微生物試驗課試題庫及原則答案

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名詞解釋

29

試題涵蓋了《微生物學》各章節有關試驗技術的內容，以及沈萍、范秀容等編《微生物學試

驗》第三版試驗指導書的內容。

選擇題40判斷題59填空題70思索題13總數211

微生物試驗技術名詞解釋

01.電子顯微鏡：電子顯微鏡是運用甩子波波長短,辨別力高的特點以電子流替代光學顯微鏡

的光束使物體放大成象的超顯微鏡檢裝置。

02.一般光學顯微鏡：用自然光或者燈光作光源鏡檢物體的顯微鏡。

03.合成培養基：由化學成分已知的營養物質配制而成的培養基。

04.人工培養基：人工配制的供微生物生長繁殖并積累代謝產物的一種營養基質。

05.天然培養基：由化學成分不完全清晰的天然物質如馬鈴薯,秋皮等配制而成的培養基。

06.半合成培養基：由化學成分已知的化學物質和化學成分不完全清晰的天然物質配制而成

的培養基。

07.革蘭氏染色法。：革蘭氏染色是細菌的?種鑒別染色法，細菌首先用結晶紫染色，再用碘液

固定,然后用95%的酒精脫色，最終用蕃紅復染。但凡菌體初染的結晶紫被酒精脫去了紫色后,

又被蕃紅復染成紅色的細菌稱為革蘭氏負反應細菌；但凡菌體初染的紫色不能被酒精脫色,

也不能被蕃紅復染成紅色的細菌稱為革蘭氏正反應細菌.

