可從病人身上取少量正常、健康皮膚在體外進行培養、擴增。目前，可對皮膚干細胞進行培養，獲得適合臨床上使用的人造皮膚。1.概念：2.原理：4.地位：3.

目的:細胞增殖（有絲分裂）獲得細胞或者細胞產物，不能獲得完整動物個體動物細胞工程的基礎問題:不能以淀粉、蔗糖為碳源1.營養條件：合成培養基

+血清等天然成分

將細胞所需的營養物質按種類和所需量嚴格配制而成的培養基。合成培養基

含人類未知、細胞生長增殖所必需的物質，滿足細胞對未知營養成分的需求。血清等天然成分一般使用液體培養基，也稱為培養液。無菌：①對培養液和所有培養用具進行滅菌處理②在無菌環境下進行操作③添加一定量的抗生素目的：①②①②③維持適宜的滲透壓的目的：維持細胞正常的形態和功能①②①②具體操作：(1)分散成單個細胞原因：②利于細胞與培養液充分接觸，更易進行物質交換。①（2）怎樣將動物組織分散成單個細胞？蛋白質不可以，因為胃蛋白酶的最適PH為1.5左右胰蛋白酶處理時間過長，會怎樣？

細胞膜也含蛋白質，長時間會分解細胞膜蛋白，破壞細胞結構，把細胞消化掉。注意控制時間和酶用量。1.取動物組織(1)取材對象:一般取材于動物胚胎或幼齡動物的組織、器官(2)取材原因:細胞分化程度低，增殖能力強，容易培養。2.分散成單個細胞3.細胞懸液懸浮生長類：貼壁生長類：細胞培養一段時間，分裂會受阻的原因：①③②三、動物細胞培養的過程-取動物組織剪碎，用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理分散成單個細胞解決懸浮生長貼壁生長(大多數）細胞密度過大、有害代謝物積累、營養物質缺乏等接觸抑制傳代培養細胞懸液原代培養分瓶培養加培養液在培養皿或培養瓶內懸浮培養的細胞:直接用離心法收集貼壁細胞:用胰蛋白酶處理分散成單個細胞，用離心法收集細胞分裂受阻②制成細胞懸液，分瓶培養①收集細胞1.下圖為幼鼠腎臟上皮細胞培養過程示意圖，下列有關敘述錯誤的是(

)A．甲→乙過程通常需要剪碎后，用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理B．在丙中培養的細胞通常在10代以內，一般未發生癌變C．丁過程表示傳代培養，大多細胞一般能增殖10～50代D．培養過程中應提供5%CO2和95%O2的氣體環境，以維持培養液正常的pHD

課堂練習D

5%CO2和95%空氣的氣體環境一般取材于動物胚胎或幼齡動物的組織、器官。細胞分化程度低，增殖能力強，容易培養。(1)干細胞的概念：動物和人體內仍保留的少數具有分裂和分化能力的細胞。在一定條件下，干細胞可以分化成其他類型的細胞。(2)分布：(3)分類：胚胎干細胞成體干細胞按來源全能干細胞多能干細胞按分化潛能專能干細胞1.1分布1.3.應用實例1.2.特點(1)形態上：體積小、細胞核大、核仁明顯。(3)在體外培養的條件下，可以只增殖，而不分化。可以冷凍保存，也可以進行遺傳改造。(2)功能上：具有發育的全能性。4.局限性必須從胚胎中獲取，涉及倫理問題；因而限制了在醫學上的應用。2.1分布2。2類型2.3特點2.4應用實例①②1.4.局限性3.1概念3.2制備方法①②（成纖維細胞、已分化的T細胞、B細胞）3.3應用①②3.4優點①②3.5.面臨的問題：3.6應用展望：

來源或存在功能、特點局限性胚胎干細胞(ES細胞)成體干細胞誘導多能干細胞(iPS細胞)早期胚胎能夠分化成為動物體內的任何細胞，并進一步形成組織、器官甚至生物個體成體組織或器官，如造血干細胞、神經干細胞和精原干細胞等體外誘導體細胞產生能分化成為具有特定功能的細胞來治療疾病。無須破壞胚胎，且避免免疫排斥反應。具有組織特異性，能分化成特定的細胞或組織不具有發育成完整個體的能力需從胚胎中獲取，涉及倫理問題，限制了它在醫學上的應用技術不成熟。面臨的問題:存在著導致腫瘤發生的風險。三、干細胞培養及其應用2.為研究治療性克隆技術能否用于帕金森綜合征的治療，科研人員利用帕金森綜合征模型鼠進行如下圖實驗。下列相關敘述錯誤的是(

)A．過程①得到的細胞，其DNA主要來自鼠皮膚細胞B．過程③的關鍵是利用特定條件誘導胚胎干細胞相關基因表達C．過程②獲取的胚胎干細胞具有細胞大、核小但核仁明顯的特征D．過程④對受體小鼠來說植入的神經元不會發生免疫排斥反應C

課堂練習細胞體積小、細胞核大、核仁明顯等特征C

×√××A

像建立骨髓庫一樣有研究團隊正在嘗試建立HLA（HumanLeukocyteAntigen，人類白細胞抗原多態性豐富的iPS細胞庫可以為需要的人找到HLA匹配度較高的iPS細胞這樣不僅可以節省時間、成本,還能減輕異體干細胞移植后發生的免疫排斥反應。

該技術可能被用于治療不孕癥,獲得足夠量的生殖細胞來進行瀕危物種的克隆研究；

獲得生殖細胞進行轉基因操作，再經過受精、胚胎發育等過程來