DB37Aleutiandiseasediagnoseandcleaning-uptechnologyforminkfarm山東省市場監督管理局發布I李玉杰、劉長浩、徐鴻、李金波、馬慧玲、藺曉月、崔凱、陳靜、李富金、王1水貂阿留申病診斷與凈化技術本標準規定了水貂阿留申病臨床診斷技術、病毒抗體檢測技術、熒光PCR檢測、病獸淘汰技術、獸本標準適用于水貂阿留申病感染動物的篩選、感染控制GB/T6682分析實驗室用水規格和DB37/T2381規模化水貂養殖場生物安全DB37/T2660規模化毛皮動物養殖場消毒3.1.2傳染源主要為病貂和隱性感染貂。病毒的群間傳播主要是來自感染貂的唾液、糞便和尿3.1.3有明顯的季節性，秋冬季節的發病率與病死率明顯地比其他季3.2.1漸進性消瘦：病貂食欲時好時壞3.2.2出血和貧血：口腔、齒齦、軟腭、硬腭和舌根有大量出血點和出血斑，內臟器官尤其是3.2.5本病預后不良，對癥治療可緩解癥狀。常復發，最后衰23.3.3肝、脾、淋巴結腫脹，肝呈土黃色，3.3.4懷孕期發病可見死胎、胎兒液化、吸收或者出現木乃伊胎兒、子宮4抗體檢測4.1樣品的采集與保存注射器、離心管架、剪刀或指甲剪、酒精棉、干脫脂棉、記號筆，有條件的使用采血板和毛細管。4.1.2采血方法：將水貂保定，剪刀酒精棉消毒，中趾趾間毛細管采血或直接剪掉中4.1.3樣品保存及運輸：2℃~8℃,不超過24h。4.2樣品處理將裝有血液的離心管靜置，待血清析出，經4000r/min離心3min～5min，取血清置于1.5mL離心4.3對流免疫檢測5.1儀器設備5.1.4冰箱（2℃~8℃和-20℃兩種）。5.2試劑或材料35.3樣品的采集與保存5.3.4存放采集或處理的樣本在2℃~8℃條件下保存，不超過24h。普通提取方法，或者采用經驗證的病毒DNA提取試劑盒，按照試劑盒使用說明書提照+1管陽性對照）。5.4.2.4每個測試反應體系需要5.4.3加樣在樣品處理區進行。分別向上述PCR管中加入樣本核酸提取步驟5.4.1中制備的DNA溶液10μL，蓋在檢測區進行。將加樣后的PCR管放入熒光PCR檢測儀內，記錄PCR管擺放順序。反應參數設置：第45.5結果判定選定FAM檢測通道讀取檢測結果；ABI儀器，選擇FAM作為報告熒光基團，無淬滅熒光基5.5.2.2陽性對照的Ct/Cp值應小于等于28，并出現典型的擴增曲線。復驗：Ct/Cp值大于30.0，且出現典型的擴增曲線的樣品建議復驗。復6.1檢測方法的選擇：抗體檢測技術適用于群體檢測，PCR檢測技術適6.3一次性凈化：把檢測出的陽性水貂直接淘汰6.4逐步凈化：實行阿留申病毒陰陽性貂分場（群）飼養，逐步淘汰陽性貂。分（場）群后，應建立對污染的飼料、墊料等廢棄物以及糞便、污水應按照GB7959和GB8978進行無害化處理。5病死水貂按照農業農村部《病死及病害動物無害化處理6FRPFAM-AAGCTTGCCTCTCCAAGTAAAGTAACCA-B7——實驗室分為三個相對獨立的區域：樣本制備區、反應混合物配置區和檢測區；——實驗室清潔時應該樣本制備區、擴增反應混合物配置區至檢測區的順序進行；——2℃~8℃冰箱；）；8——樣本的保存