08.簡樸染色：用單一染料使微生物細胞染上所用染料顏色的染色措施。

09.稀釋平板計數法：將一定量的樣品經十倍稀釋后，用平板培養最終三個稀釋度的樣品稀釋

液。待菌落長出后，計數出某一稀樣度的菌落數后再乘以稀釋倍數，即為樣品中的含菌數。

10.顯微直接計：運用血球計數板或細菌計數板在顯微鏡下測計出每小格的微生物細胞數量

后，再換算出單位體積中微生物細胞總數的測數措施。

11.巴氏消毒：巴氏消毒是法國微生物學家巴斯德發明的一種消毒措施。是在62-63℃的條件

下，保溫半小時殺死微生物的營養體（重要是病原菌）的措施。

12.間歇滅菌：運用100C的溫度殺死微生物的營養體.每次1小時持續三天，中間的空隙時間

讓未殺死的芽胞萌發成營養體，在下一次100C的溫度下被殺死。如此反復兩次可將培養基的

微生物（包括芽胞）所有殺死。該措施合用于沒有高壓滅菌器的地方進行滅菌處理。1

13.消毒:只殺死微生物的營養體（重要是病原菌），而不能殺死微生物的芽胞的除菌措施。

14.滅菌:運用物理或化學措施殺死所有微生物包括細菌的芽胞的除菌措施稱為滅菌。

15.過濾除菌:運用一定孔徑的濾膜制止微生物的通過而除去溶液中或者空氣中微生物的除菌

措施。

16.濕熱滅菌:運用熱的蒸汽殺死微生物的滅菌措施。濕熱滅菌又分常壓蒸汽滅菌和加壓蒸汽

滅菌

17.干熱滅菌:運用干熱空氣殺死微生物的措施。其滅菌工藝條件一般為160-170℃〃h。

18.選擇培養基:根據使用的目的，控制培養基的構成成分,使之有助于某種微生物的生長而限

制其他微生物的生長，從而能從自然界混雜的群體中分離出某一種單一的微生物。如無氮培

養基用來分離土壤中的自生固氮菌。

19加富培養基:在基本培養基中加入血清,動植物組織液或者其他生長因子而配制出來的營

養尤其豐富的培養基。

20.鑒別培養基:根據微生物的代謝特點，通過指示劑的顯色反應,用以鑒別不一樣微生物的培

養

21.數值孔徑:數值孔徑是判斷物鏡和聚光鏡性能的重要指標,一般用N.A表達：

N.A=n.sin(n為介質折光率,a為鏡口角)。

22.辨別力:辨別力是指顯微鏡可以辨別出的物體兩點間最小距離的能力。它與波長及物鏡的

數值孔徑有關。

23.超凈工作臺:運用過濾除菌的原理而設計出來的一種無菌操作工作臺，鼓風機鼓出的空氣

通過孔徑很小的薄膜將空氣中的微生物過濾后變成無菌空氣吹向操作臺，可防止周圍有菌空

氣流入，能保證操作臺一直保持無菌狀態，便于無菌操作。

24.純培養技術:純培養技術是培養某個單一微生物的措施。包括培養基的制作與滅菌。單一

微生物的分離與純化，和無菌操作接種技術。

25.焦深；焦深是指清晰的目的象的上面和下面所看見的物象之間的距離。它與放大倍數成

反比，即放大倍數越大，焦深越小。

26.暗視野顯微術:運用暗視野聚光器能制止光線直接照射標本，而使光線斜射在標本上。在顯

微鏡中見到黑暗視野中明亮物象的鏡檢技術。

27.熒光顯微術:紫外光作光源的顯微鏡檢技術。

28.負相差:在黑暗視野中看到明亮物體的相差鏡檢技術。

29.正相差:在明亮視野中看到黑暗物體的相差鏡檢技術。

試驗技術選擇題

01.革蘭氏染色的關鍵操作環節是：

A.結晶紫染色。B.碘液固定。C.酒精脫色。D.復染。答:(C)

02.放線菌印片染色的關鍵操作是：

A.印片時不能移動。B.染色。C.染色后不能吸干。D.A-Co答:(A)。

03.高氏培養基用來培養：

A.細菌。B.真菌。C.放線菌。答乂Q。

04.肉湯培養基用來培養：

A.酵母菌。B.霉菌。C.細菌。答:(0。

05.無氮培養基用來培養：

A.自生固氮菌。B.硅酸鹽細菌。C.根瘤菌。D.A,B均可培養。E.A,B,C均可培養。答:①)。

06.在使用顯微鏡油鏡時，為/提高辨別力，一般在鏡頭和蓋玻片之間滴加：

A.二甲苯。B.水。C.香柏油。答:(C)。

07.常用的消毒酒精濃度為：

A.75%oB.50%oC.90%o答:(A)。

08.用甲醛進行空氣熏蒸消毒的用量是：

A.20ml/M3oB.6ml/M3oC.lml/M3o答:(B)。

09.高壓蒸汽滅菌的工藝條件是：

A.121℃/30minoB.115℃歸Omin。C.130℃/50min<,答:(A)。

10.巴氏消毒的工藝條件是：

A.62-63℃^0minoB.71-72℃/15min<>CAB.均可。答:(C)。

11.半固體培養基的重要用途是：

A.檢查細菌的運動性。B.檢查細菌的好氧性。C.AB兩項。答:(C)。

12.半固體培養基的瓊脂加入量一般是：

A.l%。B.0.5%。C.0.1%o答:⑻。

13.使用手提式滅菌鍋滅菌的關鍵操作是：

A.排冷氣徹底。B.保溫時間合適。C.滅菌完后排氣不能太快。D.A-Co答乂A)。

14.目鏡頭上的,K'字母表達：

A.廣視野目鏡。B.惠更斯目鏡。C.賠償目鏡。答:(C).

15.目鏡頭上的叩”字母表達：

A.平場目鏡。B.廣視野目鏡。C.平場賠償目鏡。答MA)。

16.物鏡頭上的叩L”字母表達：

A.正低相差物鏡。B.正高相差物鏡。C.負高相差物鏡。答:(A)。

”.物鏡頭上的"UVL”字母表達。

A.無熒光物鏡。B.攝影物鏡。C.相差物鏡。答:(C).

18.鏡頭上標有“對C”字母的鏡頭是：

A.相差調整望遠鏡。B.攝影目鏡。C.相差目鏡。答:(A)。

19.”PA"表達:

A.馬鈴薯培養基。B.高氏培養基。C.肉湯培養基。答:(A)。

20.無菌室空氣滅菌常用措施是：

A.甲醛熏蒸。B.紫外燈照射。C.噴石炭酸。D.AB并用。答:①)。

21.干熱滅菌的關鍵操作是：

A.滅菌物不能有水。B.保溫過程中不能開箱門。C.降溫不能太快。答:(A).

22.霉菌水浸制片的關鍵操作足：

A.菌絲要分散。B.菌絲首先要用50%的乙醉浸潤。C.蓋蓋玻片不能有氣泡。D.A-Co答公)

