容D.MCV（fl）=每升血液中紅細胞數/每升血液中紅細胞比容×101?答案：A7.缺鐵性貧血時，紅細胞的形態特點是（）A.正細胞正色素性B.小細胞低色素性C.大細胞性D.巨幼細胞性答案：B8.正常成人白細胞計數的參考值是（）A.（4-10）×10?/LB.（5-12）×10?/LC.（10-20）×10?/LD.（20-30）×10?/L答案：A9.中性粒細胞增多常見于（）A.病毒感染B.寄生蟲感染C.急性感染D.過敏性疾病答案：C10.淋巴細胞增多常見于（）A.急性感染B.病毒感染C.嚴重組織損傷D.急性失血答案：B11.嗜酸性粒細胞增多常見于（）A.病毒感染B.細菌感染C.過敏性疾病D.白血病答案：C12.核左移是指（）A.外周血中桿狀核粒細胞增多或出現晚幼粒、中幼粒、早幼粒等細胞B.外周血中核分葉過多的中性粒細胞增多C.外周血中淋巴細胞增多D.外周血中單核細胞增多答案：A13.正常血小板計數的參考值是（）A.（50-100）×10?/LB.（100-300）×10?/LC.（300-500）×10?/LD.（500-1000）×10?/L答案：B14.血小板減少常見于（）A.原發性血小板增多癥B.特發性血小板減少性紫癜C.急性感染D.出血后答案：B15.血小板聚集功能測定常用的誘導劑是（）A.ADPB.肝素C.枸櫞酸鈉D.草酸鹽答案：A16.ABO血型系統中，A型血紅細胞表面有（）A.A抗原B.B抗原C.A抗原和B抗原D.無A抗原和B抗原答案：A17.ABO血型系統中，O型血血清中有（）A.抗A抗體B.抗B抗體C.抗A和抗B抗體D.無抗A和抗B抗體答案：C18.Rh血型系統中，Rh陽性是指紅細胞表面含有（）A.D抗原B.C抗原C.c抗原D.E抗原答案：A19.交叉配血試驗中，主側配血是指（）A.將供血者的紅細胞與受血者的血清混合B.將受血者的紅細胞與供血者的血清混合C.將供血者的血清與受血者的血清混合D.將供血者的紅細胞與受血者的紅細胞混合答案：A20.活化部分凝血活酶時間（APTT）測定是檢測（）A.內源性凝血系統B.外源性凝血系統C.共同凝血系統D.纖溶系統答案：A21.血漿凝血酶原時間（PT）測定是檢測（）A.內源性凝血系統B.外源性凝血系統C.共同凝血系統D.纖溶系統答案：B22.纖維蛋白原測定常用的方法是（）A.比色法B.免疫法C.凝血酶法D.電泳法答案：C23.凝血酶時間（TT）延長常見于（）A.凝血因子缺乏B.血液高凝狀態C.肝素增多或類肝素物質存在D.維生素K缺乏答案：C24.缺鐵性貧血時，血清鐵（）A.升高B.降低C.正常D.先升高后降低答案：B25.缺鐵性貧血時，總鐵結合力（）A.升高B.降低C.正常D.先升高后降低答案：A26.巨幼細胞貧血時，血清維生素B??水平（）A.升高B.降低C.正常D.先升高后降低答案：B27.再生障礙性貧血的血常規表現為（）A.全血細胞減少B.白細胞增多C.紅細胞增多D.血小板增多答案：A28.急性白血病的骨髓象表現為（）A.骨髓增生減低B.骨髓增生極度活躍或明顯活躍，原始細胞占非紅系細胞的30%以上C.骨髓增生正常D.骨髓增生明顯活躍，以中、晚幼粒細胞增多為主答案：B29.慢性粒細胞白血病的血常規表現為（）A.白細胞計數顯著升高，以中性中幼粒、晚幼粒和桿狀核粒細胞增多為主，可見嗜酸、嗜堿性粒細胞增多B.白細胞計數正常，以淋巴細胞增多為主C.白細胞計數降低，以單核細胞增多為主D.白細胞計數升高，以原始細胞增多為主答案：A30.慢性淋巴細胞白血病的骨髓象表現為（）A.骨髓增生減低B.骨髓增生極度活躍或明顯活躍，淋巴細胞比例≥40%，以成熟淋巴細胞為主C.骨髓增生正常D.骨髓增生明顯活躍，以中、晚幼粒細胞增多為主答案：B31.成人靜脈采血時，止血帶應系在采血部位上方約（）A.3-5cmB.5-7cmC.7-9cmD.9-11cm答案：B32.毛細血管采血法常用的部位是（）A.手指B.耳垂C.足跟D.以上都是答案：D33.以下哪種抗凝劑不適合用于凝血功能檢查（）A.枸櫞酸鈉B.肝素C.EDTA鹽D.草酸鹽答案：C34.紅細胞計數時，稀釋液的作用是（）A.固定紅細胞B.破壞白細胞C.調節滲透壓D.以上都是答案：D35.血紅蛋白測定時，比色波長一般選擇（）A.500nmB.540nmC.570nmD.600nm答案：B36.血細胞比容測定時，離心速度和時間一般為（）A.2000r/min，10分鐘B.3000r/min，15分鐘C.4000r/min，20分鐘D.5000r/min，25分鐘答案：B37.平均紅細胞血紅蛋白濃度（MCHC）的參考值是（）A.200-300g/LB.300-350g/LC.350-400g/LD.400-450g/L答案：B38.小紅細胞的直徑小于（）A.6μmB.8μmC.10μmD.12μm答案：A39.球形紅細胞常見于（）A.缺鐵性貧血B.巨幼細胞貧血C.遺傳性球形細胞增多癥D.再生障礙性貧血答案：C40.嗜堿性點彩紅細胞可見于（）A.缺鐵性貧血B.巨幼細胞貧血C.鉛中毒D.再生障礙性貧血答案：C41.白細胞分類計數時，應計數的白細胞數量一般為（）A.100個B.200個C.300個D.400個答案：A42.正常中性粒細胞核分葉一般為（）A.1-2葉B.2-5葉C.5-7葉D.7-9葉答案：B43.淋巴細胞的直徑一般為（）A.6-9μmB.9-12μmC.12-15μmD.15-18μm答案：A44.單核細胞的核形態一般為（）A.圓形B.橢圓形C.腎形、馬蹄形或不規則形D.分葉狀答案：C45.嗜酸性粒細胞的胞質內含有（）A.粗大、均勻的嗜酸性顆粒B.細小、均勻的嗜酸性顆粒C.粗大、不均勻的嗜酸性顆粒D.細小、不均勻的嗜酸性顆粒答案：A46.嗜堿性粒細胞的胞質內含有（）A.粗大、均勻的嗜堿性顆粒B.細小、均勻的嗜堿性顆粒C.粗大、不均勻的嗜堿性顆粒D.細小、不均勻的嗜堿性顆粒答案：C47.血小板衛星現象常見于（）A.血小板增多癥B.血小板減少癥C.某些藥物影響D.感染答案：C48.ABO血型鑒定時，正定型是用（）A.已知的抗A和抗B血清與受檢者紅細胞反應B.已知的A型和B型紅細胞與受檢者血清反應C.已知的抗A和抗B血清與受檢者血清反應D.已知的A型和B型紅細胞與受檢者紅細胞反應答案：A49.Rh血型鑒定常用的