23.用來染芽胞的染料一般是：

A.孔雀綠。B.結晶紫。C.復紅。D.番紅。答:(A)。

24.復紅法染鞭毛的關鍵操作是：

A玻片潔凈。B.染料新鮮。C.菌體活化合適。D.A.B.Co答:(B)。

25.鍍銀法染鞭毛的關鍵操作是：

A.玻片潔凈。B.染料無沉淀。C.加熱合適。D.菌體活化合適。E.A-Do答:(A)。

26.進行簡樸染色使用的柒色液一般是：

A.復紅。B.蕃紅。C.結晶紫。D.孔雀綠。E.A-D均可。答:網。

27物鏡頭上的“APO”字母代表：

A.消色差物鏡。B.復消色差物鏡。C.半消色差物鏡。答:(B)。

28.物鏡頭上的“Ach”字母表達：

A.平場物鏡。B.超平場物鏡。C.消色差物鏡。答XA)。

29.物鏡頭上的“NH”字母表達：

A.正相差物鏡。B.負相差物鏡。C.負高相差物鏡。答:(C)。

30.物鏡頭上的“0.17”表達：

A.規定的蓋玻片厚度。B.規定的載玻片厚度。C.鏡頭浸油的深度。答:(A)。

31.鏡頭上標有“NK”字母的鏡頭是：

A.攝影目鏡。B.熒光目鏡。C.相差目鏡。答:(A)。

32.目鏡頭上的“PK”字母表達：

A.平場目鏡。B.賠償目鏡。C.平場賠償目鏡。答:(C)。

33.物鏡頭上的“Splan”字母表達：

A.超平場物鏡。B.平場物鏡。C.消色差物鏡。答:(A)

34.物鏡頭上的“SplanApo”表達：

A.超平場復消色差物鏡。B.超平場半消色差物鏡。C.超平場物鏡。答:(A)。

35.物鏡頭上的"Planap。”表達：

A.超平場物鏡。B.平場物鏡。C.平場復消色差物鏡。答:⑹。

36.物鏡頭上的,'Plan”字母表達：

A.平場物鏡。B.消色差物鏡。C.超平場物鏡。答:（A）。

37.目鏡頭上的字母表達：

A.廣視野高眼點賠償目鏡，B.高眼點目鏡。C.廣視野目鏡。答:（C）。

38.目鏡頭上的“SWK”字母表達：

A.超廣視野目鏡。B.高眼點賠償目鏡。C.平場賠償目鏡。答小）。

39.@鏡頭上的"WHK”字母表達：

A.超廣視野目鏡。B.廣視野高眼點目鏡。C.平場賠償目鏡。答:（B）.

40.物鏡頭上的“錯.L”字母表達：

A.消色差物鏡。B.半消色差物鏡。C.復消色差物鏡。答:（B）。

試驗技術判斷題

01.無菌吸管上端塞入棉花是為了過濾口中的有菌空氣。答:（對）。

02.無菌吸管上端塞入棉花的目的是為了防止菌液吸入口中。答:（錯）。

03.稀釋平板測數時,放線菌計數的原則是選擇每皿中菌落數在30-300個之間的稀釋度進行

計數。答乂對）。

04.稀釋平板測數時，細菌計數的原則是選擇每皿中菌落數在30-300個之間的稀釋度進行計

數。答：（對）。

05.稀釋平板測數時，細菌，放線菌滇菌的計數原則是選擇每皿中菌落數在30-300個的稚釋度

進行計數。答:（錯）。

06.稀釋平板測數時，真菌的計數原則是選擇每皿中菌落數在10-100個的稀釋度進行計數。

答：（對）。

07.稀釋平板測數時,細菌、放線菌、真菌的計數原則是選擇每皿中菌落數在10-100個的稀釋

度進行計數。答：（錯）。

08.用混菌法測微生物活菌數時,每個平皿中的菌液加入量是1ml。答:（對）。

09.用涂抹法測微生物活菌數時,每個平皿中的菌液加入量是0.1ml。答:（對）。

10.用油鏡鏡檢時應將聚光器升至最高。答乂對）。

11.使用高倍鏡時，可將聚光器升至最高。答：（錯）。

12.為了滿足微生物對微量元素的需要，配制培養基所用的水最佳使用自來水。答乂對）。

13.稀釋測數用的無菌水一般是由自來水滅菌而成。答:（對）。

14.觀測根霉，青霉只需用低倍鏡觀測即可。答乂錯）。

15.試驗室一般使用血球計數板測微生物的總菌數。答:（錯）。

16.浸油的油鏡頭可用軟的衛生紙擦凈。答:（錯）。

17.為了節省時間,可直接在染色涂片上滴加香柏油后，直接用油鏡觀測。答:（錯）。

18.使用油鏡的對的操作環節是：

1.低倍鏡觀測。2.高倍鏡觀測。3.轉出高倍鏡頭，滴加香柏油后用油鏡觀測.答:（對）。

19.在擦拭顯微鏡鏡頭時,應向一種方向擦拭。答乂對）。

20.顯微鏡鏡頭的放大倍數越大,它的數值孔徑值越大，其鏡口角也越大。答:（對）。

21.稀糅平板測數一般是采用十倍稀釋法。答:（對）。

22.稀釋平板測數?般采用的是二倍稀釋法。答:（錯）。

23.做稀釋平板測數時，只需一支吸管從頭稀釋到尾即可。答:（錯）。

24.做稀釋平板測數時，每做一種稀釋度都必須更換一支無菌吸管。答乂對）。

25.稀釋平板測數時，無論是用混菌法,還是用涂抹法，每個平皿中的菌液加入量都是lmlo

答:（錯）。

26.稀釋平板測數時，無論是用混菌法,還是用涂抹法，每個平皿中的菌液加入量都是0.1ml。

答：（錯）。

27.試驗室做固體培養基時，常加1.8%的瓊脂作凝固劑，做半固體培養基時，瓊脂加入量一般是

05%。答:（對）。

28.試驗室做固體培養基，常加2%的瓊脂作凝固劑，做半固體培養基時，瓊脂加入量一般是1%。

答乂錯）。

29,E.coli經革蘭氏染色后，菌體呈紅色，它是革蘭氏正反應細菌。答:（錯）。

30.在光學顯微鏡下，根霉的泡子囊是透明的。答乂錯）。

3L使用手提滅菌鍋滅菌后，為了盡快排除鍋內蒸汽，可直接打開排氣閥排氣.答乂錯）。

32.蘇云金桿菌的芽胞在菌體的中央。答:（錯）。

33.所有真菌菌落的表面干燥，呈絨毛狀。答:（錯）。

34.所有放線菌菌落表面干燥，呈粉粒狀。答:（錯）。

35.所有細菌菌落的表面都是光滑濕潤狀。答:（錯）。（芽胞菌菌落表面粗糙。）。

36.鏡臺測微尺每小格的實際長度是10微米。答乂對）。

37.目鏡測微尺每小格的實際長度是10um。答:（錯）。

38.鏡臺測微尺每小格的實際長度是10nm（納米）。答:（錯）。

39.血球計數板兩邊的平臺比計數區高0.1cm。答:（錯）。

40.血球計數板兩邊的平臺比計數區高0.1mm。答:（對）。

41.棉花塞塞入試管的長度應為棉塞全長的羽。答:（對）。

42.棉花塞塞入試管的長度應為棉塞全長的g答乂錯）。

43.挖斜面的長度應不超過試管長度的明。答:（錯）。

44.擺斜面的長度應不超過試管長度的皿。答:（對）。

45.血球計數板計數區的面積是lmm2。答乂對）。

46用血球計數板計數時，仁數5個大方格（80個小格）的菌數即可。答乂錯）。

47.在使用細菌計數板計數時，為了防止計數偏大，計數M四面壓線的菌只能數兩邊。答:（對）。

48.目鏡測微尺每格的實際長度是未知的,需用長度已知的鏡臺測微尺校正。答:（對）。

49.測微生物的細胞大小時，需要校正的是鏡臺測微尺每格的實際長度。答:（錯）.

50.測微生物細胞大小時，需要校正的是目鏡測微尺每格的實際長度。答:（對）。

5L血球計數板計數區每小格的體積是1/I000mm3o答乂對）。

52.血球計數板計數區共有400個小格，每小格的面積是1^00cm2o答乂錯）。

53.用分裝器將培養基分裝試管時，應謹防培養基沾染試管口。答:（對）。

54.瓊脂的熔化溫度是90℃以上，凝固溫度是45c如下。答:（錯）。

55.瓊脂的熔化溫度是95℃以上，凝固溫度是45℃如下。答乂對）。

56.玻璃器材洗凈后在急需時可采用高壓蒸汽滅菌，而不能用干熱滅菌。答:（對）。

57.細菌計數板每小格的體積是Wmm3o答:（對）。

58.血球計數板計數區每小格的體積是l/4000cm3o答:（錯）。

59.無菌室用甲醛熏蒸消毒后可噴氨水以減少甲醛的刺激。答:（對）。

試驗技術填空題

01.霉菌水浸片的制片程序是加?滴水于載玻片中央，用解剖針挑取菌絲少許，將菌絲用50%

的酒精浸潤,將菌絲用蒸館水水洗，將菌絲放入載玻片水滴中并小心分散,蓋上蓋玻片。

02.放線菌印片染色的操作程序是印片，干爆固定，復紅染色2-3分鐘，水洗，晾干。

03.固體培養基常用洋菜（瓊脂）作凝固劑，一般固體培養基的用量一般為1.5-2.0%一半固體培養

基的用量一般為0.5%_。

04.簡樸染色的操作程序是涂片，干燥，固定，復紅染色1-2分鐘，水洗，晾干。

05.使用手提式滅菌鍋進行滅菌的操作程序是一鍋內加水，滅菌物體裝鍋，對稱上緊密封螺帽

將鍋密封上，加熱升溫，排盡鍋內冷空氣,升溫至滅菌工藝條件（--般為98kpa）,在工藝條件下保

壓計時（一般為30分鐘），屆時間后切斷熱源，降溫，出鍋。

06.試驗室配制固體培養基的操作程序是照配方稱取藥物，將藥物溶解在一定量的水中后加

熱煮沸，將瓊脂按量稱取后用水浸濕,將浸濕的瓊脂加入煮沸的營養液中，待瓊脂所有融化后

調整pH值，補充損失的水分，分裝培養基入不一樣的容器中。

07.有莢膜的細菌用負染色法染色后，莢膜為無色，菌體為_紅色.

08.細菌經革蘭氏染色后，革蘭氏正反應菌呈_紫色，革蘭氏負反應菌呈_紅色。

09.細菌經簡樸染色后呈—所染染料的顏色

10.顯微鏡的光學系統由_反光鏡，聚光鏡，物鏡」和目鏡構成。

11.顯微鏡的機械部分包括一鏡座，鏡臂，載物臺,轉換器，鏡筒，推進器，粗動螺旋,微動螺旋聚光

鏡升降螺旋。等九部分構成。

12.高氏培養基一般用來培養_放線菌，其pH值為_7.5-8.0_。

13.PA培養基一般用來培養真菌_菌，其pH值為5-6_o

14.牛肉膏、蛋白陳培養基一般用來培養一細菌，其pH值為_、7.0-7.2_。

15.無氮培養基一般用來培養自生固氮菌。其氮源來自一空氣中的N2_o

1GT熱滅菌的工藝條件是lG0-170℃/2h_o

17.使用顯微鏡低倍鏡觀測時，聚光器應當減少，使用顯微鏡高倍鏡觀測時，聚光器應當合適升

局O

18.革蘭氏染色的關鍵操作是酒精脫色_。

19.顯微鏡的倍數越大，焦淡越小，調焦應當越小心

20.按培養基的形態，可將培養基分為液體-固體一半固體一三種類型。

21.配制常規培養基時一般用一自來—水。

22.熱滅菌一般用來滅菌玻璃器材，培養基的滅菌一般用—高壓蒸汽滅菌。

23.細菌稀釋測數?般采用10倍—稀釋法,稀釋用試管無菌水為9_亳升。

24.配制培養基時常用」molNaOH、和ImolHCL調整pH值。

25.按培養基的特殊用途，可將培養基提成—選擇培養基，加富培養基，鑒別培養基等。

26.選擇培養基可用來分離培養我們所需的特殊微生物類群，例如我們要從土壤中分離纖維分

解菌，可以運用一纖維素_作唯一碳源來篩選纖維分—解菌要分禽產蛋白酶的微生物可以

運用酪蛋白，作唯一氮源分離—蛋白分解菌一

27.革蘭氏染色的操作程序是涂片，干燥，固定，結晶紫染色1分鐘，水洗，碘液媒染1分鐘，水

洗,95%的乙醇脫色25秒冰洗，蕃紅復染3-5分鐘冰洗，晾干

28.培養基是人工配制的適合不一樣微生物生長繁殖或積累代謝產物的營養基質。按營養物

質的不一樣來源可分為一天然培養基，合成培養基，半合成培養基_三大類。

29.高倍鏡頭的數值孔徑一般為_0.65〃放大倍數為_40x_<

30.油鏡頭的數值孔徑一般為」.25,放大倍數為」00x或90x_o

31.低倍鏡頭的數值孔徑一般是0.25一放大倍數為_10x或8x_。

32.穿刺接種使用的接種工具為_接種針，斜面接種使用的接種工具為接種環

33.進行稀釋測數使用的重要器材有_酒精燈,1ml無菌吸管,9ml試管裝無菌水,9cm的無菌平

板

34.用孔雀綠和復紅作細菌芽胞染色時，可使菌體呈紅色，使芽胞呈一綠色。

35.用日光燈作光源時，一般用一平面反光鏡，用自然光作光源時，一般用凹面_反光鏡

36.無菌室殺菌一般采用紫外燈照射，和噴灑化學藥劑（如酚）相結合的措施。

37.半固體培養基一般用來檢杳一細菌的運動性。

38.擺試管斜面的基本操作措施是將擺斜面用特制木條放在桌面上，將裝有固體培養基的試管

趁熱放在特制木條上擺成斜面，斜面長度不得超過試管長度的皿，將試管棉塞部分用滅菌報

紙蓋上，以防空氣中微生物落到棉塞上引起污染。

39不能加熱滅菌的液體培養基應采用濾法除菌，一般用的器皿有蔡氏細菌過濾濾和膜濾一。

40.藍細菌的培養可用膜濾一培養基.

41.分離?酵母菌時為了克制細菌的生長,一般用—膜培養基。

42.從土壤中分離真菌時，一般在培養基中加入一孟加拉國國紅和—鏈霉素顯—克制細菌的生長。

43.測微生物的大小使用的重要工具是微鏡，鏡臺測微尺和一目鏡測微尺。

44.測微生物的數量使用的重要工具是—顯微鏡和血球計數板一

45.進行細菌的顯微計數時使用的重要工具是顯微鏡和細菌計數板」

46.一般光學顯微鏡測酵母菌的大小的操作程序是將鏡臺測微尺置載物臺匕調焦找到臺尺,

在低倍鏡下校正目鏡測微尺每格的長，在高倍鏡下校正目鏡測微尺每格的長，去掉臺尺換上待

測樣本片，在高倍鏡下測出十個酵母菌寬和長的格數,將校正值乘入，算出十個酵母菌的平均

寬和平均長，以平均寬X*平均長Y（Hm）表達酹母菌的大小。

47.顯微計數的操作程序是—將待測菌進行合適的稀釋，將計數板置于載物臺上,在低倍鏡下找

到計數區，將菌液加到計數區上,調焦看到菌體，按五點取樣法計數五個大方格的菌數,計算每

小格的含菌數，計算出單位體積（如每ml）中的含菌數。

48.莢膜染色法的操作程序是—涂片，風干，加復紅染色3-5分鐘，水洗，晾干，加墨素涂抹，風干。

49.芽胞染色的操作程序是片，干燥，固定，

孔雀綠加熱染色15分鐘，水洗，復紅染色2-3分鐘，

水洗，

晾干。

50.芽胞染色的關鍵操作是孔雀綠加熱染色一

51.放線菌印片染色的關鍵操作是一印片時不能移動

52.用負染色法染莢膜的關鍵操作是一涂抹墨素要薄。

53.搖床振蕩培養一般用來培養—好氣微生物，亨格特的厭氧操作措施一般用來培養專性厭氧

菌

54.革蘭氏染色反應與細菌細胞壁的—構造_和_構成一有關。在革蘭氏染色過程中，當用95%

酒精處理后,就放在顯微鏡下觀測，革蘭氏陽性菌呈_紫_色，而革蘭氏陰性菌呈_無色。

55.血球計數板與細菌計數板的重要差異是前者計數區的深度是后者的五倍

56.制霉菌水浸片時加棉蘭染色液可使菌體呈—淺蘭色。

57.Anabaenaazo對ica的異型胞?般是_間生在光學顯微鏡下它是—透明的，細胞兩端有極節一

它能控制氧氣的進入，保持異型胞內一低氧分壓，以利于固定分子氮

58.配制培養基時，應注意多種營養物質的配比,尤其是C:N比（碳氮比）。一般而言，當CM5:1

時,有助于一菌體生長；當C:ND5:1時，有助于—積累代謝產物。

59.由于多種微生物對某種化合物如抗生素、染料的敏感性不一樣，可以運用這一特性來從土

壤中分離出不一樣類群的微生物。如在培養基中加入青霉素（鏈霉素），會殺死或克制細菌和放

線菌的生長而分離出真菌_；在培養基中加入一結晶紫一，有助于分離到革蘭氏陰性菌.

60.細菌在革蘭氏染色過程中，最終用蕃紅復染的原因是G-細菌經結晶紫染色、碘液媒染、

酒精脫色后菌體紫色脫去，故需用蕃紅復染，這樣在光鏡下才能見到紅色的菌體。

61.高倍鏡下能看到的物象在油鏡下看不到往往是由于一片置反和—菌體著色太淺引起。

62.微生物在培養基中生長時，由于其—新陳代謝而使培養基_pH值發生變化；因此在配制培養

基時，為維持該條件的相對恒定，常在培養基中加入緩沖物質如—碳酸鹽心83）_或_磷酸鹽

63.一般而言，微生物在含糖基質上生長，會產_酸_，而使_pH下降」微生物分解蛋白質或氨基

酸會產_堿-而使_pH上升.

64.在微生物培養過程中使用的培養皿首先是被_Petri采用的，因此又稱培養皿為_Petri_dish。

Hesse在其妻子的啟發下，洛固體培養基使用的凝固劑由明膠改為—瓊脂

65.顯微鏡的微動螺旋每轉一圈升降距離為_0.1亳米

66.兩個經典的革蘭氏正反應細菌和革蘭氏負反應細菌經革蘭氏染色后都呈陰性反應往往是

由于J酉精脫色時間過長和—菌體培養時間太長引起。

67.檢查乳品和飲料與否具有—大腸桿菌(E.ColiL等腸道細菌，可采用—伊紅-美蘭一培養基，在這

種培養基平板上一大腸桿菌(E.Coli)_會形成具有一金屬—光澤的紫黑色小菌落。

68.細菌鞭毛經鍍銀法染色后呈_褐_色。

69.細菌鞭毛經李夫森法染色后呈一紅色。

70.由于升汞(HgCL2)有腐蝕作用,因此不能用于金屬器皿消毒，尤其是—鋁制品。

試驗技術思索題

01.試述在一般光學顯微鏡下測定微生物細胞大小的基本措施。

測定微生物細胞的大小重要使用目鏡測微尺。其措施如下：

1.先用長度已知的鏡臺測微尺校正目鏡測微尺。校正的措施是讓臺尺與目尺重疊，看臺尺的X

格恰好與日尺的Y格重疊，然后用計算日尺每格的長.分別校正日鏡測微尺在低倍鏡，高倍鏡及

油鏡下每格所代表的實際長度。

2.將待測微生物制成水浸片或染色涂片置我物臺上，調焦找到微生物后用目鏡測微尺測量其

寬幾格，長幾格，然后乘上對應放大倍數下的校正值。

3.一般測10個微生物,然后以平均值表達。4.若是酵母、細菌等單細胞微生物，一般測其寬和

長,然后以平均寬'平均長表達，單位為口m0

02.以測蘇云金桿菌工業菌粉中的活菌數為例，試述稀釋平板計數的基本措施。

1.測數前先準備好測數用的1ml無菌吸管,9cm無菌平板,9ml試管無菌水和牛肉青蛋白陳瓊

脂培養基。

2.稱取10克工業菌粉加入90ml無菌水中置搖床上或用手振蕩20-30分鐘,讓菌體分散。

3.將上述振蕩過的菌液按無菌操作法進行十倍稀釋直到10-8。

4.取9cm無菌平板9套用記號筆在平板底編號,10-8編3套,10-7編3套,10-6編3套。

5.用1支1ml的無菌吸管，取lmllO-8的稀釋菌液放入編號10-8的平板中，如此將三個反復做

完.同法取10-7稀釋菌液放入三個編號為10-7平板中.同法取10-6稀釋菌液放入三個編號為

10-6平板中.(均要按無菌操作法做).

6.將牛肉膏蛋白陳瓊脂培養基熔化冷至45-50C后，在酒精燈火焰邊按無菌操作法倒入上述9

套平板中，每個加入量大概15-20ml,邊加邊搖動平板,使培養基與菌液充足混勻。

7.待培養基凝固后,將平板倒過來，置28-3CTC下培養48小時后計數。

03.試述劃線分離的操作措施。

1.取9ml無菌平板一套在火焰旁按無菌操作法倒人15-2Cml營養瓊脂，讓其冷凝成平板。

2.左手拿上述平板,右手拿接種環在火焰上滅菌后沾取原始分離物在平板上平行劃線三條

3.將接種環在火焰上滅菌，左手平板轉動大概70度,用滅菌接種環通過第一次劃線的地方作二

次劃線，亦劃三條。

4.同上法再作第三次，第四次劃線。

5.蓋上平板蓋，將平板倒過來置28-30℃下培養2-4天后觀測成果.劃的好應在第四次劃線處出

現單個菌落。

注:本答案也可畫圖闡明。

04.試述檢查細菌的運動性的操作措施。

檢查細菌的運動性有兩種措施：

1.鏡檢法

將待檢樣品制成菌懸液，滴一點菌液于一蓋玻片上，取一凹窩載玻片，將凹窩對準菌懸液蓋在

蓋玻片上，然后將蓋玻片和載玻片一起翻轉，讓菌懸液在凹窩上的蓋玻片下.然后在顯微鏡下

觀測，觀測應找懸液的邊緣.因細菌為了更多地接觸空氣，總向水滴的邊緣運動,觀測時要注意

將細菌的運動與分子的布朗運動區別開。

2.半固體穿刺法

將待檢細菌穿刺接種在半固體試管培養基中，若細菌僅沿穿刺線生長，闡明細菌不運動。若細

菌沿穿刺線向周圍擴散生長，闡明細菌有運動性。

05.簡述配制培養基的基本原則:培養基是人工配制的適合不一樣微生物生長繁殖，或用于積

累代謝產物的營養基質。因此配制培養基時應注意如下原則：

1.根據微生物的不一樣選用不一樣的培養基，以滿足微生物對營養物的需要。如自養型微生物

所規定營養較簡樸,而異養型微生物營養規定較復雜。培養細菌，放線菌,真菌等各有不一樣的

培養基。

2。注意多種營養物質的濃度與配比。微生物生長所需要的營養物質往往在合適時才生長良

好。濃度大往往會克制微生物的生長。如糖類，多種重金屬鹽類假如濃度太高,也會影響微生

物的生長。同步多種營養物質的濃度比也應注意,尤其是C/N比。

3.注意將培養基的pH值控制在?定范圍內。為了防止因微生物生長繁殖或積累代謝產物后

影響培養基pH值,常在其中加入磷酸鹽，碳酸鹽,以維持培養基pH值的相對恒定.

4.同步還應考慮培養基的氧化還原電位及原材料的經濟、易購和來源廣泛的原則。

06.試述配制培養基的基本過程及應當注意的問題。

配制培養基的基本過程是：

1.按培養基的配方稱取多種藥物，用量太少的藥物應配制成溶液后再取一定量加入。

2.將多種藥物加水溶解，一般是加所需水量的二分之一。

3.若配固體培養基，按2%的用量稱取瓊脂，用水將瓊脂浸濕?下，用手擠去瓊脂中過多的水分,

加入2的溶液中。

4.加熱至瓊脂所有溶解，并補足所需的所有水量。

5.用ImolNaOH和ImolHCL調整pH至規定值。

6.用分裝器將培養基分裝入試管或三角瓶中，塞上棉塞并包扎,滅菌后備用。

注意事項：

1.配制過程中，在加熱熔化瓊脂時，要不停攪拌，以防糊底。

2.分裝時不要讓培養基沾染試管口或瓶口，以防培養過程中輕易污染雜菌。

07.試述顯微計數的基本措施。

顯微計數一般用來測微生物單細胞的數量，大一點的細胞如酵母菌用血球計數板，小一點的細

胞如細菌用細菌計數板。該測數措施不能區別死活細胞，測出的是微生物總的細胞數量,

血球計數板和細菌計數板構造相似，計數區的面積都是lmm2,兩者的差異在于血球計數板的

深度為0.1mm。細菌計數板的深度為0.02mm。無論是血球計數板還是細菌計數板計數區都

劃為25個大方格，每個大方格又劃為16個小格。因此每小格的體積為l74OOOmm3或

計數時，先在顯微鏡下找到計數區，然后將菌液稀釋到合適濃度,取少許菌液滴在計數區上蓋

上特制蓋玻片，亦可先蓋蓋玻片。然后用吸管將菌液從計數板上的溝里加入。靠菌液的表面

張力充斥計數區。計數時采用五點取樣法數數，即四角各取?種大方格，再在中央取?種大方

格。計數時大方格四面壓線的細胞只數兩邊，以防增長數量。將5個大方格的菌數加起來除

以80得出每個小格的菌數，再乘以4000即為lmm3的菌數，再乘上1000即為1ml的菌數，乘

上稀釋倍數即為樣品含菌數。

08.標本片上的某一物象，第一次看到后怎樣再次找到它？

要做到這一點，首先取決于顯微鏡的好壞，若顯微鏡上的推進器帶有縱橫標尺,很輕易做到這

一點。首先記住標本片放到推進器上的方向，然后記下觀測某一物體時推進器上的縱橫標尺

的數字。如縱3,橫4。當標本片拿下來后，若要反復觀測本來的物象，只要按原方向將標本片

莢在推進器上，將推進器推進到第一次觀測該物體的縱，橫標尺數字縱3,橫4,即可看到第一次

觀測過的物體。

09.試述在光學顯微鏡下所看到的Anabaenaazo對ica的重要特性。

Anabaenaazo對ica的重要特性是：

1.菌體為絲狀體，營養細胞為綠色,藻絲不扭曲。

2.該菌有異型胞，異型胞間生，無色透明,兩端有極點。

3.厚壁電子無色、大、兩端無極點。

10.革蘭氏染色反應的成敗關鍵是什么？為何革蘭氏染色有十分重要的理論與實踐意義？

因通過革蘭氏染色,可把幾乎所有的細菌都提成G+和